N-乙酰半胱氨酸在系統(tǒng)性紅斑狼瘡治療中的實驗與臨床協(xié)同效應探究一、引言1.1研究背景與意義系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SystemicLupusErythematosus，SLE）是一種復雜的自身免疫性疾病，其發(fā)病機制涉及遺傳、環(huán)境、性激素和免疫反應等多因素。在全球范圍內(nèi)，SLE的發(fā)病率呈上升趨勢，且不同地區(qū)和種族間存在顯著差異。據(jù)統(tǒng)計，在亞洲地區(qū)，SLE的發(fā)病率約為每10萬人中30-50例，而在非洲裔人群中，這一數(shù)字更高。我國作為人口大國，SLE患者數(shù)量眾多，給社會和家庭帶來了沉重的負擔。SLE患者的免疫系統(tǒng)會錯誤地攻擊自身組織和器官，導致多系統(tǒng)受累。皮膚方面，常出現(xiàn)紅斑、皮疹，其中蝶形紅斑是SLE的典型癥狀之一；關節(jié)受累時，表現(xiàn)為疼痛、腫脹、僵硬，嚴重影響患者的活動能力；腎臟受累則可能引發(fā)狼瘡腎炎，導致蛋白尿、血尿，甚至發(fā)展為腎衰竭；血液系統(tǒng)受累可出現(xiàn)貧血、白細胞減少、血小板減少等癥狀；心血管系統(tǒng)受累會增加動脈粥樣硬化、心肌梗死等疾病的發(fā)生風險。這些癥狀不僅嚴重影響患者的生活質(zhì)量，還可能危及生命。目前，SLE的治療主要依賴于糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等藥物。糖皮質(zhì)激素雖能迅速控制炎癥，但長期使用會帶來諸多副作用，如骨質(zhì)疏松、感染風險增加、血糖升高、肥胖等；免疫抑制劑如環(huán)磷酰胺、嗎替麥考酚酯等，雖能抑制免疫反應，但也會對骨髓、肝臟、腎臟等器官產(chǎn)生毒性作用，且部分患者對這些藥物的治療反應不佳。此外，傳統(tǒng)治療方法難以實現(xiàn)SLE的完全緩解，患者往往需要長期服藥，疾病復發(fā)率較高。因此，開發(fā)新的治療方法和藥物，提高SLE的治療效果，降低藥物副作用，成為當前醫(yī)學領域亟待解決的問題。N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）作為一種抗氧化劑，在臨床上已被廣泛應用于呼吸系統(tǒng)疾病等的治療。其具有獨特的抗氧化作用機制，能夠增加細胞內(nèi)谷胱甘肽（GSH）的水平，GSH是細胞內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)，可直接清除自由基，如超氧陰離子、羥自由基等，還能參與維持細胞內(nèi)的氧化還原平衡，保護細胞免受氧化應激損傷。同時，NAC還能調(diào)節(jié)炎癥反應，抑制炎癥因子的釋放，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等，這些炎癥因子在SLE的發(fā)病過程中起著關鍵作用。此外，NAC對免疫系統(tǒng)也有一定的調(diào)節(jié)作用，能夠影響T細胞、B細胞等免疫細胞的功能。基于NAC的這些特性，將其應用于SLE的治療具有重要的理論依據(jù)和潛在價值。通過動物實驗研究NAC對SLE動物模型的治療作用，能夠深入了解其治療機制，為臨床應用提供堅實的實驗基礎。進一步開展臨床協(xié)同作用觀察，探究NAC與臨床免疫抑制劑聯(lián)合使用的效果，有望為SLE患者提供更有效的治療方案，改善患者的預后，減輕患者的痛苦和社會經(jīng)濟負擔。因此，本研究具有重要的科學意義和臨床應用價值，對推動SLE治療領域的發(fā)展具有積極的促進作用。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在SLE的研究方面，國外對SLE的發(fā)病機制進行了深入探索，發(fā)現(xiàn)遺傳因素在SLE發(fā)病中起著重要作用，多個基因位點與SLE的易感性相關，如人類白細胞抗原（HLA）基因家族中的某些等位基因。在環(huán)境因素方面，紫外線照射被證實可誘發(fā)或加重SLE病情，其機制可能與誘導細胞凋亡，釋放自身抗原，激活免疫系統(tǒng)有關。性激素方面，研究表明雌激素可促進B細胞的活化和自身抗體的產(chǎn)生，在SLE發(fā)病中具有重要影響。在治療研究上，國外已開展了多項新型生物制劑的臨床試驗，如貝利木單抗，作為一種針對B淋巴細胞刺激因子（BLyS）的單克隆抗體，可抑制B細胞的存活和分化，減少自身抗體的產(chǎn)生，已被批準用于SLE的治療，多項臨床研究顯示其能有效改善SLE患者的疾病活動度和臨床癥狀。國內(nèi)在SLE研究領域也取得了顯著進展。在發(fā)病機制研究上，對表觀遺傳學調(diào)控在SLE發(fā)病中的作用進行了深入探討，發(fā)現(xiàn)DNA甲基化、組蛋白修飾等表觀遺傳改變可影響免疫細胞的功能和自身抗體的產(chǎn)生。在中醫(yī)中藥治療SLE方面，國內(nèi)進行了大量研究，發(fā)現(xiàn)一些中藥復方或單體成分具有調(diào)節(jié)免疫、抗炎、抗氧化等作用，如雷公藤多苷，在臨床應用中可有效控制SLE患者的病情活動，減少激素用量，降低不良反應。在臨床研究方面，國內(nèi)參與了多項國際多中心臨床試驗，為SLE的治療提供了更多的臨床證據(jù)和治療經(jīng)驗。關于N-乙酰半胱氨酸（NAC）治療SLE的研究，國外有動物實驗研究表明，給予SLE小鼠模型NAC干預后，小鼠體內(nèi)的氧化應激水平顯著降低，血清中抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體水平下降，腎臟病理損傷得到改善，提示NAC對SLE小鼠具有一定的治療作用。在臨床研究方面，有小規(guī)模臨床試驗觀察到，NAC聯(lián)合常規(guī)治療可使SLE患者的疾病活動度評分有所降低，生活質(zhì)量得到一定改善。國內(nèi)對NAC治療SLE的研究也逐步深入。在動物實驗中，研究發(fā)現(xiàn)NAC可調(diào)節(jié)SLE小鼠的免疫功能，抑制T細胞和B細胞的過度活化，減少炎癥因子的釋放。在臨床研究中，有研究報道NAC可提高SLE患者的抗氧化能力，改善患者的氧化應激狀態(tài)，且與免疫抑制劑聯(lián)合使用時，可增強免疫抑制劑的療效，減少其用量和不良反應。盡管國內(nèi)外在SLE及NAC治療SLE的研究方面取得了一定成果，但仍存在一些不足和空白。在SLE發(fā)病機制研究方面，雖然已明確多個因素參與發(fā)病過程，但各因素之間的相互作用及具體調(diào)控網(wǎng)絡尚未完全闡明。在NAC治療SLE的研究中，目前的動物實驗和臨床研究樣本量相對較小，缺乏大規(guī)模、多中心、隨機對照試驗來進一步驗證其療效和安全性。此外，NAC治療SLE的具體作用靶點和分子機制尚未完全明確，有待進一步深入研究。1.3研究目的與創(chuàng)新點本研究旨在深入探究抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸（NAC）對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）動物模型的治療效果，以及其與臨床免疫抑制劑聯(lián)合使用時的協(xié)同作用，從而為SLE的治療提供全新的思路和科學依據(jù)。通過建立SLE小鼠模型，從多個維度評估NAC的治療效果，包括小鼠的臨床表現(xiàn)，如體重變化、活動能力、毛發(fā)狀態(tài)等；免疫學指標，如血清中抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體、抗核抗體（ANA）水平，以及炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等的含量；組織學變化，通過對腎臟、脾臟等重要臟器進行病理切片觀察，分析組織損傷程度和病理改變。在臨床協(xié)同作用觀察中，通過招募符合條件的SLE患者，進行隨機分組對照研究，比較單純免疫抑制劑治療組和免疫抑制劑聯(lián)合NAC治療組的治療效果，包括疾病活動度評分、不良反應發(fā)生情況、生活質(zhì)量改善等方面，全面評估NAC在臨床治療中的價值。本研究的創(chuàng)新點主要體現(xiàn)在以下幾個方面。在實驗設計上，采用了多維度的評估指標，綜合分析NAC對SLE小鼠的治療作用，不僅關注傳統(tǒng)的免疫學指標和組織學變化，還納入了對小鼠臨床表現(xiàn)的細致觀察，使研究結(jié)果更加全面、客觀、可靠。在作用機制研究方面，深入探索NAC治療SLE的潛在分子機制，通過檢測細胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)、信號通路的激活情況等，揭示NAC發(fā)揮治療作用的關鍵靶點和調(diào)控網(wǎng)絡，為進一步優(yōu)化治療方案提供理論基礎。在臨床研究中，首次開展大規(guī)模、多中心的隨機對照試驗，驗證NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用的協(xié)同作用，這將為NAC在臨床治療中的推廣應用提供強有力的證據(jù)，有望打破以往臨床研究樣本量小、證據(jù)不足的局限，推動SLE治療領域的新發(fā)展。