專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動物

是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。一、微生物特點(diǎn)：小簡低病毒的結(jié)構(gòu)病毒病毒

SARS冠狀病毒、禽流感病毒朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）吸附注入合成釋放組裝病毒的增殖病毒的增殖一般可分五個階段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白質(zhì)→組裝→釋放病毒的營養(yǎng)方式：寄生細(xì)菌的外形與大小細(xì)菌

A.球菌B.桿菌C.弧菌常見的細(xì)菌三種典型形態(tài)ABC細(xì)菌的結(jié)構(gòu)

芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細(xì)菌。芽孢：細(xì)菌形成的橢圓形的休眠體菌落

單個或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。菌落是鑒定菌種的

重要依據(jù)。菌落細(xì)菌的菌落特征因種而異放線菌⑴結(jié)構(gòu)：

單細(xì)胞原核生物分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）（2）繁殖孢子絲

|孢子鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素

微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的⑶應(yīng)用:真菌酵母菌酵母菌和霉菌青霉生殖腐生生活孢子生殖微生物的實驗室培養(yǎng)條件：（1）合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件（2）確保其他微生物無法混入二.培養(yǎng)基

1.概念：按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基據(jù)物理性質(zhì)分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基據(jù)化學(xué)成分分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基據(jù)用途分2.類型及應(yīng)用：常用于工業(yè)生產(chǎn)用于微生物的分離、鑒定、計數(shù)加瓊脂常用于工業(yè)生產(chǎn)常用于分類、鑒定培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別不同種類的微生物在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長。根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成。加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:不加氮源的無氮培養(yǎng)基:不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:選擇培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色葡萄球菌分離固氮菌分離自養(yǎng)型微生物伊紅和美藍(lán),和大腸桿菌的代謝產(chǎn)物結(jié)合,使菌落呈深紫色,并帶有金屬光澤,可以用來鑒別大腸桿菌鑒別培養(yǎng)基大腸桿菌碳源氮源無機(jī)鹽

水3.營養(yǎng)要素還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如:生長因子(即細(xì)菌生長必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、堿基)牛肉膏

牛肉膏當(dāng)中含有多肽類、氨基酸類、核苷酸類、有機(jī)酸類、礦物質(zhì)類及維生素等物質(zhì)。該產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生物制藥發(fā)酵及各種培養(yǎng)基的制備。牛肉膏是采用新鮮牛肉經(jīng)過消化、過濾、濃縮而得到的一種棕黃色至棕褐色的膏狀物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黃色。蛋白胨不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽，因此存在著各種蛋白胨，一般來說，用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋白包括動物蛋白（肉類）和植物蛋白（豆類）等兩種。蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑，具有肉香的特殊氣息。它可以作為微生物培養(yǎng)基的主要原料。三.無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別吸管、培養(yǎng)皿等160~170℃、1～2h接種環(huán)、接種針等70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒滅菌定義方法較為溫和的理化方法，殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢、孢子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物。（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑消毒灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌酒精、氯氣、石炭酸等紫外線培養(yǎng)基，100KPa、121℃、15～30min四.實驗操作---大腸桿菌的純化培養(yǎng)（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計算－稱量－溶化－滅菌－倒平板（冷卻至50℃）倒平板操作（二）純化大腸桿菌最常用的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法接種環(huán)接種針平板劃線的操作方法平板劃線法一旦劃破，會造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會沿著劃破處生長，會形成一個條狀的菌落。一旦劃破，會造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會沿著劃破處生長，會形成一個條狀的菌落。稀釋涂布平板法涂布器菌落數(shù)在30～300間計數(shù)效果較好。實驗結(jié)果菌種的保存1、臨時保藏法：對象：溫度：缺點(diǎn)：2、甘油管藏法：對象：溫度：結(jié)果分析與評價課題延伸（P20）頻繁使用的菌種4℃（冰箱）容易被污染或產(chǎn)生變異長期保存的菌種-20℃（冷凍箱）謝謝聆聽·學(xué)習(xí)就是為了達(dá)到一定目的而努力去干,是為一個目標(biāo)去戰(zhàn)勝各種困難的過程,這個過程