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1法醫(yī)物證鑒定線粒體DNA檢驗(yàn)規(guī)范本技術(shù)規(guī)范規(guī)定了法醫(yī)學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行人類線粒體DNA檢驗(yàn)的基本要求、檢驗(yàn)程序、結(jié)果比對(duì)本技術(shù)規(guī)范適用于法醫(yī)學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室采用線粒體DNA遺傳標(biāo)記對(duì)母系親緣關(guān)系如母子(女)、隔組DNA或核基因組DNA量不足而無法完成檢測(cè)時(shí)進(jìn)行線粒體DNA檢測(cè),幫助個(gè)體身份信GA/T383-2014法庭科學(xué)DNA實(shí)當(dāng)兩種或兩種以上的mtDNA序列存在于同一個(gè)細(xì)胞、組織或個(gè)體時(shí)稱為異質(zhì)性,可分為長度異質(zhì)性和點(diǎn)異質(zhì)性,常見于以下兩種情況1)個(gè)體在同一組織檢出不同的mtDNA2安德森參考序列Andersonrefere修訂的劍橋參考序列(revisedcambridgereferencesequence,rCRS)是目前法庭科學(xué)公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)參考序列4基本要求4.1鑒定機(jī)構(gòu)應(yīng)具有從事法醫(yī)物證的執(zhí)業(yè)范圍,且應(yīng)滿足如下要求:和滿意程度;監(jiān)督的結(jié)果應(yīng)作為培訓(xùn)需求評(píng)價(jià)的依d)具有能識(shí)別樣本的標(biāo)識(shí)系統(tǒng),并確保樣本在鑒定過程期間能得5.1采樣要求5.1.1毛根、毛干、指甲、陳舊骨骼、牙、核DNA檢測(cè)失敗的血痕、組織等生物檢材均可考慮檢測(cè)5.1.2樣本應(yīng)分別包裝,注明被鑒定人姓名、編號(hào)、采樣日期等。5.1.4采樣單須在案件鑒定完畢后同其他原始技術(shù)記錄一并存入檔案。3L16047:5’-CATGGGGAAGCAGATTTG-3’H16464:5’-TTAGCTACCCCCAAGTGT-3’L29:5’-GGTCTATCACCCTATTAACCAH408:5’-CTGTTAAAACTGCATACCGCCA-3’宜選擇商品化mtDNA全基因組測(cè)序試劑盒(或自行針對(duì)mtDNA全基因組設(shè)計(jì)的體系)進(jìn)行文庫構(gòu)建、定量、模板制備及測(cè)序。操作要求參考相關(guān)試劑從事mtDNA測(cè)序的實(shí)驗(yàn)室至少應(yīng)該包括以下對(duì)照設(shè)置為保證mtDNA測(cè)序結(jié)果的準(zhǔn)確性,要求每次實(shí)驗(yàn)過程中均設(shè)置陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。陰性對(duì)照包雙向測(cè)序污染防控4雙人操作線粒體參考人群數(shù)據(jù)庫實(shí)驗(yàn)室宜建立mtDNA參考人群數(shù)據(jù)庫,有助于對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)量控制和解釋新出現(xiàn)的單倍型序列數(shù)據(jù)。在尚未建立mtDNA數(shù)據(jù)庫前,可參考國際法醫(yī)遺傳學(xué)會(huì)推薦的線粒體DNA數(shù)據(jù)庫EMPOP樣本mtDNA序列應(yīng)與修訂的劍橋參考序列rCRS進(jìn)行比對(duì),結(jié)果的表述中需要指明差異位置及比對(duì)原則上,對(duì)照樣本序列數(shù)據(jù)用K標(biāo)示(Known的第一個(gè)英文字母),證據(jù)樣本序列數(shù)據(jù)用Q標(biāo)示),a)運(yùn)用與參考序列最少數(shù)目的差異進(jìn)行5HVR-II區(qū)域多聚C常位于303nt-315n7.1根據(jù)mtDNA檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行鑒定意見判斷,一般分為三類:排除、不排除8.1鑒定人根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果、比對(duì)結(jié)果和鑒定意見撰寫鑒定文書。8.2鑒定文書的格式要求宜按照主管部門或司法鑒定標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)頒布的相關(guān)規(guī)范執(zhí)行。9特別說明9.1建議采取全基因組測(cè)序方式建立mtDNA參考人群數(shù)據(jù)庫。9.2mtDNA呈單倍型遺傳,人類線粒體DNA單倍型類群(humanmitochondrialDNAhap69.5基于mtDNA存在潛在的突變,對(duì)相隔多代的個(gè)體進(jìn)行母系親緣關(guān)系分析時(shí),應(yīng)謹(jǐn)慎作出判斷意IUPAC(Internat
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