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文檔簡介
第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能
測試題
一、單項選擇題
1.測得某一蛋白質(zhì)樣品的含氮量為0.40g,此樣品約含蛋白質(zhì)多少克?
A.2.00gB.2.50gC.6.40gD.3.00gE.6.35g
2.含有兩個竣基的氨基酸是:D.PH7.0E.PH8.0
A.CysB.GluC.Asn9.蛋白質(zhì)合成后修飾而成的氨基酸是:
D.GinE.LysA.脯氨酸B.胱氨酸C.賴氨酸
3.在生理條件下,下列哪種氨基酸殘基的側(cè)D.蛋氨酸E.天門冬氨酸
鏈所帶的正電荷最多?10.蛋白質(zhì)變性是由于:
A.CysB.GluC.LysA.氨基酸排列順序的改變
D.ThrE.AlaB.氨基酸組成的改變
4.下列哪種氨基酸為環(huán)狀亞氨基酸?C.肽鍵的斷裂
A.GlyB.ProC.TrpD.蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的破壞
D.TyrE.LysE.蛋白質(zhì)的水解
5.蛋白質(zhì)分子中維持一級結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)11.蛋白質(zhì)在280nm處有最大光吸收,主要
鍵是:是由下列哪組結(jié)構(gòu)引起的?
A.肽鍵B.二硫鍵A.組氨酸的咪哇基和酪氨酸的酚基
C.醋鍵D.氫鍵B.酪氨酸的酚基和色氨酸的口引跺環(huán)
E.疏水鍵C.酪氨酸的酚基和苯丙氨酸的苯環(huán)
6.在中性條件下混合氨基酸在溶液中的主D.色氨酸的口引跺環(huán)和苯丙氨酸的苯環(huán)
要存在形式是:E.苯丙氨酸的苯環(huán)和組氨酸的咪唾基
A.兼性離子B.非極性分子12.蛋白質(zhì)溶液的穩(wěn)定因素是:
C.帶單價正電荷D.疏水分子A.蛋白質(zhì)溶液有分子擴散現(xiàn)象
E.帶單價負(fù)電荷B.蛋白質(zhì)在溶液中有“布朗”運動
7.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)及高級結(jié)構(gòu)決定于:C.蛋白質(zhì)分子表面帶有水化膜和同種電
A.分子中氫鍵荷
B.分子中鹽鍵D.蛋白質(zhì)溶液的粘度大
C.氨基酸組成和順序E.蛋白質(zhì)分子帶有電荷
D,分子內(nèi)部疏水鍵13.蛋白質(zhì)變性不包括:
E.亞基A.氫鍵斷裂B.肽鍵斷裂
8.血清蛋白(PI為4.7)在下列哪種PH值溶C.疏水鍵斷裂1).鹽鍵斷裂
液中帶正電荷?E.二硫鍵斷裂
A.PII4.0B.PH5.0C.PH6.014.關(guān)于蛋白質(zhì)等電點的敘述下列哪項是正
I
確的?E.以上都不是
A.在等電點處蛋白質(zhì)分子所帶凈電荷為21.a螺旋每上升一圈相當(dāng)于氨基酸殘基的
零個數(shù)是:
B.等電點時蛋白質(zhì)變性沉淀A.4.8B.2.7C.3.6D.3.0E.2.5
C.不同蛋白質(zhì)的等電點相同22.組成蛋白質(zhì)的基本單位是:
1).在等電點處蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性增加A.L-P氨基酸B.D-B氨基酸
E.蛋白質(zhì)的等電點與它所含的堿性氨基C.D-a氨基酸D.L-a氨基酸
酸的數(shù)目無關(guān)E.L,D-a氨基酸
15.維持蛋白質(zhì)分子二級結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵23.關(guān)于蛋白質(zhì)分子三級結(jié)構(gòu)的描述,其中
是:錯誤的是:
A.氫鍵B.二硫鍵C.疏水鍵A.具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈都具有生物學(xué)
D.離子鍵E.磷酸二酯鍵活性
16.天然蛋白質(zhì)中不存在的氨基酸是:B.決定盤曲折疊的因素是氨基酸殘基
A.脯氨酸B.半胱氨酸C.蛋氨酸C.親水基團多聚集在三級結(jié)構(gòu)的表面
D.絲氨酸E.瓜氨酸D.三級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性主要是次級鍵維系
17.有一混合蛋白質(zhì)溶液,各種蛋白質(zhì)的PIE.天然蛋白質(zhì)分子均具有這種結(jié)構(gòu)
為4.6;5.0;5.3;6.7;7.3。電泳時24.具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)特征是:
欲使其中4種泳向正極,緩沖液的PH應(yīng)A.分子中必定含有輔基
該是B.靠亞基的聚合和解聚改變生物學(xué)活性
A.4.0B.5.0C.6.0C.依賴肽鍵維系四級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性
D.8.0E.7.0D.在兩條或兩條以上具有三級結(jié)構(gòu)多肽
18.下列關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)敘述中,不正確的鏈的基礎(chǔ)上,肽鏈進(jìn)一步折疊、盤曲形
是:成
A.a-螺旋是二級結(jié)構(gòu)的一種E.每條多肽鏈都具有獨立的生物學(xué)活性
B.無規(guī)卷曲是在一級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上形成的25.關(guān)于蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)正確的是:
C.只有二、三級結(jié)構(gòu)才能決定四級結(jié)構(gòu)A.亞基的種類、數(shù)目都不定
D.一級結(jié)構(gòu)決定二、三級結(jié)構(gòu)B.一定有種類相同、而數(shù)目不同的亞基
E.三級結(jié)構(gòu)即具有空間構(gòu)象數(shù)
19.使蛋白質(zhì)和酶分子顯示筑基的氨基酸C.一定有多個相同的亞基
是:D.一定有多個不同的亞基
A.賴氨酸B.半胱氨酸E.一定有種類不同、而數(shù)目相同的亞基
C.胱氨酸D.蛋氨酸數(shù)
E.谷氨酸26.下列正確描述血紅蛋白(Hb)概念是:
20.蛋白質(zhì)多肽鏈具有的方向性是:A.是含有鐵咋咻的單亞基球蛋白
A.從5'端到3'端B.血紅蛋白氧解離曲線為S型
B.從3,端到5,端C.1個血紅蛋白可與1個氧分子可逆結(jié)
C.從N斷到C端合
D.從C端到N端D.血紅蛋白的功能與肌紅蛋白相同
2
E.血紅蛋白不屬于變構(gòu)蛋白是:
27.在飽和硫酸鉉狀態(tài)下析出的蛋白質(zhì)是:A.陰離子交換層析
A.清蛋白B.纖維蛋白原B.陽離子交換層析
C.Y-球蛋白D.al-球蛋白C.凝膠過濾
E.B-球蛋白D.親和層析
28.有一蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物在PH=6用陽離子E.透析
交換劑層析時,第一個被洗脫下來的氨34.關(guān)于蛋白質(zhì)變構(gòu),下列哪種敘述是錯誤
基酸是:的?
A.Vai(pl5.96)B.Asp(pl2.77)A.氧對血紅蛋白的作用屬于正協(xié)同效應(yīng)
C.Lys(pl9.74)D.Tyr(pI5.66)B.氧對血紅蛋白的作用屬于負(fù)協(xié)同效應(yīng)
E.Arg(pl10.76)C.氧與血紅蛋白結(jié)合呈S型曲線
29.以下屬于分子伴侶的是:D.蛋白質(zhì)變構(gòu)效應(yīng)是生物體內(nèi)重要的代
A.膠原蛋白謝調(diào)節(jié)方式之一
B.細(xì)胞色素CE.氧是血紅蛋白的變構(gòu)劑
C.RNaseA35.下列哪一條肽鏈不能形成螺旋?
D.熱休克蛋白(heatshockprotein)A.Ala-Ile-Asn-Met-Val-Gln
E.谷胱甘肽(GSH)B.Tyr-Trp-Va1-G1u-A1a-Asn
30.蛋白質(zhì)沉淀、變性和凝固的關(guān)系,下面敘C.Asn-Pro-A1a-Met-Tyr-Ala
述正確的是:D.His-Trp-Cys-Met-Gly-Ala
A.變性蛋白不一定失去活性E.Met-lys-trp-his-phe-Ala
B.變性蛋白一定要凝固36.蛋白質(zhì)分子中a-螺旋構(gòu)象的特點是:
C.蛋白質(zhì)沉淀后必然變性A.靠鹽鍵維持穩(wěn)定
1).變性蛋白一定沉淀B.肽鍵平面充分伸展
E.蛋白質(zhì)凝固后??定變性C.多為左手螺旋
31.一個含有葡萄糖、N-乙酰谷氨酸、天冬D.螺旋方向與長軸垂直
氨酸、精氨酸和丙氨酸的溶液,在PH=6E.以上都不是
條件下通過陰離子交換樹脂,被保留最37.多肽鏈中主鏈骨架的組成是:
多的是:A.-CHNOCHNOCHNO-
A.精氨酸B.天冬氨酸C.丙氨酸B.-CuONHaCONHCuONH-
1).葡萄糖E.亮氨酸C.-NCCNNCCNNCCN-
32.向卵清蛋白溶液中加入0.INNaOH使溶D.-CNHOCNHOCNHO-
液呈堿性,并加熱至沸后立即冷卻,此時E.-CNOIICNOHCNOH-
A.蛋白質(zhì)變性沉出38.下面哪種方法沉淀出來的蛋白質(zhì)具有生
B.蛋白質(zhì)水解為混合氨基酸物學(xué)活性?
C.蛋白質(zhì)變性,但不沉出A.重金屬鹽B.鹽析C.苦味酸
1).蛋白質(zhì)沉淀但不變性D.常溫下有機溶劑E.強酸強堿
E.蛋白質(zhì)變性,冷卻又復(fù)性39.以下有關(guān)結(jié)構(gòu)域的敘述正確的是:
33.利用分子篩原理來分離蛋白質(zhì)的技術(shù)A.結(jié)構(gòu)域即亞基
3
B.通常在較小蛋白質(zhì)分子中存在40.可用于測定多肽N端氨基酸的試劑有:
C.與蛋白質(zhì)分子整體以次極鍵相連結(jié)A.甲酸B.浸化素C.丹磺酰氯
D.與蛋白質(zhì)分子整體以共價鍵相連結(jié)D.B筑基乙醇E.羥胺
E.以上都不是
三、填空題
L組成蛋白質(zhì)的元素有______、__、_
2.不同蛋白質(zhì)中含量相近的元素是其平均含量為
3.氨基酸的種類很多,但構(gòu)成天然蛋白質(zhì)的氨基酸只有種,根據(jù)氨基酸的結(jié)構(gòu)和性
質(zhì)不同可將其分為以下四類、、、。
4.穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象的次級鍵包括等。
5.氨基酸在PI時以——離子形式存在,在PH大于PI的溶液中大部分以離子形
式存在,在PH小于PI的溶液中,大部分以______離子形式存在。
6.在PH=6.00時將一個丙、精、谷氨酸三種氨基酸的混合溶液進(jìn)行電泳,移向正極的是
,移向負(fù)極的是,留在原點的是。
7.蛋白質(zhì)由許多通過形成?條多肽鏈,在每條多肽鏈的兩端有自由的
_______基和自由的基,這兩端分別稱為末端和末端。
8.蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要構(gòu)象形式有和o
9.蛋白質(zhì)顆粒表面的和_____是蛋白質(zhì)親水膠體穩(wěn)定的兩個因素。
10.維持蛋白質(zhì)分子一、二、三、四級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要化學(xué)鍵分別是、_、
11.蛋白質(zhì)可受、或的作用而水解,最后徹底水解為各種的
混合物。
12.常用的蛋白質(zhì)沉淀法有、、和。其中和
法沉淀,可保持蛋白質(zhì)不變性。
13.由于肽單元上_____原子所連的二個單鍵的_______,決定了兩個相鄰肽單元平面的
相對空間位置。
14.血紅蛋白的氧解離曲線為說明第一個亞基與結(jié)合可第二個亞基與
。2結(jié)合,這被稱為效應(yīng)。
15.用凝膠過濾分離蛋白質(zhì),分子量較小的蛋白質(zhì)在柱中滯留的時間較因此最先
流出凝膠柱的蛋白質(zhì),其分子量_______o
16.蛋白質(zhì)可與某些試劑作用產(chǎn)生顏色反應(yīng),可用作蛋白質(zhì)_____和分析。常用的
顏色反應(yīng)有______和。
17.蛋白質(zhì)變性主要是破壞了—鍵,使其—結(jié)構(gòu)遭到破壞,而——結(jié)構(gòu)未破
壞;其性質(zhì)改變,喪失。
4
18.分子伴侶的化學(xué)本質(zhì)是_____,其功能是和
19.蛋白質(zhì)在_____nm處,對紫外光有最大吸收,據(jù)此可對蛋白質(zhì)進(jìn)行o
20.用電泳分離蛋白質(zhì)時,其移動速率主要取決于蛋白質(zhì)所帶、和
四、名詞解釋
1.肽單元(peptideunit)
2.蛋白質(zhì)變性作用(denaturationofprotein)
3.蛋白質(zhì)等電點(isoeletricpointofprotein)
4.肽鍵(peptidebond)
5.分子伴侶(molecularchaperon)
7.變構(gòu)效應(yīng)(allostericeffect)
8.協(xié)同效應(yīng)(cooperativeeffect)
9.結(jié)構(gòu)域(domain)
10.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)(primarystructure)
11.蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)(tertiarystructure)
12.蛋白質(zhì)沉淀
13.透析(dialysis)
五、問答題:
1.酸性氨基酸和堿性氨基酸各包括什么?
2.哪些氨基酸屬于必需氨基酸?
3.使蛋白質(zhì)變性的因素有哪些?變性后性質(zhì)有哪些改變?
4.什么是蛋白質(zhì)的一、二、三、四級結(jié)構(gòu),維系各級結(jié)構(gòu)的鍵或力是什么??
7.舉例說明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系?
8.列舉分離純化蛋白質(zhì)的主要方法,并扼要說明其原理?
9.有哪些方法可用于蛋白質(zhì)或多肽鏈的N末端分析或C末端分析?
10.沉淀蛋白質(zhì)的方法有哪些?各有何特點?
參考答案
一、單項選擇題
1.B2.B3.C4.B5.A6.A7.C8.A9.B10.D
11.B12.C13.B14.A15.A16.E17.E18.C19.B20.C
21.C22.D23.A24.B25.A26.B27.A28.B29.D30.E
5
31.B32.C33.C34.B35.C36.D37.B38.B39.C40.C
三、填空題
l.CH0N
2.N16%
3.20非極性疏水性氨基酸中性極性氨基酸酸性氨基酸堿性氨基酸
4.氫鍵鹽鍵疏水鍵范德華力
5.兼性離子負(fù)正
6.谷氨酸精氨酸丙氨酸
7.氨基酸.肽鍵竣基氨基碳氮
8.a-螺旋折疊
9.電荷層水化膜
10.肽鍵氫鍵疏水鍵次級鍵
11.酸堿;酶氨基酸
12.鹽析法有機溶劑沉淀某些酸類沉淀重金屬鹽沉淀鹽析低溫有機溶劑
13.a碳自由旋轉(zhuǎn)度
14.S型促進(jìn)正協(xié)同
15.長大
16.定性定量苗三酮反應(yīng)雙縮胭
17.次級鍵空間一級理化生物學(xué)活性
18.蛋白質(zhì)可使肽鏈正確折疊在二硫鍵正確配對中起重要作用
19.280定量測定
20.電荷數(shù)量分子量大小分子形狀
四、名詞解釋
1.在多肽分子中肽鍵的6個原子(以|,(3,0,此乩以2)位于同一平面,被稱為肽單元(肽鍵平
面)。
2.在某些理化因素的作用下,使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)受到破壞但不包括肽鍵的斷裂,從而引
起蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的改變及生物學(xué)活性的喪失,這種作用稱為蛋白質(zhì)的變性作用。
3.當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一PH值時,其分子解離成正負(fù)離子的趨勢相等成為兼性離子,凈電
荷為零,此時該溶液的PH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點。
4.一個氨基酸的氨基與另一個氨基酸的臻基脫去一分子的水,所形成的酰胺鍵稱為肽鍵。
5.是蛋白質(zhì)合成過程中形成空間結(jié)構(gòu)的控制因子,是一類幫助多肽鏈正確折疊的蛋白質(zhì).
它可逆地與未折疊肽段的疏水部分結(jié)合隨后松開,如此重復(fù)進(jìn)行可以防止錯誤的聚集發(fā)
生,使肽鏈正確折疊。分子伴侶對于蛋白質(zhì)分子中二硫鍵的正確形成起到重要作用。
6.在蛋白質(zhì)分子中,可發(fā)現(xiàn)二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段,在空間上相互接近,形成一個
特殊的空間構(gòu)象,并具有相應(yīng)的功能,被稱為模序。
7.蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的改變伴隨其功能的變化,稱為變構(gòu)效應(yīng)。具有變構(gòu)效應(yīng)的蛋白質(zhì)稱為
6
變構(gòu)蛋白,常有四級結(jié)構(gòu)。以血紅蛋白為例,一分子與一個血紅素輔基結(jié)合,引起亞基
構(gòu)象變化,進(jìn)而引起相鄰亞基構(gòu)象變化,更易與結(jié)合。
8.是指蛋白質(zhì)中的一個亞基與其配體結(jié)合后,能影響該蛋白質(zhì)中另一個亞基與配體的結(jié)合
能力。如果是促進(jìn)作用則稱為正協(xié)同效應(yīng);反之,則稱為負(fù)協(xié)同效應(yīng)。
9.分子量大的蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)??煞指畛?個和數(shù)個球狀或纖維狀的區(qū)域,折疊的較為緊
密,各行其功能,稱為結(jié)構(gòu)域。
10.蛋白質(zhì)分子中氨基酸的組成和排列順序。
11.是指整條多肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置,也即整條多肽鏈所有原子在三維
空間的排布位置。
12.分散在溶液中的蛋白質(zhì)分子發(fā)生凝聚,并從溶液中析出的現(xiàn)象。
13.利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法稱為透析。
14.多肽鏈的主鏈圍繞中心軸有規(guī)律的螺旋式上升,每3.6個氨基酸殘基盤繞一周,形成的
右手螺旋,稱為a-螺旋。
15.在具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子中,其中每條具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈稱為亞基,亞基和亞
基之間以非共價鍵相連接。
五、問答題
1.酸性氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸。堿性氨基酸包括精氨酸、組氨酸和賴氨酸。
2.蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、綴氨酸、賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸。
3.引起變性的因素有:物理因素如高溫、紫外線、X-射線、超聲波、劇烈振蕩等;化學(xué)因
素如強酸、強堿、尿素、去污劑、重金屬、濃酒精等。
變性后:⑴生物學(xué)活性喪失;⑵溶解度下降;⑶粘度增加;⑷易被蛋白酶水解。
4.多肽鏈中氨基酸殘基的組成和排列順序稱為蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu),連接一級結(jié)構(gòu)的鍵是肽
鍵。
蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)主鏈原子的局部空間結(jié)構(gòu),并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈構(gòu)象,
二級結(jié)構(gòu)的種類有a-螺旋、折疊、轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲。氫鍵是維系二級結(jié)構(gòu)最主
要的鍵。
三級結(jié)構(gòu)是指多肽鏈主鏈和側(cè)鏈原子的空間排布。次級鍵維持其穩(wěn)定,最主要的鍵是疏
水鍵。
四級結(jié)構(gòu)是指兩條以上具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈之間締合在一起的結(jié)構(gòu)。其中每條具有三
級結(jié)構(gòu)的多肽鏈稱為亞基,一般具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)才有生物學(xué)活性。維持其穩(wěn)定的
是次級鍵,如氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華力等。
5.①Gly參與合成谷胱甘肽(GSH)。GSII的活性基團是半胱氨酸筑基(-SII)GSH在體內(nèi)的重要
功能之一是保護(hù)某些蛋白質(zhì)或酶分子中的-SH不被氧化,從而維持各自的生物學(xué)功能。
②甘氨酸、絲氨酸、組氨酸、色氨酸都可提供“一碳基團”。“一碳基團”的主要生理功
能是作為合成喋吟和喀陡的原料。
③Gly和琥珀酰CoA及Fe"合成血紅素,而血紅素是血紅蛋白和肌紅蛋白的輔基,在氧的
