2025屆上海建平中學(xué)高考生物押題試卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列有關(guān)變異與進(jìn)化的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．突變只能改變基因的結(jié)構(gòu)，但不能改變基因的數(shù)量和排列順序B．某些環(huán)境因素能引起突變，但突變不一定引起個(gè)體表現(xiàn)型改變C．若無其他因素影響，一隨機(jī)交配的小種群的基因頻率也可能變化D．種群是生物進(jìn)化的基本單位，進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變2．細(xì)菌放在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，它會繁殖并形成菌落（如圖）。某實(shí)驗(yàn)小組想檢驗(yàn)兩種抗生素的殺菌作用，下列實(shí)驗(yàn)方案最合適的是（）A． B． C． D．3．miRNA是人體的一類內(nèi)源性非編碼RNA，長度為19-25個(gè)核苷酸。某miRNA能抑制W基因控制的W蛋白的合成，其形成和發(fā)揮作用的過程如下圖。敘述正確的是（）A．miRNA指導(dǎo)合成的肽鏈最多含8個(gè)氨基酸B．圖中①和②過程都只能發(fā)生A與U配對，不能發(fā)生T與A配對C．若miRNA不發(fā)揮作用，W基因mRNA同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體合成多條相同肽鏈D．miRNA通過抑制W基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而抑制W蛋白的合成4．哺乳動物受精卵的前幾次分裂異常可能導(dǎo)致子細(xì)胞出現(xiàn)多核現(xiàn)象。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，受精卵分裂時(shí)，首先形成兩個(gè)相對獨(dú)立的紡錘體，之后二者夾角逐漸減小，形成一個(gè)統(tǒng)一的紡錘體。科研人員用藥物N處理部分小鼠（2n=40）受精卵，觀察受精卵第一次分裂，結(jié)果如圖所示。以下有關(guān)實(shí)驗(yàn)的分析中，合理的是（）A．兩個(gè)紡錘體可能分別牽引來自雙親的兩組染色體，最終合二為一B．細(xì)胞A最終可能將分裂成為1個(gè)雙核細(xì)胞，1個(gè)單核細(xì)胞C．細(xì)胞B最終形成的子細(xì)胞中每個(gè)核的染色體條數(shù)為40D．藥物N能抑制兩個(gè)紡錘體的相互作用，可能是秋水仙素5．現(xiàn)采用標(biāo)志重捕法調(diào)查草魚種群數(shù)量變化，并建立種群數(shù)量隨時(shí)間變化的數(shù)學(xué)模型，下列敘述正確的是（）A．若種群的大于1，則可判斷該種群以“J”型曲線增長B．若種群的增長率小于1，則種群數(shù)量會不斷下降C．若種群增長符合“S”型曲線，則種群數(shù)量一定不會超過K值D．若誤將重捕個(gè)體中未標(biāo)記個(gè)體記作標(biāo)記個(gè)體，則估算的種群數(shù)量會偏小6．將黃化的豌豆莖用刀劈成對稱的兩半后，內(nèi)側(cè)為髓，外側(cè)為木質(zhì)部、形成層和韌皮部。浸沒在蒸餾水中，劈莖的兩臂向外彎曲，如圖甲所示。已知豌豆莖的橫切結(jié)構(gòu)如圖乙所示。髓由薄壁細(xì)胞構(gòu)成；形成層細(xì)胞是未成熟的細(xì)胞，無中央大液泡，在適宜條件下會分裂、分化，向內(nèi)產(chǎn)生木質(zhì)部，向外產(chǎn)生韌皮部，細(xì)胞分裂和生長所需要的營養(yǎng)從髓中獲得。下列敘述不正確的是（）A．薄壁細(xì)胞在清水中能夠發(fā)生滲透作用吸收水分B．木質(zhì)部細(xì)胞細(xì)胞壁的伸縮性比薄壁細(xì)胞細(xì)胞壁的伸縮性小C．形成層細(xì)胞在適宜濃度的蔗糖溶液中可觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象D．細(xì)胞分裂和生長所需要的營養(yǎng)從髓中獲得，導(dǎo)致髓細(xì)胞丟失營養(yǎng)物質(zhì)滲透壓下降二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）研究發(fā)現(xiàn)，牛的瘤胃中含有多種纖維素分解菌，這些纖維素分解菌可用于分解秸稈等廢棄物。某科研小組按以下實(shí)驗(yàn)流程分離獲取了牛瘤胃中的纖維素酶高產(chǎn)菌株。（1）纖維素酶是由多種酶組成的復(fù)合酶，其中能催化纖維二糖水解的是________。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的_______進(jìn)行定量測定。（2）步驟A是_____________，可以通過此步驟增加______________________。（3）科研小組的某個(gè)同學(xué)將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件，并持續(xù)通入無菌空氣，結(jié)果一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒有菌種，原因是_________。（4）按照修正后的實(shí)驗(yàn)方法，研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明圈的菌落（如圖）。圖中透明圈的大小與纖維素酶的________有關(guān)；圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是____________。（5）現(xiàn)利用稀釋涂布平板法測定該目的菌的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下4個(gè)平板上均接種0.1ml樣品溶液，菌落數(shù)分別為156、178、486、191，通過計(jì)算得知原樣品溶液中每毫升含有目的菌1.75×108個(gè)，則稀釋倍數(shù)是________________。8．