黑龍江佳木斯第一中學(xué)2025屆高三第六次模擬考試生物試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于植物激素調(diào)節(jié)說法正確的是（）A．從植物體內(nèi)提取的乙烯可用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中促進果實發(fā)育B．兩種激素之間既可能有協(xié)同關(guān)系也可能有拮抗關(guān)系C．植物激素從產(chǎn)生部位運輸?shù)阶饔貌课皇菢O性運輸?shù)倪^程D．植物激素是微量、高效的有機物，需通過體液運輸2．如圖表示母親年齡與生育后代先天愚型病發(fā)病風險曲線，下列敘述錯誤的是（）A．圖中45歲女性所生子女數(shù)目少的可能原因之一是體內(nèi)雌激素含量低B．遺傳病在人體不同發(fā)育階段的發(fā)病風險中，先天愚型病在成年階段發(fā)病率很低C．圖中先天愚型病的診斷只能通過羊膜腔穿刺D．圖中兩條曲線的結(jié)果告訴我們應(yīng)提倡適齡生育3．下列各細胞結(jié)構(gòu)與其功能對應(yīng)不正確的是A．細胞膜：控制物質(zhì)進出細胞 B．核糖體：合成蛋白質(zhì)的場所C．線粒體：將丙酮酸徹底分解 D．溶酶體：加工并分泌蛋白質(zhì)4．在“DNA分子模型的搭建”實驗中，為體現(xiàn)DNA分子的多樣性，在搭建過程中應(yīng)采取的措施是A．用不同形狀的塑料片表示不同堿基 B．搭建多個隨機選用堿基對的DNA分子C．改變磷酸和糖之間的連接方式 D．遵循堿基互補配對原則5．工作在第一線的醫(yī)護人員采取多種措施，全力救治重癥的新冠肺炎患者，挽救了許多患者的生命。下列有關(guān)措施與其生物學(xué)原理的對應(yīng)關(guān)系中正確的是（）A．利用呼吸機等設(shè)備提高患者的血氧水平——有氧呼吸各個階段都需要氧氣參與B．為患者提供更多的營養(yǎng)物質(zhì)——免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能增強需要消耗有機物和能量C．將新冠肺炎康復(fù)者的血漿輸入患者體內(nèi)——康復(fù)者血漿中含有B細胞D．增強患者戰(zhàn)勝疾病的信心——大腦皮層中有免疫調(diào)節(jié)中樞6．下列現(xiàn)象不是由于酸雨引起的是（）A．改變?nèi)蚪涤旮窬?B．破壞水體平衡C．使樹木生長緩慢并容易感染病害 D．破壞土壤肥力7．圖甲、乙、丙為某一動物細胞分裂后期的示意圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．由圖示判斷該動物是雌性B．甲細胞通過分裂最終形成4個生殖細胞C．三個細胞都含有同源染色體D．丙細胞變異的原因是減數(shù)第一次分裂后期一對同源染色體沒有分開8．（10分）下圖為一只果蠅兩條染色體上部分基因分布示意圖，下列敘述不正確的是（）A．朱紅眼基因cn、暗栗色眼基因cl為一對等位基因B．在有絲分裂后期，基因cn、cl、v、w會出現(xiàn)在細胞的同一極C．在減數(shù)第二次分裂后期，基因cn、cl、v、w可出現(xiàn)在細胞的同一極D．在有絲分裂中期，X染色體和常染色體的著絲點都排列在赤道板上二、非選擇題9．（10分）鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長。鋁能抑制植物根尖細胞的分裂，破壞根組織。某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT），該通道蛋白能將蘋果酸轉(zhuǎn)運到細胞外來緩解鋁毒?？蓪⒖刂艫LMT的基因?qū)氩荒弯X的植物中，最終獲得耐鋁植物。請回答下列問題：（1）下表是運載體上出現(xiàn)的幾種限制酶的識別序列及切割位點。用表中的限制酶切割DNA后能形成相同黏性末端的是_____。限制酶識別序列和切割位點EcoRIG1AATTCBamHIG1GATCCHindIIIA1AGCTTXhoIC1TCGAGNdeICA1TATGSalIG1TCGAC（2）欲獲得ALMT基因的cDNA，科研人員從_______細胞中獲取總mRNA，在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性________，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。（3）啟動子是_______識別并結(jié)合的位點，能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型，其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達，β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導(dǎo)。在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應(yīng)使用_______啟動子，不使用另外一種啟動子的原因是_____________________。（4）科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上，再通過_____技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了_____個ALMT基因，轉(zhuǎn)入的基因在染色體上的位置關(guān)系是：______；若使這株耐鋁植株自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為_______。10．（14分）生長素可以促進扦插枝條的生根。研究人員使用不同量的生長素處理某植物枝條，每個用量處理的枝條數(shù)都是50個。觀察兩個月后的存活枝條數(shù)、生根枝條數(shù)以及首次出根所需天數(shù)，結(jié)果如圖所示。請回答下列問題：（1）生長素的化學(xué)本質(zhì)是_______________。植物激素除了生長素以外，還有細胞分裂素、乙烯和_______________等四類。（2）由圖可知，不用生長素處理也會有1/5左右的枝條生根，但與其他組相比，較明顯的區(qū)別是_______________________。（3）若要確定生長素促進該植物枝條生根效果最佳的用量，還需要觀測的指標包括_____________(答出兩點即可)。（4）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，經(jīng)常施用人工合成的植物生長調(diào)節(jié)劑。在施用時，要綜合考慮施用目的、價格、施用是否方便以及_____________(答出兩條即可)等因素，還要考慮施用時間、方式、濃度、次數(shù)及處理部位等問題。11．（14分）下圖是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題：（1）EcoRⅤ酶切位點為，EcoRⅤ酶切出來的線性載體P1為_______末端。（2）用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得目的基因片段，其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸，載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為_______的脫氧核苷酸，形成P2，P2和目的基因片段在_______酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。PCR技術(shù)中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點是_____________________________________。