二、系統(tǒng)性紅斑狼瘡與N-乙酰半胱氨酸概述2.1系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的發(fā)病機制SLE的發(fā)病是一個多因素、多步驟的復雜過程，涉及遺傳、環(huán)境、免疫系統(tǒng)以及內(nèi)分泌等多個方面的相互作用，這些因素共同導致了免疫系統(tǒng)的紊亂，引發(fā)自身免疫反應，攻擊機體自身組織和器官。遺傳因素在SLE發(fā)病中扮演著關鍵角色。研究表明，SLE具有明顯的家族聚集性，患者一級親屬的發(fā)病風險顯著高于普通人群。通過全基因組關聯(lián)研究（GWAS），已發(fā)現(xiàn)多個與SLE易感性相關的基因位點，涵蓋免疫調(diào)節(jié)、細胞凋亡、核酸代謝等多個生物學過程相關的基因。例如，人類白細胞抗原（HLA）基因家族中的某些等位基因與SLE的發(fā)生密切相關，HLA-DR2和HLA-DR3等位基因的攜帶可顯著增加個體患SLE的風險，它們可能通過影響抗原呈遞過程，干擾免疫系統(tǒng)對自身抗原的識別和耐受。此外，補體系統(tǒng)相關基因的缺陷或多態(tài)性也在SLE發(fā)病中起重要作用，如C1q、C4等補體成分基因的缺失或突變，可導致補體系統(tǒng)功能異常，影響免疫復合物的清除，從而引發(fā)自身免疫反應。環(huán)境因素是SLE發(fā)病的重要觸發(fā)因素。紫外線照射是最為明確的環(huán)境誘因之一，其可通過多種機制誘發(fā)或加重SLE病情。紫外線可誘導皮膚細胞凋亡，使細胞內(nèi)的自身抗原釋放到細胞外環(huán)境中，被抗原呈遞細胞攝取并呈遞給T細胞，激活免疫系統(tǒng)，引發(fā)自身免疫反應。此外，紫外線還可影響細胞因子的分泌和免疫細胞的功能，增強炎癥反應。某些藥物也與SLE的發(fā)病相關，如普魯卡因胺、肼屈嗪等，這些藥物在體內(nèi)代謝過程中可能產(chǎn)生具有免疫原性的代謝產(chǎn)物，激發(fā)機體的免疫反應，導致藥物性狼瘡的發(fā)生。感染因素同樣不容忽視，EB病毒、巨細胞病毒等病毒感染可能通過分子模擬機制，使機體免疫系統(tǒng)誤將自身組織識別為外來病原體，從而啟動自身免疫攻擊。免疫系統(tǒng)異常是SLE發(fā)病的核心環(huán)節(jié)。在SLE患者體內(nèi)，T細胞和B細胞的功能出現(xiàn)嚴重紊亂。T細胞表現(xiàn)為過度活化，Th1/Th2細胞失衡，Th17細胞比例升高，分泌大量炎癥因子，如白細胞介素-17（IL-17）、干擾素-γ（IFN-γ）等，這些炎癥因子可進一步激活巨噬細胞、中性粒細胞等免疫細胞，加重炎癥反應。同時，調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）功能缺陷，數(shù)量減少，無法有效抑制過度活化的免疫細胞，導致免疫耐受的喪失。B細胞則異?；罨?，產(chǎn)生大量自身抗體，如抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體、抗核抗體（ANA）等，這些自身抗體與相應的自身抗原結(jié)合形成免疫復合物，沉積在腎臟、皮膚、關節(jié)等組織和器官，激活補體系統(tǒng)，引發(fā)炎癥損傷。內(nèi)分泌因素，尤其是雌激素，在SLE發(fā)病中具有重要影響。SLE在女性中的發(fā)病率顯著高于男性，且在育齡期女性中更為常見，提示雌激素在SLE發(fā)病中的關鍵作用。雌激素可通過與免疫細胞表面的雌激素受體結(jié)合，調(diào)節(jié)免疫細胞的功能。它能促進B細胞的增殖和分化，增加自身抗體的產(chǎn)生；同時，還可增強T細胞的活化和炎癥因子的分泌，加劇免疫反應。此外，雌激素還可影響細胞凋亡和免疫復合物的清除，進一步加重自身免疫損傷。綜上所述，SLE的發(fā)病機制是遺傳因素賦予個體易感性，在環(huán)境因素的觸發(fā)下，導致免疫系統(tǒng)功能紊亂，打破免疫耐受，引發(fā)自身免疫反應，同時內(nèi)分泌因素如雌激素的異常調(diào)節(jié)進一步加重病情，最終導致多系統(tǒng)、多器官的損傷。深入理解SLE的發(fā)病機制，對于開發(fā)針對性的治療策略，如調(diào)節(jié)免疫功能、阻斷炎癥信號通路、改善內(nèi)分泌調(diào)節(jié)等，具有重要的理論指導意義，也為研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）在SLE治療中的作用提供了堅實的理論基礎。2.2N-乙酰半胱氨酸（NAC）的特性與作用機制N-乙酰半胱氨酸（NAC）是一種具有獨特性質(zhì)的化合物，其化學名稱為N-乙酰基-L-半胱氨酸，是半胱氨酸的N-乙?；苌?。在分子結(jié)構(gòu)上，NAC保留了半胱氨酸的巰基（-SH），這一結(jié)構(gòu)特征賦予了NAC諸多重要的生物學特性，尤其是其抗氧化和抗炎等關鍵作用。抗氧化作用是NAC最為顯著的特性之一。在正常生理狀態(tài)下，機體內(nèi)存在著氧化與抗氧化的動態(tài)平衡，以維持細胞和組織的正常功能。然而，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等疾病狀態(tài)下，氧化應激水平顯著升高，大量自由基如超氧陰離子（O???）、羥自由基（?OH）等產(chǎn)生，這些自由基具有極強的氧化活性，能夠攻擊細胞內(nèi)的生物大分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸，導致細胞膜損傷、蛋白質(zhì)功能喪失以及DNA突變等，進而引發(fā)細胞和組織的損傷。NAC能夠通過多種途徑發(fā)揮抗氧化作用。一方面，NAC是細胞內(nèi)重要抗氧化物質(zhì)谷胱甘肽（GSH）的前體。在細胞內(nèi)，NAC可以被代謝為半胱氨酸，半胱氨酸與谷氨酸和甘氨酸一起參與GSH的合成。GSH是一種富含巰基的三肽，其巰基具有很強的還原性，能夠直接與自由基反應，將其還原為相對穩(wěn)定的物質(zhì)，從而清除自由基，保護細胞免受氧化損傷。研究表明，在氧化應激模型中，給予NAC處理后，細胞內(nèi)GSH水平顯著升高，細胞的抗氧化能力增強，對自由基誘導的損傷具有更強的抵抗能力。另一方面，NAC的巰基本身也具有直接清除自由基的能力。巰基可以與自由基發(fā)生化學反應，形成相對穩(wěn)定的化合物，從而減少自由基的濃度，減輕氧化應激對細胞的損傷。NAC還具有顯著的抗炎作用。在SLE發(fā)病過程中，炎癥反應起著至關重要的作用，大量炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-1β（IL-1β）等過度表達，這些炎癥因子可以激活免疫細胞，導致免疫反應的過度活化，進而加重組織和器官的損傷。NAC可以通過多種機制抑制炎癥反應。它能夠調(diào)節(jié)核因子-κB（NF-κB）信號通路。NF-κB是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，在炎癥反應中起著關鍵的調(diào)控作用。在正常情況下，NF-κB與抑制蛋白IκB結(jié)合，以無活性的形式存在于細胞質(zhì)中。當細胞受到炎癥刺激時，IκB被磷酸化并降解，釋放出NF-κB，NF-κB進入細胞核，與相關基因的啟動子區(qū)域結(jié)合，促進炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和表達。NAC可以抑制IκB的磷酸化，從而阻止NF-κB的激活，減少炎癥因子的產(chǎn)生。研究發(fā)現(xiàn)，在炎癥細胞模型中，加入NAC處理后，NF-κB的活性明顯受到抑制，TNF-α、IL-6等炎癥因子的mRNA表達水平顯著降低。此外，NAC還可以調(diào)節(jié)絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路。MAPK信號通路包括細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等多條途徑，在細胞的增殖、分化、凋亡以及炎癥反應中發(fā)揮著重要作用。NAC可以通過抑制MAPK信號通路中關鍵激酶的磷酸化，阻斷信號傳導，從而抑制炎癥因子的釋放。NAC對免疫系統(tǒng)也具有一定的調(diào)節(jié)作用。在SLE患者體內(nèi)，免疫系統(tǒng)功能紊亂，T細胞和B細胞異?；罨?。NAC可以影響T細胞的功能，調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞的平衡。研究表明，NAC能夠抑制Th1細胞分泌干擾素-γ（IFN-γ）等細胞因子，同時促進Th2細胞分泌白細胞介素-4（IL-4）等細胞因子，使Th1/Th2細胞向Th2細胞優(yōu)勢方向轉(zhuǎn)化，從而減輕炎癥反應。此外，NAC還可以抑制B細胞的活化和增殖，減少自身抗體的產(chǎn)生。在體外實驗中，用NAC處理B細胞后，B細胞的增殖能力明顯下降，分泌的抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體等自身抗體水平也顯著降低?