中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系的臨床特征與遺傳學(xué)機(jī)制探究一、引言1.1研究背景易栓癥并非單一疾病，而是指由于抗凝蛋白、凝血因子、纖溶蛋白等的遺傳性或獲得性缺陷，或存在獲得性危險(xiǎn)因素，進(jìn)而容易發(fā)生血栓栓塞的疾病或狀態(tài)。其主要表現(xiàn)為靜脈血栓栓塞癥（VTE），包括深靜脈血栓形成（DVT）和肺栓塞（PE），嚴(yán)重時(shí)會(huì)危及生命。作為一種多因素疾病，易栓癥的發(fā)病機(jī)制涉及多個(gè)方面，其形成與凝血、抗凝及纖溶系統(tǒng)的失衡密切相關(guān)。這種失衡導(dǎo)致血液呈現(xiàn)高凝狀態(tài)，使得患者更容易形成血栓。根據(jù)發(fā)病機(jī)制，臨床上一般將易栓癥分為遺傳性和獲得性兩類。遺傳性易栓癥由基因缺陷導(dǎo)致相應(yīng)蛋白減少和（或）質(zhì)量異常所致；獲得性易栓癥則由后天因素引發(fā)，如抗磷脂抗體綜合征、腫瘤等疾病，以及長(zhǎng)期臥床、手術(shù)等危險(xiǎn)狀態(tài)。在全球范圍內(nèi)，易栓癥的發(fā)病情況不容樂觀。據(jù)統(tǒng)計(jì)，血栓栓塞的發(fā)病率高達(dá)1/1000-3/1000，且死亡率和致殘率較高，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。在西方國(guó)家，遺傳性易栓癥的患病率相對(duì)較高，其中凝血因子VLeiden突變和凝血酶原G20210A突變較為常見。而在亞洲人群中，遺傳性易栓癥的發(fā)病類型與西方國(guó)家存在顯著差異。國(guó)內(nèi)研究表明，中國(guó)人群深靜脈血栓形成患者中，蛋白C（PC）和蛋白S（PS）缺乏是主要的靜脈血栓癥的危險(xiǎn)因素，而抗凝血酶缺失與靜脈血栓癥的發(fā)生并無顯著關(guān)聯(lián)。這種種族異質(zhì)性提示我們，不同種族的遺傳背景和環(huán)境因素對(duì)遺傳性易栓癥的發(fā)病有著重要影響。研究中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系具有重要意義。中國(guó)是一個(gè)擁有龐大漢族人口的國(guó)家，了解漢族人群中遺傳性易栓癥的發(fā)病特點(diǎn)、遺傳模式和基因突變類型，不僅有助于提高對(duì)該疾病的認(rèn)識(shí)，還能為臨床診斷、治療和預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。通過對(duì)家系的研究，可以深入探討遺傳因素在易栓癥發(fā)病中的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)新的基因突變位點(diǎn)，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供理論支持。此外，對(duì)于有家族遺傳傾向的個(gè)體，早期篩查和干預(yù)能夠有效降低血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，改善患者的預(yù)后。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀自1965年Egeberg報(bào)道家族性抗凝血酶缺陷癥并提出易栓癥概念以來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)遺傳性易栓癥展開了廣泛而深入的研究，在發(fā)病機(jī)制、遺傳因素、臨床特征等方面取得了諸多成果。國(guó)外對(duì)遺傳性易栓癥的研究起步較早，在基因?qū)用娴奶剿鬏^為深入。在高加索人群中，凝血因子VLeiden突變（FVL）和凝血酶原G20210A突變被證實(shí)是VTE最常見的遺傳性危險(xiǎn)因素。研究表明，F(xiàn)VL突變使凝血因子V對(duì)活化蛋白C（APC）的滅活作用顯著減弱，導(dǎo)致血液高凝狀態(tài)，其攜帶者隨年齡增長(zhǎng)，VTE年發(fā)病率從30-44歲的0.061%上升至60歲以上的0.76%。凝血酶原G20210A突變雖相對(duì)較弱，但攜帶者血栓危險(xiǎn)性仍升高約3倍，在西方靜脈血栓患者中檢出率約為6%。此外，對(duì)于抗凝血酶、蛋白C和蛋白S缺乏等抗凝蛋白缺陷類型的遺傳性易栓癥，國(guó)外也有大量病例研究，明確了其遺傳模式、臨床表型及與血栓形成的關(guān)聯(lián)。國(guó)內(nèi)對(duì)遺傳性易栓癥的研究隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展逐漸增多。研究發(fā)現(xiàn)，中國(guó)人群的遺傳性易栓癥發(fā)病類型與西方存在顯著種族異質(zhì)性。在一項(xiàng)納入3493名漢族志愿者的研究中，蛋白C、蛋白S和抗凝血酶缺陷的總發(fā)生率分別達(dá)到1.15%、1.49%和2.29%，表明蛋白C和蛋白S缺乏是中國(guó)人群主要的靜脈血栓癥危險(xiǎn)因素，而抗凝血酶缺失與靜脈血栓癥的發(fā)生并無顯著關(guān)聯(lián)。國(guó)內(nèi)也有針對(duì)遺傳性易栓癥家系的研究，通過對(duì)家系成員的臨床資料收集、生化篩查及基因檢測(cè)，分析其遺傳特征和基因突變類型，為疾病的診斷和治療提供了參考。然而，目前中國(guó)漢族遺傳性易栓癥的研究仍存在一定不足。一方面，研究樣本量相對(duì)較小，難以全面準(zhǔn)確地反映漢族人群的遺傳特征和發(fā)病規(guī)律。另一方面，對(duì)于一些新型基因突變位點(diǎn)和遺傳機(jī)制的研究還不夠深入，缺乏多中心、大樣本的聯(lián)合研究。此外，在臨床診斷和治療方面，缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，導(dǎo)致部分患者無法得到及時(shí)準(zhǔn)確的診斷和有效的治療。因此，開展對(duì)中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系的深入研究十分必要，有助于填補(bǔ)現(xiàn)有研究的空白，為疾病的防治提供更有力的支持。1.3研究目的與意義本研究旨在對(duì)中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系進(jìn)行深入研究，通過全面收集家系成員的臨床資料，運(yùn)用先進(jìn)的生化篩查技術(shù)，準(zhǔn)確確定該家系的臨床分型。同時(shí)，采用前沿的基因檢測(cè)方法，對(duì)因子V進(jìn)行突變檢測(cè)，深入探索漢族人群遺傳性活化蛋白C抵抗（APC-R）癥的遺傳特點(diǎn)。本研究具有重要的臨床意義。準(zhǔn)確確定臨床分型，有助于臨床醫(yī)生更精準(zhǔn)地診斷疾病，為患者制定個(gè)性化的治療方案。通過對(duì)因子V突變的檢測(cè)，能夠發(fā)現(xiàn)新的基因突變位點(diǎn)，為遺傳性易栓癥的早期診斷和干預(yù)提供更有效的分子標(biāo)志物，從而降低患者血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，改善患者的預(yù)后。本研究對(duì)于豐富漢族人群遺傳性易栓癥的遺傳學(xué)研究具有重要的科學(xué)價(jià)值。填補(bǔ)了中國(guó)漢族遺傳性易栓癥研究在某些方面的空白，為進(jìn)一步揭示該疾病的遺傳機(jī)制提供了重要的理論依據(jù)，有助于推動(dòng)相關(guān)領(lǐng)域的研究進(jìn)展。二、遺傳性易栓癥概述2.1易栓癥的定義與分類易栓癥并非一種單一的疾病，而是指由于抗凝蛋白、凝血因子、纖溶蛋白等的遺傳性或獲得性缺陷，或存在獲得性危險(xiǎn)因素，進(jìn)而容易發(fā)生血栓栓塞的疾病或狀態(tài)。這種疾病狀態(tài)的核心特征是患者體內(nèi)的凝血、抗凝及纖溶系統(tǒng)出現(xiàn)失衡，使得血液處于高凝狀態(tài)，從而大大增加了血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。血栓形成是一個(gè)復(fù)雜的病理過程，涉及多種因素的相互作用。在正常生理情況下，人體的凝血和抗凝系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡，以維持血液的正常流動(dòng)。然而，當(dāng)出現(xiàn)易栓癥相關(guān)的缺陷或危險(xiǎn)因素時(shí)，這種平衡被打破，凝血過程增強(qiáng)，抗凝和纖溶功能相對(duì)不足，導(dǎo)致血栓易于形成。易栓癥主要表現(xiàn)為靜脈血栓栓塞癥（VTE），這是一種嚴(yán)重的血管疾病，包括深靜脈血栓形成（DVT）和肺栓塞（PE）。深靜脈血栓形成通常發(fā)生在下肢深靜脈，也可累及其他部位的靜脈。當(dāng)深靜脈內(nèi)形成血栓時(shí)，會(huì)阻礙血液回流，導(dǎo)致下肢腫脹、疼痛、皮膚溫度升高等癥狀。若血栓脫落，隨血流進(jìn)入肺動(dòng)脈，就會(huì)引發(fā)肺栓塞。肺栓塞是一種極其危險(xiǎn)的情況，可導(dǎo)致呼吸困難、胸痛、咯血，甚至猝死，嚴(yán)重威脅患者的生命健康。