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尿素被加熱,則兩分子尿素放出一分子氨而形成雙縮脲。雙縮脲在堿性環(huán)境中,能與硫酸銅結(jié)合成紫色化合物,此反應(yīng)稱(chēng)為雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度第1頁(yè)蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵與縮脲結(jié)構(gòu)相同,故也能進(jìn)行此反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)可作為蛋白質(zhì)定量測(cè)定依據(jù)。雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度第2頁(yè)二、試驗(yàn)儀器
1、
試管 2、
吸管 3、
7200分光光度計(jì)雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度第3頁(yè)三、試驗(yàn)試劑1、2mg/ml牛血清白蛋白液:將1g牛血清白蛋白溶于0.9%NaCl溶液并稀釋至1000ml.2、雙縮脲試劑:將1.75gCuSO4.5H2O溶于約150ml蒸餾水,然后置于1000ml容量瓶中,加入300ml濃氨水、300ml冰涼蒸餾水和200ml飽和氫氧化鈉溶液,搖勻,室溫放置2小時(shí),再加蒸餾水至刻度,搖勻備用。雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度第4頁(yè)
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