ICS91.140.30

CCSP49

DB42

湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB42/T2286—2024

地鐵冷卻塔衛(wèi)生管理規(guī)范

Specificationofhygienemanagementformetrocoolingtowers

2024-09-22發(fā)布2024-11-22實(shí)施

湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB42/T2286—2024

目次

前言................................................................................III

1范圍................................................................................1

2規(guī)范性引用文件......................................................................1

3術(shù)語和定義..........................................................................1

4一般要求............................................................................2

5衛(wèi)生要求............................................................................2

6衛(wèi)生管理............................................................................2

7清洗與消毒..........................................................................5

8檢測(cè)要求............................................................................5

9標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施及評(píng)價(jià)......................................................................6

附錄A（資料性）衛(wèi)生巡檢記錄格式示例.................................................7

附錄B（規(guī)范性）冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌定性檢驗(yàn)方法.......................................8

附錄C（資料性）湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見反饋表..................................11

參考文獻(xiàn).............................................................................12

I

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件中的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不負(fù)責(zé)承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。

本文件由武漢市疾病預(yù)防控制中心提出。

本文件由湖北省衛(wèi)生健康委員會(huì)歸口。

本文件起草單位：武漢市疾病預(yù)防控制中心、武漢地鐵集團(tuán)有限公司、武漢中建天創(chuàng)環(huán)境工程有限

公司、湖北省標(biāo)準(zhǔn)化與質(zhì)量研究院。

本文件主要起草人：王懷記、石斌、曾鐵梅、李婳婧、陶懿、李聞?dòng)?、張育娟、劉俊玲、胡勝偉?/p>

何振宇、王一梅、王斌、謝秋琪、徐然、吳宇凡、張靖、畢奎、王佩、劉正丹、王藝璇、曹磊。

本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問，可咨詢湖北省衛(wèi)生健康委員會(huì)，聯(lián)系電話郵箱：

hbszfc@126.com；對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)修改意見建議請(qǐng)反饋至武漢市疾病預(yù)防控制中心，聯(lián)系電話：027-

88851369，郵箱：environment@。

III

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地鐵冷卻塔衛(wèi)生管理規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了地鐵冷卻塔的一般要求、衛(wèi)生要求、衛(wèi)生管理、清洗、消毒和檢測(cè)要求。

本文件適用于地鐵冷卻塔的日常運(yùn)行管理。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T18204.5公共場(chǎng)所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法第5部分：集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)

GB/T29044采暖空調(diào)系統(tǒng)水質(zhì)

GB39800.1個(gè)體防護(hù)裝備配備規(guī)范第1部分:總則

WS10013公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

地鐵metro

在城市中修建的快速、大運(yùn)量、用電力牽引的軌道交通。列車在全封閉的線路上運(yùn)行，位于中心城

區(qū)的線路基本設(shè)在地下隧道內(nèi)，中心城區(qū)以外的線路一般設(shè)在高架橋或地面上。

[來源：GB50157-2013，2.0.1，有修改]

3.2

嗜肺軍團(tuán)菌legionellapneumophila

是一種有鞭毛，革蘭氏陰性，軍團(tuán)菌屬多形態(tài)性的短小球桿菌。可通過空氣傳播，自呼吸道侵入，

導(dǎo)致肺部炎癥。

[來源：SN/T4283.5-2015，3.4，有修改]

3.3

冷卻塔thecoolingtower

冷卻塔是一種將水冷卻的裝置，水在其中與流過的空氣進(jìn)行熱交換、質(zhì)交換，致使水溫下降,它廣

泛應(yīng)用于空調(diào)循環(huán)水系統(tǒng)。

3.4

冷卻塔水thecoolingtowerwater

為冷卻塔內(nèi)水體及循環(huán)冷卻水體的集合，是集中空調(diào)熱量傳輸?shù)拿浇?，可通過冷卻塔進(jìn)行熱量交換。

3.5

冷卻水coolingwater

是指經(jīng)過冷卻塔等熱交換設(shè)施處理過的循環(huán)水，起到冷卻主機(jī)的作用。

1

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3.6

系統(tǒng)性清洗與消毒systematiccleaninganddisinfection

對(duì)冷卻塔填充料、蓄水池、系統(tǒng)管路、過濾器等進(jìn)行清洗后，經(jīng)過殺菌滅藻、鈍化預(yù)膜等處理方式

后，以達(dá)到對(duì)冷卻塔系統(tǒng)全面除菌滅藻的工藝。

3.7

經(jīng)常性清洗與消毒regularcleaninganddisinfection

對(duì)冷卻塔填充料、蓄水池等進(jìn)行清洗，維持性投放消毒劑，以達(dá)到維持冷卻塔水體質(zhì)量和消毒劑濃

度的日常性保養(yǎng)工藝。

3.8

自動(dòng)監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備automaticmonitoringdosingequipment