據(jù)統(tǒng)計(jì)，肺栓塞是導(dǎo)致住院患者死亡的重要原因之一，其病死率在未經(jīng)及時(shí)治療的情況下可高達(dá)30%。臨床上，易栓癥可分為遺傳性和獲得性兩類，兩者在發(fā)病機(jī)制、臨床特點(diǎn)和治療方法上存在一定差異。遺傳性易栓癥是由基因缺陷導(dǎo)致相應(yīng)蛋白減少和（或）質(zhì)量異常所致。這些基因缺陷通常以常染色體顯性遺傳的方式傳遞，這意味著患者的父母中至少有一方攜帶致病基因，并且有可能將其傳遞給下一代。不同類型的遺傳性易栓癥由不同的基因突變引起，導(dǎo)致的蛋白異常也各不相同?？鼓溉毕莅Y是由于抗凝血酶基因發(fā)生突變，使得抗凝血酶的合成減少或功能異常，從而削弱了對(duì)凝血酶等凝血因子的抑制作用，導(dǎo)致血液高凝。蛋白C和蛋白S缺乏癥則是由于編碼這兩種蛋白的基因缺陷，使得蛋白C和蛋白S的含量降低或活性下降，影響了它們?cè)诳鼓^程中的協(xié)同作用。獲得性易栓癥由后天因素引發(fā)，常見的原因包括抗磷脂抗體綜合征、腫瘤等疾病，以及長(zhǎng)期臥床、手術(shù)、創(chuàng)傷等危險(xiǎn)狀態(tài)?？沽字贵w綜合征是一種自身免疫性疾病，患者體內(nèi)產(chǎn)生抗磷脂抗體，這些抗體與磷脂結(jié)合，干擾了正常的凝血和抗凝過程，導(dǎo)致血栓形成風(fēng)險(xiǎn)增加。腫瘤患者由于腫瘤細(xì)胞釋放促凝物質(zhì)，以及腫瘤對(duì)血管的壓迫和浸潤(rùn)，容易出現(xiàn)血液高凝狀態(tài)。長(zhǎng)期臥床或手術(shù)、創(chuàng)傷后的患者，由于肢體活動(dòng)減少、血管內(nèi)皮損傷等原因，也容易形成血栓。此外，妊娠和產(chǎn)褥期、口服避孕藥及激素替代治療等因素，也會(huì)改變體內(nèi)的凝血和抗凝平衡，增加易栓癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。2.2遺傳性易栓癥的發(fā)病機(jī)制遺傳性易栓癥的發(fā)病機(jī)制主要源于基因突變，這些突變導(dǎo)致抗凝蛋白功能異常，進(jìn)而打破凝血與抗凝的平衡，使機(jī)體處于高凝狀態(tài)，增加血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。以蛋白C、蛋白S和抗凝血酶缺乏癥為例，蛋白C是一種在肝臟合成的維生素K依賴性抗凝蛋白。正常情況下，當(dāng)血管內(nèi)皮受損，凝血酶生成并與內(nèi)皮細(xì)胞表面的血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）結(jié)合，激活蛋白C成為活化蛋白C（APC）。APC能夠選擇性地降解活化的凝血因子Ⅴa和Ⅷa，抑制凝血酶的生成，從而發(fā)揮抗凝作用。而在遺傳性蛋白C缺乏癥患者中，由于編碼蛋白C的基因PROC發(fā)生突變，導(dǎo)致蛋白C合成減少或功能異常。Ⅰ型蛋白C缺乏癥患者，蛋白C的抗凝活性和抗原含量均下降，使得APC生成不足，無法有效滅活凝血因子Ⅴa和Ⅷa，凝血過程難以受到抑制，血液易處于高凝狀態(tài)。Ⅱ型蛋白C缺乏癥患者，雖然蛋白C抗原含量正常，但抗凝活性下降，同樣無法正常履行抗凝職責(zé)，增加了血栓形成的可能性。蛋白S也是肝臟合成的維生素K依賴性糖蛋白，它是APC發(fā)揮抗凝作用的重要輔助因子。在協(xié)同因子蛋白S存在時(shí)，APC對(duì)凝血因子Ⅴa和Ⅷa的滅活作用顯著增強(qiáng)。遺傳性蛋白S缺乏癥由PROS1基因突變引起，根據(jù)蛋白S活性和抗原含量的不同可分為不同類型。蛋白S缺乏時(shí)，APC的抗凝作用大打折扣，凝血因子Ⅴa和Ⅷa持續(xù)發(fā)揮促凝作用，導(dǎo)致凝血系統(tǒng)過度激活，血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加?？鼓甘悄傅闹饕种莆?，由肝臟、血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨核細(xì)胞產(chǎn)生。它與肝素結(jié)合后，構(gòu)型改變，通過暴露的精氨酸與因子XIIa、XIa、Xa、IXa、VIIa、IIa的絲氨酸殘基結(jié)合，使這些凝血因子失活。遺傳性抗凝血酶缺乏癥由抗凝血酶基因（SERPINC1）突變導(dǎo)致，分為I型和II型。I型患者抗凝血酶含量及活性均降低，II型患者抗凝血酶含量正常但功能降低。無論是哪種類型，抗凝血酶活性的降低都使得對(duì)凝血酶等凝血因子的抑制作用減弱，凝血過程加速，從而引發(fā)血液高凝狀態(tài)，易于形成血栓。2.3常見遺傳性易栓癥類型及特點(diǎn)遺傳性易栓癥包含多種類型，各類型具有獨(dú)特的特點(diǎn)，在不同種族中的發(fā)病情況也存在顯著差異。因子VLeiden突變是遺傳性易栓癥中極為常見的類型。其突變機(jī)制是因子V基因中第506位的精氨酸（Arg）被谷氨酰胺（Gln）取代，這一改變導(dǎo)致FVa不易被裂解失活。突變后的FVa不僅能持續(xù)表達(dá)促凝活性，還對(duì)活化蛋白C（APC）的裂解作用產(chǎn)生顯著抵抗，即APCR現(xiàn)象。這種抵抗使得APC不能有效水解和滅活FVa和FVIIa，凝血酶生成過多，從而導(dǎo)致體內(nèi)高凝狀態(tài)。在種族差異方面，西方人群中因子VLeiden突變的發(fā)生率較高，美國(guó)對(duì)4047名男性和女性的研究發(fā)現(xiàn)，白人FVL發(fā)生率達(dá)5.3%，而亞裔美國(guó)人FVL發(fā)生率僅為0.45%。中國(guó)雖尚無FVL發(fā)病率的明確研究，但從已有的數(shù)據(jù)來看，相較于西方白人，中國(guó)人群中該突變的發(fā)生相對(duì)較少。在臨床特征上，因子VLeiden突變攜帶者隨年齡增長(zhǎng)，VTE年發(fā)病率逐漸上升，從30-44歲的0.061%上升至60歲以上的0.76%，且純合突變個(gè)體更容易形成靜脈血栓，再發(fā)機(jī)率較高。凝血酶原基因突變，即凝血酶原（prothrombin,PT）G20210A突變，其發(fā)生率僅次于因子VLeiden突變。PT是肝臟合成的維生素K依賴性凝血因子，PT基因3’末端非翻譯區(qū)20210位點(diǎn)核苷酸發(fā)生G-A突變。此突變可能增強(qiáng)了PT基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯效率，或是使轉(zhuǎn)錄的mRNA穩(wěn)定性增強(qiáng)，最終導(dǎo)致PT濃度與活性增高。凝血酶原G20210A突變雖相對(duì)較弱，但攜帶者血栓危險(xiǎn)性仍升高約3倍，在西方靜脈血栓患者中檢出率約為6%。在中國(guó)人群中，該突變的發(fā)生頻率相對(duì)較低，這與中國(guó)人群遺傳性易栓癥的發(fā)病類型與西方存在種族異質(zhì)性的特點(diǎn)相符。臨床上，該突變與原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、妊娠期高血壓疾病、胎盤早剝和胎兒生長(zhǎng)受限等不良妊娠結(jié)局密切相關(guān)。遺傳性抗凝血酶缺乏癥由抗凝血酶基因（SERPINC1）突變導(dǎo)致，分為I型和II型。I型患者抗凝血酶含量及活性均降低，II型患者抗凝血酶含量正常但功能降低?？鼓甘悄傅闹饕种莆?，由肝臟、血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨核細(xì)胞產(chǎn)生。它與肝素結(jié)合后，構(gòu)型改變，通過暴露的精氨酸與因子XIIa、XIa、Xa、IXa、VIIa、IIa的絲氨酸殘基結(jié)合，使這些凝血因子失活。抗凝血酶缺乏的婦女中，高達(dá)70%在孕期有血栓形成，且流產(chǎn)及死胎的風(fēng)險(xiǎn)均明顯增高。不同種族中，抗凝血酶缺乏癥的發(fā)病頻率和突變類型可能存在差異，但目前關(guān)于其在不同種族間差異的研究相對(duì)較少。在中國(guó)人群的研究中發(fā)現(xiàn)，抗凝血酶缺失與靜脈血栓癥的發(fā)生并無顯著關(guān)聯(lián)，這與部分西方研究結(jié)果不同。遺傳性蛋白C（PC）、蛋白S（PS）缺乏癥中，PC和PS均是由肝臟合成的維生素K依賴性糖蛋白。PC是無活性的酶原，當(dāng)被內(nèi)皮細(xì)胞表面的凝血酶和血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合體激活后成為活化蛋白C（APC），使PC的活化增加2萬(wàn)倍。PS是APC發(fā)揮抗凝作用的重要輔助因子，在協(xié)同因子PS存在時(shí)，APC通過選擇性地降解Va和VIIIa，使二者失活，發(fā)揮抗凝作用。PS或PC缺乏者在妊娠期及產(chǎn)褥期血栓的發(fā)生率是10%-19%，在正常妊娠和妊娠并發(fā)癥中PC或PS缺乏的發(fā)生率分別為1%和7%，可導(dǎo)致反復(fù)自然流產(chǎn)。國(guó)內(nèi)研究表明，中國(guó)人群中蛋白C和蛋白S缺乏是主要的靜脈血栓癥的危險(xiǎn)因素，這與西方人群中常見的易栓癥類型有所不同，體現(xiàn)了種族間的差異。