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微生物生長(zhǎng)GrowthofMicrobes微生物在適宜的環(huán)境條件下,不斷地吸收周圍環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并按照自己的代謝方式進(jìn)行代謝活動(dòng),如果同化作用大于異化作用,則細(xì)胞的原生質(zhì)量不斷增加,體積得以增大,這就是生長(zhǎng)。
生長(zhǎng)就是有機(jī)體的細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加。
多細(xì)胞微生物的生長(zhǎng):(霉菌)(1)細(xì)胞的不斷延長(zhǎng);(2)細(xì)胞數(shù)目的增加;通過(guò)形成無(wú)性孢子使個(gè)體數(shù)目增加叫繁殖。單細(xì)胞微生物:(細(xì)菌和酵母菌)
生長(zhǎng)(Growth)表現(xiàn)為原生質(zhì)與細(xì)胞結(jié)構(gòu)在量上的增長(zhǎng)。如果一個(gè)細(xì)胞分裂成二個(gè),即細(xì)胞數(shù)目的增加,就叫繁殖(Reproduction)
由生長(zhǎng)到繁殖的過(guò)程(量變到質(zhì)變的過(guò)程)就叫發(fā)育(Development)。
如果把微生物的整個(gè)培養(yǎng)系統(tǒng)作為一個(gè)整體來(lái)考慮,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的培養(yǎng)后,細(xì)胞的總原生質(zhì)量及總體積也不斷地增長(zhǎng),我們把整個(gè)系統(tǒng)中微生物總原生質(zhì)量及總體積的增長(zhǎng)叫做群體增長(zhǎng)。微生物通過(guò)分裂使(個(gè)體)數(shù)目和質(zhì)量增加的過(guò)程稱為群體增長(zhǎng)(populationgrowth)。本章主要介紹微生物的個(gè)體生長(zhǎng)微生物的群體生長(zhǎng)環(huán)境因子對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響。第一節(jié)微生物的個(gè)體生長(zhǎng)
IndividualGrowthofMicroorganisms
同步化方法(synchronousmethod)單細(xì)胞微生物的個(gè)體生長(zhǎng)多細(xì)胞微生物的個(gè)體生長(zhǎng)一、同步化細(xì)胞的取得1.
同步細(xì)胞(synchronouscells):同步分裂或同步生長(zhǎng)2.同步培養(yǎng)技術(shù)(synchronousculturetechnique):不得引起形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理生化特性的改變1)
選擇法:同步細(xì)胞的體積大致相等
A、過(guò)濾法
B、離心法
C、硝酸纖維濾膜法2)
誘導(dǎo)法:用生理學(xué)手段強(qiáng)制同步
A、化學(xué)誘導(dǎo):饑餓---臨分裂—加營(yíng)養(yǎng)---同步細(xì)胞
B、物理誘導(dǎo):物理環(huán)境----臨分裂---恢復(fù)—同步細(xì)胞。同步化細(xì)胞只能維持2-3個(gè)世代
二、單細(xì)胞微生物的個(gè)體生長(zhǎng)細(xì)胞壁細(xì)胞膜原生質(zhì)
DNA的生長(zhǎng)與合成三、多細(xì)胞微生物的個(gè)體生長(zhǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)(伸長(zhǎng))細(xì)胞數(shù)目的增加。第二節(jié)
微生物的群體生長(zhǎng)
PopulationGrowthofMicroorganisms研究方法-----純培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室條件下從一個(gè)細(xì)胞或一種細(xì)胞群繁殖得到的后代稱為純培養(yǎng)(pureculture)。一、純培養(yǎng)的分離方法1.dilutesample1ml9ml10-1
10-210-310-410-510-610-7cellno/ml2.plateout0.1ml(一)稀釋法(serialdilation)ViablecellcountInoculatinganagarplatetoobtainsinglecolonies(二)平皿劃線分離(Streakplate)(三)
單細(xì)胞挑取法
