檢驗(yàn)標(biāo)本的采集與處理_第1頁
檢驗(yàn)標(biāo)本的采集與處理_第2頁
檢驗(yàn)標(biāo)本的采集與處理_第3頁
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檢驗(yàn)標(biāo)本的采集與處理第1頁/共115頁概要2檢驗(yàn)標(biāo)本的定義及種類1影響檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量的因素2靜脈抽血的注意事項(xiàng)3各種標(biāo)本的采集要求45檢驗(yàn)標(biāo)本的采集與運(yùn)送危急值的處理6第2頁/共115頁一、檢驗(yàn)標(biāo)本的定義及種類標(biāo)本的定義:是指采取患者少許的血液、排泄物(糞、尿)、分泌物(痰、鼻分泌物)、嘔吐物、體液(胸腔積液、腹腔積液)和脫落細(xì)胞(食道、陰道)等樣品,經(jīng)過物理、化學(xué)和生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和方法對其進(jìn)行檢驗(yàn),作為判斷患者有無異常存在的依據(jù)。3第3頁/共115頁檢驗(yàn)標(biāo)本的種類4血液檢驗(yàn)標(biāo)本血常規(guī)其他生化檢查血沉凝血免疫檢查第4頁/共115頁檢驗(yàn)標(biāo)本的種類5體液檢驗(yàn)標(biāo)本大便尿液痰液其他第5頁/共115頁檢驗(yàn)標(biāo)本的種類6其它特殊標(biāo)本細(xì)胞穿剌毛發(fā)皮屑其它第6頁/共115頁臨床標(biāo)本檢驗(yàn)的過程7檢驗(yàn)申請患者準(zhǔn)備患者識別、采集標(biāo)本樣品檢測結(jié)果分析與解釋樣品運(yùn)送、保存與處理結(jié)果確認(rèn)特殊患者回訪第7頁/共115頁二.影響檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量的因素8患者的狀態(tài)藥物的影響患者的飲食第8頁/共115頁影響檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量的因素

原則上患者應(yīng)在平靜、休息狀態(tài)下采集標(biāo)本,特別是血液標(biāo)本。因?yàn)檫\(yùn)動能影響許多項(xiàng)目的測定結(jié)果。 研究指出,患者處于激動、興奮、恐懼狀態(tài)時,可使血紅蛋白、白細(xì)胞增高。9患者的狀態(tài)第9頁/共115頁影響檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量的因素

多數(shù)檢查要求在采血前禁食12h,并注意檢 查前一天晚餐禁食高脂食品。研究表明:一頓標(biāo)準(zhǔn)餐后,可使血中甘油三酯增高50%、血糖增高15%。進(jìn)食高脂肪食物,可引起血脂的大幅度增高。餐后采集的血液標(biāo)本,其血清常出現(xiàn)乳糜狀,影響到許多檢驗(yàn)測定的正確性。10患者的飲食第10頁/共115頁影響檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量的因素研究表明:多種常用鎮(zhèn)靜劑,多種常用抗生素,對多種檢測結(jié)果均有影響。輸血、輸液對電解質(zhì),血糖等檢驗(yàn)結(jié)果均有影響,一般不宜在輸血輸液側(cè)采集血液標(biāo)本。通常在輸液對側(cè)采集血液標(biāo)本,或輸液結(jié)束后1~2h后采血。11藥物的影響第11頁/共115頁影響檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量的因素運(yùn)動的影響

與運(yùn)動時間、強(qiáng)度有關(guān)。適度運(yùn)動,血糖、尿酸、乳酸增加,ATP減少,血清AST、LDH、CK、ALP增加,運(yùn)動員,血清Ch、TG減少,HDL-C增加。

