關(guān)于動(dòng)物檢疫技術(shù)二第1頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三第一節(jié)臨診檢疫技術(shù)一、群體檢疫群體檢疫是指對(duì)待檢動(dòng)物群體進(jìn)行的現(xiàn)場(chǎng)檢疫。(一)群體檢疫的組織1.群體劃分同場(chǎng)、同圈(舍)；同一產(chǎn)地來源的；同車、同船、同機(jī)運(yùn)輸?shù)膭潪橐蝗骸Ｔ谛笕哼^大時(shí),要適當(dāng)分群,以利于檢查。2.檢疫順序大群→小群；幼年→成年；種用畜群→其它用途的；健康→染病畜群。第2頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三(二)群體檢疫的方法和內(nèi)容1.靜態(tài)觀察

靜態(tài)觀察是在動(dòng)物安靜休息,完全保持自然狀態(tài)下,觀察其站立、睡臥姿勢(shì)；精神狀態(tài)；營(yíng)養(yǎng)程度和呼吸、反芻等基本生理活動(dòng)現(xiàn)象。注意有無異常站立、睡臥姿勢(shì),有無咳嗽、喘息、呻吟、流涎、嗜睡、孤立一隅等反?，F(xiàn)象。2.動(dòng)態(tài)觀察經(jīng)靜態(tài)觀察之后,將被檢動(dòng)物驅(qū)趕起來,觀察其自然活動(dòng)和驅(qū)趕活動(dòng)。重點(diǎn)看起立、運(yùn)動(dòng)的姿勢(shì)與步態(tài)；精神狀態(tài)。第3頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三3.飲食觀察

目的在于檢查動(dòng)物的食欲和口腔疾病?？梢杂^察動(dòng)物自然采食飲水動(dòng)作,亦可有意少給食物看其搶食行為。從中發(fā)現(xiàn)不食不飲、少食少飲、吞咽困難和退槽、嘔吐、流涎等可疑患病動(dòng)物。二.個(gè)體檢疫個(gè)體檢疫是對(duì)群體檢疫時(shí)檢出的可疑病態(tài)動(dòng)物進(jìn)行詳細(xì)和系統(tǒng)的臨診檢查。第4頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三（一）個(gè)體檢疫的方法和內(nèi)容1.視診

(1)看精神狀態(tài)健康動(dòng)物靜止時(shí)安靜,行動(dòng)時(shí)靈活,對(duì)各種外界刺激敏感。(2)看營(yíng)養(yǎng)程度營(yíng)養(yǎng)狀況：肌肉的豐滿度、皮下脂肪的蓄積量、被毛狀況三方面觀察。(3)看姿勢(shì)與運(yùn)動(dòng)觀察動(dòng)物站立、睡臥的姿勢(shì)是否自然,運(yùn)動(dòng)時(shí)動(dòng)作是否靈活而協(xié)調(diào)。(4)看皮膚被毛(5)看可視黏膜(6)看排泄物

(7)看呼吸與反芻第5頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三2.觸診

（1）耳根、角根、鼻端、四肢末端（2）體表皮膚（3）體表淋巴結(jié)3.聽診

4.測(cè)體溫

健康動(dòng)物：早晨溫度較低,午后略高,波動(dòng)范圍在0.5℃～1℃之間。豬：38-39.5，牛：37.5-39.5，羊：38-39.5，禽：40-42。第6頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三

臨床檢疫個(gè)體檢疫群體檢疫群檢正常→

抽檢群檢異?！鷤€(gè)體檢查靜態(tài)觀察食態(tài)觀察動(dòng)態(tài)觀察第7頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三三.各種動(dòng)物臨診檢疫特點(diǎn)（一）豬的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康豬

站立平穩(wěn),不斷走動(dòng)拱食,并發(fā)出“吭吭”聲。對(duì)外界刺激敏感,遇人接近表現(xiàn)警惕性凝視。睡臥常取側(cè)臥,四肢伸展,頭側(cè)地，呼吸均勻；爬臥時(shí)后腿屈于腹下。排泄物正常。體溫正常。被毛整齊光亮。起立敏捷,行動(dòng)靈活,走跑時(shí)搖頭擺尾或上卷尾。遇驅(qū)趕,隨群前進(jìn),不斷發(fā)出叫聲。餓時(shí)叫喚,飲喂時(shí)搶食,大口吞咽有響聲且響聲清脆,全身鬃毛隨吞食而顫動(dòng)。第8頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三2.病豬