(Pickingupsinglecell)用顯微挑取器:樣品懸液------稀釋------置于濕室內(nèi)-----顯微鏡下觀察到單個(gè)細(xì)胞-----用顯微挑取器的毛細(xì)管吸取單細(xì)胞-----培養(yǎng)基上培養(yǎng)-----純培養(yǎng)。二群體生長(zhǎng)的測(cè)定微生物通過(guò)分裂使群體數(shù)目和質(zhì)量增加的過(guò)程。群體生長(zhǎng)的測(cè)定可分為(一)
數(shù)量法:生長(zhǎng)量與微生物個(gè)體數(shù)目成正比,即微生物的數(shù)目代表了生長(zhǎng)量
(二)重量法1、
顯微鏡直接計(jì)數(shù)法優(yōu)點(diǎn):快速、簡(jiǎn)便缺點(diǎn):無(wú)法分清死活細(xì)胞(全菌計(jì)數(shù)法),精確度差。此方法只適用于單細(xì)胞,非絲狀微生物的計(jì)數(shù)。2、
平板計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)優(yōu)點(diǎn):計(jì)數(shù)的為活菌,精確度較高。缺點(diǎn):煩瑣、費(fèi)時(shí)。只能測(cè)定單細(xì)胞,單孢子對(duì)濃度低的樣品可先用濾膜培養(yǎng)法3、
比濁法優(yōu)點(diǎn):快速、簡(jiǎn)便缺點(diǎn):全菌、誤差大。適用;濃度較高,無(wú)其他雜菌的微生物培養(yǎng)液。
應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)原理來(lái)計(jì)數(shù)4、液體稀釋法(MPN)
Mostprobablynumbermethod9管法(3個(gè)重復(fù)15管法(5個(gè)重復(fù))10-210-310-4(二)
重量法1、
稱重法:培養(yǎng)液-----過(guò)濾(或離心)-----洗滌去雜質(zhì)---稱濕重或干重。2、
測(cè)定總含氮量用凱氏定氮法測(cè)定含氮百分率蛋白質(zhì)含量=含氮量%*6.253、
測(cè)定DNA含量DNA能與一定的試劑(如DAPA,4,6-二聯(lián)脒-2-吲哚苯;或溴化乙錠)發(fā)生熒光反應(yīng),熒光強(qiáng)弱與DNA含量成正比,可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出DNA含量(每個(gè)細(xì)菌的DNA平均含量為8.4*10-5納克)。4、
測(cè)定其他生理指標(biāo)的含量如氧氣的吸收量,CO2的產(chǎn)生量,發(fā)酵糖后的產(chǎn)酸量來(lái)推知細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。對(duì)于絲狀微生物,一般是測(cè)定菌絲的長(zhǎng)度或稱取菌絲的重量作為生長(zhǎng)指標(biāo)三、分批培養(yǎng)時(shí)細(xì)菌純培養(yǎng)的
群體生長(zhǎng)規(guī)律以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以(活)菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)作圖,可以得到一個(gè)曲線----單細(xì)胞微生物的繁殖曲線,或單細(xì)胞微生物群體生長(zhǎng)曲線(GrowthCurve)。根據(jù)細(xì)菌在不同時(shí)期的生長(zhǎng)速率不同,可將曲線大致分為四個(gè)階段。將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中,經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)繁殖,最后一次收獲,這種培養(yǎng)方式稱為分批培養(yǎng)(Batchculture)生長(zhǎng)曲線描述細(xì)菌生長(zhǎng)規(guī)律總菌數(shù)活菌數(shù)培養(yǎng)時(shí)間Ⅱ.指數(shù)期Ⅲ.穩(wěn)定期Ⅳ.衰亡期Ⅰ.延滯期細(xì)菌數(shù)目(個(gè)/ml)對(duì)數(shù)ⅡⅢⅣⅠ培養(yǎng)時(shí)間(一)
延遲期(LagPhase)1、
出現(xiàn)原因:適應(yīng)新的環(huán)境。調(diào)整代謝,重新合成必需量的酶、輔酶或某些中間代謝產(chǎn)物。2、
特點(diǎn):(1)生長(zhǎng)速率=~0,但細(xì)胞體積增大。如巨大芽孢桿菌:0小時(shí):3.4微米;3.5小時(shí):9.1微米;5.5小時(shí),19.8微米。(2)代謝旺盛,容易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶;(3)對(duì)外界理化因子敏感,對(duì)不良條件抵抗力差。3、
影響對(duì)工業(yè)生產(chǎn)不利,使生產(chǎn)周期延長(zhǎng),設(shè)備利用率下降。4、