通過動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)冷卻塔水嗜肺軍團(tuán)菌濃度，通過噴灑、滴注等方式，對(duì)冷卻塔填充料、蓄水池、系統(tǒng)

管路、過濾器等進(jìn)行持久性消毒，以實(shí)現(xiàn)對(duì)冷卻塔嗜肺軍團(tuán)菌進(jìn)行消殺的設(shè)備。

4一般要求

4.1冷卻塔選址應(yīng)設(shè)置于夏季主導(dǎo)風(fēng)向的下風(fēng)向，并遠(yuǎn)離人員聚集區(qū)域、建筑物新風(fēng)口和自然通風(fēng)口，

遠(yuǎn)離高溫和有毒有害氣體；與新風(fēng)入口、門、窗等建筑進(jìn)氣口有效距離宜保持7.5米以上。對(duì)于因既往

設(shè)計(jì)，冷卻塔與建筑進(jìn)氣口沒達(dá)到有效距離（7.5米）的應(yīng)設(shè)置有效阻擋。

4.2冷卻水系統(tǒng)應(yīng)設(shè)置持續(xù)消毒裝置或加注消毒劑的入口，有條件的宜加裝自動(dòng)監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備。

4.3冷卻塔應(yīng)設(shè)置收水器，宜增設(shè)除霧器和導(dǎo)流裝置。

4.4冷卻塔池內(nèi)側(cè)應(yīng)平滑，排水口應(yīng)設(shè)在冷卻塔系統(tǒng)最低部位。

4.5冷卻塔宜采用分離器、側(cè)流過濾和盆式過濾設(shè)備，以降低冷卻系統(tǒng)中環(huán)境懸浮物的濃度，減少微

生物滋生條件。

5衛(wèi)生要求

5.1環(huán)境衛(wèi)生要求

冷卻塔周邊環(huán)境整潔、干凈，不應(yīng)有積水坑。冷卻塔外壁無明顯附著物。冷卻塔塔內(nèi)不應(yīng)有落葉、

紙張等生活垃圾。

5.2水質(zhì)衛(wèi)生要求

冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌不應(yīng)檢出。冷卻塔水水質(zhì)指標(biāo)應(yīng)符合GB/T29044要求。

5.3其他衛(wèi)生要求

在冷卻塔周邊范圍7.5米內(nèi)的氣溶膠中嗜肺軍團(tuán)菌不應(yīng)檢出。

6衛(wèi)生管理

6.1管理機(jī)構(gòu)

冷卻塔所有權(quán)人應(yīng)明確衛(wèi)生相關(guān)管理部門，負(fù)責(zé)冷卻塔衛(wèi)生管理工作。

2

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6.2管理制度

應(yīng)建立衛(wèi)生管理制度，至少包含使用登記、衛(wèi)生巡檢、衛(wèi)生培訓(xùn)、衛(wèi)生檢測(cè)、清洗與消毒、應(yīng)急預(yù)

案、檔案管理等。

6.3使用登記

自冷卻塔建成并交付使用后，應(yīng)及時(shí)登記冷卻塔投入使用情況。

6.4衛(wèi)生巡檢

6.4.1應(yīng)定期對(duì)冷卻塔進(jìn)行巡檢，每周巡檢應(yīng)不少于1次。

6.4.2巡檢應(yīng)檢查以下記錄：

——消毒劑存儲(chǔ)及使用記錄；

——冷卻塔清洗與消毒記錄；

——設(shè)備維護(hù)記錄；

——衛(wèi)生巡檢記錄。

6.4.3各類記錄應(yīng)字跡清晰，內(nèi)容完整。

6.4.4巡檢應(yīng)開展以下衛(wèi)生檢查：

——冷卻塔周邊5米內(nèi)環(huán)境衛(wèi)生檢查；

——冷卻塔塔塔內(nèi)、外壁環(huán)境衛(wèi)生檢查；

——水質(zhì)消毒劑濃度檢查。

注：使用含氯消毒劑消毒的應(yīng)采用有效氯測(cè)定試紙現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定，使用其他消毒劑的應(yīng)采用相應(yīng)的現(xiàn)場(chǎng)快檢設(shè)備測(cè)