年齡的影響

性別的影響

體形的影響

12第12頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項(xiàng)采血時,應(yīng)統(tǒng)一采血姿勢(臥位、坐位、立位);應(yīng)盡量在使用止血帶1min內(nèi)采血,看到回血馬上解開止血帶;當(dāng)需要重復(fù)使用止血帶時,應(yīng)使用另一上臂;13采集過程是標(biāo)本質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)第13頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項(xiàng)膠塞穿刺針上的乳膠套能防止滴血,采血時不能取下;采血針軟管的容積為0.4ml,采血時可酌情提前拔出采血針;采血針刺入靜脈后,如穿破靜脈,回血撤回,可將采血針順原路緩慢退回,見回血即可;采血完畢后,先拔出采血針,待滴血停止后再拔出試管端穿刺針.14第14頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項(xiàng)血液標(biāo)本常見溶血原因(1)注射器、針頭或容器不干燥;(2)壓脈帶捆扎時間太久,淤血過久;(3)穿剌不暢,損傷組織過多;(4)抽血速度太慢或太快;(5)血液注入容器時未取下針頭;15第15頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項(xiàng)(6)抗凝血混合時,振蕩力量過大;(7)血液存放時間過長;(8)靜脈采血時,為增加血流而擠壓采血部位;(9)血液標(biāo)本在送檢或運(yùn)輸過程中,擠壓或振動過大等。16第16頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項(xiàng)多管采血的順序:

17血液培養(yǎng)無添加劑管

凝血實(shí)驗(yàn)血常規(guī)其它防止凝血因子活化,或者血小板聚集而影響檢驗(yàn)結(jié)果。第17頁/共115頁四.各種標(biāo)本的采集要求18血液標(biāo)本的采集01體液標(biāo)本的采集0202003微生物標(biāo)本的采集與送檢第18頁/共115頁一)、血液標(biāo)本的采集

1、血常規(guī)標(biāo)記:淺紫色瓶塞真空采血管(EDTA抗凝)采集要求:采集2ml靜脈血后,立即顛倒混勻,至少5次,但不能劇烈震蕩,如果血液有凝塊,一定要重新抽血。19第19頁/共115頁一)、

血液標(biāo)本的采集

2、生化分析標(biāo)記:綠色瓶塞真空采血管采集要求:采集3-5ml空腹血,避免溶血,避免強(qiáng)光照射。糖化血紅蛋白:淺紫色瓶塞真空采血管(EDTA抗凝)20第20頁/共115頁21一)、血液標(biāo)本的采集

標(biāo)本的正確采集與保存是生化檢驗(yàn)結(jié)果是否可靠的前提,而這種差異往往不易被檢測者發(fā)現(xiàn),因此,必須給予重視。

第21頁/共115頁一)、血液標(biāo)本的采集3:紅細(xì)胞沉降率(血沉)標(biāo)記:黑色瓶塞真空采血管(抗凝)采集要求:采集1.6ml空腹血(至2ml瓶簽刻度處),立即顛倒混勻,至少8次。22第22頁/共115頁一)、血液標(biāo)本的采集4:免疫血清分析(如:肝炎系列、甲功、激素等)標(biāo)記:紅色瓶塞真空采血管(不抗凝)采集要求:采集3—5ml空腹血,避免溶血,避免強(qiáng)光照射。23第23頁/共115頁一)、血液標(biāo)本的采集5:凝血四項(xiàng)標(biāo)記:淺藍(lán)色瓶塞真空采血管(枸櫞酸鈉抗凝)24檢驗(yàn)?zāi)捻?xiàng)是為了證明有無出血性疾病。采集1.8ml空腹血(至2ml瓶簽刻度處),立即顛倒混勻,至少5次。避免溶血,避免凝固。第24頁/共115頁256、采集方法靜脈采血法:采血部位:最常用的是肘靜脈,此外,也可采用手背靜脈、外踝靜脈、頸外靜脈。取血容器:最好采用一次性注射器和試管。第25頁/共115頁26

