實(shí)驗(yàn)微生物菌落的觀察第一頁，共十九頁，2022年，8月28日目的要求學(xué)會(huì)觀察、識(shí)別各種不同的微生物菌落的方法。掌握平板菌落計(jì)數(shù)的方法，運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)詳細(xì)的描述所分離平板上的各種微生物菌落。學(xué)習(xí)并掌握斜面接種的操作技術(shù)。第二頁，共十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理

對(duì)于一些難區(qū)別的菌落還應(yīng)該借助顯微鏡來觀察其細(xì)胞形態(tài)以進(jìn)一步做出正確的判斷。第三頁，共十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)三所作的平板培養(yǎng)物：

A，在細(xì)菌培養(yǎng)基上生長的各種菌落；

B，在霉菌培養(yǎng)基上生長的各種菌落。實(shí)驗(yàn)二所作的試管斜面，酒精燈、接種環(huán)等。菌種：大腸桿菌E.coli枯草桿菌B.subtilis枯草桿菌B.subtilis第四頁，共十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)程序Ⅰ（觀察描述菌落特征）運(yùn)用所掌握的各種微生物菌落的特點(diǎn)，觀察、識(shí)別、描述所做樣品的兩個(gè)平板上的所有菌落,并將結(jié)果填入表1中。常用的菌落描述詞語：

大?。捍蟆⒅?、小、針尖狀形狀：圓形、隆起、扁平、假根狀、不規(guī)則狀等；

邊緣情況：整齊、波形、裂葉狀、鋸齒狀等

表面情況：干燥、濕潤、光滑、皺褶、顆粒狀、龜裂狀等；第五頁，共十九頁，2022年，8月28日樣品來源培養(yǎng)基類型菌落類型特征描述菌落數(shù)（近似值）大小形狀顏色表面情況邊緣情況aA1A2B3B4bA1A2B3B4表1平板菌落特征描述第六頁，共十九頁，2022年，8月28日某些有代表性的菌落圖片：細(xì)菌第七頁，共十九頁，2022年，8月28日第八頁，共十九頁，2022年，8月28日酵母菌啤酒酵母菌落一般較細(xì)菌菌落大且厚，表面濕潤，粘稠，易被挑起，多為乳白色、土黃色，少數(shù)呈紅色。

第九頁，共十九頁，2022年，8月28日常見的酵母菌的菌落第十頁，共十九頁，2022年，8月28日菌落形態(tài)較大，質(zhì)地一般比放線菌疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀；菌落與培養(yǎng)基的連接緊密，不易挑取，菌落正反面的顏色和邊緣與中心的顏色常不一致等。霉菌第十一頁，共十九頁，2022年，8月28日霉菌的菌落青霉屬毛霉屬

第十二頁，共十九頁，2022年，8月28日定義:根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征而設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù)。對(duì)土壤中的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),將結(jié)果填入表2中。實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ（平板菌落計(jì)數(shù)）第十三頁，共十九頁，2022年，8月28日表2土壤中微生物計(jì)數(shù)結(jié)果

稀釋度10-510-61g樣品活菌數(shù)12平均12平均細(xì)菌菌落數(shù)霉菌菌落數(shù)計(jì)數(shù)方法:每克土壤的菌數(shù)=同一稀釋度幾次重復(fù)的菌落平均數(shù)×10×稀釋倍數(shù)

計(jì)算結(jié)果時(shí)，常按下列標(biāo)準(zhǔn)從接種后的3個(gè)稀釋度中選擇一個(gè)合適的稀釋度，求出每克菌劑中的含菌數(shù)。

（1）同一稀釋度各個(gè)重復(fù)的菌數(shù)相差不太懸殊。

（2）細(xì)菌、放線菌、酵母菌以每皿30—300個(gè)菌落為宜，霉菌以每皿10—100個(gè)菌落為宜。選擇好計(jì)數(shù)的稀釋度后，即可統(tǒng)計(jì)在平板上長出的菌落數(shù)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果按下式計(jì)算。第十四頁，共十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)程序Ⅲ（無菌操作技術(shù)

）

在酒精燈火焰旁操作，將所給的兩種菌種無菌操作，轉(zhuǎn)接到大試管斜面，并貼標(biāo)簽，培養(yǎng)。點(diǎn)燃酒精燈左手夾住兩試管：斜面向上，45～0度角。灼燒接種環(huán)右手拔棉塞，管口過火取菌標(biāo)記培養(yǎng)第十五頁，共十九頁，2022年，8月28日第十六頁，共十九頁，2022年，8月28日第十七頁，共十九頁，2022年，8月28日將觀察到的菌落