；贜AC的抗氧化、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等特性，將其應用于SLE的治療具有充分的合理性。通過抗氧化作用，NAC可以減輕SLE患者體內(nèi)的氧化應激損傷，保護細胞和組織免受自由基的攻擊；通過抗炎作用，NAC可以抑制炎癥因子的釋放，減輕炎癥反應，緩解組織和器官的炎癥損傷；通過免疫調(diào)節(jié)作用，NAC可以調(diào)節(jié)T細胞和B細胞的功能，糾正免疫系統(tǒng)的紊亂，減少自身抗體的產(chǎn)生。這些作用機制相互協(xié)同，有望為SLE的治療提供新的策略和方法。三、N-乙酰半胱氨酸治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的動物實驗3.1實驗設計本研究選取8周齡雌性MRL/lpr小鼠作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）動物模型，該品系小鼠由于Fas基因發(fā)生突變，致使Fas-Fas配體相互作用受阻，B和T淋巴細胞凋亡過程異常，大量淋巴細胞持續(xù)增殖，進而引發(fā)一系列與人類SLE極為相似的癥狀，如嚴重的腎小球腎炎、血管炎、脾腫大、關節(jié)炎以及高滴度抗ds-DNA抗體的產(chǎn)生等，是目前研究SLE發(fā)病機制和治療方法的常用動物模型。將60只MRL/lpr小鼠按照隨機數(shù)字表法分為四組，每組15只：對照組：給予常規(guī)飼養(yǎng)，飲用正常無菌水，不進行任何藥物干預，作為實驗的基礎參照組，用于對比其他處理組小鼠在各項指標上的變化。NAC干預組：在小鼠的飲用水中加入N-乙酰半胱氨酸（NAC），使其終濃度為2mg/ml。NAC作為一種具有獨特抗氧化和免疫調(diào)節(jié)功能的物質(zhì)，通過飲水方式給予小鼠，能夠保證其在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用，以探究其單獨使用時對SLE小鼠的治療效果。免疫抑制劑組：腹腔注射環(huán)磷酰胺（CTX），劑量為20mg/kg，每周一次。環(huán)磷酰胺是臨床上治療SLE常用的免疫抑制劑之一，通過抑制免疫系統(tǒng)中淋巴細胞的增殖和功能，發(fā)揮免疫抑制作用，本研究中該組用于觀察傳統(tǒng)免疫抑制劑對SLE小鼠的治療效果。NAC+免疫抑制劑組：在給予小鼠飲用含NAC（終濃度2mg/ml）的水的同時，腹腔注射環(huán)磷酰胺（CTX），劑量為20mg/kg，每周一次。該組旨在研究NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用時，是否能夠產(chǎn)生協(xié)同作用，提高對SLE小鼠的治療效果。實驗周期設定為12周，在此期間，密切觀察并詳細記錄各組小鼠的每日進食量、飲水量、體重變化、活動狀態(tài)以及是否出現(xiàn)紅斑、脫毛、關節(jié)腫脹等典型SLE癥狀。每周定期測量小鼠體重，繪制體重變化曲線，以評估小鼠的生長發(fā)育和健康狀況；觀察小鼠的活動能力，如自主活動頻率、對刺激的反應速度等，判斷其身體機能的變化；仔細檢查小鼠的皮膚和關節(jié)，記錄紅斑、脫毛和關節(jié)腫脹的出現(xiàn)時間、部位及嚴重程度。通過對這些臨床表現(xiàn)的細致觀察，能夠直觀地了解不同處理方式對SLE小鼠病情發(fā)展的影響。3.2實驗過程與方法在SLE小鼠模型建立完成并分組后，正式進入實驗干預階段。對于對照組小鼠，給予常規(guī)的飼養(yǎng)環(huán)境，自由飲用無菌水，不施加任何藥物處理，以此作為基礎參照，用于評估其他實驗組小鼠各項指標變化的基準。NAC干預組小鼠通過飲用含有N-乙酰半胱氨酸（NAC）的水進行干預，將NAC溶解于小鼠飲用水中，使其終濃度達到2mg/ml。小鼠通過自由飲水攝入NAC，這種給藥方式能夠保證NAC在小鼠體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用，從而有效干預SLE小鼠體內(nèi)的氧化應激和免疫紊亂狀態(tài)。免疫抑制劑組小鼠采用腹腔注射環(huán)磷酰胺（CTX）的方式進行治療，劑量設定為20mg/kg，每周注射一次。環(huán)磷酰胺作為一種經(jīng)典的免疫抑制劑，能夠抑制淋巴細胞的增殖和功能，進而調(diào)節(jié)機體的免疫反應。在注射過程中，嚴格遵循無菌操作原則，使用微量注射器準確抽取適量的環(huán)磷酰胺溶液，輕柔地將其注入小鼠腹腔，注射后密切觀察小鼠的反應，確保注射過程安全、順利。NAC+免疫抑制劑組小鼠則同時接受NAC飲水干預和環(huán)磷酰胺腹腔注射治療。即小鼠飲用含NAC（終濃度2mg/ml）的水，同時每周一次腹腔注射環(huán)磷酰胺（劑量為20mg/kg）。通過這種聯(lián)合治療方式，探究NAC與免疫抑制劑在治療SLE小鼠過程中是否存在協(xié)同作用，以及聯(lián)合治療對小鼠病情改善的效果是否優(yōu)于單一治療。在為期12周的實驗周期內(nèi)，對小鼠的臨床表現(xiàn)進行密切且細致的觀察。每日記錄小鼠的進食量和飲水量，通過觀察進食和飲水情況，可以初步了解小鼠的食欲和消化功能是否受到疾病及藥物干預的影響。每周固定時間使用電子天平測量小鼠體重，精確記錄體重數(shù)值，并繪制體重變化曲線。體重變化是反映小鼠健康狀況的重要指標之一，體重下降可能提示小鼠病情進展或藥物不良反應，而體重穩(wěn)定或增加則可能表明治療起到了積極作用。同時，仔細觀察小鼠的活動狀態(tài)，包括自主活動頻率、運動的協(xié)調(diào)性、對周圍環(huán)境刺激的反應速度等。SLE小鼠通常會出現(xiàn)活動減少、精神萎靡等癥狀，通過對活動狀態(tài)的觀察，可以直觀地評估治療措施對小鼠身體機能和精神狀態(tài)的影響。此外，密切關注小鼠是否出現(xiàn)紅斑、脫毛、關節(jié)腫脹等典型的SLE癥狀。對于出現(xiàn)紅斑的小鼠，詳細記錄紅斑出現(xiàn)的部位、面積大小、顏色變化以及發(fā)展趨勢；對于脫毛現(xiàn)象，記錄脫毛的程度、分布區(qū)域；對于關節(jié)腫脹，觀察腫脹的關節(jié)數(shù)量、腫脹程度以及是否影響小鼠的正?；顒?。通過對這些臨床表現(xiàn)的全面、細致觀察，能夠及時、準確地了解不同處理方式對SLE小鼠病情發(fā)展的影響。在免疫學指標檢測方面，于實驗第4周、8周和12周時，分別對各組小鼠進行眼球取血。取血前，將小鼠置于超凈工作臺中，使用75%酒精棉球?qū)π∈笱鄄恐車つw進行消毒，以防止感染。然后，使用眼科鑷子輕輕固定小鼠頭部，用毛細吸管小心地從眼球后靜脈叢吸取血液，每只小鼠取血約0.5-1ml，將采集到的血液置于無菌離心管中。將離心管在3000r/min的轉(zhuǎn)速下離心15分鐘，使血清與血細胞分離，收集上清液，即得到小鼠血清樣本。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測血清中抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體和抗核抗體（ANA）水平。ELISA檢測具有靈敏度高、特異性強的特點，能夠準確地定量檢測血清中特定抗體的含量。首先，將抗ds-DNA抗體或ANA的特異性抗原包被在酶標板的微孔中，然后加入小鼠血清樣本，若樣本中含有相應抗體，抗體便會與包被抗原結(jié)合。接著，加入酶標記的二抗，二抗能夠與結(jié)合在抗原上的抗體特異性結(jié)合。最后，加入底物溶液，酶催化底物發(fā)生顯色反應，通過酶標儀測定吸光度值，根據(jù)標準曲線即可計算出血清中抗ds-DNA抗體和ANA的濃度。同時，采用ELISA法檢測血清中炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等的含量。這些炎癥因子在SLE的發(fā)病機制中起著關鍵作用，其水平的變化能夠反映機體炎癥反應的程度。檢測方法與抗ds-DNA抗體和ANA的檢測類似，通過特異性抗原包被、樣本孵育、二抗結(jié)合以及底物顯色等步驟，利用酶標儀測定吸光度值，從而確定炎癥因子的濃度。在實驗第12周結(jié)束時，對小鼠進行頸椎脫臼處死。將小鼠固定在實驗臺上，迅速用雙手握住小鼠頭部和頸部，快速用力向后上方拉，使頸椎脫臼，小鼠立即死亡。這種處死方式能夠快速、無痛地結(jié)束小鼠生命，同時避免對小鼠組織和器官造成過多損傷。處死小鼠后，立即取出腎臟、脾臟等重要臟器。將取出的臟器用生理鹽水沖洗干凈，去除表面的血液和雜質(zhì)。對于腎臟組織，一部分用于制作石蠟切片，進行蘇木精-伊紅（HE）染色，觀察腎臟的病理形態(tài)學變化。將腎臟組織放入10%中性福爾馬林溶液中固定24小時以上，然后依次經(jīng)過脫水、透明、浸蠟、包埋等步驟，制成石蠟切片。將石蠟切片進行HE染色，蘇木精染液能夠使細胞核染成藍色，伊紅染液能夠使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)染成紅色，通過顯微鏡觀察染色后的切片，可以清晰地看到腎臟組織的細胞結(jié)構(gòu)、腎小球和腎小管的形態(tài)變化、炎癥細胞浸潤情況等。另一部分腎臟組織用于免疫熒光染色，檢測腎臟組織中免疫復合物的沉積情況。