注意事項(xiàng):①如遇到病人采血發(fā)生眩暈,平臥休息,必要時嗅吸芳香氨酊,掐人中。

②防止溶血:造成溶血原因,穿刺不順利,局部組織損傷過多,取血容器有水,血液注入試管時不取下針頭,抗凝血的劇烈震蕩。第26頁/共115頁27

③避免充血和血液濃縮:止血帶壓迫時間不能過長,最好不超過半分鐘。

④抽血時,只能向外抽,不能向內(nèi)推。以免注人空氣。

⑤肢體進(jìn)行靜脈輸液時不宜在同側(cè)靜脈采血。

第27頁/共115頁28

動脈采血法:一般多采用股動脈,其他部位如橈動脈,肱動脈也可采用,在博動明顯處,常規(guī)消毒,刺入動脈后,血液自行涌入注射器,達(dá)所需血量,用干棉球壓迫止血。第28頁/共115頁29

7、標(biāo)本的處理抗凝劑阻止血液凝固的化學(xué)試劑,稱為抗凝劑,常用的有:

①草酸鉀與血液中鈣離子結(jié)合生成草酸鈣沉淀。通常配成100g/L水溶液,每支試管中加0.1ml,80℃以下烘干備用。

優(yōu)點(diǎn):溶解度大,抗凝作用強(qiáng)(抗凝用量2mg/ml血),價格低

缺點(diǎn):改變血液pH,不能用于酸堿平衡觀察,不能用于K+、Ca2+測定,抑制一些酶活性,LDH、ACP、ALT。第29頁/共115頁30②氟化鈉抗凝作用弱,常與草酸鉀混合使用,NaF4g,草酸鉀6g,溶解至100ml,每管加0.1ml,80℃以下烘干備用,可抗凝2~3ml血。

優(yōu)點(diǎn):防止糖酵解,用于血糖測定。

③肝素是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖,具有多方面抗凝作用。

優(yōu)點(diǎn):抗凝作用強(qiáng)(抗凝用量0.1mg/ml血)不影響血細(xì)胞體積,不易溶血,配成1g/L水溶液,每管0.5ml,60℃烘干備用,久置而失效,價格貴。第30頁/共115頁二)、體液標(biāo)本的采集1:尿常規(guī)晨尿標(biāo)本:一般留取清晨第一次尿最佳。尿標(biāo)本的送檢及保存:(1)一般需留取10ml左右.(2)尿標(biāo)本收集后應(yīng)及時送檢,以免有型成分破壞和有機(jī)物質(zhì)分解.31第31頁/共115頁二)、體液標(biāo)本的采集2:大便標(biāo)本(1)患者的準(zhǔn)備:患者應(yīng)于治療之前留取標(biāo)本,留作隱血試驗(yàn)的標(biāo)本應(yīng)于3日前禁食肉類及動物性食物,并禁服鐵劑及維生素C等藥物。(2)自然排便后,挑取有膿血、粘液部分糞便2-3g,若稀水樣便則應(yīng)取約2ml,于糞便標(biāo)本容器中送檢。32第32頁/共115頁二)、體液標(biāo)本的采集(3)標(biāo)本務(wù)必新鮮且不可混入尿液、消毒液及污水等,以免有型成分破壞。(4)標(biāo)本采集后應(yīng)于1-2小時內(nèi)檢查完畢,否則可因pH及消化酶等影響導(dǎo)致有型成分破壞分解。33第33頁/共115頁二)、體液標(biāo)本的采集3:痰液標(biāo)本(1)痰液要求新鮮,一般檢查以清晨第一口痰作標(biāo)本最適宜。(2)咳痰:清水反復(fù)漱口后用力咳嗽,從肺深部咳新鮮痰液于無菌容器送檢。(3)對咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔抵達(dá)氣管腔內(nèi)吸取痰液。

