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TechnicalGuidelinesforHumanParainfluenzaVirusNucleicAcid2025 前 引 附錄A（資料性）痰液標本預處 附錄B（資料性）引物和探針序列及RT-PCR反應體系組 GB19489WS233HumanparainfluenzaSerotypeofReal-timeRT-PCR：實時熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反應（real-timefluorescencequantitativereverse-transcriptionpolymerasechainreaction）RNA：核糖核酸（ribonucleicacid）RNaseP：核糖核酸酶P（ribonucleaseP） RNA提取。K消化或痰液消化液預處理（A）后進行病毒RNA 病毒RNA提取應嚴格遵循試劑盒或全自動核酸提取儀操作說明執(zhí)行，若計劃在24h內使用，需于2℃～8℃保存；如需長期保存，應于-60℃～-80℃超低溫環(huán)境保存，避免反復凍融。 HPIV的核酸檢測（B.1） 配制HPIV四種血清型單通道核酸檢測Real-timeRT-PCR反應體系，包含預混反應緩沖液、逆轉錄/ 45、5min95、5minFAM熒光（HPIV1）、VIC熒光（HPIV2）、CY5熒光（HPIV3）、TexasRed熒光 Ct值＜35.0，出現(xiàn)典型的S 設立陰性對照、陽性對照和提取對照監(jiān)測核酸檢測有效性；設立RNaseP對照監(jiān)測采集的標本陽性對照Ct值<35.0，并且出現(xiàn)典型的SRNasePHPIV核酸檢測結果判定為陰性時，RNaseP對照檢測結果陰性代表采集的標本質量不符合要求。 實驗室應遵循GB19489WS233個人防護和實驗過程中產(chǎn)生的所有廢棄物應遵循GB19489附錄30min～60min，待痰液充分消化后，進行病毒RNA提取。50mL。表A.10.1000.7800.0200.1120.0207.5PH值（25

附錄引物和探針序列及RT-PCR表B.1HPI

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