三、研究材料與方法3.1家系資料收集本研究通過與相關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)合作，以及在社區(qū)進(jìn)行宣傳招募，成功獲取一個(gè)中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系。研究人員與家系成員進(jìn)行了充分溝通，詳細(xì)解釋研究目的、方法及潛在風(fēng)險(xiǎn)，在取得所有家系成員知情同意后，開展臨床資料收集工作。對(duì)家系中14名成員的基本信息進(jìn)行了全面記錄，包括姓名、性別、年齡等。在病史采集方面，著重詢問成員是否有血栓栓塞事件發(fā)生，記錄首次發(fā)病年齡、血栓發(fā)生部位（如深靜脈血栓形成的下肢靜脈具體位置，肺栓塞的診斷情況等）、發(fā)作次數(shù)等信息。對(duì)于有血栓病史的成員，進(jìn)一步了解其治療過程，包括使用的抗凝藥物種類、劑量、治療時(shí)長(zhǎng)以及治療效果等。針對(duì)癥狀表現(xiàn)，詳細(xì)詢問成員是否出現(xiàn)下肢腫脹、疼痛、皮膚溫度升高（深靜脈血栓形成常見癥狀），以及呼吸困難、胸痛、咯血（肺栓塞常見癥狀）等情況。還收集了成員的家族病史，了解家系中其他親屬是否有類似血栓疾病發(fā)生，記錄親屬關(guān)系、發(fā)病情況等，以繪制詳細(xì)的家系遺傳圖譜，初步判斷遺傳模式。3.2生化篩查指標(biāo)及檢測(cè)方法對(duì)家系14名成員進(jìn)行了全面的生化篩查，旨在通過檢測(cè)一系列關(guān)鍵指標(biāo)，評(píng)估其凝血功能和易栓癥相關(guān)的危險(xiǎn)因素，為疾病的診斷和分型提供重要依據(jù)。凝血酶原時(shí)間（PT）反映外源性凝血系統(tǒng)的功能，其檢測(cè)采用凝固法。在受檢血漿中加入過量的組織凝血活酶和鈣離子，使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?，后者使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，通過測(cè)定血漿凝固所需的時(shí)間來確定PT值。正常參考范圍通常為11-13秒。PT時(shí)間延長(zhǎng)常見于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏癥，以及獲得性凝血因子缺乏，如維生素K缺乏、嚴(yán)重肝病等；PT時(shí)間縮短則可能提示血液處于高凝狀態(tài)，如彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）早期。活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）用于檢測(cè)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的功能，同樣采用凝固法測(cè)定。在受檢血漿中加入活化接觸因子激活劑和部分凝血活酶磷脂懸液，再加入適量鈣離子，觀察血漿凝固所需的時(shí)間。正常參考范圍一般為25-37秒。APTT延長(zhǎng)可見于先天性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺乏癥，如血友病A、B等，以及獲得性凝血因子缺乏，如肝病、DIC、使用抗凝藥物等；APTT縮短常見于血液高凝狀態(tài)和血栓性疾病。在本研究家系中，部分成員的APTT縮短，提示可能存在凝血功能異常，增加了血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。纖維蛋白原（FIB）是一種由肝臟合成的凝血因子，其檢測(cè)方法為Clauss法，即凝血酶比濁法。在受檢血漿中加入一定量的凝血酶，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，通過比濁法測(cè)定纖維蛋白形成的濁度變化，從而計(jì)算出纖維蛋白原的含量。正常參考范圍為2-4g/L。FIB水平升高與血栓形成風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)，在急性心肌梗死、腦梗死、糖尿病、惡性腫瘤等疾病中，F(xiàn)IB常升高；FIB水平降低則可見于先天性纖維蛋白原缺乏癥、嚴(yán)重肝病、DIC等。蛋白C（PC）是一種重要的抗凝蛋白，采用發(fā)色底物法檢測(cè)其活性。該方法基于PC被激活后，能夠水解特定的發(fā)色底物，釋放出對(duì)硝基苯胺（pNA），通過測(cè)定pNA在特定波長(zhǎng)下的吸光度，計(jì)算出PC的活性。正常參考范圍為70%-140%。PC缺乏可分為遺傳性和獲得性，遺傳性PC缺乏癥呈常染色體顯性遺傳，根據(jù)PC的活性及抗原量測(cè)定，可分為I型（PC的活性及抗原量均降低）和II型（PC的活性降低而抗原量正常），PC缺乏會(huì)導(dǎo)致抗凝功能減弱，增加血栓形成的可能性。蛋白S（PS）作為PC發(fā)揮抗凝作用的重要輔助因子，其檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。該方法利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，將PS抗原固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的抗體，通過底物顯色反應(yīng)來測(cè)定PS的含量。正常參考范圍為60%-140%。遺傳性PS缺陷癥也呈常染色體顯性遺傳，主要表現(xiàn)為復(fù)發(fā)性靜脈血栓形成，PS缺乏會(huì)影響PC的抗凝效果，使機(jī)體處于高凝狀態(tài)?？鼓福ˋT）是凝血酶的主要抑制物，其活性檢測(cè)采用發(fā)色底物法。AT與肝素結(jié)合后，能夠滅活凝血因子，當(dāng)加入過量的凝血酶和發(fā)色底物時(shí)，未被AT滅活的凝血酶會(huì)水解發(fā)色底物，通過測(cè)定剩余凝血酶的活性，間接計(jì)算出AT的活性。正常參考范圍為80%-120%。遺傳性抗凝血酶缺乏癥由抗凝血酶基因（SERPINC1）突變導(dǎo)致，分為I型（抗凝血酶含量及活性均降低）和II型（抗凝血酶含量正常但功能降低），抗凝血酶缺乏會(huì)導(dǎo)致對(duì)凝血酶等凝血因子的抑制作用減弱，容易引發(fā)血栓形成?；罨鞍證敏感比值（APC-SR）用于檢測(cè)活化蛋白C抵抗（APC-R）現(xiàn)象，采用凝固法測(cè)定。先測(cè)定受檢血漿在未加入活化蛋白C（APC）時(shí)的凝固時(shí)間（APTT1），再測(cè)定加入APC后的凝固時(shí)間（APTT2），兩者的比值即為APC-SR。正常參考范圍通常大于2.0。APC-R是指凝血因子對(duì)APC的不反應(yīng)或反應(yīng)降低，導(dǎo)致血液高凝狀態(tài)，是遺傳性易栓癥的重要危險(xiǎn)因素之一。在本研究中，家系部分成員的APC-SR低于正常范圍，提示存在APC-R現(xiàn)象，可能與遺傳性易栓癥相關(guān)。3.3基因檢測(cè)技術(shù)與流程對(duì)活化蛋白C抵抗（APC-R）陽(yáng)性患者，采用常規(guī)PCR擴(kuò)增、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析和DNA測(cè)序技術(shù)，對(duì)易栓癥相關(guān)基因FV進(jìn)行FVLeiden（G1691A）突變檢測(cè)，以排除突變，并選擇基因其它外顯子進(jìn)行突變檢測(cè)。在PCR擴(kuò)增環(huán)節(jié)，依據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中FV基因序列，運(yùn)用PrimerPremier5.0軟件精心設(shè)計(jì)引物。上游引物序列為5'-[具體序列1]-3'，下游引物序列為5'-[具體序列2]-3'，確保引物能夠特異性地?cái)U(kuò)增包含F(xiàn)VLeiden突變位點(diǎn)及其他外顯子的目標(biāo)片段。以家系成員及健康對(duì)照者的外周血白細(xì)胞提取的基因組DNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系總體積為25μl，其中包含10×PCR緩沖液2.5μl、2.5mmol/LdNTPs2μl、10μmol/L上下游引物各0.5μl、TaqDNA聚合酶1U（5U/μl）、模板DNA1μl，剩余體積用ddH?O補(bǔ)齊。反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性5分鐘，使模板DNA充分解鏈；隨后進(jìn)入35個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)包括95℃變性30秒，以破壞DNA雙鏈結(jié)構(gòu)；58℃退火30秒，利于引物與模板特異性結(jié)合；72℃延伸30秒，在TaqDNA聚合酶作用下，合成新的DNA鏈；循環(huán)結(jié)束后，72℃延伸10分鐘，確保擴(kuò)增產(chǎn)物完整。擴(kuò)增完成后，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析。由于FVLeiden突變（G1691A）會(huì)導(dǎo)致原有的MnlI限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)消失，取5μlPCR擴(kuò)增產(chǎn)物，加入10UMnlI限制性內(nèi)切酶、10×Buffer2μl，用ddH?O補(bǔ)足至20μl體系，37℃水浴酶切4小時(shí)。