（10分）人們從土壤中分離得到以纖維素為唯一碳源和能源的細(xì)菌用于生產(chǎn)。將等量同濃度的細(xì)菌樣液滴在同等大小的卷煙紙（只含纖維素）上，保持足夠的濕度。一段時(shí)間后，比較各組實(shí)驗(yàn)中卷煙紙的降解程度，選出降解能力大的細(xì)菌?；卮鹣铝袉栴}：（1）實(shí)驗(yàn)中微生物的篩選所利用的原理是_______。（2）由于纖維素的________作用，長期只以纖維素作碳源的土壤中可能含有目的菌。（3）為什么只有分解纖維素的微生物生長在卷煙紙上？________（4）在純化分解纖維素的細(xì)菌時(shí)，常用的接種方法有________和________。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在________進(jìn)行計(jì)數(shù)。9．（10分）P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，研究表明P53基因突變可導(dǎo)致肝臟細(xì)胞癌變?？茖W(xué)家研究發(fā)現(xiàn)P53基因?qū)w外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞生長有抑制作用，請回答下列問題：（1）切下新鮮的肝癌組織，在37℃下用_____消化30～40分鐘，用培養(yǎng)液制成_____在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是_______________________。（2）若P53基因兩側(cè)的一段核苷酸序列是已知的，則獲取P53基因的方法通常是_____。（3）將P53基因經(jīng)過一系列的處理并與脂質(zhì)體混合，將混合物滴加至肝癌細(xì)胞上，輕輕混勻。最后篩選出含有P53基因的肝癌細(xì)胞。脂質(zhì)體在這個(gè)操作中的作用是_____。（4）為證明P53基因?qū)Ω伟┘?xì)胞有抑制作用，需將兩種細(xì)胞接入多孔板中，并從次日開始檢測每孔的細(xì)胞總數(shù)，繪制成如圖所示的生長曲線。請分析兩條曲線分別是哪種細(xì)胞，曲線1是_____細(xì)胞，曲線2是_____細(xì)胞。10．（10分）人乳鐵蛋白是一種藥用保健蛋白。下圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的過程，圖中Tetr表示四環(huán)素抗性基因，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，五種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)如表所示，請回答以下問題：限制酶BamHⅠHaeⅢBclⅠSau3AⅠNotⅠ識別序列及切割位點(diǎn)（1）要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，若只允許使用一種限制酶，應(yīng)選擇的限制酶是_________，酶能起催化作用的原理是_________________________________。（2）據(jù)圖分析篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含___________________（填“四環(huán)素”“氨芐青霉素”或“四環(huán)素或氨芐青霉素”）的培養(yǎng)基上進(jìn)行，原因是_________________________________。（3）若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接起來，連接部位的6個(gè)堿基對序列為___________，對于該部位，這兩種酶___________（填“都不能”或“只有一種能”）切開。（4）培養(yǎng)出早期胚胎后，科學(xué)家欲進(jìn)行胚胎分割移植，則應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的___________，將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后用分割針進(jìn)行分割。11．（15分）三黃雞因羽、脛（小腿）、喙均為黃色而得名，因在烹飪中具有良好的顏色效果而具有一定的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。育種工作者為了研究雞的羽色和脛色的遺傳規(guī)律，選擇多個(gè)品種進(jìn)行了三組雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下。已知控制羽色的基因（A/a）位于常染色體上，脛色淺色（黃色）對深色為顯性（相關(guān)基因?yàn)锽/b）。請回答下列問題：雜交組合親代F1♂♀♂♀一黑羽深脛黑羽深脛黑羽深脛：黃羽深脛=3：1黑羽深脛：黃羽深脛=3：1二黑羽淺脛黃羽深脛黑羽淺脛：黑羽深脛：黃羽淺脛：黃羽深脛=1：1：1：1黑羽淺脛：黑羽深脛：黃羽淺脛：黃羽深脛=1：1：1：1三黑羽深脛黃羽淺脛黑羽淺脛：黃羽淺脛=1：1黑羽深脛：黃羽深脛1：1（1）羽色黑色對黃色為__________性。若B、b基因位于常染色體上，則雜交組合__________的結(jié)果不會出現(xiàn)。（2）若B、b基因位于Z染色體上，則雜交組合二的親本基因型為___________。（3）進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，B、b基因位于Z染色體上，且某種飼料會影響黑色素的產(chǎn)生，使黃羽、淺脛變?yōu)楹谟?、深脛。現(xiàn)有一只黑羽深脛母雞和若干已知基因型的公雞。請完善關(guān)于確定這只母雞基因型的部分實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。①讓該母雞與基因型為__________的公雞多次雜交，用普通飼料喂養(yǎng)子代，觀察并統(tǒng)計(jì)子代表現(xiàn)型及比例（不考慮性別）。②預(yù)期結(jié)果：若子代__________，則該母雞基因型為aaZBW；若子代__________，則該母雞基因型為AaZbW。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