精神萎靡,離群獨(dú)立,全身顫抖或頭頸歪斜。蜷臥,不愿起立。被毛粗亂無光,鼻盤干燥,眼有分泌物,肷窩凹陷。行動(dòng)遲緩,步態(tài)踉蹌,跛行或出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。食欲下降,懶于上槽,或只吃幾口就退槽,有些只聞而不食,亦有的食欲廢絕。排泄物異常。多有體溫異常。第9頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三(二)牛的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康牛

站立平穩(wěn),神態(tài)安靜。睡臥時(shí)常呈膝臥姿勢(shì),四肢彎曲。全身被毛平整有光澤,鼻鏡濕潤(rùn),眼、嘴及肛門周圍干凈。反芻有力，正常噯氣，呼吸平穩(wěn)。肉用牛垂肉高度發(fā)育；乳用牛乳房清潔,泌乳正常。排泄物、體溫正常健康牛走起路來精力充沛,腰背靈活,四肢有力,搖耳甩尾,自由自在。飲食中爭(zhēng)搶飼料,咀嚼有力,采食時(shí)間長(zhǎng),采食量大。放牧中喜采食高草,常甩頭用力扯斷。運(yùn)動(dòng)后飲水不咳嗽。第10頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三2.病牛精神沉郁,頭頸低伸,拱背彎腰或有異常體態(tài)。睡臥時(shí)四肢伸開,橫臥或曲頸側(cè)臥,嗜睡,久臥不起或起立困難。被毛粗亂。反芻遲緩或停止。排泄物異常。體溫、呼吸多異常。運(yùn)動(dòng)時(shí)常跛行掉隊(duì)或不愿行走。飲食時(shí)表現(xiàn)厭食或不食,或采食緩慢,咀嚼無力。出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)后飲水咳嗽。第11頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三(三)羊的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康羊

站立平穩(wěn),乖順。被毛整潔。呼吸平穩(wěn)。常于飽腹后合群臥地休息，反芻。遇炎熱相互把頭藏于對(duì)方腹下避暑。走起路來精神活潑,合群不掉隊(duì)；放牧中雖很分散,但不離群。山羊活潑機(jī)敏,喜攀登,善跳躍,好爭(zhēng)斗,尤其是羔羊和幼齡羊。飼喂時(shí)互相爭(zhēng)食，放牧?xí)r常邊走邊吃草,邊走邊排糞，排泄物正常。食后肷窩臌起。第12頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三2.病羊

精神萎靡不振,常獨(dú)臥一隅,遇人接近不起不走。不反芻。排泄物異常。呼吸異常。被毛粗亂,脫毛,皮膚干裂。行走搖擺,或出現(xiàn)異常運(yùn)動(dòng),異常姿勢(shì)。食欲不振或停食,食后肷窩仍下陷。山羊喜臥懶動(dòng)，多有體溫異常。第13頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三(四)家禽的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康家禽

神態(tài)活潑,反應(yīng)敏銳。站立時(shí)伸頸昂首翹尾,且常高收一肢,目光伶俐,時(shí)常側(cè)視。臥時(shí)頭疊放在翅內(nèi)。冠、髯紅潤(rùn),羽絨豐滿光亮,排列勻稱?？诒菨崈?呼吸正常,排泄物正常。體溫正常。平養(yǎng)雞行動(dòng)敏捷,步態(tài)穩(wěn)??；鴨、鵝陸地行走穩(wěn)健,水中游牧自如,放牧?xí)r不掉隊(duì)。健康家禽啄食連續(xù),食欲旺盛,食量大,嗉囊飽滿。2.病禽

精神萎靡,縮頸垂翅,閉目似睡。冠、髯蒼白或紫黑,喙、蹼色澤變暗。有的頭頸部腫脹,眼、鼻等天然孔有異常分泌物。羽絨蓬亂無光。行動(dòng)遲緩,跛行或有肢翅麻痹及其它神經(jīng)癥狀。食欲減退或廢絕,嗉囊空虛。排泄物異常。多有體溫異常。第14頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三第二節(jié)病理學(xué)檢查技術(shù)一、病理剖檢檢查技術(shù)（一）對(duì)動(dòng)物尸體剖檢的要求1、剖檢前檢查●剖檢前仔細(xì)檢查尸體體表特征及天然孔有無異常，以排除炭疽等惡性傳染病?！窕继烤也〉膭?dòng)物及其尸體，禁止剖檢?！袢魬岩蓜?dòng)物死于炭疽，先采取耳尖血液涂片鏡檢，排除炭疽后方可剖檢。第15頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三2、剖檢時(shí)間

剖檢進(jìn)行的越早越好，最好在白天進(jìn)行剖檢。3、剖檢地點(diǎn)