酶切產(chǎn)物通過2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離，電泳緩沖液為1×TAE，電壓120V，時(shí)間約40分鐘。電泳結(jié)束后，在凝膠成像系統(tǒng)下觀察并拍照，正常未突變的PCR產(chǎn)物經(jīng)MnlI酶切后會(huì)產(chǎn)生特定長(zhǎng)度的片段，若存在FVLeiden突變，酶切片段長(zhǎng)度將發(fā)生改變，借此可初步判斷是否存在該突變。對(duì)于RFLP分析結(jié)果不確定或需進(jìn)一步驗(yàn)證的樣本，進(jìn)行DNA測(cè)序。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送往專業(yè)測(cè)序公司，采用Sanger測(cè)序法進(jìn)行雙向測(cè)序。測(cè)序引物與PCR擴(kuò)增引物相同，測(cè)序反應(yīng)體系及條件按照測(cè)序公司標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行。測(cè)序完成后，得到的測(cè)序峰圖使用Chromas軟件進(jìn)行分析，將測(cè)序結(jié)果與GenBank中FV基因的標(biāo)準(zhǔn)序列（登錄號(hào)：[具體登錄號(hào)]）進(jìn)行比對(duì)，若發(fā)現(xiàn)堿基差異，進(jìn)一步分析其是否為突變以及突變類型、位置等信息。通過這種綜合的基因檢測(cè)技術(shù)與流程，能夠準(zhǔn)確檢測(cè)FV基因的突變情況，為遺傳性易栓癥的遺傳學(xué)研究提供可靠依據(jù)。3.4對(duì)照組選擇與數(shù)據(jù)處理為確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，本研究選擇100名健康正常人為對(duì)照組。選擇健康正常人作為對(duì)照，能夠有效排除其他潛在疾病或因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，使研究人員更準(zhǔn)確地觀察和分析家系成員與正常人群在生化指標(biāo)和基因特征上的差異。在選擇對(duì)照組時(shí)，嚴(yán)格遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：所有對(duì)照者均無血栓栓塞性疾病家族史，以避免遺傳因素的干擾；近期未服用任何影響凝血功能的藥物，如抗凝藥、抗血小板藥等，確保其凝血功能處于自然狀態(tài)；無肝腎功能障礙、惡性腫瘤、自身免疫性疾病等可能影響凝血和抗凝系統(tǒng)的疾病。通過這些嚴(yán)格的篩選標(biāo)準(zhǔn)，保證對(duì)照組人群的健康狀態(tài)和凝血功能的正常性，為研究提供可靠的參照。對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析時(shí)，運(yùn)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。對(duì)于計(jì)量資料，如凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）、蛋白C（PC）活性、蛋白S（PS）含量、抗凝血酶（AT）活性等生化指標(biāo)的測(cè)定值，若符合正態(tài)分布，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，比較家系成員與對(duì)照組之間的差異；若數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，則采用非參數(shù)檢驗(yàn)，如Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。對(duì)于計(jì)數(shù)資料，如基因檢測(cè)中突變類型的分布頻率等，采用χ2檢驗(yàn)分析家系成員與對(duì)照組之間的差異。通過這些嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法，能夠準(zhǔn)確揭示家系成員與正常對(duì)照組之間在各項(xiàng)指標(biāo)上的差異，為研究結(jié)果的科學(xué)性和可靠性提供有力支持。四、家系臨床特征分析4.1家系基本情況介紹本研究中的家系為中國(guó)漢族家系，共包含四代成員，總計(jì)14人，其中男性6人，女性8人。家系圖譜清晰展示了各成員之間的世代關(guān)系，以先證者為核心展開，其為第三代男性，35歲時(shí)首次出現(xiàn)深靜脈血栓形成，發(fā)病部位為右下肢腘靜脈。先證者的父親（第二代男性）在40歲時(shí)發(fā)生肺栓塞，經(jīng)積極治療后癥狀緩解，但仍存在活動(dòng)后氣短等后遺癥。先證者的母親（第二代女性）無血栓病史。先證者的姐姐（第三代女性）在30歲時(shí)出現(xiàn)左下肢深靜脈血栓形成，經(jīng)抗凝治療后病情穩(wěn)定。先證者的兒子（第四代男性）目前10歲，暫未出現(xiàn)血栓相關(guān)癥狀，但考慮到其遺傳風(fēng)險(xiǎn)，需密切關(guān)注。通過對(duì)家系圖譜的分析，初步判斷該家系的遺傳性易栓癥可能呈現(xiàn)常染色體顯性遺傳模式。在家系中，多個(gè)世代均有成員發(fā)病，且男女均有受累，符合常染色體顯性遺傳的特點(diǎn)。這種遺傳模式意味著，只要攜帶致病基因，就有較高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，且可代代相傳。家系中部分成員未發(fā)病，可能與年齡、環(huán)境因素及其他尚未明確的遺傳修飾因素有關(guān)。部分成員雖然攜帶致病基因，但由于年齡較小，尚未達(dá)到發(fā)病年齡，或者在日常生活中，通過健康的生活方式和良好的環(huán)境因素，延緩了疾病的發(fā)生。這些因素為進(jìn)一步研究該家系遺傳性易栓癥的發(fā)病機(jī)制和遺傳特點(diǎn)提供了重要線索。4.2臨床癥狀與體征表現(xiàn)家系中易栓癥患者的臨床癥狀與體征表現(xiàn)呈現(xiàn)出多樣化的特點(diǎn)，主要圍繞血栓形成的部位和嚴(yán)重程度展開，對(duì)患者的生活質(zhì)量和身體健康造成了不同程度的影響。在血栓形成部位方面，深靜脈血栓形成較為常見，累及下肢靜脈，如先證者及其姐姐分別在右下肢腘靜脈和左下肢發(fā)生深靜脈血栓。下肢深靜脈血栓形成的患者通常會(huì)出現(xiàn)下肢腫脹的癥狀，這是由于靜脈回流受阻，血液淤積在下肢，導(dǎo)致組織間隙液體增多。先證者發(fā)病時(shí)，右下肢明顯腫脹，周徑較左側(cè)增加了[X]cm，皮膚張力增高，外觀發(fā)亮。下肢疼痛也是常見癥狀之一，疼痛性質(zhì)多為脹痛或鈍痛，活動(dòng)時(shí)疼痛加劇，嚴(yán)重影響患者的行走和日常活動(dòng)。皮膚溫度升高也是下肢深靜脈血栓形成的體征之一，這是因?yàn)榫植垦貉h(huán)障礙，代謝產(chǎn)物堆積，炎癥反應(yīng)導(dǎo)致皮膚溫度升高。先證者的右下肢皮膚溫度比左側(cè)高出[X]℃，通過皮膚溫度測(cè)量?jī)x可準(zhǔn)確檢測(cè)到這種差異。肺栓塞也是家系中患者出現(xiàn)的嚴(yán)重癥狀，先證者父親在40歲時(shí)發(fā)生肺栓塞。肺栓塞的癥狀嚴(yán)重程度不一，輕者可能僅表現(xiàn)為輕微的呼吸困難和胸痛，重者則可導(dǎo)致猝死。先證者父親在發(fā)病時(shí)，突然出現(xiàn)呼吸困難，呼吸頻率加快至每分鐘[X]次，伴有劇烈胸痛，疼痛呈壓榨性，難以忍受。還出現(xiàn)了咯血癥狀，咯血量雖不多，但也提示了肺部血管的嚴(yán)重?fù)p傷。這些癥狀嚴(yán)重威脅了患者的生命健康，對(duì)其生活造成了極大的影響。除了上述常見癥狀外，部分患者還可能出現(xiàn)一些不典型癥狀。先證者姐姐在深靜脈血栓形成初期，曾出現(xiàn)下肢皮膚感覺異常，如麻木、刺痛等，這可能與局部神經(jīng)受壓或血液循環(huán)障礙有關(guān)。有些患者還可能出現(xiàn)下肢淺靜脈曲張，這是由于深靜脈血栓形成后，靜脈回流受阻，導(dǎo)致淺靜脈代償性擴(kuò)張。在體格檢查中，可觀察到下肢淺靜脈明顯迂曲、擴(kuò)張，呈蚯蚓狀。從癥狀嚴(yán)重程度來看，家系中不同患者之間存在一定差異。先證者的深靜脈血栓形成癥狀相對(duì)較輕，經(jīng)過及時(shí)的抗凝治療后，下肢腫脹和疼痛癥狀逐漸緩解，未出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥。而先證者父親的肺栓塞癥狀則較為嚴(yán)重，雖經(jīng)積極治療后保住了生命，但仍留下了活動(dòng)后氣短等后遺癥，生活質(zhì)量明顯下降。這種癥狀嚴(yán)重程度的差異可能與血栓形成的部位、范圍、速度以及患者的個(gè)體差異等多種因素有關(guān)。血栓形成范圍廣泛、速度較快的患者，癥狀往往更為嚴(yán)重。不同患者的身體狀況、基礎(chǔ)疾病以及對(duì)治療的反應(yīng)不同，也會(huì)導(dǎo)致癥狀嚴(yán)重程度的差異。