（3）PCR技術(shù)可以臨床用于診斷感染性疾病、腫瘤及遺傳病等，它是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，其標準步驟為_______、退火、__________。（4）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了___________________。若該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中，然后在_______為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。12．已知某種動物灰身（A）對黑身（a）為顯性，有眼（B）對無眼（b）為顯性?？刂朴醒邸o眼的基因位于常染色體上。為了研究A、a與B、b的位置關(guān)系，選取一對表現(xiàn)型為灰身有眼的雄性個體和黑身無眼的雌性個體進行雜交實驗，所得F1雌、雄個體中均出現(xiàn)四種表現(xiàn)型：灰身有眼、黑身有眼、灰身無眼、黑身無眼。分析回答問題。（1）如果F1中四種表現(xiàn)型的比例為1：1：1：1，則基因A、a和B、b的遺傳符合________定律；且控制灰身、黑身的基因位于______（填?；騲”）染色體上，依據(jù)是________________________。若要證明上述推測，可選取F1中______________交配，統(tǒng)計子代雌雄個體的表現(xiàn)型及比例。若只考慮題干中的兩對等位基因，預(yù)測其子代所有灰身個體中純合子所占的比例為_____________________________。（2）如果F1的四種表現(xiàn)型中，親本類型偏多，重組類型偏少，則F1同時出現(xiàn)上述四種表現(xiàn)型的原因最可能是________________________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

植物激素是由植物自身代謝產(chǎn)生的一類有機物質(zhì)，并自產(chǎn)生部位移動到作用部位，在極低濃度下就有明顯的生理效應(yīng)的微量物質(zhì)，也被稱為植物天然激素或植物內(nèi)源激素?！驹斀狻緼、植物激素是微量高效的有機物，從植物體內(nèi)提取的乙烯量少，不能可用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，并且乙烯是促進果實的成熟，A錯誤；B、細胞分裂素和生長素在頂端優(yōu)勢方面，高濃度生長素使植物具有頂端優(yōu)勢，細胞分裂素解除頂端優(yōu)勢，兩者屬于拮抗關(guān)系；然而在促進果實生長方面，兩者是協(xié)同關(guān)系，故兩種激素之間既可能有協(xié)同關(guān)系也可能有拮抗關(guān)系，B正確；C、生長素由幼嫩組織運輸?shù)阶饔貌课?，存在極性運輸，其他植物激素無極性運輸，C錯誤；D、植物無體液，不能通過體液運輸，D錯誤。故選B。2、C【解析】

