本科生畢業(yè)論文開題報告書題目名稱 硅酸鹽細菌的分離篩選和 純化 學生姓名 鄭一凡 學號 20064073022 學 院 生物資源與環(huán)境科學學院 專業(yè)年級 06級生物工程1班 指導教師 彭清靜 職稱 教授 填寫時間 2010年3月31日 一 、選題的依據(jù)：硅酸鹽細菌又稱鉀細菌, 是一類特殊的細菌。這類細菌能分解巖石礦物, 把其中植物不能利用的養(yǎng)分釋放出來。自然界中含鉀素很豐富的長石和云母等硅酸鹽礦物, 是組成地球表面巖石和土壤的主要成分(占 60% 以上)。這些礦物雖然含有豐富的鉀素, 可是并不能為植物所利用, 因為它們都是很穩(wěn)定的礦物。但是, 有些細菌能分解穩(wěn)定的礦物, 把其中對植物有用的鉀素釋放出來, 硅酸鹽細菌即屬此類。硅酸鹽細菌研究已有 80 多年歷史, 這類菌可分解土壤中難溶的磷、 鉀, 此類菌發(fā)酵液中有激素類物質(zhì),在植物根際形成優(yōu)勢種, 可抑制其它病原菌生長, 達到增產(chǎn)效果。這類菌能分解土壤礦物, 在瓷業(yè)中作添加劑，還可用來處理污水。 其代謝產(chǎn)物如多糖、 有機酸、 蛋白質(zhì)對作物有增產(chǎn)效果。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的硅酸鹽細菌有膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)和環(huán)狀芽孢桿菌(B. circulans)等。李鳳汀等人在1997年報道了分離到硅酸鹽細菌HM 8841菌株, 經(jīng)工業(yè)發(fā)酵制成菌劑, 使農(nóng)作物提高產(chǎn)量。本論文通過分離、 收集硅酸鹽細菌, 豐富菌種資源庫, 篩選高效解鉀菌, 不僅具有理論意義, 而且, 在菌肥生產(chǎn)及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上也有十分重要的應用價值。 二、研究內(nèi)容 本課題主要目的是分離篩選出具有解鉀作用的硅酸鹽細菌，并對篩選出的菌種純化以利于保存。研究的主要內(nèi)容有：1、 硅酸鹽細菌培養(yǎng)基的配制；2、分離篩選硅酸鹽細菌；3、硅酸鹽細菌的純化；4、高效解鉀硅酸鹽細菌的篩選。三、研究方法、技術(shù)路線、實驗方案及可行性分析 研究方法：以鉀長石粉為惟一鉀源的硅酸鹽細菌選擇性培養(yǎng)基篩選能夠降解土壤中鉀元素的細菌.利用梯度稀釋分離法和平板劃線分離法對其中的細菌進行篩選并純化。用純化的細菌進行培養(yǎng)，利用ICAP儀器檢測鉀元素的含量，篩選高效解鉀菌株。技術(shù)路線：土壤樣品稀釋液制備 涂布接種 恒溫培養(yǎng) 定期觀察記錄 挑菌落純化菌株 ICAP儀器檢測實驗方案：1、土壤樣品稀釋液制備：所取材料為吉首大學內(nèi)土壤2、涂布接種：按梯度配制的稀釋液接種到培養(yǎng)基上進行恒溫培養(yǎng)3、初次篩選：在平板上挑選大部具有一定特征的菌落進行純化培養(yǎng)4、經(jīng)過兩次的純化后，得到純的菌落5、用純菌株配制的檢測液用ICAP儀器檢測，從而篩選出高效解鉀菌株 可行性分析：主要運用微生物的一些基本實驗方法，操作簡單，但需要細心和耐心。指導老師彭清靜教授曾經(jīng)做過此方面的研究工作，具有豐富經(jīng)驗，能很好的指導我完成論文。實驗室也具備該論文實驗的條件。四、進程安排和采取的主要措施第1階段：（2009年11月）論文選題 第2階段：（2009年11月至12月）查詢資料文獻，設(shè)計實驗方案，準備實驗材料第3階段：（2010年1月至3月）根據(jù)方案完成實驗內(nèi)容第4階段：（2010年4月至5月）在導師的指導下修改論文并完成論文五、主要參考文獻（不少于10篇）1連賓.硅酸鹽細菌的解鉀作用研究M.貴陽:貴州科技出版社,1998.2周德慶.微生物學教程M.北京:高等教育出版社,1993.3俞大紱,李季倫.微生物學M.北京:科學出版社,1985.4中國科學院微生物研究所細菌鑒定分類組編.一般細菌常用鑒定方法M.北京:科學出版社,1978.5王大耜.細菌分類基礎(chǔ)M.北京:科學出版社,1977. 6 唐亮, 張進忠,于萍萍,等.硅酸鹽細菌的分離、 純化、 鑒定及生物學特性研究 J .山東農(nóng)業(yè)科學, 2008 (1) : 71 - 73. 7胡開輝.微生物學實驗 M .北京:中國林業(yè)出版社, 2004: 95 - 97.8李鳳汀,郝正然,楊則瑗.硅酸鹽細菌HM8841菌株解鉀作用的研究J.微生物學報,1997,37(1):79-81. 9劉光華,林洋,黃昭賢.硅酸鹽細菌解鉀兼拮抗活性菌株的篩選J.應用和環(huán)境生物學報, 2001,7(1):66-68.10連賓.硅酸鹽細菌GY92對伊利石礦粉釋鉀作用研究J.礦物學報,1998,18(2):234238.11劉榮昌,李鳳汀,郝正然,等.生物鉀肥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應用A.葛誠.微生物肥料的生產(chǎn)應用及其發(fā)展M.北京:中國農(nóng)業(yè)科技出版社,1996. 667412Monib Role of Silicate Bacteria in ReleasingK and Si from biblite and orthoclase the Biosphere. Soil Biology and Conservation of theBiosphereJ.1984,(2):42-47.13美Breed等.BERGES MANVAL OF DE