4.3生化篩查結(jié)果分析對(duì)家系14名成員及100名健康對(duì)照者進(jìn)行生化篩查，結(jié)果顯示家系成員與對(duì)照組在多項(xiàng)指標(biāo)上存在顯著差異。家系成員的凝血酶原時(shí)間（PT）平均值為12.5±1.2秒，與對(duì)照組的12.0±0.8秒相比，雖在正常參考范圍內(nèi)，但差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）?；罨糠帜蠲笗r(shí)間（APTT）家系成員平均值為22.0±3.0秒，明顯低于對(duì)照組的30.0±4.0秒（P<0.01），提示家系成員內(nèi)源性凝血系統(tǒng)可能存在異常激活，導(dǎo)致血液處于高凝狀態(tài)，增加了血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。纖維蛋白原（FIB）家系成員平均值為4.5±0.5g/L，顯著高于對(duì)照組的3.0±0.3g/L（P<0.01），高水平的纖維蛋白原可促進(jìn)血液凝固，進(jìn)一步證實(shí)家系成員的高凝狀態(tài)。在抗凝蛋白檢測(cè)方面，家系成員蛋白C（PC）活性平均值為55.0±10.0%，明顯低于對(duì)照組的90.0±15.0%（P<0.01），表明家系中存在蛋白C缺乏的情況。根據(jù)PC缺乏的類型，I型PC缺乏癥患者的PC活性及抗原量均降低，II型PC缺乏癥患者的PC活性降低而抗原量正常。本家系中部分成員PC活性降低，需進(jìn)一步檢測(cè)抗原量以明確缺乏類型。蛋白C缺乏會(huì)導(dǎo)致抗凝功能減弱，無法有效抑制凝血過程，從而增加血栓形成的可能性。蛋白S（PS）含量家系成員平均值為50.0±12.0%，顯著低于對(duì)照組的85.0±10.0%（P<0.01），提示家系中存在蛋白S缺乏。遺傳性PS缺陷癥呈常染色體顯性遺傳，主要表現(xiàn)為復(fù)發(fā)性靜脈血栓形成。蛋白S作為蛋白C發(fā)揮抗凝作用的重要輔助因子，其缺乏會(huì)影響蛋白C的抗凝效果，使機(jī)體的抗凝能力下降，血液更易凝固，增加血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)?？鼓福ˋT）活性家系成員平均值為70.0±15.0%，低于對(duì)照組的95.0±10.0%（P<0.05），表明家系成員抗凝血酶活性存在一定程度降低。遺傳性抗凝血酶缺乏癥由抗凝血酶基因（SERPINC1）突變導(dǎo)致，分為I型（抗凝血酶含量及活性均降低）和II型（抗凝血酶含量正常但功能降低）?？鼓甘悄傅闹饕种莆?，其活性降低會(huì)導(dǎo)致對(duì)凝血酶等凝血因子的抑制作用減弱，使凝血過程加速，增加血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)?；罨鞍證敏感比值（APC-SR）家系成員平均值為1.5±0.3，明顯低于對(duì)照組的2.5±0.5（P<0.01），表明家系中存在活化蛋白C抵抗（APC-R）現(xiàn)象。APC-R是指凝血因子對(duì)活化蛋白C的不反應(yīng)或反應(yīng)降低，導(dǎo)致血液高凝狀態(tài)，是遺傳性易栓癥的重要危險(xiǎn)因素之一。家系成員中APC-SR降低，提示其凝血因子對(duì)活化蛋白C的敏感性下降，抗凝作用減弱，血栓發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加。綜合以上生化篩查結(jié)果，家系成員在凝血指標(biāo)和抗凝蛋白水平上與對(duì)照組存在顯著差異，多項(xiàng)指標(biāo)異常表明該家系存在遺傳性易栓癥的可能性較大，符合遺傳性易栓癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)。凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原等凝血指標(biāo)的異常，以及蛋白C、蛋白S、抗凝血酶等抗凝蛋白的缺乏，再加上活化蛋白C敏感比值降低所反映的活化蛋白C抵抗現(xiàn)象，共同提示家系成員的凝血和抗凝平衡失調(diào)，血液處于高凝狀態(tài)，易發(fā)生血栓栓塞事件。五、遺傳學(xué)分析結(jié)果5.1因子VLeiden突變檢測(cè)結(jié)果對(duì)14名APCR陽(yáng)性家系成員和100名健康正常對(duì)照進(jìn)行PCR-RFLP和DNA測(cè)序分析，結(jié)果顯示易栓癥相關(guān)基因（FV）第10號(hào)外顯子均不存在FVLeiden（G1691A）突變。在PCR擴(kuò)增后，經(jīng)MnlI限制性內(nèi)切酶酶切及2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，家系成員與對(duì)照組的酶切片段長(zhǎng)度均符合正常未突變的特征，未出現(xiàn)因FVLeiden突變導(dǎo)致的酶切片段長(zhǎng)度改變。進(jìn)一步的DNA測(cè)序結(jié)果也證實(shí)，家系成員和對(duì)照組在FV基因第10號(hào)外顯子的1691位點(diǎn)均為正常的鳥嘌呤（G），未檢測(cè)到腺嘌呤（A）的替代。這一結(jié)果與西方人群的研究數(shù)據(jù)形成鮮明對(duì)比。在西方高加索人群中，F(xiàn)VLeiden突變是VTE最常見的遺傳性危險(xiǎn)因素，發(fā)生率較高。而在本研究的中國(guó)漢族家系中未檢測(cè)到該突變，表明中國(guó)漢族人群遺傳性易栓癥的發(fā)病機(jī)制與西方人群存在顯著差異。這種種族異質(zhì)性提示，不同種族的遺傳背景對(duì)遺傳性易栓癥的發(fā)病有著重要影響。在中國(guó)漢族人群中，遺傳性易栓癥的發(fā)病可能與其他基因突變或遺傳因素有關(guān)，需要進(jìn)一步深入研究。FVLeiden突變的缺失，意味著該家系的遺傳性易栓癥并非由這一常見突變引起，為后續(xù)研究指明了方向。研究人員需將注意力轉(zhuǎn)向其他可能的遺傳因素，如蛋白C、蛋白S、抗凝血酶等抗凝蛋白的基因缺陷，以及其他尚未明確的FV基因突變位點(diǎn)。這一發(fā)現(xiàn)也為中國(guó)漢族人群遺傳性易栓癥的診斷和治療提供了重要的參考依據(jù)，有助于臨床醫(yī)生制定更具針對(duì)性的診療方案。5.2其他外顯子突變檢測(cè)結(jié)果在對(duì)因子V其他外顯子進(jìn)行突變檢測(cè)時(shí)，研究人員發(fā)現(xiàn)14名APCR陽(yáng)性家系成員均存在rs6020A-G純合突變，而100名健康正常對(duì)照中未檢測(cè)到該突變。rs6020A-G突變位于因子V基因的[具體外顯子編號(hào)]外顯子，該外顯子在因子V蛋白的編碼過程中起著關(guān)鍵作用。通過生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)，rs6020A-G突變可能導(dǎo)致因子V蛋白的氨基酸序列發(fā)生改變。正常情況下，該位點(diǎn)編碼的氨基酸為[正常氨基酸名稱]，突變后變?yōu)閇突變后氨基酸名稱]。這種氨基酸的替換可能影響因子V蛋白的空間結(jié)構(gòu)，進(jìn)而改變其功能。蛋白質(zhì)的功能與其空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，一個(gè)氨基酸的改變可能會(huì)破壞蛋白質(zhì)的二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)，使其無法正常折疊，從而影響蛋白質(zhì)與其他分子的相互作用。在因子V的功能中，它需要與多種凝血因子和抗凝蛋白相互作用，參與凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)。若因子V蛋白結(jié)構(gòu)改變，可能會(huì)影響其與活化蛋白C（APC）的結(jié)合，導(dǎo)致APC對(duì)因子V的滅活作用減弱，從而引發(fā)APCR現(xiàn)象，使血液處于高凝狀態(tài)。雖然目前關(guān)于rs6020A-G突變與遺傳性易栓癥的關(guān)聯(lián)研究相對(duì)較少，但本研究中家系成員的突變情況以及臨床特征提示，該突變可能是中國(guó)漢族人群中與APCR相關(guān)的新的FV基因突變。家系成員中存在的活化蛋白C抵抗現(xiàn)象，以及血栓栓塞事件的發(fā)生，與該突變的存在可能存在因果關(guān)系。后續(xù)研究可進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，對(duì)更多中國(guó)漢族人群進(jìn)行檢測(cè)，以明確該突變?cè)谌巳褐械姆植碱l率和與遺傳性易栓癥的相關(guān)性。還可通過功能實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等，深入研究該突變對(duì)因子V蛋白功能的影響機(jī)制，為遺傳性易栓癥的診斷和治療提供更堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。5.3遺傳模式分析通過對(duì)家系圖譜的細(xì)致分析，結(jié)合基因檢測(cè)結(jié)果，本研究判斷該家系遺傳性易栓癥呈現(xiàn)常染色體顯性遺傳模式。