定。

6.4.5各處環(huán)境衛(wèi)生應(yīng)符合本文件5.1的要求。

6.4.6衛(wèi)生檢查完成后應(yīng)及時(shí)填寫衛(wèi)生巡檢記錄。衛(wèi)生巡檢記錄格式參見附錄A。

6.5衛(wèi)生培訓(xùn)

6.5.1應(yīng)定期組織冷卻塔衛(wèi)生管理從業(yè)人員的衛(wèi)生培訓(xùn)，每年培訓(xùn)應(yīng)不少于1次。

6.5.2培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)包括冷卻塔相關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、衛(wèi)生管理制度及應(yīng)急預(yù)案要求等。

6.5.3培訓(xùn)形式可以采用線下和線上培訓(xùn)相結(jié)合，應(yīng)滿足培訓(xùn)時(shí)長(zhǎng)和相關(guān)要求。

6.5.4衛(wèi)生管理從業(yè)人員培訓(xùn)合格后方可上崗。

6.6衛(wèi)生檢測(cè)

6.6.1應(yīng)按以下頻次要求開展衛(wèi)生檢測(cè)：

——冷卻塔首次運(yùn)行之前、停用半年及以上再次運(yùn)行之前應(yīng)開展衛(wèi)生檢測(cè)；

——每年開展不少于2次衛(wèi)生檢測(cè)；

——在傳染病流行期間或其他應(yīng)急情況下，可適當(dāng)增加檢測(cè)頻次。

6.6.2應(yīng)委托具有檢測(cè)能力的機(jī)構(gòu)開展衛(wèi)生檢測(cè)，并將相關(guān)檢測(cè)報(bào)告存檔。

6.6.3應(yīng)按以下要求根據(jù)檢測(cè)結(jié)果對(duì)冷卻塔采取衛(wèi)生管理措施：

——冷卻水中未檢出嗜肺軍團(tuán)菌且使用含氯消毒劑的水中游離余氯不低于0.05mg/L；應(yīng)按照本文

件6.7的要求開展清洗與消毒，有自動(dòng)監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備的，宜按1次/天頻率記錄冷卻水中消

毒劑濃度；

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——冷卻塔水中未檢出嗜肺軍團(tuán)菌且使用含氯消毒劑的水中游離余氯低于0.05mg/L；應(yīng)盡快開展

1次經(jīng)常性清洗與消毒，有自動(dòng)監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備的，應(yīng)在清洗與消毒后，按1次/12小時(shí)頻率

記錄冷卻塔水中消毒劑濃度；

——冷卻塔水中和冷卻塔周圍氣溶膠中均檢出嗜肺軍團(tuán)菌；應(yīng)立即停用冷卻塔，并自收到檢測(cè)報(bào)

告之日起5日內(nèi)，開展1次系統(tǒng)性清洗與消毒，有自動(dòng)監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備的，應(yīng)在清洗與消毒

后，按1次/2小時(shí)頻率記錄冷卻塔水中消毒劑濃度。如上述措施啟用后，仍檢出嗜肺軍團(tuán)