34第34頁/共115頁二)、體液標(biāo)本的采集354:其它分泌物排泄物標(biāo)本及特殊標(biāo)本的采集主要由??漆t(yī)生或檢驗(yàn)人員進(jìn)行:胃液標(biāo)本 精液標(biāo)本腦脊液標(biāo)本 前列腺液標(biāo)本胸腹水標(biāo)本 陰道分泌物標(biāo)本羊水標(biāo)本 骨髓標(biāo)本等細(xì)胞穿剌標(biāo)本第35頁/共115頁36體液標(biāo)本的處理收集24小時尿液時,為防止細(xì)菌生長而影響檢驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)使用防腐劑,常用的有:

1、甲苯(或二甲苯)在尿液表面形成一薄膜,防止細(xì)菌繁殖,防腐能力較弱。用量10ml左右,適合作尿糖,尿蛋白、尿素、肌酸、肌酐、尿酸,鉀、鈉、氯測定。第36頁/共115頁37

2、濃鹽酸使尿液保持強(qiáng)酸性,阻止細(xì)菌繁殖,防止尿液中某些成分因尿酸堿化而分解,用量10ml左右,適合作尿17-羥、17-酮、兒茶酚胺、鈣測定。

3、麝香草酚可抑制尿中細(xì)菌生長,用量1g左右,也可用麝香草酚異丙醇溶液(10%),5ml左右,適合作尿鉀,鈉、鈣、AA、糖、尿膽原、膽紅素測定,不適合作尿蛋白測定。第37頁/共115頁38標(biāo)本的分離和儲存

血液標(biāo)本采集后,如需要血漿或血清者,應(yīng)及時分離,以免紅細(xì)胞與血清或血漿之間物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和紅細(xì)胞對血清中某些物質(zhì)的利用。

血漿的分離:取血后與抗凝劑充分混勻后,可立即離心分離,2500~3000轉(zhuǎn)/min,5min。

血清的分離:取血后將試管放37℃水浴放置30min左右,離心分離。

分離的血漿或血清不能及時檢測時,可放4~6℃冰箱保存,保存期限依待測成分穩(wěn)定性而定,一般3~5天。第38頁/共115頁三)、微生物檢驗(yàn)的標(biāo)本采集及送檢在醫(yī)學(xué)高度發(fā)展,新的抗菌藥物不斷涌現(xiàn)的今天,感染性疾病的發(fā)病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是當(dāng)代的感染性疾病,在病原上發(fā)生了較大的變化,形成了現(xiàn)代感染性疾病在病原學(xué)上的新特點(diǎn)。39第39頁/共115頁現(xiàn)代感染性疾病的新特點(diǎn)以條件致病菌為主:很多低致病、弱毒的細(xì)菌,在外環(huán)境、人體體表以及與外界相通的腔道中廣泛存在的細(xì)菌,引起感染甚至造成嚴(yán)重后果的現(xiàn)象日益增多。病原菌的種類更為廣泛:包括需氧菌、厭氧菌、苛氧菌、分枝桿菌和真菌等。40第40頁/共115頁現(xiàn)代感染性疾病的新特點(diǎn)細(xì)菌的耐藥性不斷增強(qiáng):同一種細(xì)菌對抗生素的耐藥性可以完全不同,甚至出現(xiàn)同時耐多種抗生素的“多重耐藥”細(xì)菌,往往使臨床醫(yī)師的“經(jīng)驗(yàn)性”治療或所謂的常規(guī)治療根本無效。41第41頁/共115頁現(xiàn)代感染性疾病的新特點(diǎn)出現(xiàn)一些新的感染性病原:有人統(tǒng)計(jì),20世紀(jì)后期,全世界一共出現(xiàn)種31種新的傳染病,其中病毒14種,細(xì)菌11種,寄生物6種,由于人們的認(rèn)識不足,缺乏有效的預(yù)防、治療辦法,人群又無免疫力,這些新出現(xiàn)的病菌在不同的地區(qū)和范圍內(nèi)流行,來勢猛,傳播快,造成巨大的損失和社會恐慌。例如:瘋牛病、埃博拉出血熱、新型肝炎病毒、大腸桿菌O157、出血性腸炎、O139霍亂、艾滋病、萊姆病等。42第42頁/共115頁

我們應(yīng)該追求:

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

“針對性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送,是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提!