突變和基因重組為生物進(jìn)化提供原材料，自然選擇決定生物進(jìn)化的方向?！驹斀狻緼、突變包括基因突變和染色體變異，染色體變異可能改變基因的數(shù)量和排列順序，A錯(cuò)誤；B、某些環(huán)境因素如輻射等能引起突變．但由于密碼子的簡并性，突變不一定引起個(gè)體表現(xiàn)型改變，B正確；C、在種群較小時(shí)，即使無其他因素的影響，該隨機(jī)交配的小種群也可能因?yàn)閭€(gè)別個(gè)體的死亡等原因丟失部分基因，導(dǎo)致種群的基因頻率發(fā)生改變，C正確；D、種群是生物進(jìn)化的基本單位，進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變，種群基因頻率改變說明生物發(fā)生了進(jìn)化，D正確。故選A。2、C【解析】根據(jù)題意分析本實(shí)驗(yàn)的目的是檢驗(yàn)兩種抗生素的殺菌作用，該實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對照原則，即設(shè)計(jì)只有細(xì)菌的空白對照組，實(shí)驗(yàn)組是含有A抗生素和含有B抗生素，然后進(jìn)行對比分析，符合分析的圖示只有C，故C正確。3、C【解析】

當(dāng)RNA聚合酶與DNA分子的某一啟動部位結(jié)合后，啟動DNA轉(zhuǎn)錄形成RNA。根據(jù)題圖可知，miRNA基因在核內(nèi)轉(zhuǎn)錄成mRNA后，經(jīng)過初步加工，然后通過核孔到達(dá)細(xì)胞質(zhì)中，在細(xì)胞質(zhì)中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成miRNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體，該復(fù)合體與W基因的mRNA結(jié)合，從而導(dǎo)致W基因mRNA翻譯過程受阻?！驹斀狻緼、miRNA是非編碼RNA，即不會編碼蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、①過程為轉(zhuǎn)錄，能發(fā)生A-U配對，也能發(fā)生T-A配對，②為翻譯，只能發(fā)生A-U配對，B錯(cuò)誤；C、mRNA上同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體，其模板為同一條mRNA，合成的多條肽鏈相同，C正確；D、miRNA蛋白質(zhì)復(fù)合物作用到了W基因的mRNA上，只能抑制X基因的翻譯，不會抑制W基因的轉(zhuǎn)錄，D錯(cuò)誤。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查學(xué)生對遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯等相關(guān)知識的識記和理解能力。解決此類問題需要學(xué)生熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識，系統(tǒng)、全面地構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)，據(jù)此從圖示中提取信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。4、B【解析】

分析題圖：正常情況下，受精卵第一次分裂過程，開始形成兩個(gè)相對獨(dú)立的紡錘體，最后形成“雙紡錘體”，這樣形成的子細(xì)胞為單核細(xì)胞，而每個(gè)細(xì)胞核中含有40條染色體。而細(xì)胞A中紡錘體一端形成雙紡錘體，一端沒有形成雙紡錘體，這樣形成的兩個(gè)子細(xì)胞一個(gè)為單核，另一個(gè)為雙核，單核子細(xì)胞的染色體數(shù)為40條，雙核子細(xì)胞的每個(gè)核內(nèi)染色體數(shù)為20條?！驹斀狻緼、兩個(gè)紡錘體共同牽引來自雙親的兩組染色體，最終合二為一，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞A的兩個(gè)紡錘體一極靠近，形成的子細(xì)胞會出現(xiàn)含40條染色體的單核，另一極分開，形成的子細(xì)胞會出現(xiàn)各含20條染色體的雙核，B正確；C、細(xì)胞B的兩個(gè)紡錘體完全分開，形成的子細(xì)胞都會出現(xiàn)各含20條染色體的雙核，C錯(cuò)誤；D、秋水仙素能抑制紡錘體的形成，而藥物N抑制兩個(gè)紡錘體的相互作用，這一過程與秋水仙素作用無關(guān)，D錯(cuò)誤。故選B。5、D【解析】

