探究“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化〞1實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)論血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)對照實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表設(shè)計(jì)2實(shí)驗(yàn)原理思考：1、酵母菌的呼吸方式。2、酵母菌在液體培養(yǎng)基中繁殖其種群數(shù)量受哪些因素影響。3、酵母菌種群數(shù)量增長的曲線類型。3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路思考：如何設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)探究“酵母菌種群數(shù)量變化〞？提示：從影響實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)的酵母菌的因素來考慮4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路試管編號A

BC

試管內(nèi)液體溫度條件對照實(shí)驗(yàn)設(shè)置28℃5℃28℃培養(yǎng)液無菌水酵母菌100.1100.1100.15實(shí)驗(yàn)步驟〔1〕向三支試管中參加培養(yǎng)液或無菌水〔2〕向三支試管中接種酵母菌〔3〕將三支試管在不同的溫度下培養(yǎng)〔4〕每天取樣計(jì)數(shù)酵母菌〔5〕分析數(shù)據(jù)畫出曲線6血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)7〔1〕計(jì)數(shù)工具——血球計(jì)數(shù)板實(shí)物圖正面圖側(cè)面圖計(jì)數(shù)室滴液處血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)8〔1〕計(jì)數(shù)工具——血球計(jì)數(shù)板放大后的計(jì)數(shù)池每塊計(jì)數(shù)板由H形凹槽分為2個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池。每個(gè)計(jì)數(shù)池分為9個(gè)大方格。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)925個(gè)中格16個(gè)小格16個(gè)中格25個(gè)小格25X16=400小格16X25=400小格每個(gè)計(jì)數(shù)室〔大方格〕共有400小格，總?cè)莘e為0.1mm3*********抽樣檢測：5×16=80個(gè)小格抽樣檢測：4×25=100個(gè)小格10血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)思考：1、使用16×25規(guī)格時(shí)計(jì)數(shù)幾個(gè)中方格中的細(xì)胞數(shù)？即個(gè)小方格中的細(xì)胞數(shù)？2、設(shè)每個(gè)中方格中的細(xì)菌數(shù)分別是：A1，A2，A3，A4，稀釋倍數(shù)為：B，那么樣品中細(xì)胞數(shù)/ml是多少？4個(gè)中方格，100個(gè)小方格〔A1+A2+A3+A4〕/100×4000000×B11〔2〕計(jì)算：每毫升培養(yǎng)液中的酵母菌細(xì)胞數(shù)是多少？

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)x400x104x稀釋倍數(shù)所數(shù)的小方格數(shù)12實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄連續(xù)多天統(tǒng)計(jì)，每天統(tǒng)計(jì)屢次。請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表格時(shí)間次數(shù)

1

2

3

4

5

6

7

1

2

3

平均值13酵母菌培養(yǎng)：培養(yǎng)液配制滅菌接種培養(yǎng)配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％的葡萄糖溶液〔葡萄糖20g，1000mL水〕，分裝到5個(gè)燒杯中〔200mL/燒杯〕用高壓蒸汽滅菌鍋將培養(yǎng)液和取樣、計(jì)數(shù)時(shí)所用的滴管分別滅菌。貼標(biāo)簽。接種時(shí)要在酒精燈附近，用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每個(gè)燒杯中參加?！沧⒁猓旱渭恿坎灰?，防止初始菌數(shù)過多?！硨糜?8℃的恒溫箱中培養(yǎng)無菌操作討論：計(jì)數(shù)前還應(yīng)有哪些步驟？需注意些什么？14實(shí)驗(yàn)本卷須知1、從試管中吸取培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)前，為什么需將試管輕輕震蕩幾次？2、假設(shè)一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌數(shù)過多，難以數(shù)清，那么如何處理？使培養(yǎng)液中酵母菌均勻分布，以保證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差。將培養(yǎng)液稀釋一定的倍數(shù)，再重新計(jì)數(shù)。15本卷須知：進(jìn)行計(jì)數(shù)前，應(yīng)先將試管搖勻，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻，以減少計(jì)數(shù)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)時(shí)，對于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。假設(shè)一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過多，難以數(shù)清時(shí)，那么可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計(jì)數(shù)。本實(shí)驗(yàn)無對照實(shí)驗(yàn)，酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照。血球計(jì)數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。實(shí)驗(yàn)本卷須知16試管編號培養(yǎng)液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析17實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析1、分析酵母菌種群數(shù)量變化趨勢的原因2、分析影響酵母菌種群數(shù)量的因素。養(yǎng)料、溫度、pH及有害代謝廢物等數(shù)量時(shí)間18實(shí)驗(yàn)再探究培養(yǎng)空間、氧氣會影響酵母菌的生長嗎？〔2023年江蘇卷31題〕為研究酵母菌種群密度的動(dòng)態(tài)變化，某同學(xué)按下表所列條件進(jìn)行了A、B、C和D共4組實(shí)驗(yàn)，用1000mL錐形瓶作為培養(yǎng)器皿，棉塞封口，在25℃下靜置培養(yǎng)，其他實(shí)驗(yàn)條件均相同，定時(shí)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪出的酵母菌種群密度變化曲線圖如下。19例2:酵母菌的計(jì)數(shù)通常用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行，血球計(jì)數(shù)板每個(gè)大方格容積為0.1mm3，由400個(gè)小方格組成?，F(xiàn)對某一樣液進(jìn)行檢測，如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)先

后再計(jì)數(shù)。假設(shè)屢次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，那么10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

個(gè)。例1:在用血球計(jì)數(shù)板〔2mm×2mm方格〕對某一稀釋50倍樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)在一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)〔蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm〕酵母菌平均數(shù)為16，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌

個(gè)。2x1072×108稀釋20例3

檢測員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，那么上述水樣中約有藍(lán)藻

個(gè)／mL。5n×105

21利用計(jì)數(shù)板可在顯微鏡下對微生物細(xì)胞進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是一個(gè)特制的可在顯微鏡下觀察的玻片，樣品就滴在計(jì)數(shù)室內(nèi)。計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小室組成，容納液體的總體積為0．1m