43微生物讓人類步步為營第43頁/共115頁檢驗(yàn)誤差發(fā)生率哪個階段最高44?第44頁/共115頁60%以上實(shí)驗(yàn)誤差發(fā)生在分析前

1997年,一位意大利著名檢驗(yàn)專家就對急診檢驗(yàn)誤差發(fā)生的種類和發(fā)生率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示,約有68.2%的檢驗(yàn)誤差發(fā)生在檢驗(yàn)前期,而來自于檢驗(yàn)中期和檢驗(yàn)后期的誤差率分別為13.3%和18.5%。

2007年,這位檢驗(yàn)專家又進(jìn)行了類似統(tǒng)計(jì),結(jié)果顯示,檢驗(yàn)前期的誤差發(fā)生率仍高達(dá)61.9%。45第45頁/共115頁分析前質(zhì)量控制46獲得準(zhǔn)確結(jié)果的重要環(huán)節(jié)第46頁/共115頁基本原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.標(biāo)本容器須滅菌處理,但不得使用消毒劑6.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康?7第47頁/共115頁如何提高細(xì)菌陽性檢出率?標(biāo)本采集時機(jī)標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運(yùn)送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本(退檢制度)高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境48第48頁/共115頁常見不合格標(biāo)本主要有以下問題:

標(biāo)本采集時間錯誤容器錯誤標(biāo)本量不足標(biāo)本采集延誤標(biāo)本未及時正確運(yùn)送以及暫存條件錯誤。。。。。。。

49第49頁/共115頁最有價值的細(xì)菌學(xué)檢測項(xiàng)目

血液培養(yǎng)腦脊液培養(yǎng)膽汁培養(yǎng)胸腹水培養(yǎng)關(guān)節(jié)液其他無菌體液或分泌液50第50頁/共115頁血培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)送51第51頁/共115頁52血培養(yǎng)是進(jìn)行血流感診斷的最佳手段第52頁/共115頁血培養(yǎng)概念:采集患者的血液或無菌體液標(biāo)本,送至微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)檢測.檢測原本無菌的血液及體液中是否有細(xì)菌存在.如有細(xì)菌,則極有可能為致病的細(xì)菌.進(jìn)一步進(jìn)行鑒定/藥敏試驗(yàn).53第53頁/共115頁完整的血培養(yǎng)過程醫(yī)師開出醫(yī)囑護(hù)理人員收集送檢樣本實(shí)驗(yàn)室檢測、分離并鑒定導(dǎo)致血流感染的微生物三級報告:為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果54第54頁/共115頁采血時機(jī)不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng),不同時做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時正在使用抗生素治療55目前血培養(yǎng)的問題:第55頁/共115頁血流感染與血培養(yǎng)的規(guī)范實(shí)踐56第56頁/共115頁“只有在發(fā)熱時,才需要進(jìn)行血培養(yǎng)?!?7————關(guān)于血培養(yǎng)指征想采就采?第57頁/共115頁當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時,應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有:不明原因的發(fā)燒(>38℃)或體溫過低(<36℃)白細(xì)胞增多(>10,000/ul),粒細(xì)胞減少(<1,000ul)休克,寒顫,僵直嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎,心內(nèi)膜炎,肺炎,腎盂腎炎,腹部術(shù)后感染,…)心率異常加快低血壓或高血壓呼吸頻率加快58答案:血培養(yǎng)的指征第58頁/共115頁“何時采血進(jìn)行血培養(yǎng),無特殊時間要求?!?9———關(guān)于采血時機(jī)?第59頁/共115頁6003060時間(分鐘)體溫血培養(yǎng)采血時機(jī)細(xì)菌濃度第60頁/共115頁盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療,應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)

