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過繼免疫細胞治療基礎(chǔ)篇-2血液第一頁,共22頁。患者:提供血液健康人:提供血液可制備產(chǎn)品:NK、CIK、AIL、DC-CIK、DC、iAPA可制備產(chǎn)品:NK、CIK、AIL血源選擇第二頁,共22頁。采集方式靜脈采集單采機采集適用于:用血量少的產(chǎn)品,如NK、CIK、AIL、適用于:所有產(chǎn)品對患者要求:體質(zhì)好,靜脈通道通暢。對患者要求:適用于患者身體狀況較廣。第三頁,共22頁?;颊咄庵苎?0ml采血試管紫頭EDTA采血管綠頭肝素鈉采血管適用于NK產(chǎn)品以外的外周血抗凝、儲運。適用于所有產(chǎn)品以外的外周血抗凝、儲運。注意:綠頭有肝素鈉、肝素鋰兩種,我們是肝素鈉。采集數(shù)量:>8-10管選擇那種試管?采集試管選擇第四頁,共22頁。外周血采集最佳部位第五頁,共22頁。采集用具,采集靜脈名稱靜脈采集獲得的血液第六頁,共22頁。德國Fresenius集團公司生產(chǎn)的COM.TEC血細胞分離機單采機采集單采機獲得的細胞產(chǎn)品第七頁,共22頁。冷鏈運輸工具冷鏈運輸箱監(jiān)測用溫度計冰袋第八頁,共22頁。血液離心后各成分分布血液由血漿(plasma)+血細胞(bloodcell)第九頁,共22頁。白細胞紅細胞血小板有粒白細胞無粒白細胞嗜酸性粒細胞中性粒細胞
淋巴細胞(CIK等相關(guān)產(chǎn)品所需)單核細胞(DC類細胞產(chǎn)品產(chǎn)品所需)血細胞約占血液容積的45%*血象:對血細胞形態(tài)、數(shù)量、比例和血紅蛋白含量的測定嗜堿性粒細胞第十頁,共22頁。造血干細胞分化為各種血細胞制備CIK所需的T淋巴細胞制備DC所需的單核細胞第十一頁,共22頁。培養(yǎng)CIK、AIL、NK細胞培養(yǎng)DC細胞第十二頁,共22頁。單核細胞光鏡和TEM單核細胞第十三頁,共22頁。單核細胞數(shù)量:3%~8%直徑:14~20μm(體積最大的白細胞)形態(tài):核卵圓/腎形/馬蹄形/不規(guī)則形,染色質(zhì)著色淺
胞質(zhì)豐富,灰藍色,含嗜天青顆粒
第十四頁,共22頁。功能:具有活躍的變形運動和趨化能力在血液停留1~5天,進入結(jié)締組織變?yōu)榫奘杉毎淌僧愇?、衰老的細胞,分泌生物活性物質(zhì),參與免疫應(yīng)答單核細胞第十五頁,共22頁。淋巴細胞第十六頁,共22頁。
數(shù)量:25%~30%光鏡形態(tài):小淋巴細胞:6~8μm,胞質(zhì)少,強嗜堿性,核圓有側(cè)凹,染色質(zhì)塊狀著色深中淋巴細胞:9~12μm,胞質(zhì)較多,含少量嗜天青顆粒,核染色質(zhì)較疏松,著色略淺大淋巴細胞:13~20μm,主要存在于組織中電鏡結(jié)構(gòu):胞質(zhì)內(nèi)含豐富的游離核糖體,少量線粒體和高爾基復(fù)合體,核仁常見功能:參與免疫應(yīng)答淋巴細胞第十七頁,共22頁。分類:
胸腺依賴淋巴細胞(T細胞):參與細胞免疫骨髓依賴淋巴細胞(B細胞):參與體液免疫自然殺傷細胞(NK細胞):非特異殺傷某些腫瘤
細胞和病毒感染細胞淋巴細胞第十八頁,共22頁。在符合GMP標準的實驗室里制備第十九頁,共22頁。離心獲得的淋
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