縮短延遲期的措施(1)增大接種量(2)用對(duì)數(shù)期菌種接種(3)選用繁殖快的菌種(4)在種子培養(yǎng)基中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些成分.(二)
對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(LogPhase)1、
出現(xiàn)原因:(1)
菌體已經(jīng)完成了適應(yīng)過(guò)程(2)
培養(yǎng)基內(nèi)的養(yǎng)料還很豐富(3)
有害代謝產(chǎn)物尚未積累(4)
培養(yǎng)條件比較適宜2、
特點(diǎn)(1)
繁殖最快,菌體以幾何級(jí)數(shù)增加;(2)
菌體健壯,代謝活躍,形態(tài)整齊,活性一致;(3)細(xì)菌數(shù)目的增加與菌液濁度成正比。世代時(shí)間g=t/n=(t1-tO)*lg2/(lgNt-lgNO)生長(zhǎng)速率(growthrate),即每小時(shí)分裂代數(shù)=1/g3、
應(yīng)用(1)發(fā)酵生產(chǎn)的良好種子(2)研究基本代謝的良好材料(3)微生物育種的好材料(三)
穩(wěn)定期(StationaryPhase)1、
出現(xiàn)原因:(1)
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗(2)
有害代謝產(chǎn)物的積累(3)
環(huán)境條件的變化2、
特點(diǎn)(1)新增細(xì)胞數(shù)=~死亡的細(xì)胞數(shù),生長(zhǎng)速度=~0(2)活細(xì)胞總數(shù)達(dá)最高,菌體產(chǎn)量達(dá)最高點(diǎn)。(3)儲(chǔ)藏物或代謝產(chǎn)物大量積累。生長(zhǎng)產(chǎn)量常數(shù)Y(生長(zhǎng)得率growthyield)
Y=(X-X0)/(C0-C)X:穩(wěn)定期的細(xì)胞干重
X0:剛接種時(shí)的細(xì)胞干重
C0:限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)初濃度
C:限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)終濃度3、
應(yīng)用(1)
是收獲菌體的好時(shí)機(jī)(2)
工業(yè)生產(chǎn)上收獲產(chǎn)物的高峰期(四)
衰亡期DeathPhase1、
出現(xiàn)原因營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)一步消耗,有害代謝產(chǎn)物進(jìn)一步積累,環(huán)境更加不利。2、
特點(diǎn)(1)
死亡速率>生長(zhǎng)速率,活菌數(shù)下降;(2)
細(xì)胞大小、形態(tài)不一,有時(shí)產(chǎn)生畸形,有時(shí)G+變成G-反應(yīng)3、
應(yīng)用由于芽孢與孢子多在此期形成,所以多用此期的前期菌體或孢子作為菌種保藏;活菌數(shù)培養(yǎng)時(shí)間Ⅰ.延滯期培養(yǎng)時(shí)間Ⅱ.指數(shù)期Ⅲ.穩(wěn)定期Ⅳ.衰亡期細(xì)菌數(shù)目(個(gè)/ml)對(duì)數(shù)流加新鮮培養(yǎng)基活菌數(shù)保持恒定排出代謝物四、連續(xù)培養(yǎng)
ContinuousCulture
不斷流加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并以同樣速度排出培養(yǎng)物,使對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期長(zhǎng)期保持連續(xù)培養(yǎng)就是在培養(yǎng)液中不斷流加新鮮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并及時(shí)不斷地以同樣速度排出培養(yǎng)物(包括菌體及代謝產(chǎn)物),使微生物一直以對(duì)數(shù)生長(zhǎng)速度生長(zhǎng)的培養(yǎng)方法。連續(xù)培養(yǎng)方法一般分為兩大類:恒濁連續(xù)培養(yǎng)恒化連續(xù)培養(yǎng)(一)
恒濁連續(xù)培養(yǎng)---恒濁器
(Turbidostat)不斷調(diào)節(jié)流速,使培養(yǎng)液的濁度保持恒定.如果所有必需營(yíng)養(yǎng)物都過(guò)量,就可使菌體維持最高生長(zhǎng)速率。常用此法來(lái)得到大量菌體及與之相平行的代謝產(chǎn)物。(二)
恒化連續(xù)培養(yǎng)---恒化器
