專題20現(xiàn)代生物科技專題

1.（202L6浙江月選考）采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可將增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）

基因定點(diǎn)插入到受精卵的Y染色體上，獲得轉(zhuǎn)基因雄性小鼠。該轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型雌性小

鼠交配，通過觀察熒光可確定早期胚胎的性別。下列操作錯(cuò)誤的是（）

A.基因編輯處理的受精卵在體外培養(yǎng)時(shí)，不同發(fā)育階段的胚胎需用不同成分的培養(yǎng)液

B.基因編輯處理的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至2細(xì)胞期，須將其植入同期發(fā)情小鼠的子官，才可獲

得表達(dá)EGFP的小鼠

C.分離能表達(dá)EGFP的胚胎干細(xì)胞，通過核移植等技術(shù)可獲得大量的轉(zhuǎn)基因小鼠

D.通過觀察早期胚胎的熒光，能表達(dá)EGFP的即為雄性小鼠胚胎

【答案】B

【解析】B受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至囊胚期，須將其植入同期發(fā)情小鼠的子官

2.（202L1月浙江選考）下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）

①切取組織②制備細(xì)胞懸浮液③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)

A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行

B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離

C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化

【答案】C

【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊分剪碎組織少用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞玲制成細(xì)胞

懸液好轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）垃放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)好貼滿瓶壁的細(xì)胞用能分散為

單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液）轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)））放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要無菌操作，故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯(cuò)誤；

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞，制成

細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；

C、傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，

C正確；

D、步驟④為傳代培養(yǎng)過程，該過程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型改變，D錯(cuò)誤。

故選Co

3.（2021?湖南高考真題）M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等

技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

成纖維細(xì)胞去核卵母細(xì)胞

\胚胎培養(yǎng)

早期胚胎

［胚胎移植

代孕母親

克隆動(dòng)物A

（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是,這類酶

能將特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的斷開。

（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更

換培養(yǎng)液，目的是

（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是。從

早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為（答出兩點(diǎn)即可），功能上具

有。

（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合

雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否

失活的實(shí)驗(yàn)思路。

【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）磷酸二酯鍵

（2）清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害

（3）動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其

全能性十分困難細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯（任選兩點(diǎn)作答）發(fā)育的全能性

（4）B用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩

選出雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動(dòng)物A

中已失活

【分析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插

入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③

檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)，個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病

鑒定、活性鑒定等。

2、核移植:

（1）概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組

并發(fā)育成?個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱

為克隆動(dòng)物；

（2）原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性；

（3）動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高

于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞

分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。

【詳解】

（1）基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），故在構(gòu)建含有片段F

的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）。限制性內(nèi)切核

酸內(nèi)切酶是作用于其所識(shí)別序列中兩個(gè)脫氧核甘酸之間的磷酸二酯鍵。不同的限制酶可以獲

得不同的末端，主要分為黏性末端和平末端。

（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更

換培養(yǎng)液，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（3）由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢

復(fù)其全能性十分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。胚胎

干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性，可

分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分

化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

（4）先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴

細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的

單克隆抗體：若要利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活，如果M基因已經(jīng)失活，

則克隆動(dòng)物A中無法產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，則可利用抗原一抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出雜交瘤細(xì)

胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動(dòng)物A中己失活。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖示考查基因工程、核移植、胚胎移植、單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)，涉及知識(shí)點(diǎn)較多，

但難度不大，要求考生掌握基礎(chǔ)知識(shí)，屬于考綱中識(shí)記與理解層次。

4.（2021?全國乙卷高考真題）用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符

合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切

割位點(diǎn)如圖所示.

IIII

GAATTCCCCGGGCTGCAGGATATC

CTTAAGGGGCCCGACGTCCTATAG

tttt

限制酶：EcoRISmalPstIEcoRV

回答下列問題：

（1）常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中酶切割后

的DNA片段可以用f.CO//DNA連接醐連接。上圖中酶切割后的DNA片段可以

用T4DNA連接酶連接。

（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是。

（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以

保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能;質(zhì)粒DNA分子上有,便于外源DNA

插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因（如某種抗生素抗性基因），利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒

載體的宿主細(xì)胞，方法是。

（4）表達(dá)載體含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是指。

【答案】（1）EcoRkPstlEcoRKPstl、Smal和EcoRV

（2）磷酸二酯鍵

（3）自我復(fù)制一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)用含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能

夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞

（4）位于基因首端的一段特殊DNA序列，是RNA聚合酶識(shí)別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄

過程

【分析】

基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。

【詳解】

（1）限制酶EcoRI和Pstl切割形成的是黏性末端，限制酶Smal和EcoRV切割形成的是平末

端，E.coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二

酯鍵連接起來，而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接黏性末端和平末端，但連接

效率較低。因此圖中EcoRI和Pstl切割后的DNA片段（黏性末端）可以用E.coliDNA連接酶

連接，除了這兩種限制醐切割的DNA片段，限制醐Smal和EcoRV切割后的DNA片段（平

末端）也可以用T4DNA連接酶連接。

（2）DNA連接酶將兩個(gè)DNA片段連接形成磷酸二酯鍵。

（3）質(zhì)粒是小型環(huán)狀的DNA分子，常作為基因表達(dá)的載體，首先質(zhì)粒上含有復(fù)制原點(diǎn)，能

保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中自我復(fù)制。質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶的酶切

位點(diǎn)，便于目的基因的導(dǎo)入。質(zhì)粒上的標(biāo)記基因是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，

具體做法是川含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)

胞。

（4）啟動(dòng)子是?段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合

的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得需要的蛋白質(zhì)。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操

作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

5.（2021?廣東高考真題）非細(xì)胞合成技術(shù)是一種運(yùn)用合成生物學(xué)方法，在細(xì)胞外構(gòu)建多酶

催化體系，獲得目標(biāo)產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘、表達(dá)等。中國科學(xué)家設(shè)計(jì)

了4步酶促反應(yīng)的非細(xì)胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料）,

以期解決高溫強(qiáng)酸水解方法造成的嚴(yán)重污染問題，并可以提高產(chǎn)率。

磷酸肌雷

水解酶

肌醇

回答下列問題：

（1）研究人員采用PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)前基因。此外，獲得酶基

因的方法還有。（答出兩種即可）

（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板

時(shí)必須除去蛋白，方法有。（答出兩種即可）

（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞、pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表

達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，首先應(yīng)制備細(xì)胞。為了檢測(cè)目的基因是否成功

表達(dá)出酶蛋白，需要采用的方法有。

（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一

個(gè)反應(yīng)體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導(dǎo)致的結(jié)果是。在分子水平上,

可以通過改變,從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化。

【答案】（1）基因文庫中獲取、人工合成法

（2）鹽析法、酶解法或高溫變性

（3）感受態(tài)抗原-抗體雜交技術(shù)

（4）有的醐失活而使反應(yīng)中斷基因的堿基序列

【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。簭幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插

入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③

檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病

鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）分析題意，研究人員從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因采用了PCR技術(shù)，此

外獲得酶基因的方法還有從基因文庫中獲取和人工合成法。

（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之-?在制備高質(zhì)量DNA模板

時(shí)必須除去蛋白，可根據(jù)DNA和蛋白質(zhì)的溶解性、對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性去除蛋白

質(zhì)，方法有鹽析、酶解法或高溫變性法等。

（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞、pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表

達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，首先應(yīng)制備感受態(tài)細(xì)胞，即利用鈣離子處理大腸桿菌，使

其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其易于接受外來的DNA分子。基因工程中，隨基因（目的基因）成

功表達(dá)的產(chǎn)物酶蛋白的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，常用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一

個(gè)反應(yīng)體系。由于酶的作用條件較溫和，若這些酶最適反應(yīng)條件不同，則可能導(dǎo)致有的酶失

活而使反應(yīng)中斷。在分子水平上，可以通過改變基因的堿基序列，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，

實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程、DNA的粗提取和鑒定的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生把握知識(shí)間的聯(lián)系、

理論與實(shí)際相結(jié)合解決實(shí)際問題的能力，難度中等。

6.（2021?全國甲卷高考真題）PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)。為檢測(cè)病人是否感染了

某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作：①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；

③利用PCR擴(kuò)增DNA片段；④采集病人組織樣本。回答下列問題：

（1）若要得到正確的檢測(cè)結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是（用數(shù)字序號(hào)表示）。

（2）操作③中使用的酶是,PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、

三步，其中復(fù)性的結(jié)果是o

（3）為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與特異性結(jié)合。

（4）PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方

面。

【答案】（1）④②③①

（2）hq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）延伸7dq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成

（3）兩條單鏈DNA

（4）一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)

【分析】

PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。通過這一技術(shù)，可以在短時(shí)間

內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核

甘酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。

【詳解】

（1）PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)，若要得到正確的檢測(cè)結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該