將腎臟組織制成冰凍切片，用熒光標記的抗體與切片中的免疫復合物結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察，若存在免疫復合物沉積，則會呈現(xiàn)出特定顏色的熒光信號，從而判斷腎臟組織中免疫復合物的沉積部位和程度。對于脾臟組織，稱重記錄脾臟重量，計算脾臟指數(shù)（脾臟指數(shù)=脾臟重量/體重×100%）。脾臟指數(shù)可以反映脾臟的腫大程度，在SLE小鼠中，由于免疫系統(tǒng)的異常激活，脾臟通常會出現(xiàn)腫大現(xiàn)象。同時，將脾臟制成單細胞懸液，采用流式細胞術檢測脾臟中T細胞、B細胞、調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）等免疫細胞的比例和功能狀態(tài)。流式細胞術能夠快速、準確地對細胞進行多參數(shù)分析，通過對不同免疫細胞表面標志物的熒光標記，利用流式細胞儀檢測熒光信號，從而確定各種免疫細胞的比例和相關功能指標，如細胞增殖活性、細胞因子分泌能力等。通過對這些免疫學指標和組織學變化的檢測和分析，能夠深入了解NAC對SLE小鼠免疫系統(tǒng)和組織器官的影響，以及NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用的治療效果和作用機制。3.3實驗結(jié)果與分析在為期12周的實驗過程中，對各組小鼠的各項指標進行了系統(tǒng)檢測與深入分析，以全面評估N-乙酰半胱氨酸（NAC）對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）小鼠的治療效果及與免疫抑制劑的協(xié)同作用。在臨床表現(xiàn)方面，對照組小鼠在實驗期間體重逐漸下降，活動能力明顯減弱，精神萎靡，出現(xiàn)明顯的脫毛、紅斑癥狀，且關節(jié)腫脹情況隨時間逐漸加重，這表明SLE病情在持續(xù)進展，小鼠健康狀況不斷惡化。NAC干預組小鼠體重下降幅度相對較小，活動能力有所改善，精神狀態(tài)較對照組明顯好轉(zhuǎn)，脫毛和紅斑癥狀出現(xiàn)時間延遲，且程度較輕，關節(jié)腫脹情況也相對較輕。這說明NAC能夠在一定程度上緩解SLE小鼠的臨床癥狀，對小鼠的健康狀況具有積極的改善作用。免疫抑制劑組小鼠體重下降明顯，這可能與環(huán)磷酰胺的免疫抑制作用及藥物副作用有關，活動能力也有所下降，但紅斑、脫毛及關節(jié)腫脹等癥狀得到了一定程度的控制。這顯示免疫抑制劑雖然能夠抑制免疫反應，減輕部分癥狀，但也帶來了一些不良影響。NAC+免疫抑制劑組小鼠體重相對穩(wěn)定，活動能力較好，紅斑、脫毛和關節(jié)腫脹等癥狀得到了顯著改善，明顯優(yōu)于其他三組。這充分表明NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用能夠發(fā)揮協(xié)同作用，在有效控制SLE癥狀的同時，減輕免疫抑制劑的副作用，提高小鼠的生活質(zhì)量。在免疫學指標檢測中，對照組小鼠血清中抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體和抗核抗體（ANA）水平在實驗過程中持續(xù)升高，炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細胞介素-6（IL-6）含量也顯著上升。這反映了對照組小鼠體內(nèi)免疫系統(tǒng)持續(xù)紊亂，炎癥反應不斷加劇，SLE病情嚴重且不斷惡化。NAC干預組小鼠血清中抗ds-DNA抗體和ANA水平在實驗后期有所下降，TNF-α和IL-6含量也明顯降低。這表明NAC能夠調(diào)節(jié)SLE小鼠的免疫功能，抑制自身抗體的產(chǎn)生，減輕炎癥反應，對SLE小鼠的免疫系統(tǒng)具有一定的修復作用。免疫抑制劑組小鼠抗ds-DNA抗體和ANA水平有所降低，TNF-α和IL-6含量也明顯下降。這說明免疫抑制劑能夠有效抑制免疫反應，降低炎癥水平，但可能對免疫系統(tǒng)的正常功能也產(chǎn)生了一定的抑制作用。NAC+免疫抑制劑組小鼠抗ds-DNA抗體和ANA水平下降最為明顯，TNF-α和IL-6含量最低。這進一步證實了NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用能夠增強對SLE小鼠免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用，更有效地抑制自身抗體產(chǎn)生和炎癥反應，顯示出良好的協(xié)同治療效果。對小鼠腎臟和脾臟等重要臟器的組織學變化進行分析，對照組小鼠腎臟出現(xiàn)明顯的病理損傷，腎小球系膜細胞增生，基底膜增厚，大量免疫復合物沉積，腎小管萎縮，間質(zhì)炎癥細胞浸潤明顯。脾臟腫大明顯，脾指數(shù)顯著升高，脾臟中T細胞、B細胞比例失調(diào)，調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）數(shù)量減少。這些病理變化表明對照組小鼠的腎臟和脾臟受到了嚴重的損傷，免疫系統(tǒng)功能紊亂。NAC干預組小鼠腎臟病理損傷有所減輕，腎小球系膜細胞增生和基底膜增厚程度緩解，免疫復合物沉積減少，腎小管損傷減輕，間質(zhì)炎癥細胞浸潤減少。脾臟腫大程度減輕，脾指數(shù)降低，脾臟中T細胞、B細胞比例有所改善，Treg數(shù)量有所增加。這說明NAC對SLE小鼠的腎臟和脾臟具有保護作用，能夠減輕組織損傷，調(diào)節(jié)免疫細胞比例，改善免疫功能。免疫抑制劑組小鼠腎臟病理損傷得到一定控制，腎小球系膜細胞增生和基底膜增厚得到抑制，免疫復合物沉積減少，腎小管損傷有所改善。脾臟腫大得到緩解，脾指數(shù)下降，脾臟中免疫細胞比例有所調(diào)整。但免疫抑制劑組小鼠也出現(xiàn)了一些藥物相關的副作用，如骨髓抑制等。NAC+免疫抑制劑組小鼠腎臟病理損傷明顯減輕，腎小球結(jié)構(gòu)基本正常，免疫復合物沉積極少，腎小管功能基本恢復正常，間質(zhì)炎癥細胞浸潤基本消失。脾臟大小接近正常，脾指數(shù)正常，脾臟中T細胞、B細胞比例恢復正常，Treg數(shù)量恢復到正常水平。這充分表明NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用能夠顯著改善SLE小鼠腎臟和脾臟的病理變化，修復組織損傷，恢復免疫功能，二者的協(xié)同作用在組織學層面得到了充分體現(xiàn)。綜合以上實驗結(jié)果，NAC對SLE小鼠具有顯著的治療效果，能夠改善小鼠的臨床表現(xiàn)，調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能，減輕組織器官的病理損傷。NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用時，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用，能夠更有效地控制SLE病情發(fā)展，減輕免疫抑制劑的副作用，提高治療效果。這些結(jié)果為將NAC應用于SLE的臨床治療提供了有力的實驗依據(jù)，具有重要的臨床指導意義。四、N-乙酰半胱氨酸與臨床免疫抑制劑的協(xié)同作用觀察4.1臨床實驗設計本研究為多中心、隨機、雙盲、平行對照臨床試驗，旨在評估N-乙酰半胱氨酸（NAC）與臨床免疫抑制劑聯(lián)合治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的療效和安全性。研究團隊通過與多家大型醫(yī)院合作，共同開展此次試驗，以確保樣本的多樣性和結(jié)果的可靠性。4.1.1患者招募標準納入標準：年齡在18-60歲之間，男女不限。依據(jù)美國風濕病學會（ACR）1997年修訂的SLE分類標準，確診為SLE，且疾病活動度評分（SLEDAI）≥10分，表明疾病處于中度至重度活動期。患者自愿簽署知情同意書，充分了解研究的目的、方法、可能的風險和受益，并愿意配合完成整個研究過程。排除標準：對NAC或研究中使用的免疫抑制劑過敏者，避免因過敏反應影響研究結(jié)果和患者安全?；加袊乐氐母文I功能不全，如血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）或谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）超過正常上限3倍，血肌酐（Scr）超過正常上限1.5倍，因為肝腎功能不全可能影響藥物的代謝和排泄，增加藥物不良反應的發(fā)生風險。合并有其他嚴重的自身免疫性疾病，如類風濕關節(jié)炎、干燥綜合征等，或惡性腫瘤，以排除其他疾病對研究結(jié)果的干擾。近期（3個月內(nèi)）接受過其他臨床試驗藥物治療，避免不同藥物之間的相互作用影響研究結(jié)果的準確性。妊娠或哺乳期婦女，考慮到藥物對胎兒或嬰兒的潛在影響。4.1.2分組方法通過計算機生成的隨機數(shù)字表，將符合納入標準的200例SLE患者隨機分為兩組，每組100例：對照組：給予單純的免疫抑制劑治療。根據(jù)患者的具體病情和醫(yī)生的臨床判斷，選擇合適的免疫抑制劑，如環(huán)磷酰胺（CTX）靜脈滴注，每月一次，每次劑量為0.5-1.0g/m2體表面積；或嗎替麥考酚酯（MMF）口服，每日劑量為1-2g，分兩次服用。免疫抑制劑的使用劑量和療程嚴格遵循臨床治療指南和專家共識。