61答案:采集血培養(yǎng)樣本的最佳時間第61頁/共115頁

“為減輕患者痛苦,只從一個穿刺部位采一份血液標(biāo)本即可?!?2———關(guān)于采血套數(shù)及部位?第62頁/共115頁基本概念成人“一套”血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個,也叫“一份”注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套應(yīng)從另一個穿刺點(diǎn)獲得。兒童一般只做需氧培養(yǎng),但仍需從多個部位采集多次。特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)。

63第63頁/共115頁采血套數(shù)64Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548第64頁/共115頁表皮葡萄球菌的臨床意義2-3套血培養(yǎng),有助于污染的判斷。Tokars,JI.ClinInfectDis2004;39:333污染菌致病菌?

采集1套無法判斷是病原菌還是污染菌。第65頁/共115頁每位患者每次采血最少2套,初發(fā)患者,絕不能只采1套標(biāo)本多個穿刺部位采血。因多部位同時發(fā)生污染的幾率較小,便于對結(jié)果進(jìn)判斷

66答案:關(guān)于血培養(yǎng)套數(shù)與采血部位第66頁/共115頁“兩套血培養(yǎng)采集間隔無特殊要求?!?7———關(guān)于采血間隔?第67頁/共115頁對于非持續(xù)性菌血癥,同時或短時間內(nèi)采集2-3套血培養(yǎng),因?yàn)轶w內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)會在15~30min內(nèi)清除掉進(jìn)入人體內(nèi)的細(xì)菌??梢杉毙孕膬?nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng),30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集,采集后立即進(jìn)行抗菌藥的經(jīng)驗(yàn)治療。如果24小時內(nèi)報告陰性,則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套,連續(xù)采集3套標(biāo)本。如果24小時內(nèi)報告陰性,則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。

68答案:關(guān)于標(biāo)本采集間隔時間第68頁/共115頁“每瓶采集多少血液無特殊要求?!?9———關(guān)于采血量?第69頁/共115頁采血量(ml)與檢出率的關(guān)系70Overall血培養(yǎng)物每增加一毫升,真性菌血癥成年人微生物的檢出率增加3%但并非越多越好,超過一定數(shù)量的采血量會稀釋培養(yǎng)瓶內(nèi)的肉湯,使肉湯無法有效中和血中的抑制物質(zhì)(補(bǔ)體、抗體、抗生素)。所以血液與肉湯的最佳比例為1:4-1:10第70頁/共115頁采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素成人一般應(yīng)采2個培養(yǎng)瓶(需氧+厭氧),每瓶5-10ml,共20ml。兒童一般只需采集需氧瓶,在保證采集血量<1%總血量下,一般為1-3ml采血量不足時應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶,因臨床90%以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染

71答案:關(guān)于采集血液量第71頁/共115頁先采生化、凝血標(biāo)本,再采血培養(yǎng)標(biāo)本?!?2———關(guān)于各種血液標(biāo)本的采集順序?第72頁/共115頁血培養(yǎng)對無菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標(biāo)本要高。所以要最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本。污染率的指標(biāo)是<3%

(100份標(biāo)本里只能有不到3個標(biāo)本出現(xiàn)污染。)73答案:采各種血液標(biāo)本的先后順序第73頁/共115頁“消毒的重點(diǎn)是足夠量的消毒劑?!?4———關(guān)于皮膚及培養(yǎng)瓶消毒?第74頁/共115頁75皮膚消毒程序:

推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消毒劑。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用時間與碘町一樣(但不能用于少于2個月嬰兒皮膚消毒)第75頁/共115頁76培養(yǎng)瓶的消毒程序:去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。自然待干。將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)。5.顛倒混勻標(biāo)本與肉湯,以避免血液凝集。第76頁/共115頁“培養(yǎng)瓶未使用時,需要冷藏或冷凍。”77———關(guān)于培養(yǎng)瓶的儲存溫度?第77頁/共115頁78