是④采集病人組織樣本玲②從病人組織樣本中提取DNA玲③利用PCR擴(kuò)增DNA片段好①分

析PCR擴(kuò)增結(jié)果。

（2）在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，DNA的復(fù)制過程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似，操作③中使

用的酶是Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶），PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三

步，其中復(fù)性的結(jié)果是Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。

（3）DNA復(fù)制需要引物，為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與兩條單鏈DNA

特異性結(jié)合。

（4）據(jù)分析可知，PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的

核酸合成技術(shù)。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。

【點(diǎn)睛】

本題考查PCR技術(shù)及應(yīng)用，難度較小，解答本題的關(guān)鍵是明確PCR技術(shù)的原理，具體反應(yīng)

過程，以及在臨床病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用。

7.（2021?河北高考真題）采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過量積累。

利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理（例如，收集植物組織器

官異地妥善儲(chǔ)存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究

者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（YCF1）基因?qū)胧茉囍参铮z測(cè)了相關(guān)指標(biāo)。

回答下列問題：

（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的

群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體稱為。

（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，所需要的兩種酶是。構(gòu)建的重

組基因表達(dá)載體中必須含有標(biāo)記基因，其作用是.

（3）進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最

多的方法是o研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系

作為實(shí)驗(yàn)材料的目的是。

（4）將長勢(shì)一致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測(cè)定植株干重

（圖1）及不同器官中Cd含量（圖2）。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對(duì)Cd具有

更強(qiáng)的（填"耐性"或"富集能力”）；據(jù)圖2可知，對(duì)轉(zhuǎn)基因植株的進(jìn)

行后續(xù)處理對(duì)于緩解土壤Cd污染最為方便有效。

（5）已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能

更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是。相較于草本植物，采用楊樹這種喬

木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢(shì)在于（寫出兩點(diǎn)即可）。

【答案】（1）基因組文庫

（2）限制酶和DNA連接酶便于目的基因的篩選和鑒定

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法避免目的基因在自然界中的擴(kuò)散

（4）耐性莖葉

（5）YCF1可通過主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水

楊樹具有發(fā)達(dá)的根系和高大的樹冠，更適應(yīng)污染礦區(qū)等不良環(huán)境，同時(shí)可充分吸收土壤中的

Cd,木材也方便運(yùn)輸、利用

【分析】

1、基因文庫包括基因組文庫和CDNA文庫，基因組文庫包含該物種的全部基因，CDNA文庫

是部分基因文庫。

2、據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株地上部分、地下部分和整株干重均增加；據(jù)圖2

可知，轉(zhuǎn)基因植株的莖、葉中Cd含量高于野生型。

【詳解】

（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的

群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體含有酵母菌的全部基因，稱為基因組文庫。

（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，需要用限制酶切割供體DNA和質(zhì)粒，以產(chǎn)

生相同的黏性末端，然后用DNA連接酶進(jìn)行連接。基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因可用于目的

基因的篩選和鑒定.

（3）農(nóng)桿菌容易侵染雙子葉植物，其質(zhì)粒中的T-DNA可轉(zhuǎn)移并插入到受體細(xì)胞DNA中，將

含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

考慮轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性,采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料，可避免目的基因在自然界中的擴(kuò)散。

（4）根據(jù)分析可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株地上部分、地下部分和整株干重均增加，說

明轉(zhuǎn)基因植株在Cd污染的土壤中生長較好，即對(duì)Cd具有更強(qiáng)的耐性：據(jù)圖2分析，轉(zhuǎn)基

因植株的莖、葉中Cd含量高于野生型，因此對(duì)轉(zhuǎn)基因植株的莖、葉進(jìn)行后續(xù)處理，可使轉(zhuǎn)

基因植株持續(xù)發(fā)揮富集Cd的作用，對(duì)于緩解土壤Cd污染最為方便有效。

（5）YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上，可通過主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，

提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水，所以轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境。

相較于草本植物，楊樹具有發(fā)達(dá)的根系和高大的樹冠，更適應(yīng)污染礦區(qū)等不良環(huán)境，同時(shí)可

充分吸收土壤中的Cd,木材也方便運(yùn)輸、利用，作為Cd污染土壤修復(fù)植物更具有優(yōu)勢(shì)。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖示考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生掌握基因工程的工具、步驟，難度適中，

意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，要求能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決生活

中的一些實(shí)際問題，或運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解釋生活中的一些現(xiàn)象。

8.（202L6浙江月選考）（15分）回答下列（二）小題：

（-）斑馬魚是一種模式動(dòng)物，體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀察，可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)，基

因功能分析以及藥物毒性與安全性評(píng)價(jià)等。

（1）由于人類活動(dòng)產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會(huì)

引起水體，導(dǎo)致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚，可用斑馬魚每周的

體重和死亡率等指標(biāo)監(jiān)測(cè)水體污染程度。

（2）為了研究某基因在斑馬魚血管發(fā)育過程中的分子調(diào)控機(jī)制，用DNA連接酶將該基因

連接到質(zhì)粒載體形成,導(dǎo)入到大腸桿菌菌株DH5a中?為了能夠連接上該目的

基因、并有利于獲得含該目的基因的DH5a陽性細(xì)胞克降，質(zhì)粒載體應(yīng)含有

____________________________________________________（答出2點(diǎn)即可）。提取質(zhì)粒后，

采用法，將該基因?qū)氲桨唏R魚受精卵細(xì)胞中，培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎血

管的發(fā)育情況。

（3）為了獲取大量斑馬魚胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用分散斑馬伍囊胚的內(nèi)細(xì)

胞團(tuán)，取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為

,以提高斑馬魚胚胎細(xì)胞克隆的形成率。

（-）（1）富營養(yǎng)化

（2）重組DNA分子限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列、抗生素抗性基因顯微注射

（3）胰蛋白酶原代飼養(yǎng)層細(xì)胞

9.（202L1月浙江高考真題）回答下列（二）小題：

（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長環(huán)境要求非?？量?，以

及生態(tài)環(huán)境的破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青己十分珍稀。

（1）為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，

利用技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。

（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物,

誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上前系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒

上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上,

T-DNA上r。/系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成

，再分化形成毛狀根.

（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭抱類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中

添加抗生素的主要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培

養(yǎng)，通過控制搖床的和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的,獲得大量毛狀根，用

于提取藥用成分。

【答案】（二）（1）遺傳間種

（2）DNA聚合酶愈傷組織

（3）繼代殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)速營養(yǎng)元素以及生長調(diào)節(jié)劑的種類和濃度

【解析】（二）（1）生物多樣性包括遺傳多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)多樣性，為保護(hù)三

葉青的遺傳多樣性和保證藥材的品質(zhì)；三葉青的林下種植，是利用間種技術(shù)。

（2）分析題意可知，從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA）,DNA復(fù)制需

要DNA聚合酶，故可知，酚類化合物誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上"系列基因表達(dá)，形成DNA

聚合前和限制性核酸內(nèi)切醐等。根據(jù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)過程可知，相應(yīng)植物激素可以促使葉

片細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，再分化形成毛狀根。

（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭抱類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加

抗生素的主要目的是殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮

培養(yǎng)，通過控制搖床的轉(zhuǎn)速和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的營養(yǎng)元素以及生長調(diào)節(jié)劑的種類和

濃度，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。

10.（2020年山東省高考生物試卷（新高考）?13）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方

的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段

在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上

而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲

得了耐鹽小麥新品種，過程如下圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

普通小麥細(xì)胞一二普通小麥原牛.質(zhì)體、③雜種培養(yǎng)雜種篩選

中間偃麥草細(xì)胞一上中間偃麥草原生質(zhì)體）一細(xì)胞"餡株"耐，皿小上

不同劑量的紫外線照射—

A.過程①需使用纖維素酶和果膠醐處理細(xì)胞

B.過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂

C.過程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段

【答案】C

【解析】

【分析】

從圖中看出①是去掉植物細(xì)胞壁，②是用紫外線誘導(dǎo)染色體變異，③融合形成雜種細(xì)胞。

【詳解】

A、過程1是獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁分解，A正確；

B、根據(jù)題干信息"將其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后

可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另?個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種

細(xì)胞中，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，"故

過程②通過紫外線照射是使中間偃麥草的染色體斷裂，B正確：

C、滅活的病毒誘導(dǎo)是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法，誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合常用物理法、化學(xué)

法，C錯(cuò)誤；

D、實(shí)驗(yàn)最終將不抗鹽的普通小麥和抗鹽的偃麥草整合形成耐鹽小麥，說明耐鹽小麥染色體

上整合了中間偃麥草的染色體片段，D正確。

故選Co

【點(diǎn)睛】

本題的難點(diǎn)是對(duì)過程②的分析，考生需要結(jié)合題干中的信息作答。

11.（2020年山東省高考生物試卷（新高考）?14）經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚,

通過胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲得具有不同遺傳特性的實(shí)驗(yàn)小鼠。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子

B.體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理

C.胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植

D.遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得

【答案】C

【解析】

【分析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括：

①對(duì)供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁

殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體

母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母

牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑根或

胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。

④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。

⑤移植后的檢查?對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。

2、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。

【詳解】

A、促性腺激素可以使雌鼠超數(shù)排卵，獲得更多的卵子，A正確；

B、精子只有獲能后才能完成受精，故體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理，B正確；

C、胚胎移植通常選擇囊胚期之前的階段，如桑根胚或囊胚階段，C錯(cuò)誤；

D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以定向改造小鼠的基因，所以遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過轉(zhuǎn)基因

等技術(shù)獲得，D正確。

故選C,

【點(diǎn)睛】

本題考查胚胎工程的基本知識(shí)，考生需要識(shí)記基本操作，D項(xiàng)中需要結(jié)合基因工程的目的進(jìn)

行解答。

12.（2020年江蘇省高考生物試卷?23）小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞、

制備流程如圖所示。下列敘述簿送的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子

B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同

C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞

D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)

【答案】ABC

【解析】

【分析】

1、胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。

2、ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài).在培養(yǎng)

液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺甘酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不

同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段。

【詳解】

A、為了獲得更多的囊胚，可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體

內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤;

B、細(xì)胞a和細(xì)胞b是由同一個(gè)受精卵經(jīng)過有絲分裂形成的，故核基因相同，B錯(cuò)誤;

C、運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞，首先必須用胰蛋白酶

處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤;

D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%C02的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液的pH,D正確。

故選ABC。

13.（2020年天津高考生物試卷?1）在克隆哺乳動(dòng)物過程中，通常作為核移植受體細(xì)胞的

是去核的（）

A.卵原細(xì)胞

B.初級(jí)卵母細(xì)胞

C.次級(jí)卵母細(xì)胞

D.卵細(xì)胞

【答案】C

【解析】

【分析】

體細(xì)胞核移植過程:

植g

【詳解】

在克隆哺乳動(dòng)物過程中，通常選擇減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，即次

級(jí)卵母細(xì)胞。

故選Co

14.閱讀下列材料，回答下列小題。

在應(yīng)用基因工程改變生物遺傳特性，進(jìn)而利用種間關(guān)系進(jìn)行生物防治方面，中國科學(xué)家取得

了許多重要進(jìn)展。

資料一：人類使用化學(xué)農(nóng)藥防治害蟲，致使環(huán)境不斷惡化。王成樹等從黃肥尾蝎中克隆出一

種神經(jīng)毒素基因AalT,將其導(dǎo)入能寄生在許多害蟲體內(nèi)的綠僵菌中，增強(qiáng)綠僵菌致死害蟲的

效應(yīng)，可有效控制蟲害大規(guī)模爆發(fā)。

資料二：小麥赤霉病是世界范圍內(nèi)極具毀滅性的農(nóng)業(yè)真菌病害。王宏偉、孔令讓等從長穗偃

麥草中克隆出抗赤霉病主效基因Fhb7。將Fhb7導(dǎo)入小麥，其表達(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對(duì)小麥