病理解剖室或；在野外或其它檢疫現(xiàn)場(chǎng)剖檢時(shí)，應(yīng)選地勢(shì)高燥并遠(yuǎn)離居民區(qū)、畜舍及交通要道的地方進(jìn)行。4、剖檢數(shù)量

家禽：5只以上；大中動(dòng)物至少剖檢3頭。5、剖檢術(shù)式6、安全防護(hù)

工作人員的安全防護(hù)工作；防止環(huán)境污染。常用的消毒液有：1%～2%硼酸、0.1%新潔爾滅、5%碘酊、70%酒精等第16頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三（二）外部檢查1．檢查尸體變化尸僵、尸斑、尸腐、血液凝固2．檢查皮膚、被毛及營(yíng)養(yǎng)狀況3．檢查天然孔（三）內(nèi)部檢查1、皮下檢查

2、內(nèi)臟器官的檢查對(duì)有病變和病變嚴(yán)重的器官要重點(diǎn)檢查，分辯病理變化特點(diǎn)，判定病變性質(zhì)。3、口腔、鼻腔和頸部器官的檢查

第17頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三第三節(jié)檢疫材料的采集一．采集原則1．適時(shí)采集2．典型采樣典型采樣要求樣品具有代表性。⑴動(dòng)物活體采樣①選擇典型動(dòng)物即未經(jīng)藥物治療、病狀典型的動(dòng)物，這對(duì)細(xì)菌性傳染病的檢查尤其重要。②選擇典型材料A、采集病原體可能在其中含量最高的材料。B、在采取病料前，對(duì)動(dòng)物可能患某種疫病作出初步診斷，側(cè)重采集該病原體常侵害的部位。第18頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三⑵從動(dòng)物尸體采樣采集有病變的組織、器官或病變最明顯、最典型的部位。供病理組織切片的樣品，應(yīng)連帶部分健康組織。淋巴結(jié)、心、肝、脾、肺、腎，不論有無病變，一般均應(yīng)采取。

3．合理采樣

動(dòng)物群體發(fā)病，至少采取5頭（只）動(dòng)物的病料。每一種樣品應(yīng)有足夠的數(shù)量，除確保本次實(shí)驗(yàn)用量外，以備必要的復(fù)檢用。4．無菌采樣第19頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三二．供病原學(xué)檢查材料的采集、處理1、供微生物學(xué)檢查材料的采集、處理（1）血液采血部位：頸靜脈或尾靜脈或耳靜脈；家禽從翅靜脈或心臟。死亡動(dòng)物從右心房采血。采血量：10ml（大、中動(dòng)物）；3～5ml（小動(dòng)物和家禽）。全血抗凝：EDTA—Na2、枸櫞酸鈉、肝素。枸櫞酸鈉不宜用于病毒血樣。10ml血液+4%枸櫞酸鈉溶液1ml或0.1%肝素1ml或EDTA—Na215～20㎎。

病毒樣品：1ml血樣=青霉素+鏈霉素各500～1000IU，以抑制血源性或在采血過程中污染的細(xì)菌。第20頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三（2）分泌物和滲出液口腔、鼻腔、喉氣管、泄殖腔及陰道分泌物：用滅菌的棉球蘸取。咽食道分泌物：采前禁食12h，食道探子刮取。乳汁：清洗乳房并消毒→棄去最初擠出的幾把乳汁→擠出的10～20ml乳汁。尿液：排尿時(shí)采集或用導(dǎo)尿管采取，常取30～50ml。水泡液、水腫液、關(guān)節(jié)囊液，胸腹腔滲出液：用注射器抽取，至少采取1ml。膿汁：已破口的膿皰，用棉球蘸?。晃雌瓶诘挠米⑸淦魑?。過于濃稠不好抽取時(shí)，可切開膿皰，用棉球蘸取。第21頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三保存與送檢分泌物和滲出液采集→放入滅菌容器→密封→外貼標(biāo)簽→冷藏→送檢。病毒性病料的保存：含抗生素的PH7.2～7.4磷酸鹽緩沖液、50％甘油磷酸鹽緩沖液、50％甘油生理鹽水。細(xì)菌性病料的保存：30％甘油磷酸鹽緩沖液、30％甘油生理鹽水、滅菌液體石蠟。第22頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三2、供寄生蟲檢查材料的采集、處理（1）血液多從耳靜脈采集，立即制成涂片標(biāo)本。（2）陰道分泌物用棉拭子擦拭采取（3）糞便直腸采集或采集新排出的糞便。（4）被寄生蟲寄生的組織、器官組織、器官常連帶寄生蟲一并采集，放入5％～10％福爾馬林溶液中。