不需冷藏,更不能冷凍。保存在15-25℃的室溫即可,溫度過低會導(dǎo)致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。答案:關(guān)于未用培養(yǎng)瓶的儲存溫度第78頁/共115頁79

“加入標(biāo)本后的培養(yǎng)瓶夜班未能及時送到檢驗(yàn)科,可以冷藏或放入35℃的溫箱?!薄P(guān)于夜班血培養(yǎng)的送檢?第79頁/共115頁

培養(yǎng)瓶夜班未能及時送到檢驗(yàn)科,存在室溫即可,不能冷藏也不能放入35

℃的溫箱。過夜不會對檢測造成影響,但仍需盡快送檢。冷藏可能導(dǎo)致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。溫箱會導(dǎo)致細(xì)菌進(jìn)入生長對數(shù)期,從而錯過檢測的最佳時期。80答案:關(guān)于夜班血培養(yǎng)的送檢第80頁/共115頁“患者靜脈中插有導(dǎo)管,可直接從導(dǎo)管采血。”81———關(guān)于采血部位?第81頁/共115頁

不可以,常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置中采集,檢出污染或定植菌的可能性較大。除非懷疑導(dǎo)管相關(guān)性血流感染,請參照導(dǎo)管相關(guān)性血流感染的采血方法。82答案:關(guān)于從靜脈留置裝置直接采血第82頁/共115頁血培養(yǎng)標(biāo)本的拒收瓶子上帖的標(biāo)簽錯誤或未帖標(biāo)簽。血培養(yǎng)瓶打破的、損壞的或滲漏。血液凝固。83第83頁/共115頁培養(yǎng)基的選擇推薦使用商品化的培養(yǎng)基使用添加抗菌藥物吸附劑的血培養(yǎng)瓶有助于提高已接受抗菌藥物治療患者血培養(yǎng)的檢出率,增加細(xì)菌的分離率和分離速度,但同時也會增加污染菌的檢出率。84第84頁/共115頁上呼吸道標(biāo)本

85第85頁/共115頁上呼吸道感染:絕大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位;導(dǎo)致咽痛、鼻涕、常常會發(fā)熱。感染喉部、中耳、鼻竇炎、結(jié)膜炎或角膜炎。可能與嚴(yán)重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和傳染性單核細(xì)胞增多癥并存。86第86頁/共115頁87第87頁/共115頁不同的采樣拭子

對標(biāo)本的檢測結(jié)果有影響嗎?88?第88頁/共115頁棉+木棍89抑菌區(qū)域的產(chǎn)生由于棉中所含的脂肪酸以及從木棒中滲出的樹脂和甲醛。第89頁/共115頁咽拭子運(yùn)送培養(yǎng)基

可以運(yùn)送需氧、厭氧、苛養(yǎng)菌

4℃或RT24或48小時90建議用于病原菌培養(yǎng)而不是涂片的標(biāo)本送檢。第90頁/共115頁痰培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)送91第91頁/共115頁病原體種類繁多而復(fù)雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題92細(xì)菌(包括放線菌與奴卡菌,厭氧菌與分枝桿菌)真菌(包括肺孢子菌)病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲第92頁/共115頁咳痰途經(jīng)口咽部唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml。研究顯示,國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。93不可避免地受到污染第93頁/共115頁我國痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結(jié)果重復(fù)性差報告速度慢感染菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距94第94頁/共115頁下呼吸道感染病原學(xué)診斷注意事項(xiàng)痰標(biāo)本的正確采集(包括導(dǎo)痰)痰標(biāo)本及時運(yùn)送和處理的重要性痰標(biāo)本的洗滌與勻化痰涂片:質(zhì)量評估和細(xì)菌、真菌初步報告接種平板:質(zhì)量與質(zhì)控,血、巧克力、麥康凱、沙保弱95第95頁/共115頁下呼吸道感染病原學(xué)診斷注意事項(xiàng)培養(yǎng)環(huán)境:CO2培養(yǎng)時間:24h,48h菌落觀察要點(diǎn)結(jié)果報告:所有菌種(群),包括半定量臨床意義判定其他病原體的檢測:結(jié)核、真菌、厭氧菌、非典型病原體96第96頁/共115頁咳痰標(biāo)本的采集標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本病人先漱口,去除表面的菌群教育病人深咳,收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格!97第97頁/共115頁關(guān)于咳痰標(biāo)本在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1~2h內(nèi)必須立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室處理咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛,但也是最受爭議的標(biāo)本取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托,清潔口腔如刷牙和漱口深咳,采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo)無痰可用3%~5%NaCl5ml霧吸約5min導(dǎo)痰也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等法取痰98第98頁/共115頁5種篩選標(biāo)準(zhǔn)判斷14001份痰標(biāo)本合格率比較99

