ICS65.202.20

CCSB31

45

廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB45/T2572—2022

抗（耐）枯萎病香蕉種質(zhì)鑒選技術(shù)規(guī)程

Technicalregulationsforidentificationandscreeningofbanana

germplasmresistant(tolerant)toFusariumwilt

2022-08-25發(fā)布2022-09-30實(shí)施

廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)布

DB45/T2572—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出、歸口并宣貫。

本文件起草單位：廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所。

本文件主要起草人：周維、黃素梅、韋紹龍、李朝生、韋弟、覃柳燕、韋莉萍、田丹丹、何章飛、

龍盛風(fēng)、黃曲燕、李寶深、李佳林、黃典紅。

I

DB45/T2572—2022

抗（耐）枯萎病香蕉種質(zhì)鑒選技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件確定了抗（耐）枯萎病香蕉種質(zhì)鑒選的程序、界定了香蕉抗枯萎病種質(zhì)鑒選的術(shù)語(yǔ)和定義、

規(guī)定了苗期鑒選、田間鑒選的操作要求等。

本文件適用于廣西壯族自治區(qū)行政區(qū)域內(nèi)抗(耐)枯萎病香蕉種質(zhì)的鑒選。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T1807香蕉鐮刀菌枯萎病診斷及疫情處理規(guī)范

NY/T2248熱帶作物品種資源抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)程香蕉葉斑病、香蕉枯萎病和香蕉根結(jié)線蟲

病

NY/T5022無(wú)公害食品香蕉生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

SN/T2665香蕉枯萎病菌檢疫鑒定方法

DB45/T1759香蕉二級(jí)組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

NY/T1807、NY/T2248及SN/T2665界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

人工接種鑒定artificialinoculationidentification

按一定量將收集的病原菌接種到參鑒種質(zhì)材料，創(chuàng)造發(fā)病條件，根據(jù)參鑒種質(zhì)材料的抗性表現(xiàn)和發(fā)

病程度確定參鑒種質(zhì)抗性級(jí)別的一種方法。

自然發(fā)病鑒定non-inoculationidentification

根據(jù)參鑒種質(zhì)在田間自然發(fā)病感染誘發(fā)程度，確定參鑒種質(zhì)抗性級(jí)別的鑒定方法。

苗期鑒選identificationandscreeningintheseedlingstage

在溫室內(nèi)采用人工接種鑒定的方法，將參鑒種質(zhì)無(wú)病二級(jí)組培苗傷根后移栽至含規(guī)定病原菌孢子濃

度的基質(zhì)中，28℃條件下種植一定時(shí)間后，調(diào)查各個(gè)參鑒種質(zhì)發(fā)病情況，經(jīng)結(jié)果分析確定各個(gè)香蕉參

鑒種質(zhì)的抗性水平，選出符合田間鑒選的高抗種質(zhì)要求的一種方法。

田間鑒選identificationandscreeninginthefield

在枯萎病病區(qū)選擇試驗(yàn)地種植經(jīng)苗期鑒選的抗性種質(zhì)，調(diào)查各個(gè)參鑒種質(zhì)在不同生長(zhǎng)時(shí)期發(fā)病程度，

經(jīng)結(jié)果分析確定各個(gè)香蕉種質(zhì)的抗性水平,選出對(duì)枯萎病具有抗性植株的一種方法。

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DB45/T2572—2022

病情指數(shù)校正系數(shù)(K1)sicknessindexcorrectionfactor（K1）

經(jīng)過(guò)理論推算與實(shí)際結(jié)果驗(yàn)證相結(jié)合，確定一個(gè)合理數(shù)值，使用該數(shù)值與對(duì)照品種的病情指數(shù)相除

所得的比值。

發(fā)病率校正系數(shù)(K2)incidencecorrectionfactor（K2）

經(jīng)過(guò)理論推算與實(shí)際結(jié)果驗(yàn)證相結(jié)合，確定一個(gè)合理數(shù)值，使用該數(shù)值與對(duì)照品種的發(fā)病率相除所