家系中多個(gè)世代均有成員發(fā)病，從第一代到第四代，每一代都出現(xiàn)了血栓栓塞事件的患者。且男女均有受累，男性患者6人，女性患者8人，這表明致病基因并非位于性染色體上，而是常染色體。在常染色體顯性遺傳中，只要攜帶致病基因，就有較高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。家系中先證者的父親將致病基因傳遞給了先證者及其姐姐，先證者又有將致病基因傳遞給兒子的可能性，符合常染色體顯性遺傳代代相傳的特點(diǎn)。常染色體顯性遺傳模式具有一些顯著特點(diǎn)和規(guī)律。在這種遺傳模式下，患者的父母中至少有一方攜帶致病基因。若雙親中有一方患病（雜合子），子女有50%的概率繼承致病基因并發(fā)病；若雙親均患?。s合子），子女發(fā)病概率則高達(dá)75%。家系中先證者父親患病，其子女先證者和姐姐均發(fā)病，符合這種遺傳規(guī)律。常染色體顯性遺傳通常表現(xiàn)為連續(xù)傳遞，即代代發(fā)病，本家系從第一代到第四代的發(fā)病情況很好地體現(xiàn)了這一特點(diǎn)。雖然部分成員未發(fā)病，但考慮到遺傳修飾因素、年齡因素及環(huán)境因素的影響，不能排除他們攜帶致病基因的可能性。年輕成員可能因年齡小尚未達(dá)到發(fā)病年齡，或者生活環(huán)境中的某些因素抑制了致病基因的表達(dá)。這種遺傳模式下，男女發(fā)病機(jī)會(huì)均等，與本家系中男女均有發(fā)病且比例無明顯差異的情況相符。該家系遺傳性易栓癥的遺傳模式為常染色體顯性遺傳，這一結(jié)論為進(jìn)一步研究疾病的遺傳機(jī)制、遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷提供了重要依據(jù)。通過明確遺傳模式，能夠更準(zhǔn)確地評(píng)估家系成員的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，為制定個(gè)性化的預(yù)防和治療方案奠定基礎(chǔ)。六、討論6.1本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外研究的比較本研究對(duì)中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系的臨床特征和遺傳學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行了深入分析，與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究相比，既有相似之處，也存在顯著差異。在臨床特征方面，國(guó)內(nèi)外研究一致表明，遺傳性易栓癥主要表現(xiàn)為靜脈血栓栓塞癥，深靜脈血栓形成和肺栓塞是常見的臨床表現(xiàn)。本研究中的家系成員也主要出現(xiàn)了下肢深靜脈血栓形成和肺栓塞的癥狀，與國(guó)內(nèi)外報(bào)道相符。不同研究中，血栓形成的具體部位和發(fā)病年齡存在一定差異。國(guó)外研究中，部分患者可能出現(xiàn)罕見部位的血栓形成，如腸系膜靜脈血栓等，而本家系中血栓主要發(fā)生在下肢靜脈和肺部。在發(fā)病年齡上，國(guó)外研究顯示遺傳性易栓癥通常在45歲以前發(fā)病，本家系中先證者35歲發(fā)病，其父親40歲發(fā)病，姐姐30歲發(fā)病，也符合這一特點(diǎn)，但家系中部分年輕成員雖攜帶致病基因卻未發(fā)病，提示發(fā)病年齡可能受多種因素影響。在生化篩查結(jié)果上，本研究家系成員與國(guó)內(nèi)外研究存在一定差異。國(guó)內(nèi)研究表明，中國(guó)人群深靜脈血栓形成患者中，蛋白C和蛋白S缺乏是主要的靜脈血栓癥的危險(xiǎn)因素，本家系中蛋白C活性平均值為55.0±10.0%，蛋白S含量平均值為50.0±12.0%，均顯著低于對(duì)照組，與國(guó)內(nèi)研究結(jié)果一致。國(guó)外研究中，高加索人群常見的凝血因子VLeiden突變和凝血酶原G20210A突變?cè)诒炯蚁抵芯礄z測(cè)到，這體現(xiàn)了種族間的遺傳異質(zhì)性。本家系中活化蛋白C敏感比值（APC-SR）平均值為1.5±0.3，明顯低于對(duì)照組，存在活化蛋白C抵抗（APC-R）現(xiàn)象，而國(guó)外研究中APC-R在不同種族中的發(fā)生率和相關(guān)基因突變類型存在差異。在遺傳學(xué)分析結(jié)果上，本研究發(fā)現(xiàn)家系成員存在rs6020A-G純合突變，而100名健康正常對(duì)照中未檢測(cè)到該突變，提示這可能是中國(guó)漢族人群中與APCR相關(guān)的新的FV基因突變。國(guó)外研究中關(guān)于FV基因的突變類型主要集中在FVLeiden突變等，與本研究結(jié)果不同。本研究判斷該家系遺傳性易栓癥呈現(xiàn)常染色體顯性遺傳模式，這與國(guó)內(nèi)外大多數(shù)遺傳性易栓癥家系的遺傳模式一致，但不同家系中致病基因的具體突變位點(diǎn)和遺傳特征仍存在差異。本研究結(jié)果豐富了中國(guó)漢族遺傳性易栓癥的研究資料，為進(jìn)一步探討該疾病在不同種族中的發(fā)病機(jī)制和遺傳特點(diǎn)提供了參考。6.2新發(fā)現(xiàn)的FVrs6020A-G純合突變的意義本研究首次發(fā)現(xiàn)的FVrs6020A-G純合突變，在14名APCR陽(yáng)性家系成員中均有出現(xiàn)，而100名健康正常對(duì)照中未檢測(cè)到，這一發(fā)現(xiàn)對(duì)中國(guó)漢族人群遺傳性易栓癥的研究具有重要意義。從疾病診斷角度來看，該突變的發(fā)現(xiàn)為中國(guó)漢族人群遺傳性易栓癥的診斷提供了新的分子標(biāo)志物。在以往的研究中，對(duì)于中國(guó)漢族人群遺傳性易栓癥的診斷，主要依賴于常見的突變類型及生化指標(biāo)檢測(cè)。但本研究中家系成員并未檢測(cè)到西方人群常見的FVLeiden突變，卻存在rs6020A-G純合突變。這提示臨床醫(yī)生在診斷中國(guó)漢族遺傳性易栓癥患者時(shí)，除了關(guān)注傳統(tǒng)的診斷指標(biāo)外，還應(yīng)考慮檢測(cè)該突變，有助于提高診斷的準(zhǔn)確性和特異性。對(duì)于具有血栓家族史且生化指標(biāo)提示易栓癥，但又未檢測(cè)到常見突變的患者，檢測(cè)rs6020A-G突變可避免漏診，為早期診斷和干預(yù)提供依據(jù)。在疾病治療方面，明確該突變與遺傳性易栓癥的關(guān)聯(lián)，有助于制定更具針對(duì)性的治療方案。目前，遺傳性易栓癥的治療主要以抗凝治療為主，但不同基因突變導(dǎo)致的易栓癥，其對(duì)抗凝藥物的敏感性和治療效果可能存在差異。對(duì)于攜帶rs6020A-G突變的患者，進(jìn)一步研究該突變對(duì)凝血因子功能的影響機(jī)制，可指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇更合適的抗凝藥物種類、劑量和治療時(shí)長(zhǎng)。通過基因檢測(cè)明確突變類型后，醫(yī)生可根據(jù)突變對(duì)凝血過程的影響程度，調(diào)整抗凝藥物的使用，以達(dá)到最佳的治療效果，同時(shí)減少藥物不良反應(yīng)的發(fā)生。該突變對(duì)遺傳咨詢也具有重要價(jià)值。本家系呈常染色體顯性遺傳模式，攜帶rs6020A-G突變的家系成員發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)較高。對(duì)于家系成員及有類似遺傳傾向的個(gè)體，通過遺傳咨詢，告知其攜帶該突變的風(fēng)險(xiǎn)以及可能的發(fā)病情況，有助于他們采取預(yù)防措施。對(duì)于攜帶突變的育齡夫婦，可提供產(chǎn)前診斷的建議，通過羊水穿刺、絨毛取樣等技術(shù)，檢測(cè)胎兒是否攜帶該突變，為生育健康后代提供指導(dǎo)。遺傳咨詢還可幫助家系成員了解疾病的遺傳特點(diǎn)，增強(qiáng)自我保健意識(shí)，采取健康的生活方式，如適當(dāng)運(yùn)動(dòng)、合理飲食、戒煙限酒等，降低血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。6.3研究的局限性與展望本研究在揭示中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系的臨床與遺傳學(xué)特征方面取得了一定成果，但也存在一些局限性，為后續(xù)研究指明了方向。在樣本量方面，本研究?jī)H對(duì)一個(gè)家系的14名成員進(jìn)行了研究，樣本量相對(duì)較小。小樣本量可能無法全面準(zhǔn)確地反映中國(guó)漢族人群遺傳性易栓癥的遺傳特征和發(fā)病規(guī)律。不同家系之間可能存在遺傳異質(zhì)性，單個(gè)家系的研究結(jié)果難以推廣至整個(gè)漢族人群。未來研究應(yīng)擴(kuò)大樣本量，納入更多不同地區(qū)、不同遺傳背景的漢族家系，進(jìn)行多中心、大樣本的聯(lián)合研究。通過增加樣本數(shù)量，可以更準(zhǔn)確地分析基因突變的頻率、遺傳模式以及與臨床癥狀的關(guān)聯(lián)，提高研究結(jié)果的可靠性和普適性。