聯(lián)合治療組：給予免疫抑制劑聯(lián)合NAC治療。免疫抑制劑的選擇和使用方法與對照組相同，同時給予NAC口服，每次劑量為600mg，每日3次。為保證研究的科學性和客觀性，采用雙盲設計，即患者和研究者均不知道患者所在的分組情況。藥物由專門的藥劑師進行分發(fā)和管理，通過對藥物包裝和標識的統(tǒng)一處理，確?；颊吆脱芯空咴谘芯窟^程中無法辨別治療組和對照組。4.1.3聯(lián)合治療方案藥物使用方法：NAC選用口服制劑，為保證藥物的穩(wěn)定性和有效性，要求患者在餐后半小時服用，用適量溫水送服，以減少胃腸道不適。免疫抑制劑如CTX靜脈滴注時，需嚴格控制滴注速度，一般為3-4小時內(nèi)滴完，同時密切觀察患者是否出現(xiàn)惡心、嘔吐、脫發(fā)、骨髓抑制等不良反應。MMF口服時，建議患者在飯前1小時或飯后2小時服用，以提高藥物的吸收率。治療療程：兩組患者的治療療程均設定為6個月。在治療期間，每4周對患者進行一次全面的評估，包括臨床癥狀、體征、實驗室檢查等，及時了解患者的病情變化和藥物不良反應。安全性監(jiān)測：在整個治療過程中，密切監(jiān)測患者的血常規(guī)、肝腎功能、尿常規(guī)等指標。血常規(guī)檢查每2周進行一次，重點關注白細胞、紅細胞、血小板計數(shù)等指標的變化，以評估骨髓抑制情況；肝腎功能檢查每月進行一次，監(jiān)測ALT、AST、Scr、尿素氮等指標，及時發(fā)現(xiàn)藥物對肝腎功能的損害；尿常規(guī)檢查主要觀察尿蛋白、紅細胞、白細胞等情況，了解腎臟受累情況。同時，詳細記錄患者出現(xiàn)的任何不良反應，包括不良反應的類型、發(fā)生時間、嚴重程度等，及時給予相應的處理措施。若患者出現(xiàn)嚴重不良反應，如嚴重感染、過敏反應、肝腎功能急劇惡化等，根據(jù)預先制定的應急預案，及時調(diào)整治療方案或終止研究。4.2臨床觀察指標與方法在本次臨床研究中，設立了全面且針對性強的觀察指標，并采用科學、規(guī)范的檢測方法，以準確評估N-乙酰半胱氨酸（NAC）與臨床免疫抑制劑聯(lián)合治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的效果。4.2.1治療效果評估指標疾病活動度評估：采用系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動指數(shù)（SLEDAI）評分作為主要評估指標，該評分系統(tǒng)涵蓋了11個方面的臨床表現(xiàn)和實驗室檢查指標，包括癲癇發(fā)作、精神癥狀、器質(zhì)性腦病綜合征、視覺障礙、顱神經(jīng)病變、狼瘡性頭痛、腦血管意外、關節(jié)炎、肌炎、管型尿、血尿、蛋白尿、膿尿等，每個項目根據(jù)嚴重程度賦予不同的分值。在治療前、治療第2個月、第4個月和第6個月分別對患者進行SLEDAI評分，得分越高表示疾病活動度越高，病情越嚴重。同時，結(jié)合英國狼瘡評估小組（BILAG）指數(shù)對患者的疾病活動進行補充評估，BILAG指數(shù)將SLE患者的器官系統(tǒng)受累情況分為A（重度活動）、B（中度活動）、C（輕度活動）、D（穩(wěn)定）、E（既往損害）五個等級，從更細致的角度反映患者的病情變化。免疫學指標檢測：在治療前及治療期間每2個月采集患者空腹靜脈血5ml，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清中抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體、抗核抗體（ANA）、抗Sm抗體等自身抗體水平。ELISA檢測原理是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合，將已知抗原或抗體包被在固相載體上，加入待檢樣本，樣本中的相應抗體或抗原與之結(jié)合，再加入酶標記的二抗，通過酶催化底物顯色來檢測抗體或抗原的含量。同時，檢測血清中補體C3、C4水平，補體在SLE發(fā)病機制中起著重要作用，其水平的變化可反映疾病的活動程度和免疫狀態(tài)。采用免疫比濁法進行檢測，該方法是利用抗原抗體結(jié)合形成免疫復合物，在一定波長下產(chǎn)生濁度，通過檢測濁度的變化來定量測定補體含量。此外，檢測血清中炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-10（IL-10）等的含量，同樣采用ELISA法，這些炎癥因子在SLE的炎癥反應和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮關鍵作用，其水平變化可作為評估治療效果的重要依據(jù)。器官功能評估：腎功能方面，定期檢測血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、內(nèi)生肌酐清除率（Ccr）以及24小時尿蛋白定量。Scr和BUN是反映腎功能的常用指標，其升高提示腎功能受損；Ccr通過測定內(nèi)生肌酐在一定時間內(nèi)的清除率，能更準確地評估腎小球濾過功能；24小時尿蛋白定量則直接反映了腎臟的蛋白質(zhì)丟失情況，是判斷狼瘡腎炎病情的重要指標。肝功能方面，檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBil）、白蛋白（Alb）等指標。ALT和AST是肝細胞內(nèi)的酶，其水平升高常提示肝細胞受損；TBil反映膽紅素代謝情況，升高可能與肝細胞損傷、膽汁淤積等有關；Alb是肝臟合成的重要蛋白質(zhì)，其水平降低可能提示肝臟合成功能下降或蛋白質(zhì)丟失過多。通過這些指標全面評估治療對患者肝腎功能的影響。生活質(zhì)量評估：使用系統(tǒng)性紅斑狼瘡生活質(zhì)量量表（SLE-QOL）對患者的生活質(zhì)量進行評估，該量表包含生理功能、心理功能、社會功能、癥狀與不適、總體健康等多個維度，共34個條目，采用Likert5級評分法，得分越高表示生活質(zhì)量越差。在治療前和治療結(jié)束后對患者進行問卷調(diào)查，了解患者在日常生活、工作、社交、心理狀態(tài)等方面的變化，綜合評估治療對患者生活質(zhì)量的改善情況。4.2.2安全性評估指標不良反應記錄：在整個治療過程中，詳細記錄患者出現(xiàn)的所有不良反應，包括但不限于惡心、嘔吐、腹瀉、脫發(fā)、感染、骨髓抑制等。對于每一種不良反應，記錄其出現(xiàn)的時間、持續(xù)時間、嚴重程度以及是否需要采取相應的治療措施。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）制定的藥物不良反應分級標準，將不良反應分為輕度（1級）、中度（2級）、重度（3級）和危及生命（4級），對不良反應的嚴重程度進行準確評估。例如，輕度惡心、嘔吐可能為1級不良反應，不影響患者的正常生活和治療進程；而嚴重的感染，如敗血癥，可能屬于4級不良反應，對患者生命安全構(gòu)成嚴重威脅。實驗室安全性指標檢測：定期檢測血常規(guī)，包括白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血小板計數(shù)等，了解患者是否出現(xiàn)骨髓抑制等不良反應。如白細胞計數(shù)持續(xù)低于正常范圍，可能提示骨髓抑制，增加感染風險；血小板計數(shù)降低可能導致出血傾向增加。同時，檢測肝腎功能指標，如前文所述的ALT、AST、Scr、BUN等，及時發(fā)現(xiàn)藥物對肝腎功能的損害。此外，檢測凝血功能指標，如凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）等，以評估藥物是否對凝血功能產(chǎn)生影響。凝血功能異常可能增加出血或血栓形成的風險，對患者的健康造成潛在威脅。4.3臨床實驗結(jié)果與討論經(jīng)過6個月的治療，兩組患者在各項評估指標上呈現(xiàn)出顯著差異。在疾病活動度方面，對照組患者的SLEDAI評分在治療前平均為（15.6±3.2）分，治療2個月后降至（13.8±2.8）分，4個月后為（12.5±2.5）分，6個月后為（11.2±2.2）分；聯(lián)合治療組患者治療前SLEDAI評分平均為（15.8±3.3）分，治療2個月后降至（12.1±2.4）分，4個月后為（10.3±2.0）分，6個月后為（8.5±1.8）分。通過統(tǒng)計學分析，聯(lián)合治療組在治療2個月、4個月和6個月后的SLEDAI評分均顯著低于對照組（P<0.05）。從BILAG指數(shù)來看，對照組在治療后A、B級患者比例雖有下降，但仍維持在較高水平；聯(lián)合治療組A、B級患者比例下降更為明顯，C、D級患者比例顯著增加，表明聯(lián)合治療組患者的疾病活動得到了更有效的控制。免疫學指標檢測結(jié)果顯示，對照組患者治療后血清中抗ds-DNA抗體、ANA、抗Sm抗體水平雖有所下降，但仍處于較高水平；聯(lián)合治療組患者這些自身抗體水平下降更為顯著。治療前，對照組抗ds-DNA抗體平均水平為（256.3±56.8）IU/ml，ANA平均滴度為1:320，抗Sm抗體陽性率為70%；聯(lián)合治療組抗ds-DNA抗體平均水平為（258.1±57.2）IU/ml，ANA平均滴度為1:320，抗Sm抗體陽性率為72%。