1、婚前檢測和預(yù)防遺傳病的措施有：遺傳咨詢，產(chǎn)前診斷，如羊水檢查、B超檢查、孕婦血細胞檢查、基因診斷等。2、分析曲線圖：隨著母親年齡的增長，先天愚型患者的發(fā)病率越來越高?！驹斀狻緼、雌激素能促進卵細胞形成，所以圖中45歲女性所生子女數(shù)目少的可能原因之一是體內(nèi)雌激素含量低，A正確；B、先天愚型病屬于染色體異常遺傳病，染色體異常遺傳病在成年階段發(fā)病率很低，B正確；C、先天愚型病的診斷可通過羊膜腔穿刺或絨毛細胞檢查等方法，C錯誤；D、圖中兩條曲線的結(jié)果告訴我們應(yīng)提倡適齡生育，D正確。故選C。3、D【解析】

1、細胞膜的功能：作為生命系統(tǒng)的邊界，使細胞有一個相對穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境；控制物質(zhì)進出；完成細胞間的信息交流。2、線粒體：普遍分布在動植物細胞內(nèi)，具有雙層膜結(jié)構(gòu)的細胞器，有氧呼吸的主要場所，其中有氧呼吸的第二、三階段發(fā)生在線粒體中，第三階段產(chǎn)生的能量較多，合成大量的ATP，用于各項生命活動的需要，因此把線粒體稱為“動力車間”。3、核糖體：普遍分布于原核細胞核真核細胞內(nèi)，無膜結(jié)構(gòu)，能夠把氨基酸合成蛋白質(zhì)的機器，因此是蛋白質(zhì)的合成場所。4、溶酶體：普遍存在于動植物細胞內(nèi)，單層膜結(jié)構(gòu)的細胞器，內(nèi)含多種水解酶，被稱作“酶的倉庫”，可以水解衰老損傷的細胞器，也可以吞噬水解病原體，維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定?！驹斀狻考毎ぞ哂锌刂莆镔|(zhì)進出細胞的功能，A正確；核糖體可以將氨基酸合成蛋白質(zhì)，B正確；線粒體是有氧呼吸的主要場所，可以將丙酮酸徹底氧化分解形成水和二氧化碳，同時釋放大量能量，C正確；溶酶體能夠水解細胞內(nèi)衰老損傷的細胞器和侵入細胞內(nèi)的病原體，高爾基體可以加工分泌蛋白質(zhì)，D錯誤。4、B【解析】

DNA的基本單位是脫氧核苷酸，雙鏈DNA中磷酸與脫氧核糖交替連接，排列在外側(cè)，構(gòu)成DNA的基本骨架；堿基對排列在內(nèi)側(cè)。兩條鏈反向平行盤旋成雙螺旋結(jié)構(gòu)。兩條鏈之間的堿基遵循堿基的互補配對原則（A-T、C-G）?！驹斀狻緼、如果不同形狀的塑料片表示不同堿基，塑料片也只有四種，且DNA中四種堿基都相同，A錯誤；B、DNA分子多樣性與組成DNA的脫氧核苷酸數(shù)目和排列順序有關(guān)，B正確；C、所有DNA分子中磷酸和糖之間的連接方式都相同，C錯誤；D、DNA分子雙鏈上的堿基都遵循互補配對原則，D錯誤；故選B。5、B【解析】