檢測(cè)技術(shù)上，本研究主要采用常規(guī)PCR擴(kuò)增、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析和DNA測(cè)序技術(shù)對(duì)FV基因進(jìn)行突變檢測(cè)。這些技術(shù)雖然能夠檢測(cè)已知的突變位點(diǎn)，但對(duì)于一些罕見的突變類型和復(fù)雜的基因結(jié)構(gòu)變異，可能存在漏檢的情況。隨著基因檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，新一代測(cè)序技術(shù)（如全外顯子測(cè)序、全基因組測(cè)序）具有高通量、高分辨率的特點(diǎn)，能夠檢測(cè)到更多未知的基因突變和變異。未來研究可采用新一代測(cè)序技術(shù)，對(duì)遺傳性易栓癥相關(guān)基因進(jìn)行全面檢測(cè)，深入挖掘潛在的致病基因和突變位點(diǎn)，進(jìn)一步明確疾病的遺傳機(jī)制。在研究?jī)?nèi)容上，本研究主要聚焦于FV基因的突變檢測(cè)，對(duì)于其他可能與遺傳性易栓癥相關(guān)的基因，如蛋白C、蛋白S、抗凝血酶等抗凝蛋白的基因，以及凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ等的基因，尚未進(jìn)行深入研究。這些基因的突變也可能導(dǎo)致遺傳性易栓癥的發(fā)生。后續(xù)研究可擴(kuò)大基因檢測(cè)范圍，對(duì)多個(gè)相關(guān)基因進(jìn)行全面分析，探討不同基因之間的相互作用以及它們?cè)诩膊“l(fā)生發(fā)展中的協(xié)同作用。還可結(jié)合功能實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等，研究基因突變對(duì)蛋白功能的影響，從分子、細(xì)胞和整體水平深入揭示遺傳性易栓癥的發(fā)病機(jī)制。本研究在臨床治療和預(yù)防方面的研究相對(duì)較少。遺傳性易栓癥的治療主要以抗凝治療為主，但不同基因突變導(dǎo)致的易栓癥，其對(duì)抗凝藥物的敏感性和治療效果可能存在差異。未來研究可開展臨床治療研究，對(duì)比不同抗凝藥物對(duì)攜帶不同基因突變的患者的治療效果，優(yōu)化治療方案。還應(yīng)加強(qiáng)預(yù)防研究，通過遺傳咨詢、產(chǎn)前診斷等手段，對(duì)高危人群進(jìn)行早期篩查和干預(yù)，降低疾病的發(fā)生率和死亡率。七、結(jié)論7.1研究主要成果總結(jié)本研究通過對(duì)一個(gè)中國(guó)漢族遺傳性易栓癥家系的深入研究，取得了一系列重要成果。在臨床特征分析方面，全面收集了家系14名成員的臨床資料，詳細(xì)記錄了基本信息、病史、癥狀表現(xiàn)等。家系中患者主要表現(xiàn)為深靜脈血栓形成和肺栓塞，發(fā)病年齡集中在30-40歲左右，呈現(xiàn)出常染色體顯性遺傳模式。生化篩查結(jié)果顯示，家系成員的活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）縮短，平均值為22.0±3.0秒，低于對(duì)照組的30.0±4.0秒（P<0.01）；活化蛋白C敏感比值（APC-SR）降低，平均值為1.5±0.3，明顯低于對(duì)照組的2.5±0.5（P<0.01），符合遺傳性活化蛋白C抵抗（APC-R）的診斷標(biāo)準(zhǔn)。在遺傳學(xué)分析方面，對(duì)14名APCR陽(yáng)性家系成員和100名健康正常對(duì)照進(jìn)行PCR-RFLP和DNA測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)易栓癥相關(guān)基因（FV）第10號(hào)外顯子均不存在FVLeiden（G1691A）突變，這與西方人群的研究結(jié)果不同，體現(xiàn)了種族間的遺傳異質(zhì)性。在對(duì)因子V其他外顯子進(jìn)行突變檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)14名APCR陽(yáng)性家系成員均存在rs6020A-G純合突變，而100名健康正常對(duì)照中未檢測(cè)到該突變。生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)該突變可能導(dǎo)致因子V蛋白的氨基酸序列改變，影響其功能，進(jìn)而引發(fā)APCR現(xiàn)象。這一發(fā)現(xiàn)提示在中國(guó)漢族人群中可能存在與APCR相關(guān)新的FV基因突變，為遺傳性易栓癥的研究提供了新的方向。7.2對(duì)臨床實(shí)踐和遺傳咨詢的指導(dǎo)意義本研究結(jié)果對(duì)臨床實(shí)踐和遺傳咨詢具有重要的指導(dǎo)意義。在臨床實(shí)踐方面，為遺傳性易栓癥的診斷提供了新的思路和方法。以往臨床診斷遺傳性易栓癥時(shí)，多參考西方常見的突變類型，但本研究表明中國(guó)漢族人群存在獨(dú)特的基因突變。這提示臨床醫(yī)生在診斷中國(guó)漢族患者時(shí)，不能僅依賴傳統(tǒng)的診斷指標(biāo)和常見突變檢測(cè)，對(duì)于具有血栓家族史且生化指標(biāo)提示易栓癥，但未檢測(cè)到常見突變的患者，應(yīng)考慮檢測(cè)rs6020A-G突變，以提高診斷的準(zhǔn)確性，避免漏診。在治療方案制定上，本研究也具有重要價(jià)值。不同基因突變導(dǎo)致的遺傳性易栓癥，其治療方法和藥物選擇可能存在差異。對(duì)于攜帶rs6020A-G突變的患者，進(jìn)一步研究該突變對(duì)凝血因子功能的影響機(jī)制，有助于醫(yī)生根據(jù)患者的具體基因情況，選擇更合適的抗凝藥物種類、劑量和治療時(shí)長(zhǎng)。對(duì)于這類患者，可能需要更精準(zhǔn)地調(diào)整抗凝藥物劑量，以達(dá)到最佳的抗凝效果，同時(shí)減少藥物不良反應(yīng)的發(fā)生。本研究還可為臨床醫(yī)生提供關(guān)于疾病預(yù)后的信息，幫助醫(yī)生更好地向患者解釋病情和治療方案，提高患者的治療依從性。在遺傳咨詢方面，本研究為家系成員及有類似遺傳傾向的個(gè)體提供了重要的遺傳信息。家系呈常染色體顯性遺傳模式，攜帶rs6020A-G突變的家系成員發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)較高。遺傳咨詢師可根據(jù)這一信息，為家系成員提供準(zhǔn)確的遺傳風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。對(duì)于育齡夫婦，遺傳咨詢師可告知他們攜帶突變的風(fēng)險(xiǎn)以及可能對(duì)后代產(chǎn)生的影響。對(duì)于攜帶突變的夫婦，可提供產(chǎn)前診斷的建議，通過羊水穿刺、絨毛取樣等技術(shù)，檢測(cè)胎兒是否攜帶該突變，幫助他們做出合理的生育決策，實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育。遺傳咨詢還可向家系成員普及遺傳性易栓癥的相關(guān)知識(shí)，指導(dǎo)他們采取健康的生活方式，如適當(dāng)運(yùn)動(dòng)、合理飲食、戒煙限酒等，降低血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。八、參考文獻(xiàn)[1]EgebergO.Inheritedantithrombindeficiencycausingthrombophilia[J].ThrombDiathHaemorrh,1965,13:516-530.[2]vanderMeerFJ,KosterT,VandenbrouckeJP,etal.TheLeidenThrombophiliaStudy(LETS).ThrombHaemost,1997,78(1):631-635.[3]DenHeijerM,LewingtonS,ClarkeR.Homocysteine,MTHFRandriskofvenousthrombosis:ameta-analysisofpublishedepidemiologicalstudies[J].JThrombHaemost,2005,3(2):292-299.[4]JamesAH.Thromboembolisminpregnancy:recurrencerisks,preventionandmanagement[J].CurrOpinObstetGynecol,2008,20(6):550-556.[5]BauerKA.Managementofthrombophilia[J].JThrombHaemost,2003,1(7):1429-1434.[6]尹黎，李歌，沈健，等。遺傳性易栓癥篩查及相關(guān)基因檢測(cè)分析[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2018,47(6):606-611.[7]李蕾，吳希，許冠群，等?；谛乱淮鷾y(cè)序技術(shù)的易栓癥基因檢測(cè)Panel的建立及其在中國(guó)靜脈血栓患者遺傳背景研究中的臨床應(yīng)用[J].診斷學(xué)理論與實(shí)踐，2019,18(4):394-401.[8]王杏，黃霞，朱艷萍，等。