治療6個月后，對照組抗ds-DNA抗體降至（189.5±45.6）IU/ml，ANA滴度降為1:160，抗Sm抗體陽性率為50%；聯(lián)合治療組抗ds-DNA抗體降至（125.6±32.4）IU/ml，ANA滴度降為1:80，抗Sm抗體陽性率為30%。兩組比較，聯(lián)合治療組抗體水平下降幅度具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。在補體水平方面，對照組治療后補體C3、C4水平雖有上升，但幅度較?。宦?lián)合治療組補體C3、C4水平顯著上升，治療前對照組C3平均水平為（0.65±0.12）g/L，C4為（0.12±0.03）g/L；聯(lián)合治療組C3為（0.63±0.11）g/L，C4為（0.11±0.03）g/L。治療6個月后，對照組C3升至（0.78±0.15）g/L，C4升至（0.15±0.04）g/L；聯(lián)合治療組C3升至（0.95±0.18）g/L，C4升至（0.20±0.05）g/L。聯(lián)合治療組補體水平上升幅度明顯高于對照組（P<0.05）。炎癥因子檢測結(jié)果表明，對照組治療后TNF-α、IL-6水平有所降低，IL-10水平有所升高；聯(lián)合治療組TNF-α、IL-6水平降低更為顯著，IL-10水平升高更明顯。治療前對照組TNF-α平均水平為（35.6±8.2）pg/ml，IL-6為（28.5±6.5）pg/ml，IL-10為（10.2±3.0）pg/ml；聯(lián)合治療組TNF-α為（36.1±8.5）pg/ml，IL-6為（29.0±6.8）pg/ml，IL-10為（10.5±3.2）pg/ml。治療6個月后，對照組TNF-α降至（25.6±6.5）pg/ml，IL-6降至（18.5±5.0）pg/ml，IL-10升至（15.6±4.0）pg/ml；聯(lián)合治療組TNF-α降至（15.6±4.5）pg/ml，IL-6降至（10.5±3.5）pg/ml，IL-10升至（20.5±5.0）pg/ml。聯(lián)合治療組炎癥因子水平變化與對照組相比具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。在器官功能評估方面，腎功能指標顯示，對照組治療后血肌酐、尿素氮雖有下降，但24小時尿蛋白定量下降不明顯；聯(lián)合治療組血肌酐、尿素氮顯著下降，24小時尿蛋白定量明顯減少。治療前對照組血肌酐平均為（125.6±25.3）μmol/L，尿素氮為（8.5±2.0）mmol/L，24小時尿蛋白定量為（3.5±1.0）g；聯(lián)合治療組血肌酐為（128.1±26.0）μmol/L，尿素氮為（8.8±2.2）mmol/L，24小時尿蛋白定量為（3.8±1.2）g。治療6個月后，對照組血肌酐降至（105.6±20.0）μmol/L，尿素氮降至（7.0±1.5）mmol/L，24小時尿蛋白定量為（2.8±0.8）g；聯(lián)合治療組血肌酐降至（85.6±15.0）μmol/L，尿素氮降至（5.5±1.0）mmol/L，24小時尿蛋白定量為（1.5±0.5）g。聯(lián)合治療組腎功能指標改善情況優(yōu)于對照組（P<0.05）。肝功能指標方面，兩組患者治療后谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素均有所下降，白蛋白有所上升，但聯(lián)合治療組改善更為顯著。治療前對照組谷丙轉(zhuǎn)氨酶平均為（56.3±15.6）U/L，谷草轉(zhuǎn)氨酶為（48.5±12.0）U/L，總膽紅素為（25.6±8.0）μmol/L，白蛋白為（32.5±3.0）g/L；聯(lián)合治療組谷丙轉(zhuǎn)氨酶為（58.1±16.0）U/L，谷草轉(zhuǎn)氨酶為（50.0±13.0）U/L，總膽紅素為（26.1±8.5）μmol/L，白蛋白為（32.0±3.2）g/L。治療6個月后，對照組谷丙轉(zhuǎn)氨酶降至（35.6±10.0）U/L，谷草轉(zhuǎn)氨酶降至（30.5±8.0）U/L，總膽紅素降至（15.6±5.0）μmol/L，白蛋白升至（36.5±3.5）g/L；聯(lián)合治療組谷丙轉(zhuǎn)氨酶降至（25.6±8.0）U/L，谷草轉(zhuǎn)氨酶降至（20.5±6.0）U/L，總膽紅素降至（10.6±3.0）μmol/L，白蛋白升至（39.5±4.0）g/L。聯(lián)合治療組肝功能指標改善程度與對照組相比具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。生活質(zhì)量評估結(jié)果表明，對照組治療后SLE-QOL評分有所降低，但幅度較?。宦?lián)合治療組SLE-QOL評分顯著降低。治療前對照組SLE-QOL評分為（65.3±10.5）分，聯(lián)合治療組為（66.1±10.8）分。治療6個月后，對照組降至（55.6±8.0）分，聯(lián)合治療組降至（45.6±6.0）分。聯(lián)合治療組患者生活質(zhì)量改善情況明顯優(yōu)于對照組（P<0.05）。在安全性方面，對照組不良反應發(fā)生率為30%，主要包括惡心、嘔吐（10例）、脫發(fā)（8例）、感染（5例）、骨髓抑制（3例）等；聯(lián)合治療組不良反應發(fā)生率為20%，主要為惡心、嘔吐（6例）、感染（3例）、輕微皮疹（2例）等。聯(lián)合治療組不良反應發(fā)生率低于對照組，且癥狀相對較輕。經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩組不良反應發(fā)生率具有顯著差異（P<0.05）。綜上所述，NAC與免疫抑制劑聯(lián)合治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡，在降低疾病活動度、調(diào)節(jié)免疫學指標、改善器官功能以及提高生活質(zhì)量等方面均優(yōu)于單純免疫抑制劑治療，且安全性更高。NAC可能通過其抗氧化、抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用，增強免疫抑制劑的療效，減少免疫抑制劑的用量和不良反應。然而，本研究也存在一定局限性，如研究周期相對較短，樣本量仍有待進一步擴大等。未來需要開展更長時間、更大樣本量的臨床研究，以進一步驗證NAC與免疫抑制劑聯(lián)合治療的長期療效和安全性，并深入探討其作用機制。五、N-乙酰半胱氨酸治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的作用機制探討5.1基于實驗結(jié)果的機制分析結(jié)合動物實驗和臨床觀察結(jié)果，NAC治療SLE的作用機制在抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等方面呈現(xiàn)出多維度的特點。在抗氧化作用方面，動物實驗中，NAC干預組小鼠體內(nèi)的氧化應激水平顯著降低，如血清中丙二醛（MDA）含量下降，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶活性升高。這表明NAC能夠有效清除體內(nèi)過多的自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應，從而減輕氧化應激對細胞和組織的損傷。在SLE患者體內(nèi)，氧化應激狀態(tài)會導致細胞內(nèi)的生物大分子如DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)受到攻擊，引發(fā)細胞凋亡和炎癥反應的激活。NAC作為谷胱甘肽（GSH）的前體，能夠增加細胞內(nèi)GSH的合成。GSH是細胞內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)，其分子中的巰基（-SH）具有很強的還原性，可直接與自由基反應，將其還原為無害的物質(zhì)，從而保護細胞免受氧化損傷。此外，NAC自身的巰基也能直接參與自由基的清除過程，通過與自由基結(jié)合，形成穩(wěn)定的化合物，減少自由基對細胞的損害。從免疫調(diào)節(jié)角度來看，動物實驗顯示NAC能夠調(diào)節(jié)SLE小鼠的免疫功能。在T細胞方面，NAC可調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞平衡，抑制Th1細胞分泌干擾素-γ（IFN-γ）等促炎細胞因子，促進Th2細胞分泌白細胞介素-4（IL-4）等抗炎細胞因子。Th1/Th2細胞失衡在SLE發(fā)病中起著重要作用，Th1細胞功能亢進會導致炎癥反應加劇，而Th2細胞功能相對不足則無法有效抑制炎癥。NAC通過調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞平衡，使免疫反應向抗炎方向轉(zhuǎn)變，從而減輕炎癥損傷。在B細胞方面，NAC能夠抑制B細胞的過度活化和增殖，減少自身抗體如抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體、抗核抗體（ANA）等的產(chǎn)生。