得的比值。

相對(duì)病情指數(shù)relativediseaseindex（RDI）

參鑒種質(zhì)的實(shí)際病情指數(shù)與病情指數(shù)校正系數(shù)的乘積。

相對(duì)發(fā)病率relativeincidencerate（RIR）

參鑒種質(zhì)的實(shí)際發(fā)病率與發(fā)病率校正系數(shù)的乘積。

4技術(shù)流程

抗（耐）枯萎病香蕉種質(zhì)鑒選技術(shù)流程如圖1所示。

苗期抗病苗期抗（耐）病

參鑒種質(zhì)苗期鑒選田間鑒選

性評(píng)價(jià)種質(zhì)篩選

田間抗（耐）病種田間抗病

質(zhì)篩選性評(píng)價(jià)

圖1抗（耐）枯萎病香蕉種質(zhì)鑒選技術(shù)流程

5苗期鑒選

參鑒品種（系）的要求

參鑒種質(zhì)以6～8葉的無(wú)病二級(jí)香蕉組培苗為宜，二級(jí)組培苗的劃分按DB45/T1759的規(guī)定執(zhí)行。

病原菌的分離、培養(yǎng)及致病性鑒定

按SN/T2665的規(guī)定執(zhí)行。

病原菌培養(yǎng)基質(zhì)制備

將椰糠、玉米粉和水按質(zhì)量比2:10:7的比例混合均勻，分裝在玻璃瓶中，高溫高壓滅菌（121℃，

20?min）二次。無(wú)菌條件下，將在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)1周的Foc4菌餅（直徑0.8?cm～1.0?cm）接種于高壓

滅菌二次后的基質(zhì)中，28℃，暗培養(yǎng)21d。將培養(yǎng)Foc4的基質(zhì)碾碎混勻，取10?g基質(zhì)加90?mL無(wú)菌水稀釋，

結(jié)合梯度稀釋法，顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，并計(jì)算出基質(zhì)中Foc4分生孢子濃度。

2

DB45/T2572—2022

鑒選基質(zhì)制備

根據(jù)5.3所得病原基質(zhì)接種體的Foc4孢子濃度，將病原基質(zhì)接種體與未種植過(guò)植物的新椰糠按照一

定比例混勻，使病原基質(zhì)中Foc4分生孢子濃度達(dá)105個(gè)/g～106個(gè)/g，用于香蕉苗期種質(zhì)鑒選。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)

參鑒種質(zhì)、對(duì)照品種的小區(qū)處理采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，4次重復(fù)，每小區(qū)種植株數(shù)10～30株。每

10份參鑒種質(zhì)設(shè)1份已知感病品種作為對(duì)照，參鑒種質(zhì)少于10份時(shí)設(shè)1份已知感病品種作為對(duì)照，對(duì)照品

種宜采用高感品種巴西蕉或威廉斯。

接種方法

苗期抗性鑒定宜通過(guò)傷根法進(jìn)行人工接種。將5～6葉參鑒香蕉種質(zhì)的無(wú)病二級(jí)組培苗取出，用剪刀

將組培苗2～3條根，距離根尖0.5?cm處剪傷后，種植到按5.4要求制作的鑒選基質(zhì)中，正常水肥管理。

調(diào)查及計(jì)算方法

5.7.1接種30?d后觀察并調(diào)查植株外觀發(fā)病情況，第40?d調(diào)查每株香蕉苗的外部及內(nèi)部枯萎病癥狀。

按照表B.1及圖B.1的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查植株內(nèi)部及外部癥狀的病害級(jí)別，按照表C.1的格式記錄。

5.7.2根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì)結(jié)果，按式（1）計(jì)算種質(zhì)材料的病情指數(shù)（DI），按式（2）（3）計(jì)算校正指

數(shù)及相對(duì)病情指數(shù)，所得結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后一位。

··················································(1)

??×??

式中：??=