標準解讀

《GB/T 33410-2016 生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法》是一項國家標準，旨在為生化試劑中的蛋白酶K活性提供統(tǒng)一的測定方法。該標準適用于以牛胰腺或微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的蛋白酶K活性測定。

根據(jù)此標準，蛋白酶K活性的測定基于其對特定底物（如酪蛋白）的水解能力來評估。具體步驟包括準備一系列不同濃度的蛋白酶K溶液，并將其與固定量的底物混合，在一定條件下進行反應。之后，通過測量產(chǎn)物量或者未被分解的底物量來計算酶活性單位。活性單位通常定義為在指定條件下每分鐘內能夠催化一定量底物轉化所需的酶量。

標準還詳細規(guī)定了實驗所需的各種條件，比如pH值、溫度、反應時間等參數(shù)的選擇依據(jù)，以及如何準確地配制樣品和對照組。此外，對于數(shù)據(jù)處理部分也有明確指導，包括如何使用標準曲線法確定未知樣本的酶活性值，以及誤差分析的方法。


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....

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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2016-12-30 頒布
  • 2017-07-01 實施
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文檔簡介

ICS7104030

G66..

中華人民共和國國家標準

GB/T33410—2016

生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法

DeterminationoftheactivityofproteaseKinbiochemicalreagents

2016-12-30發(fā)布2017-07-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T33410—2016

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位深圳市計量質量檢測研究院中國測試技術研究院中國標準化研究院

:、、。

本標準主要起草人林霖周李華賴心田蘭全學馬愛進陳國培李淅潘蘭芳楊國武

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T33410—2016

生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了生化試劑中蛋白酶活性檢測方法

K。

本標準適用于分子生物學實驗中使用的蛋白酶活性的測定

K。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

蛋白酶K活性單位proteaseKactivityunit

在時內水解酪蛋白產(chǎn)生酪氨酸為一個酶活性單位

55℃,pH8.0,1min1μgL-。

注活性單位為或

:U/mg、U/gU/mL。

4原理

蛋白酶是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶可催化含有較多的絲氨酸位點的酪蛋白水解

K,α-。

本方法中采用酪蛋白為反應底物經(jīng)蛋白酶催化水解為酪氨酸在處測定吸光度值再

α-,KL-,275nm。

通過測量各個濃度的酪氨酸標準溶液在處的吸光度值并構建標準曲線得出線性回歸方程

L-275nm,,

以外標法定量計算蛋白酶的酶活性

。K。

5儀器設備及器具

51恒溫水浴鍋控溫精度

.:±0.2℃。

52計精確至

.pH:0.01pH。

53紫外可見分光光度計吸光度值精確至

.-:0.001。

54石英比色皿

.1cm。

55電子天平感量

.:0.0001g。

6試劑

除非另有規(guī)定本方法所用試劑均為分析純水為規(guī)定的

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