的感染，從而避免小麥赤霉病大規(guī)模爆發(fā)。

資料三：瘧疾由受瘧原蟲感染的雌按蚊通過叮咬在人群中傳播。王四寶等從幾種微生物中克

隆出5種不同抗瘧機(jī)制的基因，將它們導(dǎo)入按蚊的腸道共生菌AS1中。在按蚊腸道內(nèi)，AS1

工程菌分泌的基因表達(dá)產(chǎn)物可殺滅瘧原蟲。因AS1可在按蚊親代和子代種群中擴(kuò)散，所以在

含AS1工程菌按蚊的群落中，瘧疾傳播一般可被阻斷。

11.（2020年天津高考生物試卷）目的基因是基因工程的關(guān)鍵要素。關(guān)于上述資料中涉及的

目的基因，下列分析正確的是（）

A.來源：必須從動(dòng)物、植物或微生物的基因組文庫中直接獲取

B.作用：上述基因表達(dá)產(chǎn)物一定影響防治對(duì)象的生長或存活

C.轉(zhuǎn)化：均可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

D.應(yīng)用：只有將目的基因?qū)敕乐螌?duì)象才能達(dá)到生物防治目的

12.在利用種間關(guān)系進(jìn)行生物防治的措施中，下列分析第送的是（）

A.施用綠僵菌工程菌減少蟲害，不改變綠僵菌與害蟲之間存在寄生關(guān)系

B.引入Fhb7增強(qiáng)小麥的抗菌性，目的是調(diào)節(jié)真菌對(duì)植物的寄生能力

C.AS1工程菌分泌的多種表達(dá)產(chǎn)物不改變AS1與按蚊之間存在共生關(guān)系

D.使AS1工程菌分泌多種表達(dá)產(chǎn)物殺滅瘧原蟲，目的是調(diào)節(jié)按蚊對(duì)人的寄生能力

【答案】

11.B

12.D

【解析】

【分析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：

(1)目的基因的獲取：從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插

入目的基因一一DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA一一分子雜交技術(shù);

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)一一抗原一抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、

抗病鑒定、活性鑒定等。

2、生物的種間關(guān)系包括競(jìng)爭(zhēng)、捕食、互利共生和寄生。互利共生是指兩種生物共居一起，

彼此創(chuàng)造有利的生活條件，較之單獨(dú)生活時(shí)更為有利；相互依賴，相互依存，一旦分離，雙

方都不能正常地生活。寄生是指一種生物生活在另一種生物的體內(nèi)或體表，并從后者攝取營

養(yǎng)以維持生活的種間關(guān)系。前者稱寄生物，后者稱寄主。大都為一方受益，一方受害，甚至

引起寄主患病或死亡。

11.

A、目的基因可以從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增或是人工合成，A錯(cuò)誤；

B、資料一中神經(jīng)毒素基因AalT導(dǎo)入綠僵菌中可以增強(qiáng)綠僵菌致死害蟲的效應(yīng)，資料二中

Fhb7基因?qū)胄←湥浔磉_(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對(duì)小麥的感染，資料三，將5種不同抗瘧機(jī)

制的基因?qū)氚次玫哪c道共生菌AS1中，AS1工程菌分泌的基因表達(dá)產(chǎn)物可殺滅瘧原蟲，因

此上述基因表達(dá)產(chǎn)物一定影響防治對(duì)象的生長或存活，B正確；

C、基因AalT導(dǎo)入綠僵菌中可用感受態(tài)細(xì)胞法，F(xiàn)hb7基因?qū)胄←溈捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基

因槍法和花粉管通道法，將5種不同抗瘧機(jī)制的基因?qū)氚次玫哪c道共生菌AS1中可用感受

態(tài)細(xì)胞法，C錯(cuò)誤；

D、要想達(dá)到生物防治的目的不一定要將目的基因?qū)敕乐螌?duì)象，如資料一，可將目的基因

導(dǎo)入能寄生在多種害蟲體內(nèi)的綠僵菌中，如資料三，可將目的基因?qū)氚次玫哪c道共生菌

AS1中，這種方法同樣可以達(dá)到生物防治的目的，D錯(cuò)誤。

故選Bo

12.

A、導(dǎo)入AalT基因的綠僵菌只是增強(qiáng)了致死害蟲的效應(yīng)，沒有改變綠僵菌與害蟲之間存在的

寄生關(guān)系，A正確：

B、Fhb7基因?qū)胄←満?，其表達(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對(duì)小麥的感染，調(diào)節(jié)了真菌對(duì)植物的寄

生能力，B正確；

C、AS1工程菌分泌的基因表達(dá)產(chǎn)物可殺滅瘧原蟲，并不會(huì)改變AS1與按蚊之間存在的共生

關(guān)系，C正確；

D、使AS1工程菌分泌多種表達(dá)產(chǎn)物殺滅瘧原蟲，目的是阻斷瘧疾的傳播，不會(huì)改變按蚊對(duì)

人的寄生能力，D錯(cuò)誤。

故選D。

15.（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考）?15）下列關(guān)于病毒的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合

B.適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力

C.在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，推測(cè)該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞

D.用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性

【答案】C

【解析】

【分析】

誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有三種：生物方法（病毒）、化學(xué)方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（離

心、震動(dòng)、電刺激）。某些病毒如：仙臺(tái)病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融

合蛋白，可介導(dǎo)病毒同宿主細(xì)胞融合，也可介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞的融合，因此可以用紫外線滅活

的此類病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合。

【詳解】

A、有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合，如滅活的病毒，A正

確；

B、適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可以參與免疫調(diào)節(jié)中的體液和細(xì)胞免疫，

盡可能殺死更多的病毒，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力，B正確；

C、在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，是因?yàn)椴《窘爰?xì)胞后大量繁殖，病毒從細(xì)胞

中釋放出來，不能說明該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)在高溫高壓下，空間

結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，肽鏈松散，發(fā)生了變性，D正確。

故選C?

