關(guān)于蓄積毒性試驗(yàn)及評(píng)價(jià)第三節(jié)蓄積毒性試驗(yàn)及評(píng)價(jià)一、基本概念及目的三、耐受性檢測(cè)二、蓄積毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)四、蓄積性與耐受性評(píng)價(jià)中存在的問(wèn)題第2頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、基本概念及目的基本概念蓄積毒性試驗(yàn)是評(píng)價(jià)外來(lái)化合物蓄積毒性的實(shí)驗(yàn)方法。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多次給予小劑量受試物嗎，經(jīng)一定時(shí)間后使機(jī)體出現(xiàn)明顯的中毒表現(xiàn)，稱(chēng)為蓄積性作用。這是由于受試物進(jìn)入機(jī)體的速度大于消除的速度。使受試物不斷蓄積，達(dá)到了使機(jī)體發(fā)生毒性反應(yīng)的閾劑量所致。生物半衰期長(zhǎng)的化學(xué)毒物，其蓄積性較大。第3頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、基本概念及目的化學(xué)毒物的蓄積包括兩個(gè)內(nèi)涵：物質(zhì)蓄積和功能蓄積兩個(gè)相對(duì)的概念，同時(shí)存在、互為基礎(chǔ)，因?yàn)槲镔|(zhì)蓄積的情況下，肯定存在機(jī)體一定結(jié)構(gòu)和功能的改變，而功能改變的積累也必須以物質(zhì)積累為基礎(chǔ)。第4頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天1052.5t/22t/23t/24t/25t/2一次給予毒物最大耐受量，以半衰期為間隔時(shí)間毒物的變化。第5頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天1052.5t/22t/23t/24t/25t/2以半衰期為間隔時(shí)間連續(xù)給予毒物的變化。給與次數(shù)及變化：如圖第一次第二次第三次第四次第五次第6頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天第7頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天7.51012.51517.552.50t/23t/22t/24t/25t/26t/27t/2蓄積性變化穩(wěn)態(tài)變化消除變化第8頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、蓄積系數(shù)法K=LD50（n）LD50（1）蓄積系數(shù)（K）蓄積作用輕度K＜11≤K＜33≤K＜5K≥5高度蓄積明顯蓄積中毒蓄積輕度蓄積化學(xué)物蓄積作用分級(jí)第9頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天1固定劑量法實(shí)驗(yàn)組20只（♀♂各半）先測(cè)得LD50對(duì)照組20只（♀♂各半）每天給予1/10個(gè)LD50N天10只死亡總量為：N個(gè)LD50K=N當(dāng)N＞50時(shí)，死亡不足10只，停止試驗(yàn)，該毒物評(píng)價(jià)為輕度蓄積第10頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天1遞增劑量法先測(cè)得LD50染毒期限1～45～89～1213～1617～2021～2425～28每日染毒劑量（LD50）0.10.150.220.340.500.751.12每4d染毒總劑量（LD50）0.40.600.901.362.003.004.48累計(jì)染毒總劑量（LD50）0.41.001.903.265.268.2612.74定期遞增染毒劑量一組動(dòng)物應(yīng)為30只，其染毒以4d為一個(gè)周期，在同一周期中，每天劑量相同，下一周期為上一周期劑量的1.5倍，第一周期為0.1LD50，直至半數(shù)死亡，計(jì)算總劑量即為L(zhǎng)D50(n)。如果到28d，死亡動(dòng)物任未足半數(shù)，可停止試驗(yàn)此時(shí)的K=12.8，可認(rèn)為無(wú)蓄積性?？梢杂糜诨瘖y品、消毒劑的評(píng)價(jià)。第11頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天第一天第二天第三天第四天第五天第六天第七天第八天第九天第十天第十一天第十二天第十三天第十四天第十五天第十六天一次劑量0.10.10.10.10.150.150.150.150.2250.2250.225周期劑量0.40.15×4=0.60.225×3=0.675總劑量0.40.4+0.6=1.01.0+0.675=1.675×1.5×1.5評(píng)價(jià)=K=LD50（n）LD50（1）1.675LD50LD50=1.675第12頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、20d蓄積實(shí)驗(yàn)法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為五組：即1/2LD50、1/5LD50、1/10LD50、1/20LD50和對(duì)照組，分別染毒，每天一次，共20天。評(píng)價(jià)停止給予毒物7d后，各劑量組均無(wú)死亡蓄積不明顯或者未見(jiàn)蓄積僅高劑量組（1/2LD50）有死亡，其他組無(wú)死亡弱蓄積性若低劑量組（1/20LD50）無(wú)死亡，但其他劑量組有死亡，并呈劑量-反應(yīng)關(guān)系。中等蓄積性若低劑量組（1/20LD50）出現(xiàn)死亡，并各劑量組呈劑量-反應(yīng)關(guān)系。強(qiáng)蓄積性第13頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、耐受性檢測(cè)使用蓄積系數(shù)法，當(dāng)總劑量超過(guò)5個(gè)LD50時(shí)，死亡仍不足半數(shù)，這種情況除了說(shuō)明蓄積性極低外，同時(shí)也提示耐受性可能已經(jīng)產(chǎn)生。為證實(shí)其耐受性的存在，往往此時(shí)對(duì)存活動(dòng)物給予打擊劑量，一般為1個(gè)LD50，若動(dòng)物死亡仍少于半數(shù)，則認(rèn)為已出現(xiàn)耐受性。打擊劑量高于3個(gè)LD50，若動(dòng)物死亡仍少于半數(shù)，則認(rèn)為耐受性較高。第14頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、蓄積性與耐受性評(píng)價(jià)中存在的問(wèn)題一次染毒，動(dòng)物死亡的原因往往是中樞神經(jīng)受抑制，而在亞慢性和慢性作用時(shí)，毒物往往以其它器官為靶部位，且對(duì)靶器官的損害不易達(dá)到引起死亡那么嚴(yán)重因此，LD50對(duì)某些化學(xué)物的評(píng)價(jià)不是一個(gè)良好的指標(biāo)，遠(yuǎn)不如以肝損害觀(guān)察到的ED50那樣恰如其分。這樣以ED50(n)/ED50(1)的比值來(lái)測(cè)定蓄積系數(shù)，是否解決此問(wèn)題，應(yīng)當(dāng)附加一個(gè)先決條件，即在急性非致死試驗(yàn)中，其主要靶器官應(yīng)當(dāng)與亞慢性試驗(yàn)一致。因?yàn)闄C(jī)體對(duì)一次染毒和多次反復(fù)染毒（非死亡）的主要靶器官有可能不同。第15頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天Thankyou!第16頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天ContentAddyourtitlewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperienceAddyourtitlewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第17頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天ContextAddyourtitlewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第18頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天Contentwelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第19頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天Contentwelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第20頁(yè),共23頁(yè)，2024年2月25日，星期天Content231welcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplat