生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)試題及答案

單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.蛋白質(zhì)定量常用的方法是（）A.斐林試劑法B.雙縮脲法C.班氏試劑法2.下列哪種物質(zhì)不是核酸的組成成分（）A.堿基B.甘油C.磷酸3.淀粉酶的最適pH一般在（）A.2-3B.6-7C.9-104.透析的原理是利用（）A.溶解度差異B.分子大小差異C.電荷差異5.脂肪水解的產(chǎn)物是（）A.氨基酸和甘油B.脂肪酸和甘油C.葡萄糖和甘油6.測(cè)定酶活性時(shí)，通常以底物濃度變化小于多少時(shí)測(cè)得的速度為初速度（）A.5%B.10%C.15%7.紙層析的固定相是（）A.濾紙B.有機(jī)溶劑C.樣品8.蛋白質(zhì)變性后（）A.一級(jí)結(jié)構(gòu)破壞B.溶解度增加C.生物學(xué)活性喪失9.核酸紫外吸收峰在（）nmA.260B.280C.34010.下列哪項(xiàng)不是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的緩沖液（）A.磷酸緩沖液B.硼酸緩沖液C.氫氧化鈉溶液多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.下列屬于蛋白質(zhì)沉淀方法的有（）A.鹽析B.有機(jī)溶劑沉淀C.重金屬鹽沉淀D.生物堿試劑沉淀2.核酸提取過(guò)程中可能用到的試劑有（）A.酚B.氯仿C.乙醇D.醋酸鈉3.影響酶促反應(yīng)速度的因素有（）A.底物濃度B.酶濃度C.溫度D.pH4.下列物質(zhì)能與斐林試劑反應(yīng)的有（）A.葡萄糖B.果糖C.蔗糖D.麥芽糖5.蛋白質(zhì)分離純化的方法有（）A.凝膠過(guò)濾B.離子交換層析C.親和層析D.電泳6.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的離心機(jī)類型有（）A.普通離心機(jī)B.高速離心機(jī)C.超速離心機(jī)D.低速離心機(jī)7.以下哪些屬于糖類的鑒定方法（）A.莫利希試驗(yàn)B.西里瓦諾夫試驗(yàn)C.碘試驗(yàn)D.雙縮脲試驗(yàn)8.下列關(guān)于SDS-PAGE說(shuō)法正確的是（）A.用于蛋白質(zhì)分離B.SDS使蛋白質(zhì)帶負(fù)電C.按分子大小分離D.屬于變性電泳9.測(cè)定蛋白質(zhì)含量的方法有（）A.凱氏定氮法B.紫外吸收法C.考馬斯亮藍(lán)法D.福林-酚試劑法10.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的顯色劑有（）A.茚三酮B.二苯胺C.考馬斯亮藍(lán)D.蘇丹Ⅲ判斷題（每題2分，共10題）1.所有的酶都是蛋白質(zhì)。（）2.蔗糖是還原糖。（）3.蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最大。（）4.溫度越高，酶促反應(yīng)速度一定越快。（）5.紙層析可用于氨基酸的分離鑒定。（）6.核酸和蛋白質(zhì)都有紫外吸收特性。（）7.透析可以去除蛋白質(zhì)溶液中的小分子雜質(zhì)。（）8.凝膠過(guò)濾是按分子電荷大小分離物質(zhì)。（）9.雙縮脲反應(yīng)是檢測(cè)蛋白質(zhì)和多肽的特有反應(yīng)。（）10.脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色。（）簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理。答案：鹽析是向蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，使蛋白質(zhì)表面電荷被中和，水化膜被破壞，導(dǎo)致蛋白質(zhì)在水溶液中的穩(wěn)定性因素去除而沉淀析出。不同蛋白質(zhì)鹽析所需鹽濃度不同，借此可分離蛋白質(zhì)。2.簡(jiǎn)述酶活性測(cè)定的基本條件。答案：需合適底物，其濃度應(yīng)足夠；反應(yīng)體系要有適宜溫度，一般為最適溫度；合適的pH環(huán)境，通常為酶的最適pH；有足夠的緩沖液維持體系穩(wěn)定；酶量要適量，且反應(yīng)時(shí)間合適，多測(cè)初速度。3.簡(jiǎn)述核酸提取的主要步驟。答案：首先破碎細(xì)胞釋放核酸，接著用酚、氯仿等去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，再通過(guò)乙醇沉淀核酸，之后用適當(dāng)緩沖液溶解核酸，最后可對(duì)核酸進(jìn)行濃度和純度測(cè)定。4.簡(jiǎn)述SDS-PAGE分離蛋白質(zhì)的原理。答案：SDS能使蛋白質(zhì)變性并帶上大量負(fù)電荷，消除蛋白質(zhì)原有電荷差異。在電場(chǎng)作用下，蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中按分子大小不同進(jìn)行分離，分子小的遷移快，分子大的遷移慢。討論題（每題5分，共4題）1.在蛋白質(zhì)提取過(guò)程中，如何盡量減少蛋白質(zhì)的損失和變性？答案：選擇合適緩沖液維持pH穩(wěn)定，低溫操作抑制酶活性和減少蛋白質(zhì)變性，避免劇烈攪拌等機(jī)械損傷，加入蛋白酶抑制劑防止蛋白質(zhì)降解，快速完成提取步驟。2.討論酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究的意義。答案：有助于了解酶作用機(jī)制，明確底物濃度、酶濃度等因素對(duì)反應(yīng)速度影響，為酶的應(yīng)用提供理論依據(jù)，如優(yōu)化酶催化反應(yīng)條件，在工業(yè)生產(chǎn)、臨床診斷等領(lǐng)域有重要價(jià)值。3.試討論生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中誤差產(chǎn)生的原因及減少誤差的方法。答案：誤差原因有儀器不準(zhǔn)確、試劑不純、操作不規(guī)范、環(huán)境變化等。減少誤差可校準(zhǔn)儀器，使用純度高試劑，規(guī)范操作，控制實(shí)驗(yàn)環(huán)境穩(wěn)定，多次測(cè)量取平均值。4.結(jié)合實(shí)驗(yàn)，談?wù)劦鞍踪|(zhì)和核酸分離純化方法選擇的依據(jù)。答案：依據(jù)蛋白質(zhì)和核酸的性質(zhì)，如分子大小、電荷、溶解度、親和力等。分子大小差異選凝膠過(guò)濾；電荷不同用離子交換層析；有特定親和力選親和層析；根據(jù)溶解度用鹽析等，還需考慮樣品量、純度要求等。答案單項(xiàng)選擇題1.B2.B3.B4.B5.B6.A7.A8.C9.A10.C多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.A