16.（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考）24）下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（）

A.若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則一定有利于該重組質(zhì)

粒進(jìn)入受體并保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定

B.抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某抗鹽植物獲得2個(gè)穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)基因品系，抗性鑒定為抗除草劑抗鹽

和抗除草劑不抗鹽。表明一定是抗鹽性的改變與抗除草劑基因的轉(zhuǎn)入無關(guān)

C.抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某植物獲得轉(zhuǎn)基因植株，其DNA檢測(cè)均含目的基因，抗性鑒定為抗除

草劑和不抗除草劑。表明一定是前者表達(dá)了抗性蛋白而后者只表達(dá)抗性基因RNA

D.已知不同分子量DNA可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)

切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶。表明該質(zhì)粒上一定至少有3個(gè)被該酶切開的位置

【答案】D

【解析】

【分析】

基因工程中通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按一定的程序

進(jìn)行操作，包括目的基因的獲得、重組DNA的形成、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞、篩選含有目

的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面。

【詳解】

A、若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則該酶會(huì)對(duì)進(jìn)入受體的

重組質(zhì)粒進(jìn)行切割，不利于其保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，A錯(cuò)誤；

B、抗除草劑基因轉(zhuǎn)入抗鹽植物，獲得了抗除草劑抗鹽品系和抗除草劑不抗鹽品系，不抗鹽

品系的產(chǎn)生可能是轉(zhuǎn)入的抗除草劑基因插入到抗鹽基因內(nèi)，影響其表達(dá)造成，B錯(cuò)誤；

C、轉(zhuǎn)基因植物中均含抗除草劑基因，但存在抗除草劑和不抗除草劑兩種植株，前者表達(dá)了

抗性蛋白，后者可能抗除草劑基因未轉(zhuǎn)錄出mRNA,或轉(zhuǎn)錄出的mRNA未能翻譯成蛋白質(zhì)，

C錯(cuò)誤；

D、某種限制性內(nèi)切酶完全醐切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶，即3種不同分子量DNA,因此環(huán)

狀質(zhì)粒上至少有3個(gè)醐切位點(diǎn)，D正確。

故選D。

17.（2019北京卷?4）甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗

甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株。再將二者雜交后得到Fi,結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時(shí)抗甲、

乙的植物新品種，以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述，錯(cuò)誤的是

A.將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞

B.通過接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定

C.調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得Fi花粉再生植株

D.經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體

【答案】D

【解析】

【分析】由題意可知，同時(shí)抗甲、乙的植物新品種的培養(yǎng)過程為：把含抗甲的目的基因

的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞，獲得抗甲植株，同時(shí)把含抗乙的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植

物細(xì)胞，獲得抗乙植株，通過雜交獲得B（二倍體植株），取B的花粉經(jīng)花藥離體培養(yǎng)

獲得單倍體植株，用秋水仙素處理單倍體植株獲得純合的同時(shí)抗甲、乙的植物新品種（二

倍體）。

【詳解】要獲得轉(zhuǎn)基因的抗甲或抗乙植株，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體（含目的基因、標(biāo)記

基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)），再把基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中，A正確；對(duì)轉(zhuǎn)

基因植株進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可以通過抗病接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，B正確；對(duì)B的花

粉進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，需要經(jīng)過脫分化和再分化過程，其中生長素/細(xì)胞分裂素比例高時(shí)利

于根的分化，比例低時(shí)利于芽的分化，C正確；經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的植株是單倍體，

D錯(cuò)誤。因此，本題答案選D。

18.（2019江蘇卷?16）下列生物技術(shù)操作對(duì)遺傳物質(zhì)的改造，不會(huì)遺傳給子代的是

A.將胰島素基因表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌

B.將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，經(jīng)組培獲得花色變異植株

C.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛

D.將腺甘酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細(xì)胞后回輸患者，進(jìn)行基因治療

