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高二生物導(dǎo)學(xué)案第二章第三節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程及其應(yīng)用第3課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用【學(xué)習(xí)目標(biāo)】以細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ),理解動(dòng)物細(xì)胞融合的內(nèi)涵。(生命觀念)通過(guò)問(wèn)題探究掌握單克隆抗體制備的過(guò)程,培養(yǎng)分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力。(科學(xué)思維)以流程圖的形式表示單克隆抗體的制備過(guò)程,培養(yǎng)建模能力。(科學(xué)思維)說(shuō)明單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用,體會(huì)科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,并能將所學(xué)知識(shí)應(yīng)用于社會(huì)生產(chǎn)生活實(shí)踐,參與社會(huì)事件的探討。(社會(huì)責(zé)任)【新課研學(xué)】新冠抗原試劑盒檢測(cè)的原理是什么?其生產(chǎn)為何運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)?探究一動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)自主閱讀課本(P66-67),回答下列問(wèn)題:什么是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)?結(jié)合植物體細(xì)胞雜交技術(shù)說(shuō)出誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的物理、化學(xué)方法具體有哪些?3.科學(xué)家在肺結(jié)核、天花、麻疹等病人含病毒的組織中觀察到多核現(xiàn)象,為什么出現(xiàn)此現(xiàn)象,說(shuō)明誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合還可以用什么方法?可用活病毒誘導(dǎo)嗎?為什么?4.從細(xì)胞質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)考慮,為什么病毒能夠作用于動(dòng)物細(xì)胞膜?【資料】滅活病毒誘導(dǎo)的原理是動(dòng)物病毒能同時(shí)與不同動(dòng)物細(xì)胞膜上受體結(jié)合,使細(xì)胞發(fā)生融合。推測(cè):為什么植物體細(xì)胞雜交技術(shù)不用此方法呢?【任務(wù)一】討論:結(jié)合病毒作用的機(jī)制和精卵結(jié)合的過(guò)程,說(shuō)出下圖滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過(guò)程。融合完成的標(biāo)志、原理是什么?通過(guò)20世紀(jì)70年代不同種間融合的成功例子,說(shuō)出意義?!緳z測(cè)一】判斷:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的誘導(dǎo)原理、方法相同。()二倍體動(dòng)物細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞仍是二倍體細(xì)胞。()植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的結(jié)果不同。()探究二單克隆抗體的制備【傳統(tǒng)制備抗體的方法】過(guò)程:向小鼠反復(fù)注射某種抗原小鼠產(chǎn)生抗體從血清中分離相應(yīng)抗體結(jié)合下列資料,思考此方法的缺點(diǎn)是什么?從血清中獲得相應(yīng)抗體,需要大量小鼠血液。動(dòng)物在生存環(huán)境中會(huì)接觸多種抗原,產(chǎn)生數(shù)百萬(wàn)種以上抗體?!舅伎肌吭鯓荧@得產(chǎn)量高、純度高、特異性強(qiáng)的單一抗體呢?【知識(shí)回顧】抗體由細(xì)胞產(chǎn)生。多種不同的抗原刺激B細(xì)胞分化為種(個(gè))漿細(xì)胞,1個(gè)漿細(xì)胞只產(chǎn)生種特異性抗體?!驹O(shè)計(jì)方案】結(jié)合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),如何獲得純度高的單一抗體?二、【單克隆抗體制備過(guò)程】(一)免疫小鼠:【任務(wù)二】根據(jù)圖中操作,完成下列填空:對(duì)小鼠免疫處理的目的是;多次免疫刺激的目的是獲得;從小鼠的部位獲得漿細(xì)胞;取出的脾臟組織可剪碎后用處理制備單細(xì)胞懸液。(二)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)融合:思考:產(chǎn)生多少種細(xì)胞(若融合,只考慮兩兩融合)?第一次篩選:【任務(wù)三】討論配制什么樣的培養(yǎng)基,各種細(xì)胞生存情況及原因是什么?(1min)【給出資料】①細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。②漿細(xì)胞有這兩種DNA的合成途徑。③骨髓瘤細(xì)胞只有D途徑,沒(méi)有S途徑。第二次篩選:思考:所得到的雜交瘤細(xì)胞都只分泌同一種抗體嗎?背景資料:往往1種抗原上有不同種抗原表位,每一種抗原表位都可刺激產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。思考:下一步做什么?目的是什么?【任務(wù)四】小組活動(dòng),討論下列問(wèn)題1和2:結(jié)合稀釋涂布平板法和單個(gè)菌落的來(lái)源,填寫(xiě)下列問(wèn)題:可將含混合雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液經(jīng)處理加到多孔板中(盡量每個(gè)孔最多含個(gè)細(xì)胞)思考:為何要做此處理?資料:被熒光素標(biāo)記的抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后,用紫外線照射,在熒光顯微鏡下可呈現(xiàn)出熒光(黃綠色等)反應(yīng),且產(chǎn)生的抗體濃度越高,現(xiàn)象越明顯。思考:(1)哪一培養(yǎng)孔中產(chǎn)生的是所需的抗體?如何判斷?(2)為什么發(fā)生反應(yīng)的培養(yǎng)孔中是我們所需要的抗體,而不是針對(duì)其它抗原的抗體?此方法的原理是什么?(3)應(yīng)用了什么技術(shù)?此技術(shù)的目的是什么?大規(guī)模生產(chǎn):思考:與傳統(tǒng)制備抗體的方法相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是什么?【任務(wù)五】小組活動(dòng):構(gòu)建概念模型每個(gè)小組根據(jù)所給卡片和箭頭構(gòu)建制備單克隆抗體的流程(用膠帶黏貼);標(biāo)出過(guò)程中進(jìn)行篩選的環(huán)節(jié);思考應(yīng)用了哪些細(xì)胞工程技術(shù)?!緳z測(cè)二】1.下列關(guān)于雜交瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備的說(shuō)法,正確的是()A.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備B.將漿細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)可分泌單克隆抗體C.誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,發(fā)生融合的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.篩選出雜交瘤細(xì)胞后,需利用特定抗原再次篩選能夠分泌單克隆抗體的細(xì)胞2.(多選)下圖是單克隆抗體制備過(guò)程圖,下列說(shuō)法不正確的是()過(guò)程1的目的是獲得相應(yīng)抗體經(jīng)第一次篩選可獲得產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞過(guò)程4的原理是抗原與抗體反應(yīng)具有特異性以上過(guò)程運(yùn)用的原理是細(xì)胞全能性三
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