(Chemostat)控制恒定流速,使耗去的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到補(bǔ)充,培養(yǎng)室中營(yíng)養(yǎng)物濃度保持恒定,從而使生長(zhǎng)速度恒定。又稱恒組成培養(yǎng)。一般將某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作為限制性因子,細(xì)菌的生長(zhǎng)速率取決于限制性因子的量。用不同濃度的限制性營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)行恒化連續(xù)培養(yǎng),可以得到不同生長(zhǎng)速率的培養(yǎng)物。多用于微生物學(xué)的研究。連續(xù)培養(yǎng)(continuousculture)(openculture)缺點(diǎn):菌種易退化;易染雜菌連續(xù)培養(yǎng)法用到工業(yè)發(fā)酵中就稱連續(xù)發(fā)酵(Continuousfermentation)優(yōu)點(diǎn):(1)縮短發(fā)酵周期,提高設(shè)備利用率(2)便于自動(dòng)控制,降低勞動(dòng)力及動(dòng)力消耗(3)產(chǎn)品較均一缺點(diǎn):易污染,菌種易退化。發(fā)酵:有氧發(fā)酵,無(wú)氧發(fā)酵發(fā)酵:固態(tài)發(fā)酵、液態(tài)發(fā)酵發(fā)酵:細(xì)菌發(fā)酵、放線菌發(fā)酵、酵母菌發(fā)酵、霉菌發(fā)酵發(fā)酵工程發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)(技能訓(xùn)練)暑假選修課(短學(xué)期)07188110第三節(jié)
微生物生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)和控制微生物生長(zhǎng)與環(huán)境有著密切的聯(lián)系環(huán)境對(duì)微生物的影響大致可分為三種情況1、
適宜的環(huán)境:2、
不適宜的環(huán)境(1)抑制微生物的生長(zhǎng)發(fā)育(2)改變微生物原有的特性3、
惡劣的環(huán)境:適宜的環(huán)境
不適宜的環(huán)境惡劣的環(huán)境得到微生物菌體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)防腐保藏菌種抑制微生物的生長(zhǎng)發(fā)育誘變育種改變微生物原有的特性使微生物死亡滅菌消毒是一種防止或抑制微生物生長(zhǎng)的方法。即利用某些理化因子使微生物暫時(shí)處于不生長(zhǎng)、不繁殖但又未完全死亡的狀態(tài)。是一種防止食品腐敗和其他物質(zhì)霉變的技術(shù)措施。如低溫、干燥、鹽腌、糖漬等(保鮮,防霉)殺滅物體上所有微生物的方法。通過(guò)滅菌后,物品上不存在任何有生命的有機(jī)體。3、滅菌(Sterilization)殺滅物體上病原微生物的方法??蛇_(dá)到防止傳染病傳染的目的。如巴斯德消毒、煮沸消毒等。2、消毒(Disinfection)1、防腐
(Asepsis)在研究理化因子與微生物的關(guān)系時(shí),還應(yīng)注意:(1)不同微生物對(duì)各種理化因子的敏感性不同(2)同一理化因子的不同劑量對(duì)微生物的效應(yīng)不同(3)微生物的生理狀態(tài)會(huì)影響理化因子的作用最適生長(zhǎng)溫度:指微生物生長(zhǎng)繁殖最快的溫度;最低生長(zhǎng)溫度:指微生物能進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的最低溫度,低于此溫度,停止生長(zhǎng);最高生長(zhǎng)溫度:指微生物能進(jìn)行繁殖的最高溫度,高于此溫度,細(xì)胞死亡;一、溫度(Temperature)在溫度低于最適生長(zhǎng)溫度時(shí),隨著溫度的上升,細(xì)胞生化反應(yīng)速率和生長(zhǎng)速率加快。當(dāng)溫度升高到一定值時(shí),蛋白質(zhì)、核酸遭到破壞。根據(jù)對(duì)溫度需求的不同,把微生物分為三大類型:(一)
低溫對(duì)微生物的影響1、
低溫對(duì)低溫型微生物的影響很小:
(1)細(xì)胞內(nèi)的酶在低溫下仍能有效地發(fā)揮作用(2)細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸的含量高,在低溫下仍能保持半流動(dòng)性。2、低溫可抑制中、高溫型微生物的生長(zhǎng)繁殖,使微生物處于休眠狀態(tài)3、
低于冰點(diǎn)的溫度對(duì)微生物有致死作用(1)冰晶破壞了原生質(zhì)膠體狀態(tài),細(xì)胞脫水(2)冰晶造成細(xì)胞,尤其膜的物理?yè)p傷。防止方法(1)快速冷凍:水凍成均勻的玻璃狀或是透明不定形的物質(zhì)(2)加入保護(hù)劑,如甘油、血清、牛奶等。4、
應(yīng)用食品冷藏菌種保藏(二)高溫對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響1、
高溫對(duì)高溫型微生物的生長(zhǎng)影響很?。?)