第23頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三（5）皮膚刮下物螨病病料：在病變皮膚和健康皮膚交界處采集。（6）寄生蟲體表寄生蟲：用手或鑷子捏取或把附有蟲體的羽毛剪下→70％酒精、甘油酒精或5％福爾馬林容液中。體內(nèi)寄生蟲：小型線蟲→用毛筆將蟲體挑出→生理鹽水洗凈→70％酒精、甘油酒精或巴氏夜固定。大型蠕蟲像蛔蟲、棘頭蟲、絳蟲用5％～10％福爾馬林溶液固定。第24頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三四．供病理組織學(xué)檢查材料的采集、處理1.選材

應(yīng)選擇病變部位與健康部位交界處的組織作為檢材。較重要的病變要多取幾塊，以展示病變的發(fā)展過程。若同一器官有不同的病變，分別采取。2.采集

供切片時(shí)用的組織塊大小為1.5cm×1.5cm×0.5cm，3.固定

供石蠟切片用的組織塊切好后，用清水輕輕沖洗血污，立即浸入固定液中。但胃腸、膽囊、膀胱等組織不要用水沖洗。第25頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三第四節(jié)病原學(xué)檢查技術(shù)一、細(xì)菌性傳染病病原檢查（一）顯微鏡檢查法1.病料處理●將病料涂成薄而均勻的涂片→室溫下自然干燥→若為細(xì)菌培養(yǎng)物涂片火焰固定●常用的染色方法有：革蘭氏染色法、美藍(lán)染色法、瑞氏染色法和姬姆薩染色法。2.顯微鏡檢查

●染色水洗后的涂片標(biāo)本→吸水紙吸干（切勿磨擦）或在酒精燈火焰的遠(yuǎn)端烘干→滴加香柏油→用油浸鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)和染色特性。第26頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三（二）培養(yǎng)檢查法1．固體培養(yǎng)基上菌落性狀的檢查

其菌落的大小、形狀、色澤、表面性狀、透明度、邊緣性狀等因菌種而異。因此，菌落特征是鑒別細(xì)菌的重要依據(jù)。2.液體培養(yǎng)基上液體性狀的觀察

細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)可使液體出現(xiàn)混濁、沉淀、液面形成菌膜以及液體變色、產(chǎn)氣等現(xiàn)象。（三）動(dòng)物試驗(yàn)最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有：小鼠、大鼠、豚鼠和家兔。第27頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三二．病毒性傳染病病原檢查（一）病毒分離培養(yǎng)1.樣品處理2.病毒分離培養(yǎng)

（1）雞胚接種痘病毒：絨毛尿囊膜接種，用9～12日齡雞胚；雞新城疫病毒：絨毛尿囊腔接種，用9～10日齡雞胚；流行性乙型腦炎病毒：卵黃囊內(nèi)接種，用6～8日齡雞胚。（2）動(dòng)物組織培養(yǎng)在病毒分離培養(yǎng)中廣泛采用的是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。（3）動(dòng)物接種第28頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三（二）病毒檢查方法1.包涵體檢查

狂犬病、偽狂犬病、犬瘟熱病毒病毒的包涵體2.病毒培養(yǎng)性狀觀察

雞新城疫病毒：雞胚全身皮膚有出血點(diǎn)雞痘病毒：產(chǎn)生痘斑病變。細(xì)胞病變有：細(xì)胞變形皺縮，胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒，核濃縮，核裂解或細(xì)胞裂解，出現(xiàn)空泡。3.病毒形態(tài)學(xué)觀察

有直接電鏡觀察和免疫電鏡技術(shù)。4.病毒核酸檢測(cè)

最常用的檢測(cè)方法是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。第29頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三三．寄生蟲病病原檢查（一）蟲卵檢查法1．直接涂片鏡檢2．集卵法檢查：水洗沉淀、飽和鹽水漂?。ǘ┫x體檢查法1.蠕蟲蟲體檢查法

（1）成蟲檢查法：肉眼觀察其形態(tài)特征。（2）幼蟲檢查法：低倍鏡下觀察液體中活動(dòng)的幼蟲。第30頁，講稿共35頁，2023年5月2日，星期三第六節(jié)免疫學(xué)檢查技術(shù)一、血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)種類繁多，可利用抗原抗體中已知的任何一方去檢測(cè)未知的另一方，以達(dá)到檢疫目的。（一）凝集反應(yīng)1．直接凝集反應(yīng)

布氏桿菌病和豬傳染性萎縮性鼻炎：平板凝集和試管凝集反應(yīng)；雞白痢、雞支原體病：全血平板凝集反應(yīng)。第31頁，講稿共35頁，2023