運輸和貯存中發(fā)揮極其重要的作用。
7
@Gly可以和游離型膽汁酸(膽酸、鵝脫氧膽酸)結(jié)合,形成結(jié)合型膽汁酸一甘氨膽酸和甘
氨鵝脫氧膽酸。膽汁酸是界面活性物質(zhì),他們在脂肪的消化和吸收中起重要作用。另外,
甘氨酸和其他氨基酸都是蛋白質(zhì)、肽類合成的原料。蛋白質(zhì)、肽具重要的生理功能。尤
其是結(jié)構(gòu)蛋白膠原中,甘氨酸含量特別多。
6.分子伴侶是一類幫助新生多肽鏈正確折疊的蛋白質(zhì)。它可逆地與未折疊肽段的疏水部分
結(jié)合,隨后松開,如此重復(fù)進(jìn)行,可防止錯誤的聚集發(fā)生,使肽鏈正確折疊。分子伴侶在蛋
白質(zhì)二硫鍵的正確配對中也起重要作用。
7.一級結(jié)構(gòu)是空間結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)。一級結(jié)構(gòu)相似其功能也相似,例如不同哺乳動物的
胰島素一級結(jié)構(gòu)相似,僅有個別氨基酸差異,故他們都具有胰島素的生物學(xué)功能;一級結(jié)
構(gòu)不同,其功能也不同;一級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,則蛋白質(zhì)功能也發(fā)生改變,例如血紅蛋白由2
條a鏈和2條B鏈組成,正常人B鏈的第6位谷氨酸換成了綴氨酸,就導(dǎo)致分子病-鐮刀
狀紅細(xì)胞貧血的發(fā)生,患者紅細(xì)胞帶氧能力下降,易溶血。
空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系也很密切,空間結(jié)構(gòu)改變,其理化性質(zhì)與生物學(xué)活性也改變。如核
糖核酸酶變性或復(fù)性時,隨之空間結(jié)構(gòu)破壞或恢復(fù),生理功能也喪失或恢復(fù)。變構(gòu)效應(yīng)也
說明空間結(jié)構(gòu)改變,功能改變。
8.蛋白質(zhì)分離純化的方法主要有:鹽析、透析、凝膠過濾(分子篩)、電泳、離子交換層析(色
譜)、超速離心等方法。
各自原理:鹽析主要是利用不同蛋白質(zhì)在不同濃度的中性鹽溶液中的溶解度不同,向蛋
白質(zhì)溶液加入中性鹽,破壞水化膜和電荷兩個穩(wěn)定因素,使蛋白質(zhì)沉淀。
透析和凝膠過濾均根據(jù)分子大小不同而設(shè)計的。透析是利用僅有小分子化合物能通透半
透膜,使大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分離,達(dá)到除鹽目的。凝膠過濾柱內(nèi)填充帶小孔的
葡聚糖顆粒,樣品中小分子蛋白質(zhì)進(jìn)入顆粒,而大分子蛋白質(zhì)則不能進(jìn)入,由于二者路徑
氏短不同,故大分子先于小分子流出柱,可將蛋白質(zhì)按分子量大小不同而分離。
蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì),在不同PH溶液中所帶電荷種類和數(shù)量不同,故在電場中向相反的
電極方向泳動,電泳的速度取決于場強、蛋白質(zhì)所帶電荷數(shù)量和其分子大小與形狀。
如在層析柱內(nèi),帶電荷蛋白質(zhì)可與帶相反電荷的離子交換樹脂相結(jié)合,然后用鹽溶液洗
脫,隨著鹽濃度增加,帶電荷少與多的蛋白質(zhì)先后被洗脫出來,分部收集洗脫液,達(dá)到分
離蛋白質(zhì)的目的。
根據(jù)不同蛋白質(zhì)的密度與形態(tài)區(qū)別,可用超速離心法,使其在不同離心力作用下沉降,達(dá)
到分離目的。
9.多肽鏈的N末端和C末端分析,均可用化學(xué)法和酶法。N末端分析可用2,4-二硝基氟苯
法、二甲基氨基蔡磺酰氯法、丹伯磺酰氯法(Dabsyl-CL)和Edman降解法,以及氨基肽
酶法。C末端分析可用腫解法和竣基肽酶法。
10.沉淀蛋白質(zhì)的主要方法有:鹽析、有機溶劑、某些酸類、重金屬鹽、加熱凝固。
上述方法的特點:中性鹽破壞蛋白質(zhì)的水化膜和電荷,采用不同濃度鹽可將不同蛋白質(zhì)
分段析出,鹽析得到的蛋白質(zhì)具有生物學(xué)活性。
有機溶劑可破壞蛋白質(zhì)的水化膜使其沉淀,常溫下操作,蛋白質(zhì)無活性,低溫下操作,則
有活性。
8
某些酸類如鴿酸、三氯醋酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀,前提是溶液的pH
值小于PL該法得到的蛋白質(zhì)無活性。
與酸類相反,重金屬離子p「+等可與帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀,故要求溶液pH大于
PI?該法得到的蛋白質(zhì)也無活性。
在等電點時加熱蛋白質(zhì)可形成凝塊沉淀。該法得到的是變性蛋白質(zhì)。
第二章核酸的結(jié)構(gòu)與功能
測試題
一、單項選擇題
1.組成核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是:E.DNA以小環(huán)狀結(jié)構(gòu)存在
A.核糖和脫氧核糖B.磷酸和核糖6.關(guān)于DNA和RNA徹底水解產(chǎn)物的比較,下
C.含氮堿基D.單核甘酸列哪項是正確的?