菌，則應(yīng)上報(bào)衛(wèi)生行政部門，對(duì)其原因開展環(huán)境衛(wèi)生學(xué)調(diào)查。

6.7清洗與消毒

6.7.1應(yīng)按以下頻次要求對(duì)冷卻塔清洗與消毒：

——每月開展經(jīng)常性清洗與消毒不少于1次；有冷卻塔無法停機(jī)清洗情況的，每周應(yīng)按照本文件

7.3d)的要求開展不少于1次消毒。

——初次啟用或者停用半年后再次啟用的，啟用前應(yīng)開展1次系統(tǒng)性清洗與消毒；

——發(fā)現(xiàn)冷卻塔填充料、蓄水池、系統(tǒng)管路出現(xiàn)明顯污物時(shí)，應(yīng)立即開展1次經(jīng)常性清洗與消

毒。

6.7.2宜委托具有從事集中空調(diào)系統(tǒng)清洗與消毒的專業(yè)技術(shù)服務(wù)單位開展清洗與消毒，并將清洗與消

毒過程制成影像資料存檔。

6.8應(yīng)急預(yù)案

6.8.1應(yīng)制定地鐵冷卻塔日常運(yùn)行期間應(yīng)急預(yù)案。

6.8.2應(yīng)急預(yù)案應(yīng)包括但不限于以下內(nèi)容：

——對(duì)冷卻塔進(jìn)行應(yīng)急處理的責(zé)任人；

——冷卻塔的衛(wèi)生檢測(cè)要求和頻次；

——冷卻塔的清洗與消毒要求和頻次；

——冷卻塔緊急狀態(tài)下的啟停制度。

6.8.3應(yīng)定期進(jìn)行應(yīng)急預(yù)案的演練，每年演練不少于1次。

6.9檔案管理

6.9.1應(yīng)建立冷卻塔衛(wèi)生管理檔案，明確檔案管理的責(zé)任人。

6.9.2冷卻塔衛(wèi)生檔案應(yīng)包括但不限于以下內(nèi)容：

——相關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范；

——衛(wèi)生管理制度；

——冷卻塔設(shè)計(jì)說明書及竣工圖紙、竣工驗(yàn)收材料；

——從業(yè)人員培訓(xùn)記錄；

——冷卻塔維護(hù)、維修記錄；

——衛(wèi)生巡檢記錄；

——冷卻水嗜肺軍團(tuán)菌、水質(zhì)歷年檢測(cè)報(bào)告；

——冷卻塔清洗與消毒記錄；

——應(yīng)急預(yù)案及演練記錄。

6.9.3冷卻塔衛(wèi)生管理檔案應(yīng)由專人管理，分類記錄，至少保存2年。其中，冷卻塔設(shè)計(jì)說明書及竣

工圖紙、竣工驗(yàn)收材料、應(yīng)急預(yù)案及演練記錄應(yīng)隨冷卻塔定期整理并長(zhǎng)期保存。

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7清洗與消毒

7.1清洗部位

冷卻塔的清洗部位為塔體、風(fēng)扇、風(fēng)柵、填充料、內(nèi)壁、外壁、集水槽和過濾器、管道和配件。

7.2系統(tǒng)性清洗與消毒

系統(tǒng)性清洗與消毒應(yīng)包含以下步驟：

a)關(guān)閉冷卻塔風(fēng)扇，將補(bǔ)充水閥打開，運(yùn)行循環(huán)泵,同時(shí)關(guān)閉集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)新風(fēng)風(fēng)機(jī)；

b)關(guān)閉補(bǔ)水閥，排干冷卻循環(huán)水，用高壓水槍清洗冷卻盤、填充料、蓄水池等，清洗其附著的灰

塵、污泥和苔蘚；

c)對(duì)塔壁、風(fēng)扇等無法浸泡消毒部位，采用濃度50mg/L～100mg/L含氯消毒劑噴灑。在可浸泡消

毒部位，在冷卻塔循環(huán)水中添加含氯消毒劑、滅藻劑及分散劑，浸泡24小時(shí)，期間保持其游

離余氯濃度在50mg/L～100mg/L；

d)排干冷卻循環(huán)水并重新注入系統(tǒng)，重復(fù)步驟b)、c)至少1次，以除去所有可見的藻類薄膜；

e)排干冷卻循環(huán)水；

f)徹底清潔所有與水接觸的區(qū)域，包括塔體、集水槽、進(jìn)水口、過濾器、過濾網(wǎng)、管道和配件，

做到表面無污物；

g)重復(fù)步驟b)、c)至少1次；

h)排干冷卻循環(huán)水并重新注入系統(tǒng)，添加鈍化預(yù)膜劑、阻垢緩蝕劑、緩釋含氯消毒劑，如有自動(dòng)