種群數(shù)量增長的“J”型曲線：指數(shù)增長函數(shù)，描述在食物充足，無限空間，無天敵的理想條件下生物無限增長的情況。種群數(shù)量增長的“S”型曲線：是受限制的指數(shù)增長函數(shù)，描述食物、空間都有限，有天敵捕食；同一種生物的K值不是固定不變的，會受到環(huán)境的影響，環(huán)境遭受破壞，K值可能會下降；而當(dāng)生物生存的環(huán)境改善，K值可能會上升?！驹斀狻緼、若種群的大于1，該種群也不一定以“J”型曲線增長，因?yàn)椤癑”型曲線的應(yīng)該大于1且一直保持不變，A錯(cuò)誤；B、種群增長率=出生率-死亡率，若種群的增長率小于0時(shí)，則種群數(shù)量會不斷下降，而種群增長率大于0小于1時(shí)，種群數(shù)量會不斷增加，B錯(cuò)誤；C、若種群增長符合“S”型曲線，則種群中的個(gè)體數(shù)量將在K值左右上下波動，即種群數(shù)量有可能會超過K值，C錯(cuò)誤；D、標(biāo)志重捕法的計(jì)算公式為：種群中的個(gè)體數(shù)=第一次捕獲數(shù)×第二次捕獲數(shù)÷標(biāo)志后重新捕獲數(shù)，因此若誤將重捕個(gè)體中未標(biāo)記個(gè)體記作標(biāo)記個(gè)體，則估算的種群數(shù)量會偏小，D正確。故選D。6、C【解析】

由題干可知，將劈開的豆莖放入清水中，薄壁細(xì)胞發(fā)生滲透作用大量吸水膨脹，而木質(zhì)部與韌皮部細(xì)胞由于細(xì)胞壁厚，伸縮性較小，滲透吸水較少。內(nèi)部膨脹多，外部膨脹少導(dǎo)致劈開的莖向外彎。【詳解】A、細(xì)胞壁具有很薄的初生壁和大液泡，在清水中發(fā)生滲透作用吸水膨脹，A正確；B、因木質(zhì)部的細(xì)胞壁比薄壁細(xì)胞細(xì)胞壁厚，因此木質(zhì)部細(xì)胞細(xì)胞壁的伸縮性比薄壁細(xì)胞細(xì)胞壁的伸縮性小，B正確；C、形成層細(xì)胞是未成熟的細(xì)胞，無中央大液泡，不能觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象，C錯(cuò)誤；D、因細(xì)胞分裂和生長所需要的營養(yǎng)從髓中獲得，髓細(xì)胞丟失營養(yǎng)物質(zhì)滲透壓下降，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞吸水和失水相關(guān)知識，答題關(guān)鍵是從題干情境中獲取信息，與植物細(xì)胞滲透作用聯(lián)系進(jìn)行答題。明確活細(xì)胞并且是成熟的植物細(xì)胞（有中央大液泡）才能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。二、綜合題：本大題共4小題7、葡萄糖苷酶葡萄糖選擇培養(yǎng)纖維素分解菌的濃度瘤胃中的微生物為厭氧型，不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖產(chǎn)量和活性菌2105【解析】

纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖。纖維素分解菌常采用剛果紅染液進(jìn)行鑒定，剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色物質(zhì)，纖維素分解菌由于能夠?qū)⒗w維素分解而在平板上的菌落周圍出現(xiàn)無色的透明圈，透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少。微生物培養(yǎng)基的滅菌方法常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，接種方法常用稀釋涂布平板法和平板劃線法。微生物的培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽，有的還有特殊營養(yǎng)物質(zhì)(生長因子、維生素)。【詳解】（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種，其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶。一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測定。（2）牛胃取樣后，使用選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)，目的是增加纖維素分解菌(或目的菌)的濃度，因此步驟A是選擇培養(yǎng)。（3）由于瘤胃中的微生物為厭氧型，不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖，所以將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件，并持續(xù)通入無菌空氣，一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒有菌種。（4）按照修正后的實(shí)驗(yàn)方法，研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明圈的菌落（如圖）。圖中透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少（產(chǎn)量）及酶的活性；圖中菌2周圍的透明圈最大，降解纖維素能力最強(qiáng)。（5）用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落的常用方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)目，所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156+178+191)÷3÷0.1稀釋倍數(shù)=1.75×108，因此稀釋倍數(shù)=105。【點(diǎn)睛】結(jié)合培養(yǎng)基的配制、菌株的篩選與鑒定等分析題意和題圖。8、人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時(shí)抑制其它微生物的生長選擇卷煙紙只含纖維素而不含其它物質(zhì)。纖維素是這種微生物可利用的唯一碳源和能源。因此，只有能分泌纖維素酶并以纖維素為碳源和能源的微生物才能生長在卷煙紙上平板劃線法稀釋涂布平板法30~300【解析】