E.多核甘酸A.堿基相同,戊糖不同
2.下列哪種堿基幾乎僅存在于RNA中?B.部分堿基相同,戊糖相同
A.腺噂吟B.鳥噪吟C.胞喀咤C.堿基不同,戊糖相同
D.尿喘咤E.胸腺喘咤D.堿基相同,戊糖相同
3.下列哪種堿基幾乎僅存在于DNA中?E.部分堿基相同,戊糖不同
A.腺噂吟B.鳥口票吟C.胞喀唬7.假尿甘中的糖音鍵是
D.尿啥咤E.胸腺嘴嚏A.N-N鍵B.C-C鍵C.N-C鍵
4.真核細(xì)胞的DNA主要存在于:D.C-0鍵E.N-0鍵
A.線立體B.核染色質(zhì)8.核酸溶液在下列哪個波長有最大光吸收?
C粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D.溶酶體A.280nmB.260nmC.340nm
E.滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D.225nmE.400nm
5.DNA攜帶生物遺傳信息這一事實意味著什9.核酸中核昔酸之間的連接方式是
么?A.2',3'-磷酸二酯鍵
A.不論哪一物種的堿基組成均應(yīng)相同B.3',5'-磷酸二酯鍵
B.病毒的侵染是靠蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至宿主細(xì)C.2',5'-磷酸二酯鍵
胞來實現(xiàn)的D.糖昔鍵
C.同一生物不同組織的DNA,其堿基組E.氫鍵
成相同10.可用于測量生物樣品中核酸含量的元素
D.DNA的堿基組成隨機體年齡及營養(yǎng)狀是:
況而改變A.碳B.氫C.氧D.氮E.磷
9
11.含有稀有堿基比例較多的核酸是:A.堿基堆積力
A.核DNAB.線立體DNAC.tRNAB.堿基對之間的氫鍵
D.mRNAE.rRNAC.螺旋內(nèi)側(cè)疏水力
12.關(guān)于DNA堿基組成的規(guī)律,下列哪項是D.二硫鍵
正確的?E.磷酸二酯鍵
A.DNA主要由A、G、C、U四種堿基組成19.關(guān)于B-DNA雙螺旋的敘述,下列哪項是
B.在DNA中,A+T/C+G=A+C/G+T正確的?
C.在DNA中,A+G/T+C=lA.DNA分子由兩條以糖-磷酸作骨架的雙
D.DNA中的堿基組成具有種族特異性和鏈組成
器官特異性B.以左手螺旋的方式圍繞同一公共軸有
E.以上都不是規(guī)律地盤旋
13.DNA的二級結(jié)構(gòu)是:C.每旋轉(zhuǎn)一周包括10個堿基對
A.a-螺旋B.B-片層D.每一螺距為0.54nm
C.B-轉(zhuǎn)角D.超螺旋結(jié)構(gòu)E.雙螺旋表面只有深溝
E.雙螺旋結(jié)構(gòu)20.核酸變性會出現(xiàn)下列哪種現(xiàn)象?
14.核酸在260nm處有最大光吸收是因為:A.減色效應(yīng)
A.氫鍵B.增色效應(yīng)
B.磷酸二酯鍵C.粘度增加
C.喋吟和嗡咤環(huán)上的共軌雙鍵D.失去對紫外線的吸收能力
D.糖背鍵E.分子量發(fā)生改變
E.核糖和脫氧核糖的吠喃型環(huán)狀結(jié)構(gòu)21.DNA變性是指:
15.關(guān)于tRNA的敘述哪項是錯誤的?A.分子中磷酸二酯鍵斷裂
A.tRNA二級結(jié)構(gòu)呈三葉草形B.多核甘酸鏈解聚
B.tRNA分子中含有稀有堿基C.DNA分子由超螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)殡p螺旋
C.tRNA分子中有一個額外環(huán)D.互補堿基之間氫鍵斷裂
D.tRNA的二級結(jié)構(gòu)有二氧尿U密噬環(huán)E.DNA分子中堿基丟失
E.反密碼環(huán)上有CCA三個堿基組成反密22.現(xiàn)有一段DNA,其核甘酸的序列為:
碼子5'-GGATGCAATGCGCATTGGC-3,
16.在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,互補堿基配對規(guī)3'-CCTACGTTACGCGTAACCG-5'它的Tm值
律是:是:
A.A-T,G-UB.A-T,UYA.60℃B.68℃C.64℃
C.G-C,T-AD.A-C,G-TD.62.℃E.78℃
E.A-G,T-C23.下列哪種分子含有核糖胸甘酸?
17.Watson-Crick的DNA結(jié)構(gòu)模型是指:A.rRNAB.DNAC.tRNA
A.三螺旋結(jié)構(gòu)B.三葉草結(jié)構(gòu)D.mRNAE.hnRNA
C.右手雙螺旋結(jié)構(gòu)D.核小體結(jié)構(gòu)24.關(guān)于DNA和RNA的敘述,下列哪項是正
E.左手雙螺旋結(jié)構(gòu)確的?