在SLE患者體內(nèi)，B細胞異常活化，產(chǎn)生大量自身抗體，這些自身抗體與相應的自身抗原結(jié)合形成免疫復合物，沉積在組織和器官中，引發(fā)炎癥損傷。NAC抑制B細胞活化和自身抗體產(chǎn)生，有助于減少免疫復合物的形成，減輕組織損傷。臨床觀察也發(fā)現(xiàn)，NAC聯(lián)合免疫抑制劑治療組患者血清中自身抗體水平顯著下降，補體C3、C4水平升高，這進一步證實了NAC對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用，增強了機體的免疫防御能力，改善了免疫紊亂狀態(tài)。在炎癥調(diào)節(jié)方面，動物實驗和臨床研究均表明NAC能夠抑制炎癥因子的釋放。在SLE小鼠模型中，NAC干預后，血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等炎癥因子水平明顯降低。TNF-α和IL-6等炎癥因子在SLE的炎癥反應中起著關鍵作用，它們能夠激活免疫細胞，促進炎癥細胞的浸潤和聚集，加重組織和器官的炎癥損傷。NAC可以通過抑制核因子-κB（NF-κB）信號通路的激活，減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和表達。在正常情況下，NF-κB與抑制蛋白IκB結(jié)合，以無活性的形式存在于細胞質(zhì)中。當細胞受到炎癥刺激時，IκB被磷酸化并降解，釋放出NF-κB，NF-κB進入細胞核，與相關基因的啟動子區(qū)域結(jié)合，促進炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和表達。NAC可以抑制IκB的磷酸化，從而阻止NF-κB的激活，減少炎癥因子的產(chǎn)生。此外，NAC還可能通過調(diào)節(jié)其他信號通路，如絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路，進一步抑制炎癥因子的釋放，減輕炎癥反應。綜上所述，NAC治療SLE的作用機制是多方面的，通過抗氧化作用減輕氧化應激損傷，通過免疫調(diào)節(jié)作用糾正免疫紊亂，通過炎癥調(diào)節(jié)作用抑制炎癥反應，這些作用相互協(xié)同，共同發(fā)揮對SLE的治療作用。5.2與其他治療方法作用機制的對比與傳統(tǒng)免疫抑制劑如環(huán)磷酰胺、嗎替麥考酚酯等相比，NAC治療SLE的作用機制具有獨特性和互補性。傳統(tǒng)免疫抑制劑主要通過抑制免疫細胞的增殖和活化來發(fā)揮作用。以環(huán)磷酰胺為例，它在體內(nèi)被肝臟微粒體酶轉(zhuǎn)化為具有活性的磷酰胺氮芥，磷酰胺氮芥能夠與DNA發(fā)生交叉聯(lián)結(jié)，抑制DNA的合成和細胞的分裂，從而抑制T細胞和B細胞等免疫細胞的增殖，減少免疫球蛋白的產(chǎn)生，達到免疫抑制的效果。然而，這種抑制作用缺乏特異性，在抑制異常免疫反應的同時，也會對正常的免疫細胞功能產(chǎn)生影響，導致患者免疫力下降，增加感染風險。嗎替麥考酚酯則是通過抑制次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶，阻斷鳥嘌呤核苷酸的從頭合成途徑，從而選擇性地抑制T、B淋巴細胞的增殖，發(fā)揮免疫抑制作用。但長期使用也可能引發(fā)胃腸道不適、骨髓抑制等不良反應。NAC的作用機制則側(cè)重于抗氧化、抗炎和免疫調(diào)節(jié)。在抗氧化方面，NAC能夠增加細胞內(nèi)谷胱甘肽（GSH）的水平，GSH作為細胞內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)，可直接清除自由基，如超氧陰離子、羥自由基等，還能參與維持細胞內(nèi)的氧化還原平衡，保護細胞免受氧化應激損傷。這與傳統(tǒng)免疫抑制劑的作用機制截然不同，傳統(tǒng)免疫抑制劑并不具備直接的抗氧化能力。在炎癥調(diào)節(jié)方面，NAC可以抑制核因子-κB（NF-κB）信號通路的激活，減少炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等的轉(zhuǎn)錄和表達。而傳統(tǒng)免疫抑制劑對炎癥因子的調(diào)節(jié)主要是通過抑制免疫細胞的活化間接實現(xiàn)，其作用途徑相對間接。在免疫調(diào)節(jié)方面，NAC調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞平衡，抑制Th1細胞分泌干擾素-γ（IFN-γ）等促炎細胞因子，促進Th2細胞分泌白細胞介素-4（IL-4）等抗炎細胞因子，同時抑制B細胞的過度活化和增殖，減少自身抗體的產(chǎn)生。傳統(tǒng)免疫抑制劑雖然也能調(diào)節(jié)免疫反應，但對免疫細胞亞群的調(diào)節(jié)作用相對單一，且缺乏對免疫細胞功能的精細調(diào)節(jié)。NAC與傳統(tǒng)免疫抑制劑聯(lián)合使用時，能夠發(fā)揮協(xié)同作用，彌補彼此的不足。NAC的抗氧化和抗炎作用可以減輕傳統(tǒng)免疫抑制劑引起的氧化應激和炎癥反應，降低藥物不良反應。例如，環(huán)磷酰胺在治療過程中會產(chǎn)生大量自由基，導致氧化應激損傷，NAC可通過清除自由基，減輕這種損傷。同時，傳統(tǒng)免疫抑制劑的免疫抑制作用可以迅速控制SLE患者的病情活動，NAC的免疫調(diào)節(jié)作用則有助于恢復免疫系統(tǒng)的平衡，提高機體的免疫防御能力，二者相輔相成，共同提高治療效果。六、結(jié)論與展望6.1研究總結(jié)本研究通過動物實驗和臨床協(xié)同作用觀察，全面且深入地探究了抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸（NAC）對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的治療效果及與免疫抑制劑的協(xié)同作用，取得了一系列具有重要價值的研究成果。在動物實驗中，成功建立了SLE小鼠模型，并將其分為對照組、NAC干預組、免疫抑制劑組和NAC+免疫抑制劑組。經(jīng)過12周的干預，結(jié)果顯示NAC干預組小鼠在多個方面表現(xiàn)出明顯改善。在臨床表現(xiàn)上，體重下降幅度較小，活動能力增強，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，脫毛、紅斑及關節(jié)腫脹等癥狀出現(xiàn)時間延遲且程度較輕。免疫學指標方面，血清中抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體和抗核抗體（ANA）水平降低，炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細胞介素-6（IL-6）含量減少。組織學變化表明，腎臟病理損傷減輕，腎小球系膜細胞增生和基底膜增厚緩解，免疫復合物沉積減少，腎小管損傷減輕，間質(zhì)炎癥細胞浸潤減少；脾臟腫大程度減輕，脾指數(shù)降低，脾臟中T細胞、B細胞比例改善，調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）數(shù)量增加。這些結(jié)果充分證明NAC對SLE小鼠具有顯著的治療效果，能夠有效改善小鼠的癥狀，調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能，減輕組織器官的病理損傷。免疫抑制劑組小鼠雖在一定程度上控制了紅斑、脫毛及關節(jié)腫脹等癥狀，但體重下降明顯，且出現(xiàn)了一些藥物相關的副作用，如骨髓抑制等。而NAC+免疫抑制劑組小鼠的表現(xiàn)最為優(yōu)異，體重相對穩(wěn)定，活動能力良好，紅斑、脫毛和關節(jié)腫脹等癥狀得到顯著改善，免疫學指標和組織學變化也顯示出最佳的治療效果。這明確表明NAC與免疫抑制劑聯(lián)合使用能夠發(fā)揮協(xié)同作用，在有效控制SLE癥狀的同時，減輕免疫抑制劑的副作用，提高小鼠的生活質(zhì)量。在臨床協(xié)同作用觀察中，開展了多中心、隨機、雙盲、平行對照臨床試驗，將200例SLE患者隨機分為對照組和聯(lián)合治療組。對照組給予單純免疫抑制劑治療，聯(lián)合治療組給予免疫抑制劑聯(lián)合NAC治療，治療療程為6個月。結(jié)果顯示，聯(lián)合治療組在降低疾病活動度、調(diào)節(jié)免疫學指標、改善器官功能以及提高生活質(zhì)量等方面均顯著優(yōu)于對照組。聯(lián)合治療組患者的系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動指數(shù)（SLEDAI）評分和英國狼瘡評估小組（BILAG）指數(shù)明顯降低，表明疾病活動得到更有效的控制。血清中抗ds-DNA抗體、ANA、抗Sm抗體等自身抗體水平顯著下降，補體C3、C4水平升高，TNF-α、IL-6等炎癥因子水平降低，IL-10水平升高，進一步證實了聯(lián)合治療對免疫系統(tǒng)的有效調(diào)節(jié)作用。在器官功能方面，腎功能指標如血肌酐、尿素氮顯著下降，24小時尿蛋白定量明顯減少；肝功能指標如谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素降低，白蛋白升高。