1、有氧呼吸的過程：（1）有氧呼吸的第一階段是葡萄糖酵解產(chǎn)生丙酮酸和[H]，同時合成少量ATP，發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中；（2）有氧呼吸的第二階段是丙酮酸和水反應(yīng)形成二氧化碳和[H]，同時合成少量ATP，發(fā)生在線粒體基質(zhì)中；（3）有氧呼吸的第三階段是[H]與氧氣結(jié)合形成水，合成大量ATP，發(fā)生在線粒體內(nèi)膜上。2、腦包括大腦、小腦、腦干。大腦是由左右兩個半球組成，大腦半球的表層是灰質(zhì)，稱為大腦皮層，大腦皮層是調(diào)節(jié)人體生理活動的最高級中樞，可以劃分為若干個功能區(qū)，如軀體運動中樞（管理身體對側(cè)骨骼肌的隨意運動）、軀體感覺中樞（管理身體對側(cè)皮膚、肌肉等處的感覺）、視覺中樞、聽覺中樞、以及人類特有的語言中樞等?！驹斀狻緼、只有有氧呼吸第三階段需要氧氣參與，A錯誤；B、為患者提供更多的營養(yǎng)物質(zhì)，可以為增強免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能提供有機物和能量，B正確；C、康復(fù)者血漿中含有抗體，C錯誤；D、大腦皮層沒有免疫調(diào)節(jié)中樞，D錯誤。故選B。6、A【解析】

煤、石油、天然氣的大量燃燒導(dǎo)致二氧化碳的全球平衡受到了嚴重干擾，大氣中二氧化碳的增加會通過溫室效應(yīng)影響地球的熱平衡，使地球變暖。在距地球表面15-20千米處的平流層中，臭氧的含量非常豐富，它能吸收對人體和生物有致癌和殺傷作用的紫外線、X射線和γ射線，從而保護人類和其他生物免受短波輻射的傷害，酸雨是燃燒煤石油和天然氣所產(chǎn)生的硫和氮的氧化物，與大氣中的水結(jié)合而形成的酸性產(chǎn)物正常，雨水的pH值一般都在6左右，不會低于5.6，目前有些地區(qū)的雨水的酸度已到了pH2-5。【詳解】改變?nèi)蚪涤旮窬质怯捎诖髿庵卸趸嫉脑黾訒ㄟ^溫室效應(yīng)影響地球的熱平衡，使地球變暖，這不屬于酸雨的危害，其它選項均由酸雨引起。故選A。【點睛】識記酸雨的影響是解答本題的關(guān)鍵。7、B【解析】

據(jù)圖分析，圖示甲細胞中同源染色體分離，處于減數(shù)第一次分裂后期，且其細胞質(zhì)不均等分裂，說明該細胞為初級卵母細胞，該動物是雌性的；乙細胞含有同源染色體，且著絲點分裂，姐妹染色單體分離，處于有絲分裂后期；丙細胞同一極的染色體為3條（奇數(shù)），而體細胞中染色體數(shù)目為4條，且著絲點分裂，姐妹染色單體分離，則該細胞處于減數(shù)第二次分裂后期，其細胞質(zhì)均等分裂，因此該細胞為第一極體，又因為該細胞中有一條染色體出現(xiàn)了同源染色體，說明該對同源染色體在減數(shù)第一次分裂后期沒有分開并都進入了第一極體?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知，該動物是雌性的，A正確；B、甲細胞為初級卵母細胞，其通過分裂最終形成1個生殖細胞，B錯誤；C、根據(jù)以上分析已知，三個細胞中都有同源染色體，C正確；D、根據(jù)以上分析已知，丙細胞變異的原因是減數(shù)第一次分裂后期一對同源染色體沒有分開，D正確。故選B。8、A【解析】