監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備則應(yīng)啟動(dòng)自動(dòng)監(jiān)測(cè)、投藥程序，運(yùn)行期間保持游離余氯濃度在1mg/L～3mg/L；

i)清洗與消毒完成后的48小時(shí)內(nèi)對(duì)嗜肺軍團(tuán)菌的衛(wèi)生檢測(cè)，確認(rèn)清洗與消毒效果。

7.3經(jīng)常性清洗與消毒

經(jīng)常性清洗與消毒應(yīng)包含以下步驟：

a)關(guān)閉冷卻塔風(fēng)扇，將補(bǔ)充水閥打開，運(yùn)行循環(huán)泵,同時(shí)關(guān)閉集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)新風(fēng)風(fēng)機(jī)；

b)用高壓水槍清洗冷卻盤、填充料、蓄水池等，清洗其附著的灰塵、污泥和苔蘚；

c)排干冷卻循環(huán)水并重新注入系統(tǒng)，重復(fù)上述步驟至少1次，直至排水無肉眼可見物為止；

d)添加鈍化預(yù)膜劑、阻垢緩蝕劑、緩釋含氯消毒劑，如有自動(dòng)監(jiān)測(cè)投藥設(shè)備則應(yīng)啟動(dòng)自動(dòng)監(jiān)測(cè)、

投藥程序。運(yùn)行期間保持游離余氯濃度在1～3mg/L。

7.4清洗與消毒個(gè)人防護(hù)裝備

清洗消毒個(gè)體防護(hù)裝備選用應(yīng)按GB39800.1的要求執(zhí)行。

8檢測(cè)要求

8.1檢測(cè)條件

檢測(cè)冷卻塔水衛(wèi)生指標(biāo)期間，空調(diào)機(jī)組應(yīng)處于正常制冷工況。

8.2檢測(cè)指標(biāo)

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冷卻塔衛(wèi)生檢測(cè)常規(guī)指標(biāo)同本文件5.2要求的項(xiàng)目；傳染病流行期間或其他應(yīng)急情況下，應(yīng)在常規(guī)

指標(biāo)基礎(chǔ)上增加本文件5.3要求的指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。

8.3檢測(cè)對(duì)象

正常運(yùn)行的地鐵冷卻塔均應(yīng)開展檢測(cè)。檢測(cè)不合格的應(yīng)重新采樣，應(yīng)復(fù)檢合格后，該冷卻塔方可正

常投入運(yùn)行。

8.4檢測(cè)方法

8.4.1冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌指標(biāo)檢驗(yàn)應(yīng)按照GB/T18204.5或本文件附錄B執(zhí)行，其中GB/T18204.5

為冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌檢測(cè)仲裁法。

8.4.2氣溶膠中嗜肺軍團(tuán)菌指標(biāo)檢驗(yàn)應(yīng)按照GB/T18204.5執(zhí)行。

8.4.3冷卻塔水水質(zhì)指標(biāo)檢驗(yàn)應(yīng)按照GB/T29044要求執(zhí)行。

8.5判定

冷卻水及冷卻塔周邊氣溶膠中不應(yīng)檢出嗜肺軍團(tuán)菌。冷卻塔水水質(zhì)指標(biāo)應(yīng)按照GB/T29044要求執(zhí)

行。

9標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施及評(píng)價(jià)

9.1結(jié)合本文件包括地鐵冷卻塔設(shè)計(jì)要求、管理要求、檢測(cè)要求、清洗與消毒要求等內(nèi)容，針對(duì)本文

件適用單位制作相關(guān)培訓(xùn)方案。本文件適用單位包括但不限于地鐵冷卻塔設(shè)計(jì)單位、使用單位、管理單

位、檢測(cè)單位等四類，宣貫方案以合并宣貫方式開展。

9.2在標(biāo)準(zhǔn)頒布實(shí)施后的1月內(nèi)，組織標(biāo)準(zhǔn)主要起草人制定完成標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案，并報(bào)標(biāo)準(zhǔn)歸口單位備

案，同時(shí)編制完成標(biāo)準(zhǔn)宣貫講義；6個(gè)月內(nèi)，以線下或線上等培訓(xùn)或現(xiàn)場(chǎng)互動(dòng)等方式，完成3次以上培

訓(xùn)；以武漢市現(xiàn)有地鐵線路站點(diǎn)為示范點(diǎn)，開展1次以上的現(xiàn)場(chǎng)模擬演練。

9.3標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施主要通過標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位的各類會(huì)議、培訓(xùn)和演示等活動(dòng)中開展。標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的重點(diǎn)是