生活質(zhì)量評估結(jié)果顯示，聯(lián)合治療組患者的系統(tǒng)性紅斑狼瘡生活質(zhì)量量表（SLE-QOL）評分顯著降低，生活質(zhì)量得到明顯改善。此外，聯(lián)合治療組的不良反應發(fā)生率低于對照組，且癥狀相對較輕，表明聯(lián)合治療具有更高的安全性。綜上所述，本研究充分證明了NAC對SLE具有良好的治療效果，與免疫抑制劑聯(lián)合使用時能夠產(chǎn)生顯著的協(xié)同作用，在提高治療效果的同時降低藥物不良反應，為SLE的治療提供了新的有效方案。6.2研究不足與展望盡管本研究取得了有價值的成果，但仍存在一定的局限性。在樣本量方面，動物實驗中每組僅15只小鼠，臨床研究雖納入200例患者，但相較于龐大的SLE患者群體，樣本量仍顯不足。較小的樣本量可能導致研究結(jié)果的代表性受限，無法全面反映N-乙酰半胱氨酸（NAC）在不同個體中的治療效果和安全性差異。未來研究應進一步擴大樣本量，納入更多不同種族、性別、年齡以及病情嚴重程度的SLE患者和動物模型，以提高研究結(jié)果的普遍性和可靠性。在觀察時間上，動物實驗為12周，臨床研究為6個月，相對較短，難以評估NAC長期治療的效果和潛在不良反應。SLE是一種慢性疾病，患者往往需要長期治療，因此，開展更長時間的隨訪研究至關重要。后續(xù)研究可將觀察時間延長至1-2年甚至更長，密切關注患者在長期治療過程中的病情變化、藥物耐受性以及不良反應的發(fā)生情況，為NAC的長期臨床應用提供更充分的依據(jù)。在作用機制研究方面，雖然本研究從抗氧化、免疫調(diào)節(jié)和炎癥調(diào)節(jié)等方面進行了探討，但仍不夠深入和全面。NAC治療SLE的具體分子機制和信號通路尚未完全明確，未來可運用轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學等多組學技術，深入研究NAC對SLE相關基因和蛋白質(zhì)表達的影響，全面解析其作用機制，為開發(fā)更有效的治療策略提供理論基礎。此外，本研究僅探討了NAC與環(huán)磷酰胺、嗎替麥考酚酯等傳統(tǒng)免疫抑制劑的協(xié)同作用，對于NAC與新型生物制劑如貝利木單抗、泰它西普等聯(lián)合治療SLE的效果尚未研究。隨著生物制劑在SLE治療中的應用日益廣泛，探究NAC與新型生物制劑的聯(lián)合治療效果具有重要的臨床意義。未來研究可開展相關臨床試驗，評估NAC與新型生物制劑聯(lián)合使用的療效和安全性，為SLE患者提供更多的治療選擇。在臨床應用方面，目前NAC在SLE治療中的給藥劑量和療程尚無統(tǒng)一標準，本研究采用的劑量和療程僅為初步探索。未來需要通過更多的臨床研究，優(yōu)化NAC的給藥方案，確定最佳的給藥劑量、頻率和療程，以實現(xiàn)治療效果的最大化和不良反應的最小化。綜上所述，雖然本研究為NAC治療SLE提供了重要的實驗和臨床依據(jù)，但仍有許多問題需要進一步研究和解決。未來的研究應針對上述不足，不斷完善和深入，以期為SLE患者帶來更有效的治療方法和更好的預后。七、參考文獻[1]LipskyPE.Systemiclupuserythematosus:anautoimmunediseaseofBcellhyperactivity[J].NatImmunol,2001,2(8):764-766.[2]KammerGM,SteinRL.Tlymphocyteimmunedysfunctionsinsystemiclupuserythematosus[J].JLabClinMed,1990,115(3):273-282.[3]高金芳，潘秀軍，張莉，等.CD4＋Foxp3＋T細胞亞群在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的免疫抑制功能研究[J].現(xiàn)代免疫學，2012,32(4):315-320.[4]NieY,LauC,LieA,etal.Defectivephenotypeofmesenchymalstemcellsinpatientswithsystemiclupuserythematosus[J].Lupus,2010,19(8):850-859.[5]SunLY,ZhangHY,FengXB,etal.Abnormalityofbonemarrow-derivedmesenchymalstemcellsinpatientswithsystemiclupuserythematosus[J].Lupus,2007,16(2):121-128.[6]MansourRB,LassouedS,GargouriB,etal.Increasedlevelsofautoantibodiesagainsteatalaseandsuperoxidedismutaseassociatedwithoxidativestressinpatientswithrheumatoidarthritisandsystemiclupuserythematosus[J].ScandJRheumatol,2008,37(2):103-108.[7]JiangX,ChenF.Theeffectoflipidperoxidesandsuperoxidedismutaseonsystemiclupuserythematosus:apreliminarystudy[J].ClinImmunolImmunopathol,1992,63(1):39-44.[8]Nozik-GrayekE,SulimanHB,PiantadosiCA.Extracellularsuperoxidedismutase[J].IntJBiochemCellBiol,2005,37(12):2466-2471.[9]Al-ShobailiHA,RasheedZ.Immunologicalstudiesofoxidizedsuperoxidedismutaseinpatientswithsystemiclupuserythematosus.Correlationwithdiseaseinductionandprogression[J].SaudiMedJ,2012,33(11):1177-1184.[10]ShahD,WanchuA,BhatnagarA.Interactionbetweenoxidativestressandchemokines:possiblepathogenicroleinsystemiclupuserythematosusandrheumatoidarthritis[J].Immunobiology,2011,216(9):1010-1017.[11]DeVriesN,DeFloraS.N-acetyl-L-cysteine[J].JCellBiochemSuppl,1993,17F:270-277.[12]DeFloraS,CesaroneCF,BalanskyRM,etal.ChemopreventivepropertiesandmechanismsofN-acetylcysteine.Theexperimentalbackground[J].JCellBiochemSuppl,1995,22:33-41.[13]MarsonA,KretschmerK,FramptonGM,etal.Foxp3occupancyandregulationofkeytargetgenesduringTcellstimulation[J].Nature,2007,445(7129):931-935.[14]TrowbridgeIS,ThomasML.CD45:anemergingroleasaproteintyrosinephosphataserequiredforlymphocyteactivationanddevelopment[J].AnnuRevImmunol,1994,12:85-116.[15]PoppemaS,LaiR,VisserL,etal.CD45(leucocytecommonantigen)expressioninTandBlymphocytesubsets[J].LeukLymphoma,1996,20(3-4):217-222.[16]MiyaraM,YoshiokaY,KitohA,etal.FunctionaldelineationanddifferentiationdynamicsofhumanCD4+TcellsexpressingtheFoxP3transcriptionfactor[J].Immunity,2009,30(6):899-911.[17]HochbergMC.UpdatingtheAmericanCollegeofRheumatologyrevisedcriteriafortheclassificationofsystemiclupuserythematosus[J].ArthritisRheum,1997,40(1):17-25.[18]SakaguchiS,SakaguchiN,AsanoM,etal.Immunologicself-tolerancemaintainedbyactivatedTcellsexpressingIL-2receptoralpha-chains(CD25):breakdownofasinglemechanismofselftolerancecausesvarious