【答案】D

【解析】

【分析】轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組?；蛑亟M和基因突變、染色體變異均屬于可遺

傳的變異。

基因治療：指把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療

疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。

【詳解】將含胰島素基因表達(dá)載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌，可以通過

二分裂將胰島素基因傳給后代，A不符合題意；將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，再

經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的植株所有細(xì)胞均含有花青素代謝基因，花青素代謝基因會(huì)隨該植

物傳給后代，B不符合題意；將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的

奶牛所有細(xì)胞均含有腸乳糖酶基因，可以遺傳給后代，C不符合題意：該患者進(jìn)行基因

治療時(shí)，只有淋巴細(xì)胞含有該腺甘酸脫氨酶基因，性原細(xì)胞不含該基因，故不能遺傳給

后代，D符合題意。

19.（2019江蘇卷?23）下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃喋吟磷

酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-）,在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長。下列敘

述正確的是

免疫B細(xì)胞骨?5痛細(xì)胞

體外長期融合的細(xì)胞在HAT

培養(yǎng)中死亡培養(yǎng)液中死亡

A.可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合

B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長

C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)

D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)

【答案】ACD

【解析】

【分析】（1）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)手段有電激、

聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體.

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融

合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動(dòng)物細(xì)胞培

養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)、體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體，

但不能無限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能

產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺(tái)病毒）

等，A正確；

兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與

骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，骨

髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃喋吟磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃喋

吟磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的

具有同種核的細(xì)胞都無法生長，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長，B錯(cuò)誤；因每個(gè)免疫B細(xì)胞

只分泌一種特異性抗體，因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌

的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)

胞篩選出來，C正確；動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的，D正確。

20.（2020年全國統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)1）?38）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某

同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。

制備單細(xì)胞懸液

篩選1篩選2

小鼠甲B淋巴細(xì)胞-

骨確瘤細(xì)胞一

回答下列問題：

（1）上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是。

（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：<,

（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所

采用的培養(yǎng)基屬于，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是

。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是。

（4）若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有

________________（答出2點(diǎn)即可）。

【答案】（1）誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞

（2）取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸

液

（3）選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性

（4）將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)

【解析】

【分析】

由圖可知，篩選1指用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，篩選2指進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體

檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）實(shí)驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒A,是為了誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴

細(xì)胞。

（2）取小鼠的脾臟，剪碎組織，用胰蛋白酶處理獲得單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液可以制成單細(xì)

胞懸液。

（3）圖中篩選1需要用到選擇培養(yǎng)基，只有雜交瘤細(xì)胞可以存活。篩選2是為了獲得能產(chǎn)

生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，該過程要用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的原理是抗原-抗體

反應(yīng)具有特異性。

（4）獲得能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞后，可以在體外培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，

或在小鼠的腹腔中進(jìn)行培養(yǎng)，使雜交瘤細(xì)胞大量增殖。

【點(diǎn)睛】

制備單克隆抗體的過程中，需要用到動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，需要用到兩次篩選，第

一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)

胞。

2L（2020年全國統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)H）?38）植樹造林、"無廢棄物農(nóng)業(yè)"、污水凈

化是建設(shè)美麗中國的重要措施?；卮鹣铝杏嘘P(guān)生態(tài)工程的問題：

（1）在植樹造林時(shí)，一般認(rèn)為，全部種植--種植物的做法是不可取的。因?yàn)榕c混合種植方

式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)相比，按照種植一種植物方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)，其抵抗力穩(wěn)定性

。抵抗力穩(wěn)定性的含義是。

（2）"無廢棄物農(nóng)業(yè)”是我國利用生態(tài)工程的原理進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一種模式，其做法是收集

有機(jī)物質(zhì)。包括人畜糞便、枯枝落葉等，采用堆肥和泄肥等多種方式，把它們轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)肥

料，再施用到農(nóng)田中。施用有機(jī)肥料的優(yōu)點(diǎn)是（答出3點(diǎn)即可）。在有機(jī)

肥料的形成過程中，微生物起到了重要作用，這些微生物屬于生態(tài)系統(tǒng)組分中的。

（3）在污水凈化過程中，除發(fā)揮污水處理廠的作用外，若要利用生物來回收污水中的銅、

鎘等金屬元素，請(qǐng)?zhí)峁┮粋€(gè)方案：。

【答案】（1）低生態(tài)系統(tǒng)抵抗外界干擾并使自身的結(jié)構(gòu)與功能保持原狀或不受損害的能

力

（2）改善了土壤結(jié)構(gòu)；培育了土壤微生物；實(shí)現(xiàn)了土壤養(yǎng)分的循環(huán)利用