人感染H7N9禽流感

實驗室采樣與檢測技術(shù)1ppt課件.H7N9禽流感病毒介紹2ppt課件.病原學(xué)特征禽流感病毒屬正粘病毒科流感病毒按照病毒核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（MP）的差異可以分成甲、乙、丙型流感病毒甲型流感根據(jù)病毒血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)的差異可以分成不同的亞型，目前可分為16個H亞型（H1～H16）和9個N亞型（N1～N9）。禽甲型流感病毒除感染禽外，還可感染人、豬、馬、水貂和海洋哺乳動物?？筛腥救说那萘鞲胁《緛喰蜑镠5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3，此次報道的為H7N9禽流感病毒。該病毒為新型重配病毒，其內(nèi)部基因來自于H9N2禽流感病毒。3ppt課件.病原學(xué)特征病毒基因組結(jié)構(gòu)甲、乙型病毒分為8節(jié)段丙型病毒分為7個節(jié)段（缺少編碼NA的節(jié)段）單鏈、負鏈RNA單純的病毒RNA不具感染性4ppt課件.PB2PB1HANPNAMPNSPA6個內(nèi)部片段來源于H9N2最新的研究表明，該病毒可能是H7N3（鴨）H7N9（野禽）H9N2中國科學(xué)院研究顯示，H7N9禽流感病毒基因來自于東亞地區(qū)野鳥和中國上海、浙江、江蘇雞群的基因重配。病毒基因組特征5ppt課件.理化特征禽流感病毒普遍對熱敏感，對低溫抵抗力較強，65℃加熱30分鐘或煮沸（100℃）2分鐘以上可滅活。病毒在較低溫度糞便中可存活1周，在4℃水中可存活1個月，對酸性環(huán)境有一定抵抗力，在pH4.0的條件下也具有一定的存活能力。在有甘油存在的情況下可保持活力1年以上。6ppt課件.人感染H7N9禽流感病毒標本采集運輸及實驗室檢測7ppt課件.臨床樣本的選擇采樣對象：不明原因肺炎、人禽流感待查病例

最佳采集時間：發(fā)病后3天內(nèi)，一般不超過7天要有醫(yī)院專家組的會診記錄8ppt課件.病例定義不明原因肺炎病例應(yīng)同時具備以下4條，不能明確診斷為其它疾病的肺炎病例：發(fā)熱（腋溫≥38℃）；具有肺炎的影像學(xué)特征；發(fā)病早期白細胞總數(shù)降低或正常、淋巴細胞分類計數(shù)減少；經(jīng)規(guī)范抗菌藥物治療3－5天監(jiān)測病例（同時具備以下4項）：發(fā)熱(腋下體溫≥38℃)具有肺炎的影像學(xué)特征發(fā)病早期白細胞總數(shù)降低或正常,或淋巴細胞分類計數(shù)減少不能從臨床或?qū)嶒炇医嵌仍\斷為常見病原所致肺炎

9ppt課件.病例定義疑似病例：符合臨床癥狀及血常規(guī)/生化及胸部影像學(xué)特征甲型流感病毒通用引物陽性并排除季節(jié)性流感可以有流行病學(xué)接觸史確診病例：符合疑似病例診斷標準呼吸道標本中分離出H7N9禽流感病毒呼吸道標本中H7N9禽流感病毒核酸檢測陽性動態(tài)檢測雙份血清H7N9禽流感病毒特異性抗體水平呈4倍或以上升高10ppt課件.標本類型上呼吸道標本咽拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液等下呼吸道標本氣管吸取物、肺洗液、肺組織標本等血清標本急性期血清：發(fā)病7天內(nèi)，盡量采集恢復(fù)期血清：間隔2-4周的尸檢組織標本肺組織、氣管、支氣管組織等11ppt課件.采樣液要求常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細胞有毒性），PH7.4-7.6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液或不加抗菌素的生理鹽水（漱口液）。為防止采樣液生長細菌和真菌，在采樣液中需加入抗菌素，加入慶大霉素（終濃度0.1mg/ml可高至0.5mg/ml）、抗真菌藥物（終濃度2ug/ml）。加入抗菌素以后重新調(diào)節(jié)pH值為7.4，配制好的采樣液，分裝每個采樣管3-4ml，-20℃凍存。慶大霉素:80mg（８萬單位）／2ml12ppt課件.Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基13ppt課件.咽拭子

用滅菌棉簽（最好用塑料柄、尼龍拭子，因為木頭柄棉拭子會抑制PCR實驗）擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去14ppt課件.15ppt課件.采咽拭子的器材和容器16ppt課件.17ppt課件.標本采集要求同時采集呼吸道標本：3~4ml血清標本：1~2ml盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標本特別是下呼吸道標本填寫標本采集登記表務(wù)必填寫清楚，不要缺漏項目復(fù)印一份交收樣單位，簽字蓋章18ppt課件.19ppt課件.20ppt課件.標本送檢送檢單位縣級疾控中心/臨床醫(yī)院送檢時限在24小時內(nèi)送達接受單位流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室（設(shè)區(qū)市疾控中心）21ppt課件.標本的運送要求新鮮的臨床采集標本應(yīng)在4℃條件下24小時內(nèi)運送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室;未能24小時內(nèi)送至實驗室的，應(yīng)置-70℃或以下保存

凍存的臨床采集標本應(yīng)在凍存的條件下，低溫送至實驗室22ppt課件.生物安全23ppt課件.傳播風(fēng)險及管理病毒特征分析表明存在人間傳染的風(fēng)險暫時按“高致病性禽流感病毒”類型管理參考《人間傳染的病原微生物名錄》需重點考慮生物安全標本采集標本運輸實驗室活動24ppt課件.標本采集和運輸標本采集重點做好采樣人員的個人防護必須佩帶N95口罩、防護服、手套等防護用品采樣后器材高壓消毒標本運輸經(jīng)過行政審批包裝臨床樣品：B類，UN3373包裝病毒分離物：A類，UN2814包裝專人專車運輸并注意防護25ppt課件.感染性物質(zhì)包裝分類航空運輸B類包裝（UN號337326ppt課件.A類、B類包裝的區(qū)別

A類包裝

B類包裝定義對人或動物致死或永久致殘不符合列入A類標準的感染性物質(zhì)運輸專用名稱感染性物質(zhì)，可感染人的診斷標本或臨床標本或生命物質(zhì)B類UN編號UN2814UN3373運輸對象《名錄》中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物及其樣本；第三類中包裝分類為A類的病原微生物《名錄》中規(guī)定的第三類、第四類病原微生物及其樣本

UN專用標記需要不需要主容器防水，防穿刺，防泄漏防破損、防泄漏次級容器防水，防穿刺，防泄漏防破損、防泄漏外包裝最小邊長≥100mm至少有一個表面≥100mm×100mm危險品申報單需要不需要標識UN3373客機單包裝主容器最大運輸量液體50mL，固體50g液體1L，固體4kg27ppt課件.檢測活動標本分裝、滅活和核酸提取BSL-2+生物安全柜核酸擴增BSL-2病毒培養(yǎng)BSL-3：細胞及雞胚的接種ABSL-3：動物感染實驗活動需要行政審批、報備個人防護BSL-2：N95口罩、眼鏡、防護服等BSL-3：按相關(guān)要求28ppt課件.病原學(xué)檢測核酸檢測Real-timeRT-PCR病毒分