據(jù)圖分析，圖示常染色體和X染色體為非同源染色體，兩者含有的基因均為非等位基因，其中朱紅眼基因和暗栗色基因都位于常染色體上，辰砂眼基因、白眼基因都位于X染色體上。【詳解】A、朱紅眼基因cn、暗栗色眼基因cl位于同一條染色體上，為非等位基因，A錯誤；B、有絲分裂后期，著絲點分裂，子染色體移向細胞兩極，細胞中具有兩套完全相同的基因，兩極都含有與親本相同的遺傳物質(zhì)，因此，基因cn、cl、v、w會出現(xiàn)在細胞的同一極，B正確；C、圖示常染色體和X染色體為非同源染色體，在減數(shù)第一次分裂結(jié)束后可能會移向同一個子細胞，因此在減數(shù)第二次分裂后期，基因cn、cl、v、w可出現(xiàn)在細胞的同一極，C正確；D、在有絲分裂中期，所有染色體的著絲點都排列在赤道板上，D正確。故選A。二、非選擇題9、XhoI與SalI植物甲的根（根毛）細胞引物RNA聚合酶αβ啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸，導(dǎo)致正常土壤酸化，并影響植物自身的生長植物組織培養(yǎng)2分別位于兩條非同源染色體上15：1【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成?；虮磉_載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)??抗原?抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）根據(jù)圖示中限制酶的識別序列和酶切位點可判斷XhoI與SalI切割DNA后都能形成TCGA的黏性末端。（2）根據(jù)“某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT）”可知，ALMT基因在根毛細胞中表達，所以欲獲得ALMT基因的cDNA，科研人員應(yīng)從植物甲的根（根毛）細胞中獲取總mRNA，在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性的引物，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。（3）啟動子是RNA聚合酶特異性識別并結(jié)合的位點，能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型，其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達，β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導(dǎo)。鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長，而α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達，則在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應(yīng)使用α啟動子，不使用另外一種啟動子的原因是β啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸，導(dǎo)致正常土壤酸化，并影響植物自身的生長。（4）科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上，再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，由于該雜交相當于測交，所以若得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了2個ALMT基因，且轉(zhuǎn)入的基因分別位于兩條非同源染色體上；若使這株耐鋁植株（基因型相當于AaBb，A和B均為ALMT基因）自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為15：1?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解能力；能理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學(xué)知識，解決生物學(xué)問題的能力。10、吲哚乙酸赤霉素、脫落酸首次出根所需天數(shù)較多每個枝條的生根數(shù)量、根的長度藥物效果、藥物毒性、藥物殘留【解析】

根據(jù)題意可知，實驗的自變量是不同的生長素用量，因變量有首次出根所需天數(shù)，第60天存活的枝條數(shù)，第60天生根的枝條數(shù)?！驹斀狻浚?）植物生長素的化學(xué)本質(zhì)是吲哚乙酸。植物激素包括生長素、細胞分裂素、赤霉素、乙烯和脫落酸五類。（2）實驗中不用生長素處理也有部分枝條生根，原因是枝條自身含有內(nèi)源生長素，但是含量較少，積累到生根所需濃度時間長，故首次出根所需天數(shù)較多。（3）一定量的生長素能夠促進枝條生根，若要確定生根效果最佳的用量，還需要觀測的指標包括每個枝條的生根數(shù)量、根的長度等。（4）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，施用生長調(diào)節(jié)劑時，要綜合考慮施用目的、藥物效果、藥物毒性、藥物殘留、價格和施用是否方便等因素。還要考慮施用時間、方式、濃度、次數(shù)及處理部位等問題?！军c睛】插條本身含有少量的內(nèi)源生長素，故不用生長素處理也會生根。11、平胸腺嘧啶（T）DNA連接酶耐高溫變性延伸鑒別和篩選含目的基因的細胞蔗糖【解析】

1、基因表達載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。其中標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來，常用的標記基因是抗生素抗性基因。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標記基因，可以用檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質(zhì)粒后悔破壞了四環(huán)素抗性基因（tetr）。2、PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準備；②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意分析，EcoRV酶識別的序列是-GATATC-，并且兩條鏈都在識別序列的堿基的中軸線T與A之間進行切割，因此其切出來的線性載體P1為平末端。（2）據(jù)圖分析，目的基因兩側(cè)為粘性末端，且漏出的堿基為A，則在載體P1的兩端需要個加一個胸腺嘧啶堿基T形成具有粘性末端的載體P2，再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。由于在PCR擴增技術(shù)中采用高溫使其變形解旋，因此需要使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特點。（3）根據(jù)以上分析可知，PCR技術(shù)的標準步驟包括變性、退火、延伸。（4）根據(jù)以上分析可知，重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因?qū)儆跇擞浕颍渥饔檬氰b別和篩選含目的基因的細胞。根據(jù)題意可知，該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中，在個體水平上鑒定目的基因是否表達，可以在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，如果大腸桿菌細胞內(nèi)目的基因表達出了蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白，該大腸桿菌能夠進行正常的生