酶和蛋白質(zhì)的抗熱性強(qiáng);(2)飽和脂肪酸含量高,直鏈脂肪酸多,保持半流動(dòng)性;(3)
核糖體對(duì)高溫有較大的抗性;(4)
核酸中G+C比例高;(5)能產(chǎn)生多胺、熱亞胺和高溫精胺等保護(hù)分子;(6)生長(zhǎng)速率快,合成迅速,以彌補(bǔ)破壞的大分子。2、高于最高生長(zhǎng)溫度的高溫能殺死微生物
(1)原生質(zhì)膠體狀態(tài)破壞,膜被熱溶解,半流動(dòng)性喪失(2)酶失活,蛋白質(zhì)、核酸產(chǎn)生不可逆變性3、
對(duì)高溫的利用高溫能殺死微生物,廣泛應(yīng)用于消毒滅菌:(1)干熱滅菌(2)濕熱滅菌
在一定溫度和其他條件下,殺死微生物所需的最短時(shí)間稱為致死時(shí)間;在一定時(shí)間和其他條件下,殺死微生物的最低溫度稱為致死溫度。(1)
干熱滅菌A、焚燒滅菌法:滅菌徹底、迅速、簡(jiǎn)便,使用范圍有限,常用于接種工具、污染物品等處理;B、干熱滅菌法:可保持物品的干燥。適用范圍:玻璃器皿、金屬用具等耐熱物品。(2)
濕熱滅菌蒸汽的穿透力大;蛋白質(zhì)在含水的情況下更容易凝固;蒸汽有潛熱(汽化熱)存在,提高滅菌物體的溫度。常用的濕熱滅菌方法
A、高壓蒸汽滅菌法
B、間隙滅菌法
C、煮沸消毒法
D、巴氏消毒法:62-63℃30分鐘或71-72℃15分鐘。殺死病原菌,又不損害營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味。結(jié)核桿菌的致死溫度為62℃15分鐘。(三)適溫對(duì)微生物的影響有許多微生物的最適生長(zhǎng)溫度與產(chǎn)物形成的最適溫度是不同的。所以,發(fā)酵前期控制溫度使其生長(zhǎng),后期控制在形成產(chǎn)物的最適溫度。如青霉素發(fā)酵:接種后30℃5小時(shí)至25℃35小時(shí)85小時(shí)至25℃至20℃40小時(shí)有利菌絲生長(zhǎng)使發(fā)酵速度加快青霉素大量合成營(yíng)養(yǎng)物完全利用青霉素發(fā)酵工藝:二、干燥(Drying)或水活度(aw)作用:抑制微生物的生長(zhǎng),嚴(yán)重時(shí)使微生物死亡。機(jī)理:影響酶的活性,使代謝不能正常進(jìn)行,細(xì)胞處于失水狀態(tài);嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞脫水、蛋白質(zhì)變性。用途:
(1)可抑制或致死微生物-----保存食品
(2)休眠孢子抗干燥能力強(qiáng)--可用于菌種保藏。微生物類群aw一般細(xì)菌0.91酵母菌0.88霉菌0.80嗜鹽細(xì)菌0.76嗜鹽真菌0.65嗜高滲酵母0.60水—幾類微生物生長(zhǎng)的最適aw三、滲透壓(Osmolarity)是溶劑透過(guò)半透膜時(shí)的壓力細(xì)胞只能在一定的滲透壓范圍內(nèi)生活。高滲下:細(xì)胞失水,質(zhì)壁分離;抑菌,甚至死亡;低滲下:細(xì)胞膨脹,甚至破裂死亡。用途:(1)
高糖、高鹽保存食品(2)
低滲使細(xì)胞破裂----細(xì)胞膜、細(xì)胞器制備;耐高滲的菌種能進(jìn)行高糖發(fā)酵。四、氫離子濃度(pH)1、
氫離子濃度對(duì)微生物的影響(1)
影響微生物生長(zhǎng):最適生長(zhǎng)pH。生長(zhǎng)能改變pH,培養(yǎng)基中要加緩沖物質(zhì);(2)