18.維持DNA雙螺旋橫向穩(wěn)定性的力是:A.DNA和RNA分子中均含二氫尿喀咤和
10
假尿喘咤等稀有堿基E.凡引起DNA氫鍵斷裂的因素都可使其
B.DNA和RNA的二級結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)三葉草結(jié)變性
構(gòu)29.在下列哪一種情況下,互補的兩條DNA
C.DNA和RNA的熱變性隨溫度上升而逐單鏈將會結(jié)合成DNA雙鏈?
漸發(fā)生A.變性B.退火C.加連接酶
1).DNA和RNA都是單鏈線性分子D.加聚合酶E.以上都不是
E.DNA和RNA變性后均出現(xiàn)增色效應(yīng)30.關(guān)于tRNA的敘述,下列哪項是錯誤的?
25.從某細(xì)菌中分離的DNA樣品內(nèi)含有A.tRNA由70-90余個核甘酸構(gòu)成
15.1%的腺喋吟,那么其它堿基的百分含B.tRNA的3'-末端都為-CpApAOH,用來
量是:接受活化的氨基酸
A.G=34.9%B.C=15.1%C.tRNA含有10%-20%的稀有堿基
C.T=34.9%D.G=69.8%D.tRNA分子中有反密碼環(huán)
E.C=30.2%E.三葉草型是tRNA共同的二級結(jié)構(gòu)
26.下列哪一種力不參與維持DNA雙螺旋的31.關(guān)于rRNA的敘述,下列哪項是錯誤的?
穩(wěn)定?A.rRNA是細(xì)胞內(nèi)含量最多的RNA
A.堿基堆積力B.rRNA與核糖體蛋白共同組成核糖體
B.互補堿基對間的氫鍵C.核糖體由易于解聚的大、小兩個亞基
C.范德華力組成
D.磷酸基團上的負(fù)電荷與介質(zhì)中的陽離D.真核細(xì)胞的核糖體包括5S、16s和23s
子之間形成的離子鍵三種rRNA
E.二硫鍵E.rRNA分子中有一些能配對的區(qū)域形成
27.關(guān)于真核細(xì)胞mRNA的敘述,下列哪項是局部的雙鏈
錯誤的?32.有關(guān)核能的正確描述是:
A.在5'-端有帽子結(jié)構(gòu),在3,-端有多聚A.它是DNA分子,但具有催化功能
A尾巴B.它是RNA分子,但具有催化功能
B.生物體內(nèi)各種mRNA的長短差別很大C.它是位于細(xì)胞核內(nèi)的酶
C.三類RNA中mRNA的合成率和轉(zhuǎn)化率最D.它是專門水解核酸的蛋白質(zhì)
快E.它是由RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的酶
I).聚A尾巴是DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物33.有關(guān)DNA變性,錯誤的敘述是:
E.真核細(xì)胞的mRNA前身是hnRNA,在細(xì)A.變性后生物學(xué)活性改變
胞核內(nèi)合成,在核內(nèi)剪接、加工而成B.變性后3',5'-磷酸二酯鍵破壞
28.關(guān)于DNA變性的敘述哪一項是正確的?C.變性后理化性質(zhì)改變
A.升高溫度是DNA變性的唯一原因D.氫鍵破壞成為兩股單鏈DNA
B.DNA熱變性是一種漸進(jìn)過程,無明顯E.變性后粘度降低,出現(xiàn)高色效應(yīng)
分界線34.有關(guān)核小體的錯誤敘述是:
C.變性必有DNA分子中共價鍵斷裂A.DNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體
D.核酸變性是DNA的獨有現(xiàn)象,RNA無B.H2A、H2B、H3和H4各兩分子組成的
此現(xiàn)象八聚體與DNA雙螺旋構(gòu)成核心顆粒
II
C.RNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體A.DNA開始解鏈時的溫度
D.DNA和組蛋白Hl構(gòu)成核小體連接區(qū)B.A260在達(dá)到最大值時的溫度
E.核小體是染色體的基本單位C.A260在達(dá)到最大值50%時的溫度
35.有關(guān)復(fù)性的正確敘述為:D.A280在達(dá)到最大值50%時的溫度
A.不同的變性DNA分子在緩慢降溫后,E.DNA完全解鏈時的溫度
都可結(jié)合成雙鏈復(fù)性38.Tm值愈高的DNA分子,其
B.核酸熱變性后,使其溫度緩慢下降,A.G+C含量愈高B.A+T含量愈高
變性的兩股單鏈DNA可復(fù)性C.A+G含量愈高D.T+C含量愈高
C.變性DNA的濃度越高,復(fù)性越慢E.A+C含量愈低
D.熱變性DNA迅速冷卻后即可相互結(jié)合39.下列各DNA分子中,堿基組成比例各不
E.熱變性的DNA迅速降溫過程稱為退火相同,其中哪種DNA的Tm最低
36.關(guān)于核酸分子雜交的錯誤敘述是:A.A-T占15%B.G-C占25%
A.通過分子雜交技術(shù),可從基因文庫中C.G-C占40%D.A-T占80%
篩選出目的基因E.G-C占35%
B.RNA可與編碼的多肽鏈結(jié)合成為雜交40.DNA的一級結(jié)構(gòu)是指:
分子A.單核甘酸通過3',5'-磷酸二酯鍵連