由題干可知，用選擇培養(yǎng)基對土壤中的纖維素分解菌進(jìn)行粗篩，可得到以纖維素為唯一碳源和能源的細(xì)菌，再用卷煙紙進(jìn)行細(xì)篩，當(dāng)纖維素被分泌的纖維素酶分解后，卷煙紙被降解，得到降解能力大的細(xì)菌?！驹斀狻浚?）篩選微生物的原理是人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時(shí)抑制其它微生物的生長。（2）長期只以纖維素作碳源的土壤中可能含有目的菌，為自然選擇的結(jié)果，是由于纖維素的選擇作用。（3）卷煙紙只含纖維素而不含其它物質(zhì)，纖維素是這種微生物可利用的唯一碳源和能源。因此，只有能分泌纖維素酶并以纖維素為碳源和能源的微生物才能生長在卷煙紙上。（4）在純化分解纖維素的細(xì)菌時(shí)，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300進(jìn)行計(jì)數(shù)。【點(diǎn)睛】本題考查知識點(diǎn)比較簡單，答題關(guān)鍵在于掌握纖維素分解菌分離的相關(guān)知識。9、胰蛋白酶細(xì)胞懸液防止雜菌污染利用PCR人工擴(kuò)增目的基因?qū)53（目的）基因?qū)敫伟┘?xì)胞肝癌轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌【解析】

本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)和應(yīng)用。分析曲線圖：P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，所以導(dǎo)入P53基因的肝癌細(xì)胞數(shù)目會下降，即曲線2，而普通肝癌細(xì)胞能無限增殖，其數(shù)目不斷上升，即曲線1?！驹斀狻浚?）動物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶處理組織，使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是防止其他細(xì)菌等雜菌的污染。（2）若P53基因兩側(cè)的一段核苷酸序列是已知的，則獲取P53基因的方法通常是利用PCR人工擴(kuò)增目的基因，在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的目的基因。

（3）脂質(zhì)體在這個(gè)操作中的作用是作為運(yùn)載體將P53（目的）基因?qū)敫伟┘?xì)胞。

（4）P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，所導(dǎo)入P53基因的肝癌細(xì)胞數(shù)目下降，而普通肝癌細(xì)胞能無限增殖，其數(shù)目不斷上升，即曲線1是肝癌細(xì)胞，曲線2是轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌細(xì)胞?！军c(diǎn)睛】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：①無菌、無毒的環(huán)境：消毒、滅菌；添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。②營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。③溫度和PH．④一定的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。10、Sau3AⅠ可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能氨芐青霉素用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會破壞Ampr基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞（對氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來都不能桑椹胚或囊胚【解析】

題圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過程，該過程采用了基因工程技術(shù)（目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與表達(dá)）、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。圖中①表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；②表示早期胚胎培養(yǎng)；③表示胚胎移植；④表示產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因牛；⑤表示從轉(zhuǎn)基因牛中獲取目的基因產(chǎn)物?！驹斀狻浚?）根據(jù)表中五種酶的識別序列及切割位點(diǎn)可知，限制酶Sau3AI還可以切割限制酶BstⅠ和限制酶BamHⅠ的識別序列，因此要將人乳蛋白基因插入載體，在只允許用一種限制酶酶切載體和人乳鐵蛋白基因的情況下，應(yīng)選擇限制酶Sau3AI。酶能起催化作用的原理是酶可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能。（2）據(jù)用限制酶Sau3AI切割后會破壞四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞可能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來。（3）根據(jù)表格中各種限制酶的識別序列和切割位點(diǎn)可知，若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接起來，連接部位的6個(gè)堿基對序列為，對于該部位，這兩種酶都不能切開。（4）胚胎分割時(shí)，應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。【點(diǎn)睛】本題結(jié)合圖表，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及其特點(diǎn)；識記基因工程的操作步驟