影響代謝產(chǎn)物合成培養(yǎng)基的pH不同,可積累不同的代謝產(chǎn)物。如酵母菌pH4.5時(shí)為乙醇發(fā)酵,pH?8時(shí)產(chǎn)生乙醇、甘油。(3)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿可殺菌。腐蝕性大,一般不作消毒劑。某些酸可防腐、防霉。如苯甲酸可作防腐劑,丙酸可防霉,乳酸可抑制腐敗性微生物的生長(zhǎng)。2、
氫離子濃度影響微生物生長(zhǎng)的機(jī)理(1)
引起膜電荷的變化,影響對(duì)營(yíng)養(yǎng)的吸收;(2)
影響代謝過(guò)程中酶的活性;
(3)改變營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的可給性及有害物質(zhì)的毒性。3、
應(yīng)用(1)
控制pH,使生長(zhǎng)最適宜;有利于代謝產(chǎn)物的形成;有利于有益微生物的生長(zhǎng),控制雜菌。(2)
殺菌,防腐(3)
保存食品(乳酸菌)五、氧氣(Oxygen)1、
根據(jù)對(duì)氧氣的需求不同,可分為(1)
專性好氧微生物:(2)
專性厭氧微生物:
(3)兼性厭氧微生物:(4)
耐氧性厭氧微生物:只有超氧化物歧化酶,而不具接觸酶,產(chǎn)生的過(guò)氧化氫通過(guò)細(xì)胞內(nèi)某些還原性物質(zhì)的氧化而解毒。
(5)微需氧微生物:在通氣和絕對(duì)厭氧下均不能生長(zhǎng),只有在氧氣濃度?0.2大氣壓時(shí)才能生長(zhǎng)。2、
氧氣的作用機(jī)理(1)
影響酶的活性(2)
影響細(xì)胞的呼吸作用3、
應(yīng)用對(duì)好氧性微生物,缺氧能抑制其生長(zhǎng),故可用于保藏菌種六、輻射(Radiation)波長(zhǎng)越長(zhǎng),所含能量越低,生物學(xué)效應(yīng)最弱。UV殺菌機(jī)理
A、
形成嘧啶二聚體,T=T,干擾核酸復(fù)制;
B、
可使O2—O3,O3—O2+[O]。
注意
A、穿透力弱,只適于空氣及表面消毒;
B、紫外照射后不能暴露于可見(jiàn)光中,因?yàn)橛泄鈴?fù)活作用。γ射線殺菌機(jī)理:
A、
直接學(xué)說(shuō)(靶子學(xué)說(shuō))認(rèn)為能量直接作用于細(xì)胞某個(gè)特殊的敏感區(qū),導(dǎo)致細(xì)胞死亡;
B、間接學(xué)說(shuō):輻射引起電離,生成的自由基使細(xì)胞中的敏感分子發(fā)生反應(yīng),使后者失活。電離輻射,穿透力強(qiáng),能致死所有微生物七、重金屬及其化合物1、
作用:某些是細(xì)胞組分,低濃度促生長(zhǎng),高濃度有毒;某些重金屬離子不管濃度大小,對(duì)生長(zhǎng)有抑制或致死作用。2、
作用機(jī)制(1)與蛋白質(zhì)結(jié)合使其變性(蛋白質(zhì)帶負(fù)電,重金屬帶正電)(2)與酶上的SH結(jié)合使酶失活3、
應(yīng)用有效的殺菌或防腐劑,如HgCl2(升汞),紅汞(汞溴紅)
1%硝酸銀滴入新生兒眼內(nèi),防止傳染性眼炎;
CuSO4與石灰配成的波爾多液能殺真菌。砷、鉍、銻等用作化學(xué)療劑治療梅毒及原生動(dòng)物引起的疾病。八、有機(jī)化合物1、
作用(1)
使蛋白質(zhì)變性(2)
破壞細(xì)胞膜的透性,使細(xì)胞內(nèi)含物外溢;2、
機(jī)理(1)
破壞了蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)中的氫鍵、疏水鍵等,如甲醛能與-NH2結(jié)合;(2)有的有機(jī)化合物具有表面活性劑的作用,破壞膜的透性(有機(jī)溶劑)3、
