銅綠假單胞菌高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及其耐藥性分析

【Summary】目的探討銅綠假單胞菌高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及其耐藥性。方法對(duì)2019年1月-2019年12月檢出的133株銅綠假單胞菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)，分析銅綠假單胞菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果、高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果及β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果133株銅綠假單胞菌株中,檢出產(chǎn)生高活性β內(nèi)酰胺酶的28株，陽性率為21.1%；銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮、慶大霉素、氨曲南的耐藥性均＞40.0%，對(duì)頭孢曲松的耐藥性＞70.0%；銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性＜30.0%；β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株對(duì)亞胺培南、頭孢吡肟、哌拉西林、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢曲松、頭孢哌酮的耐藥性相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論臨床上應(yīng)對(duì)耐藥菌株進(jìn)行高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)，以便為臨床合理使用抗菌藥物提供指導(dǎo)?！綤eys】銅綠假單胞菌；高活性β內(nèi)酰胺酶；耐藥性；分析銅綠假單胞菌（PA）在健康人體呼吸道、皮膚、消化道、周圍環(huán)境中廣泛存在，是一種條件致病菌，在當(dāng)前屬于全球醫(yī)院內(nèi)感染的重要病菌，也是導(dǎo)致免疫力較低、慢性疾病、老年人群并發(fā)感染的重要病菌[1]。隨著β-內(nèi)酰胺類、碳青霉烯類抗菌藥物的廣泛使用與過度使用，使得PA產(chǎn)生了較高的耐藥性、多種β-內(nèi)酰胺酶，進(jìn)而導(dǎo)致β-內(nèi)酰胺類、碳青霉烯類抗菌藥物耐藥機(jī)制變得非常復(fù)雜[2]。此研究對(duì)銅綠假單胞菌高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及其耐藥性進(jìn)行了分析，期望可以為臨床合理使用抗菌藥物提供指導(dǎo)價(jià)值。1資料與方法1.1一般資料選取的133株銅綠假單胞菌株來源于本院2019年1月-2019年12月收治的門診、住院患者的尿液、引流液、分泌物、膿液、痰液等標(biāo)本分離。所有菌株均經(jīng)PhoenixTM100全自動(dòng)微生物分析儀(美國碧迪公司)鑒定。1.2方法1.2.1對(duì)收集的133株銅綠假單胞菌株進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)，對(duì)耐藥性進(jìn)行記錄，然后進(jìn)行高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)，分析陽性菌株與陰性菌株耐藥性情況。1.2.2參照2015版美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(clinicalandlaboratorystandardsinstitute，CLSI)標(biāo)準(zhǔn)，采用Kirby-Bauer紙片瓊脂擴(kuò)散法對(duì)銅綠假單胞菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行判讀。1.2.3使用雙紙片協(xié)同法進(jìn)行高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)。使用乙二胺四乙酸絡(luò)合、金屬離子去除金屬酶活性，根據(jù)其特性將待測(cè)菌株制備成菌液（0.5麥?zhǔn)蠁挝唬?，將其均勻的涂布在瓊脂平板（M-H）上，并將亞胺培南紙片（2張）貼在平皿上，紙片之間的距離保持2cm，其中1張亞胺培南紙片上加入EDTA（5μL）。結(jié)果顯示：含有EDTA的亞胺培南紙片抑菌圈直徑與亞胺培南紙片相比增加了6cm，說明該菌株可以產(chǎn)生金屬酶[3]。1.3觀察指標(biāo)銅綠假單胞菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果、高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果、β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS22.0軟件，X2檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料（%），T檢驗(yàn)(士s)資料，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1藥敏試驗(yàn)結(jié)果銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮、慶大霉素、氨曲南的耐藥性均＞40.0%，對(duì)頭孢曲松的耐藥性＞70.0%，銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性＜30.0%，詳見表1。表1藥敏試驗(yàn)結(jié)果（株，%）抗菌藥物敏感敏感率耐藥耐藥性亞胺培南10578.9%2821.1%頭孢吡肟8463.2%4936.8%哌拉西林8463.2%4936.8%左氧氟沙星8765.4%4634.6%頭孢他啶8966.9%4433.1%頭孢哌酮/舒巴坦11284.2%2115.8%阿米卡星10679.7%2720.3%哌拉西林/他唑巴坦10276.7%3123.3%頭孢曲松3828.6%9571.4%頭孢哌酮7254.1%6145.9%慶大霉素7757.9%5642.1%氨曲南7657.1%5742.9%2.2高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果133株銅綠假單胞菌株中,檢出產(chǎn)生高活性β內(nèi)酰胺酶的28株，陽性率為21.1%。2.3β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株對(duì)亞胺培南、頭孢吡肟、哌拉西林、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢曲松、頭孢哌酮的耐藥性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株對(duì)左氧氟沙星、慶大霉素、氨曲南的耐藥性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。3討論銅綠假單胞菌是臨床常見的條件致病菌，有研究顯示，致病菌可以誘發(fā)機(jī)體多部位、多臟器、多系統(tǒng)發(fā)生感染[4]。研究結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮、慶大霉素、氨曲南的耐藥性均＞40.0%，對(duì)頭孢曲松的耐藥性＞70.0%，銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性＜30.0%。由此可見，銅綠假單胞菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物存在明顯的耐藥，主要機(jī)制為該菌可以產(chǎn)生金屬β-內(nèi)酰胺酶。因此，在臨床診療中，加強(qiáng)對(duì)病原菌的檢測(cè)、鑒定及進(jìn)行藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床合理用藥是極為重要的。綜上所述，對(duì)耐藥菌株進(jìn)行高活性β內(nèi)酰胺酶檢測(cè)是必要的，其可以為臨床合理使用抗菌藥物提供指導(dǎo)?！綬eference】[1]余湛,王軍,何飛,等.2015—2017年重癥監(jiān)護(hù)病房患者分離菌監(jiān)測(cè)及耐藥性分析[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2019,39(08):140-145.[2]ZhanelGG,GoldenAR,ZelenitskyS,etal.Cefiderocol:ASiderophoreCephalosporinwithActivityAgainstCarbapenem-ResistantandMultidrug-ResistantGram-NegativeBacilli[J].Drugs,2019,79(12):271-289.[3]周俊立、張文萃、王瑩瑩，等.肺部感染患者多重耐藥銅綠假單胞菌的耐藥譜與特征[J].中華疾病控制雜志,2020,24(09):6