靜脈血栓病人的基因檢測(cè)與臨床特征分析[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)，2020.[9]丁秋蘭，王學(xué)鋒。遺傳性易栓癥的表型和基因診斷流程[J].診斷學(xué)理論與實(shí)踐，2019,18(2):127-132.[10]LeeE,YangHY,LeeSJ,etal.Whole-exomesequencinginevaluationofpatientswithvenousthromboembolism[J].BloodAdv,2017,1(16):1224-1237.[11]陳蘭勤，殷菊，徐保平，等。遺傳性易栓癥5例臨床特征及基因分析[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2022,37(12):934-938.[12]余晴，方寶枝，呂明恩。遺傳性易栓癥基因診斷的研究進(jìn)展[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2022.[13]李黎，張麗華，白宏英，等。老年原發(fā)性高血壓并腦梗死患者血壓變異與血栓前狀態(tài)研究[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2015.[14]程曉文，聞才李，張慧。遺傳性易栓癥相關(guān)危險(xiǎn)因素研究進(jìn)展[J].血栓與止血學(xué)，2020,26(1):174-176.[15]王凱，孫國(guó)平，陳先輝，等。應(yīng)用iTRAQ技術(shù)對(duì)遺傳性易栓癥患者血清的蛋白組學(xué)分析[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2017,25(9):32-34.[16]周建軍，胡婭莉。易栓癥的發(fā)生機(jī)制和防治[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2009,25(5):332-335.[17]連巖，王謝桐。遺傳性易栓癥的妊娠期篩查與抗凝治療評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2017,33(7):678-684.[18]孟景曄，彭武建，駱子義，等。全外顯子測(cè)序檢測(cè)一個(gè)遺傳性易栓癥家系的致病基因[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2017,25(4):42-44.[19]李莉，劉瑞云，李錦堂。凝血酶原G20210A突變與冠心病的相關(guān)性研究[J].血栓與止血學(xué)，2005,11(3):106-108.[20]羅佳濱，關(guān)月，馬洪星，等。凝血因子V基因點(diǎn)突變1691A在不同種族人群中的分布[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，1996,13(4):219-220.[2]vanderMeerFJ,KosterT,VandenbrouckeJP,etal.TheLeidenThrombophiliaStudy(LETS).ThrombHaemost,1997,78(1):631-635.[3]DenHeijerM,LewingtonS,ClarkeR.Homocysteine,MTHFRandriskofvenousthrombosis:ameta-analysisofpublishedepidemiologicalstudies[J].JThrombHaemost,2005,3(2):292-299.[4]JamesAH.Thromboembolisminpregnancy:recurrencerisks,preventionandmanagement[J].CurrOpinObstetGynecol,2008,20(6):550-556.[5]BauerKA.Managementofthrombophilia[J].JThrombHaemost,2003,1(7):1429-1434.[6]尹黎，李歌，沈健，等。遺傳性易栓癥篩查及相關(guān)基因檢測(cè)分析[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2018,47(6):606-611.[7]李蕾，吳希，許冠群，等。基于新一代測(cè)序技術(shù)的易栓癥基因檢測(cè)Panel的建立及其在中國(guó)靜脈血栓患者遺傳背景研究中的臨床應(yīng)用[J].診斷學(xué)理論與實(shí)踐，2019,18(4):394-401.[8]王杏，黃霞，朱艷萍，等。靜脈血栓病人的基因檢測(cè)與臨床特征分析[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)，2020.[9]丁秋蘭，王學(xué)鋒。遺傳性易栓癥的表型和基因診斷流程[J].診斷學(xué)理論與實(shí)踐，2019,18(2):127-132.[10]LeeE,YangHY,LeeSJ,etal.Whole-exomesequencinginevaluationofpatientswithvenousthromboembolism[J].BloodAdv,2017,1(16):1224-1237.[11]陳蘭勤，殷菊，徐保平，等。遺傳性易栓癥5例臨床特征及基因分析[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2022,37(12):934-938.[12]余晴，方寶枝，呂明恩。遺傳性易栓癥基因診斷的研究進(jìn)展[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2022.[13]李黎，張麗華，白宏英，等。老年原發(fā)性高血壓并腦梗死患者血壓變異與血栓前狀態(tài)研究[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2015.[14]程曉文，聞才李，張慧。遺傳性易栓癥相關(guān)危險(xiǎn)因素研究進(jìn)展[J].血栓與止血學(xué)，2020,26(1):174-176.[15]王凱，孫國(guó)平，陳先輝，等。應(yīng)用iTRAQ技術(shù)對(duì)遺傳性易栓癥患者血清的蛋白組學(xué)分析[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2017,25(9):32-34.[16]周建軍，胡婭莉。易栓癥的發(fā)生機(jī)制和防治[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2009,25(5):332-335.[17]連巖，王謝桐。遺傳性易栓癥的妊娠期篩查與抗凝治療評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2017,33(7):678-684.[18]孟景曄，彭武建，駱子義，等。全外顯子測(cè)序檢測(cè)一個(gè)遺傳性易栓癥家系的致病基因[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2017,25(4):42-44.[19]李莉，劉瑞云，李錦堂。凝血酶原G20210A突變與冠心病的相關(guān)性研究[J].血栓與止血學(xué)，2005,11(3):106-108.[20]羅佳濱，關(guān)月，馬洪星，等。凝血因子V基因點(diǎn)突變1691A在不同種族人群中的分布[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，1996,13(4):219-220.[3]DenHeijerM,LewingtonS,ClarkeR.Homocysteine,MTHFRandriskofvenousthrombosis:ameta-analysisofpublishedepidemiologicalstudies[J].JThrombHaemost,2005,3(2):292-299.[4]JamesAH.Thromboembolisminpregnancy:recurrencerisks,preventionandmanagement[J].CurrOpinObstetGynecol,2008,20(6):550-556.[5]BauerKA.Managementofthrombophilia[J].JThrombHaemost,2003,1(7):1429-1434.[6]尹黎，李歌，沈健，等。遺傳性易栓癥篩查及相關(guān)基因檢測(cè)分析[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2018,47(6):606-611.[7]李蕾，吳希，許冠群，等。基于新一代測(cè)序技術(shù)的易栓癥基因檢測(cè)Panel的建立及其在中國(guó)靜脈血栓患者遺傳背景研究中的臨床應(yīng)用[J].診斷學(xué)理論與實(shí)踐，2019,18(4):394-401.[8]王杏，黃霞，朱艷萍，等。靜脈血栓病人的基因檢測(cè)與臨床特征分析[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)，2020.[9]丁秋蘭，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