應(yīng)用(1)
是常用的消毒劑:0.5%的酚(石炭酸)為防腐劑,
2-5%的酚為消毒劑;
70%乙醇(酒精棉)消毒皮膚,
10%的甲醛消毒廠房、無(wú)菌室等(每立方米用10mL福爾馬林);(2)
酚系數(shù)是評(píng)價(jià)消毒劑殺菌能力的標(biāo)志:將某一消毒劑作不同梯度的稀釋,在一定時(shí)間內(nèi)(10分鐘),一定條件下致死全部供試微生物的最高稀釋度與達(dá)到同樣效果的酚的最高稀釋度的比值,即為酚系數(shù)。酚系數(shù)越大,表明該消毒劑的殺菌能力越強(qiáng)。消毒劑殺菌能力的測(cè)定待測(cè)消毒劑的酚系數(shù)=100/1000=0.1九、氧化劑1、
作用:使蛋白質(zhì)變性,酶失活----抑菌殺菌作用;2、
機(jī)理:產(chǎn)生自由基;使蛋白質(zhì)中的-SH氧化成-S-S-;3、
應(yīng)用:
0.1-1%的KMnO4消毒皮膚;
3%H2O2(雙氧水)消毒感染的傷口;過(guò)氧乙酸對(duì)肝炎病毒有特效;碘酒是皮膚及小傷口的有效消毒劑;
0.2-0.5ppm的Cl2消毒自來(lái)水和游泳池;
5-20%的次氯酸鈣(漂白粉)常用作餐具的消毒。十、染料1、
作用:低濃度抑菌,高濃度殺菌2、
機(jī)理:與蛋白質(zhì)進(jìn)行離子交換,使蛋白質(zhì)失去活性,所以堿性染料效果好。3、
應(yīng)用:如龍膽紫(紫藥水),2-4%作外用藥水。第四節(jié)
化學(xué)療劑與微生物的生長(zhǎng)一、化學(xué)療劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響二、微生物對(duì)化學(xué)療劑的適應(yīng)一、化學(xué)療劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響化學(xué)療劑(ChemotherapeuticAgents):能直接干擾病原微生物的生長(zhǎng)繁殖,并可用于治療感染性疾病的化學(xué)藥劑抗代謝物抗生素(一)
抗代謝物
(Anti-metabolite)結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似,能和特定的酶結(jié)合,從而阻礙酶的功能,干擾代謝正常進(jìn)行的物質(zhì)。即能與正常代謝物產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用的物質(zhì)。如百浪多息(prontosil)COOHH2NNH2SO2RCOOHH2NNH2SO2R磺胺藥(sulphonamides,sulfadrugs)抑菌機(jī)理
TMP:三甲基芐二氨嘧啶
(磺胺增效劑)選擇素力是氨基苯磺酰胺的衍生物,與對(duì)氨基苯甲酸很相似,能與二氫甲酸合成酶結(jié)合,從而阻斷了葉酸的合成,使氨基酸、維生素的合成缺乏了必需的輔酶,細(xì)菌細(xì)胞的活力受到明顯的破壞。而哺乳動(dòng)物必須依靠現(xiàn)成的葉酸生活,所以不影響人和動(dòng)物的代謝。二氫葉酸二氫葉酸還原酶四氫葉酸葉酸COOHH2N+二氫喋啶二氫喋啶合成酶NH2SO2R起競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用葉酸是一種重要的輔酶,用于氨基酸,維生素的合成(二)
抗生素
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