推進(jìn)地鐵冷卻塔設(shè)計(jì)、衛(wèi)生管理、清洗與消毒等要求。

9.4標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位建立標(biāo)準(zhǔn)宣貫辦公室，定期組織開展標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施檢查。做好標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施驗(yàn)證記錄，

暢通標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息采集的方式方法和反饋渠道，定期整理并處理收集到的意見建議。依據(jù)《中華人民共

和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法》落實(shí)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施評(píng)價(jià)。

9.5在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施一定時(shí)間后，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案，開展標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施效果評(píng)價(jià)分析，總結(jié)實(shí)施經(jīng)驗(yàn)成效,梳

理存在的薄弱環(huán)節(jié)，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的評(píng)價(jià)主要是評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的效果，主要從標(biāo)準(zhǔn)的適用性、實(shí)用性、衛(wèi)生

效果等方面進(jìn)行評(píng)價(jià)，還應(yīng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施帶來的問題，以便為未來改進(jìn)提供參考。

9.6適時(shí)向?qū)I(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)和標(biāo)準(zhǔn)歸口管理單位反饋情況，提出標(biāo)準(zhǔn)推廣、修改、補(bǔ)充、完善

或者廢止等意見建議。

9.7標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見反饋表相關(guān)示例見附錄C。

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A

A

附錄A

（資料性）

衛(wèi)生巡檢記錄格式示例

圖A.1給出了衛(wèi)生巡檢記錄格式示例。

圖A.1衛(wèi)生巡檢記錄格式示例

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B

B

附錄B

（規(guī)范性）

冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌定性檢驗(yàn)方法

B.1儀器設(shè)備

除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：

——采樣瓶（不含硫代硫酸鈉）：具螺旋帽或磨口塞的250mL、500mL廣口玻璃瓶。

——量筒：100mL（具1mL刻度）。

——5ml無菌帶蓋試管。

——無菌管：1mL（具0.01mL刻度）或微量移液器及無菌吸頭。

——96孔定量盤：含6個(gè)大孔，90個(gè)小孔。其中，每個(gè)小孔可容納0.187mL樣品，大孔可容納

20mL樣品。可采用經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌的市售商品化成品。

——恒溫培養(yǎng)箱：37℃±0.5℃，培養(yǎng)箱內(nèi)濕度保持在80%；39℃±0.5℃，培養(yǎng)箱內(nèi)濕度保持在

80%。

——冰箱：2℃～5℃及-10℃～-20℃。

——程控定量封口機(jī)：用于96孔定量盤的封口。

B.2培養(yǎng)基和試劑

主要培養(yǎng)基和試劑如下：

——Legiolert試劑：每100mL樣品需加入培養(yǎng)基粉末2.02g。亦可選用市售商品化制品。

——預(yù)處理試劑：有機(jī)酸化合物2.04g。亦可選用市售商品化制品。

——無菌磷酸鹽緩沖液：貯存液：稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500mL蒸餾水中，用大約175mL

的1mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH，用蒸餾水定容稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液：取

貯存液1.25mL，用蒸餾水定容稀釋至1000mL，分裝于適宜容器中，121℃高壓滅菌15min。

——硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1g/mL）。

——無菌水。

——NSI定量質(zhì)控菌株，或美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌庫標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC33152）。

B.3樣品

B.3.1樣品采集

B.3.1.1點(diǎn)位布設(shè)

點(diǎn)位布設(shè)按WS10013中相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

B.3.1.2采樣點(diǎn)數(shù)量

每個(gè)冷卻塔采集1個(gè)樣品。

B.3.1.3采樣位置

冷卻水采樣點(diǎn)設(shè)置在距塔壁20cm，液面下10cm處。

B.3.1.4采樣量

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采集冷卻水500mL。

B.3.1.5個(gè)人防護(hù)

采集樣品時(shí)應(yīng)做好個(gè)人防護(hù)，佩戴護(hù)目鏡、口罩、一次性手套。

B.3.2樣品保存

采集的樣品應(yīng)在2天內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，不必冷凍，但要避光和防止受熱，室溫下儲(chǔ)存不應(yīng)超過15天。

