ICS65.020.20CCSB38DB50重慶市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB50/T1223—2022本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)則起請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)提出。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)歸口并組織實(shí)施。本文件起草單位：重慶市中藥研究院。本文件主要起草人：伍曉麗、陳大霞、李隆云、張雪。1DB50/T1223—2022玄參組培快繁技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了玄參組培快繁的培養(yǎng)環(huán)境、外植體制備、培養(yǎng)基配制、組培苗培養(yǎng)、組培苗過渡移植等技術(shù)。本文件適用玄參組培苗的生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4培養(yǎng)基配制4.1愈傷組織誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)基MS+蔗糖20g/L+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L，pH5.8。4.2芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+蔗糖20g/L+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L，pH5.8。4.3根誘導(dǎo)培養(yǎng)基1/2MS+蔗糖10g/L，pH5.8。5外植體制備5.1枝條采集5～7月，選擇晴天9:00～11:00采集無病蟲害、生長健壯的帶頂芽枝條。5.2外植體制備取0.5mm～1mm莖尖，用3%洗衣粉水浸泡1min，流水沖洗40min；洗滌后的莖尖置于滅菌的燒杯中，在超凈工作臺(tái)上用75%乙醇洗滌1min，無菌水漂洗1次；用1‰的升汞消毒4min，無菌水漂洗4次，無菌濾紙吸干水分。2DB50/T1223—20226愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)6.1接種在超凈工作臺(tái)上，將外植體淺插入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，蓋封口膜，標(biāo)明編號(hào)。6.2培養(yǎng)將接種后的培養(yǎng)瓶擺放在培養(yǎng)架上，溫度25℃,培養(yǎng)30d～40d形成愈傷組織。7繼代培養(yǎng)7.1接種在超凈工作臺(tái)上，將每個(gè)愈傷組織分割成3份～5份，接種于繼代培養(yǎng)基上，蓋封口膜，標(biāo)明編7.2培養(yǎng)將接種后的培養(yǎng)瓶擺放在培養(yǎng)架上，溫度25℃,培養(yǎng)30d～40d。8芽誘導(dǎo)培養(yǎng)8.1接種將繼代培養(yǎng)的愈傷組織接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，蓋封口膜，標(biāo)明編號(hào)。8.2培養(yǎng)將接種后的培養(yǎng)瓶擺放在培養(yǎng)架上，溫度25℃,光照強(qiáng)度2000Lx，光照時(shí)間12h/d，培養(yǎng)25d～30d。9根誘導(dǎo)培養(yǎng)9.1接種將3cm～5cm長的芽接種到根誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，蓋封口膜，標(biāo)明編號(hào)。9.2培養(yǎng)將接種后的培養(yǎng)瓶擺放在培養(yǎng)架上，溫度25℃,光照強(qiáng)度2000Lx，光照時(shí)間為12h/d，培養(yǎng)10煉苗10.1瓶苗煉苗待苗高7cm～10cm，根長3cm以上，置于有光的自然條件下2d，后松開瓶蓋2d，再半開瓶蓋2d，最后揭去瓶蓋3d。DB50/T1223—202210.2穴盤煉苗10.2.1基質(zhì)珍珠巖：河沙=1:1混合作為基質(zhì)，121℃高壓滅菌30min。10.2.2穴盤穴盤規(guī)格：孔徑6