C.分子雜交原理可用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)接而成的多核甘酸鏈
D.不完全互補的二鏈在復(fù)性時的結(jié)合稱B.核甘酸中核甘與磷酸的連接鏈
為雜交C.磷酸和戊糖的鏈形骨架
E.核酸雜交類型有DNA-DM、DNA-RNA,D.DNA分子中堿基通過氫鍵連接鏈
RNA-RNAE.DNA反向平行的雙螺旋鏈
37.DNA的解鏈溫度是指
三、填空題
1.核酸可分為_—和_一兩大類,其中一—主要存在于細(xì)胞液
中,而卜:要":在「細(xì)胞核中。
2.核酸完全水解的產(chǎn)物為—、和。其中
又可分為堿和堿。
3.DNA中堿基是、、、。RNA中堿
基是、、、o
4.DNA的基本組成單位是、、、;
RNA的基本組成單位是、、、o
5.DNA分子中,兩條鏈通過堿基間的__相連,堿基間的配對原則是—對
,對。
6.DNA雙螺旋直徑為nm雙螺旋每隔nm轉(zhuǎn)一圈,約相當(dāng)于
12
一個堿基對。戊糖和磷酸基位于雙螺旋側(cè),堿基位于
____________側(cè)。
7.核酸的基本組成單位是,他們之間通過鍵相連。
8.DNA的二級結(jié)構(gòu)的重要特點是形成結(jié)構(gòu),此結(jié)構(gòu)的內(nèi)部是由__________通過
____________相連而成。
9.RNA的二級結(jié)構(gòu)大多數(shù)是以多核甘酸鏈的形式存在,但也可局部盤曲形成
結(jié)構(gòu),典型的tRNA結(jié)構(gòu)是結(jié)構(gòu)。
10.組成核酸的元素有、、、、
—等,其中的含量比較恒定,約占,可測
—的含量來代表核酸含量。
11.維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的力,主要有和o
12.DNA變性后,剛性減弱,粘度,紫外吸收峰
13.DNA分子中,兩條多核甘酸鏈所含的堿基和之間有三個氫
鍵,和之間有兩個氫鍵。
14.因為核酸分子中含有堿和堿,而這兩類物質(zhì)又均具有
—結(jié)構(gòu),故使核酸對260nm波長的紫外線有吸收作用。
15.tRNA的三葉草型結(jié)構(gòu)中有—環(huán),一環(huán),—環(huán)及
環(huán),還有氨基酸臂。
16.tRNA的三葉草型結(jié)構(gòu)中,氨基酸臂的功能是,反密碼環(huán)的功能是
17.喋吟環(huán)上的第位氮原子與戊糖的第位碳原子相連形成
鍵,通過這種鍵相連而成的化合物叫喋吟核甘;喀咤環(huán)上的第
位氮原子與戊糖的第位碳原子相連形成健,
通過這種鍵相連而成的化合物叫喀咤核昔。
18.成熟的mRNA的結(jié)構(gòu)特點是:,。
19.Tm值與DNA的和所含堿基中的成正比。
20.核酶具有功能,其化學(xué)本質(zhì)是,其用途為o
21.DNA的基本功能是__和而取人與—_的合成密切相關(guān)。
22.熱變性DNA在——條件下可復(fù)性,這種現(xiàn)象又稱為_變性DNA
的濃度越,長度越,復(fù)性越快。
23.可以雜交的二鏈的結(jié)構(gòu)特點是_雜交種類有一_、—
和?
24.真核生物染色體的基本組成單位是。
25.核酸變性時鍵破壞,而一__結(jié)構(gòu)未破壞。
四、名詞解釋
13
2.Tm值3.核酸分子雜交
5.堿基互補規(guī)律7.核酸的變性8.退火
9.增色效應(yīng)10.DNA的一級結(jié)構(gòu)11.稀有堿基
五、問答題
1.試比較RNA和DNA在分子組成及結(jié)構(gòu)上的異同點。
2.簡述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的要點。
3.簡述tRNA二級結(jié)構(gòu)的基本特點。
4.簡述RNA的種類及其生物學(xué)作用。
7.什么叫增色效應(yīng)?試述變性后出現(xiàn)增色效應(yīng)的原因。
9.簡述真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點。
10.什么叫解鏈溫度?影響DNATm值大小的因素有哪些?為什么?
參考答案
一、單項選擇題
1.D2.D3.E4.B5.C6.E7.B8.B9.B10.E
11.C12.C13.E14.C15.E16.C17.C18.B19.C20.B
21.D22.A23.C24.E25.A26.E27.D28.E29.B30.B
31.D32.B33.B34.C35.B36.B37.C38.A39.D40.A
三、填空題
l.DNARNARNADNA
2.磷酸含氨堿戊糖含氨堿嘲令啥噬
3A.GCTAGCU
4.dAMPdGMPdCMPdTMPAMPGMPCMPUMP
5.氫鍵ATGC
6.23.410外內(nèi)
7.單核甘酸3',5'-磷酸二酯鍵
8.雙螺旋含氮堿氫鍵
9.單股雙螺旋三葉草
10C.H0NP磷9-10%磷
11.氫鍵堿基堆積力
12.降低升高
13C.GAT
1
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