B.4分析步驟

B.4.1接種

接種步驟如下：

a)量取100mL無菌水于錐形瓶或取樣瓶，加入Legiolert試劑，蓋上瓶蓋，搖勻直至試劑完全溶

解（溶液或保持渾濁狀），置于一旁待用；

b)無菌移取2mL水樣至已加入2mL預(yù)處理試劑的無菌帶蓋試管，混合均勻，室溫放置60s（±5

s）后，再次混合試管內(nèi)液體，取2mL至無菌錐形瓶或取樣瓶中，混合均勻；

c)將錐形瓶或取樣瓶中液體倒入96孔定量盤，輕輕拍打趕出氣泡，使用程控定量封口機(jī)對(duì)定量

盤進(jìn)行封口。

B.4.2培養(yǎng)

培養(yǎng)要求如下：

a)封口后的定量盤放入培養(yǎng)箱37±0.5℃培養(yǎng)7天，培養(yǎng)箱內(nèi)濕度保持在80%。定量盤紙面一面

朝下，孔格一面朝上，最大限度減少液體損失。定量盤疊放時(shí)，需錯(cuò)開疊放，即定量盤的大孔

位于小孔之上，增加穩(wěn)固性。疊放不要超過10個(gè)定量盤。

b)培養(yǎng)3天后開始觀察至第7天，根據(jù)結(jié)果判讀觀察結(jié)果。

B.4.3對(duì)照試驗(yàn)

B.4.3.1陽性對(duì)照檢測(cè)

陽性對(duì)照檢測(cè)步驟如下：

a)從-10℃冰箱取出NSI定量質(zhì)控菌株，在室溫平衡10min～15min后，將質(zhì)控菌株轉(zhuǎn)移入預(yù)先

準(zhǔn)備好的100mL無菌磷酸鹽緩沖液中，輕輕振蕩，待全部溶解后在30min內(nèi)操作。或?qū)⒁恍?biāo)

準(zhǔn)菌株培養(yǎng)物加入100mL無菌水中待用，作為陽性水樣；

b)加入Legiolert試劑到陽性樣品中，蓋上瓶蓋，充分混勻。將上述處理好的樣品全部倒入96

孔定量盤中。輕拍或輕彈定量盤，以排出空氣，立即放入程控定量封口機(jī)中封口；

c)在39℃±0.5℃的溫度下，培養(yǎng)7天。根據(jù)A.5觀察結(jié)果。

B.4.3.2陰性對(duì)照檢測(cè)

以100mL無菌水為陰性水樣，加入Legiolert試劑混合均勻，倒入96孔定量盤中。輕拍或輕彈定量盤，

以排出空氣，立即放入程控定量封口機(jī)中封口。在37℃±0.5℃的溫度下，培養(yǎng)7天。根據(jù)A.5觀察結(jié)果。

B.5結(jié)果判讀

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將培養(yǎng)7天后的96孔定量盤根據(jù)表A.1進(jìn)行結(jié)果判讀，顏色顯褐色或比陰性對(duì)照渾濁的判斷為嗜肺

軍團(tuán)菌陽性。

表B.196孔定量盤結(jié)果呈現(xiàn)及判斷

外觀嗜肺軍團(tuán)菌結(jié)果

相對(duì)陰性對(duì)照而言，無論渾濁與否，任何顯褐色的跡象陽性

相對(duì)陰性對(duì)照而言，無論是否顯褐色，濁度大于陰性對(duì)照陽性

如顏色與濁度方面，與陰性對(duì)照無差異陰性

注：Legiolert試劑的培養(yǎng)時(shí)間為7天。在7天培養(yǎng)內(nèi)出現(xiàn)的陽性結(jié)果和7天后顯示的陰性檢測(cè)結(jié)果均有效。僅發(fā)生

渾濁度變化表示嗜肺軍團(tuán)菌的生長(zhǎng)，但指示劑還沒有很強(qiáng)或很快的顯露出來。

B.6結(jié)果報(bào)告

冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌測(cè)定結(jié)果：若96孔均為陰性，可報(bào)告為嗜肺軍團(tuán)菌未檢出。若96孔有任意1孔

為陽性，可報(bào)告為嗜肺軍團(tuán)菌檢出。

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附錄C

（資料性）

湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見反饋表

湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見反饋表如表C.1所示。

表C.1湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見反饋表

標(biāo)準(zhǔn)名稱及編號(hào)

該標(biāo)準(zhǔn)與當(dāng)前所在地的產(chǎn)業(yè)或社會(huì)發(fā)展水平是否相匹