合格不合格不能歸類

標(biāo)本數(shù)率%標(biāo)本數(shù)率%標(biāo)本數(shù)率%標(biāo)準(zhǔn)1474033.9925366.1*80.1標(biāo)準(zhǔn)2358325.611097.9*930966.5標(biāo)準(zhǔn)3483234.5916965.5--標(biāo)準(zhǔn)4911565.1488634.9--標(biāo)準(zhǔn)5637845.6762354.4--注:標(biāo)準(zhǔn)2:衛(wèi)生部醫(yī)政局《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第99頁/共115頁咳痰標(biāo)本不合格,退檢嗎?如果低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞大于25個,白細(xì)胞小于10個,應(yīng)不做或僅在特殊要求時做培養(yǎng)。如做培養(yǎng),報告中注明“鏡檢結(jié)果表明標(biāo)本口咽分泌物污染明顯”。100第100頁/共115頁幾種下呼吸道直接采集的標(biāo)本經(jīng)氣管穿刺吸引(transtrachealaspiration,TTA)經(jīng)胸壁針刺吸引(transthoracicneedleaspiration,TNA)經(jīng)支氣管鏡采樣支氣管肺泡灌洗(bronchoalveolarlavage,BAL)經(jīng)支氣管鏡直接吸引防污染樣本毛刷(protectivespecimenbrush,PSB)開胸肺活檢(open-lungbiopsy,OLB)經(jīng)人工氣道吸引分泌物(endotrachealaspirates,ETA)101第101頁/共115頁痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)對于普通細(xì)菌性肺炎,痰標(biāo)本送檢每天1次,連續(xù)2~3天。不建議24h內(nèi)多次采集,除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變;懷疑分枝桿菌感染者,應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢;懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染,痰標(biāo)本理想的送檢次數(shù)尚無定論。102第102頁/共115頁痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存盡快(<2h)送至實(shí)驗(yàn)室。如不能及時送達(dá),應(yīng)將標(biāo)本暫存于4℃,但放置時間不可超過24h。厭氧培養(yǎng)標(biāo)本的最佳運(yùn)送時間取決于標(biāo)本量。被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。103第103頁/共115頁痰培養(yǎng)的拒收光學(xué)顯微鏡細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)口咽分泌物污染明顯。沒有標(biāo)簽或貼錯標(biāo)簽。運(yùn)送容器選擇不當(dāng)或有滲漏。標(biāo)本采集不符合要求。同一天同一試驗(yàn)重復(fù)送檢2次。延時送至實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本。104第104頁/共115頁尿培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)送105第105頁/共115頁你知道嗎?尿液通常是無菌的或一過性有少量微生物,但是尿道內(nèi)或尿道周圍皮膚的菌群會污染尿液標(biāo)本,從而可能導(dǎo)致錯誤的培養(yǎng)結(jié)果。診斷癥狀明顯的病人(如尿急、尿頻、尿痛),一份標(biāo)本就已足夠,治療48-72小時后再采集第

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