標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 40472-2021 柱銹菌科實(shí)時(shí)熒光PCR檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)范柱銹菌科(Pucciniales)真菌的檢測與鑒定過程。該標(biāo)準(zhǔn)通過應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)來實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)病原體DNA片段的特異性擴(kuò)增及定量分析,適用于進(jìn)出口植物及其產(chǎn)品中柱銹菌科成員的快速準(zhǔn)確識別。
根據(jù)文檔內(nèi)容,本標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了從樣本采集到最終結(jié)果報(bào)告的一系列步驟:
- 樣品制備:包括但不限于植物材料的選擇、保存條件以及DNA提取的方法;
- 引物設(shè)計(jì):基于已知序列信息選擇或設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增柱銹菌特定區(qū)域的引物對;
- 實(shí)驗(yàn)操作流程:涵蓋反應(yīng)體系配置、循環(huán)參數(shù)設(shè)定等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的操作指南;
- 結(jié)果判讀:提供陽性對照、陰性對照設(shè)置建議,并說明如何根據(jù)Ct值判斷樣品是否含有目標(biāo)病原體;
- 質(zhì)量控制措施:強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)過程中需要遵循的質(zhì)量保證原則,確保檢測結(jié)果可靠性和重復(fù)性。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2021-08-20 頒布
- 2022-03-01 實(shí)施
文檔簡介
ICS6502001
CCSB.16.
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T40472—2021
柱銹菌科實(shí)時(shí)熒光PCR檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofCronartiaceaeusingreal-timePCR
2021-08-20發(fā)布2022-03-01實(shí)施
國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布
國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T40472—2021
前言
本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定
GB/T1.1—2020《1:》
起草
。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任
。。
本文件由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本文件起草單位中華人民共和國寧波海關(guān)中國科學(xué)院微生物研究所中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
:、、、
中華人民共和國烏魯木齊海關(guān)
。
本文件主要起草人段維軍蔡磊趙鵬郭立新劉芳李雪蓮張永江張慧麗王翀陳先鋒
:、、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T40472—2021
柱銹菌科實(shí)時(shí)熒光PCR檢疫鑒定方法
1范圍
本文件描述了植物病原真菌柱銹菌科的實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)以下簡稱實(shí)時(shí)熒光檢疫
(PCR)
鑒定方法
。
本文件適用于攜帶柱銹菌科病菌的植物及其產(chǎn)品中柱銹菌科病菌的檢測篩查
。
2規(guī)范性引用文件
本文件沒有規(guī)范性引用文件
。
3術(shù)語和定義
本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義
。
4基本信息
學(xué)名
:Cronartiaceae
中文學(xué)名柱銹菌科
:
分類地位隸屬于真菌界擔(dān)子菌門柄銹菌綱柄銹菌
:(Fungi),(Basidimycota),(Pucciniomycetes),
目
(Pucciniales)。
傳播途徑柱銹菌科主要由種苗或病殘?bào)w等傳播也可經(jīng)風(fēng)雨水和昆蟲傳播
:,、。
柱銹菌科基本信息參見附錄
A。
5鑒定原理
根據(jù)柱銹菌科病菌的序列特征采用實(shí)時(shí)熒光方法應(yīng)用所設(shè)計(jì)引物和探針對柱銹菌
DNA,PCR,
科病菌進(jìn)行檢測鑒定
。
6儀器和試劑
61儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)用具
.、
天平研缽水浴鍋純水儀旋渦振蕩器臺式離心機(jī)紫外分光光度計(jì)高速冷凍離心機(jī)冰箱實(shí)
、、、、、、、、、
時(shí)熒光儀微量移液器
PCR、(0.1μL~2.5μL,1μL~10μL,10μL~50μL,20μL~200μL,100μL~
1000μL)。
62試劑
.
十六烷基三甲基溴化銨提取液
(CTAB)(2%CTAB,1.4mol/LNaCl,20mmol/LEDTA,
三羥甲基氨基甲烷飽和酚三氯甲烷異戊醇異丙醇無水乙
1
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