2026屆山東省生物高三第一學(xué)期期末調(diào)研模擬試題請(qǐng)考生注意：1．請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請(qǐng)用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無(wú)效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．圖是某基因的局部示意圖，下列敘述正確的是（）A．ACA可稱為一個(gè)密碼子B．DNA分子的多樣性與①②有關(guān)C．限制酶切割該基因時(shí)應(yīng)作用于⑤處D．對(duì)該基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，解旋酶作用于④處2．下列關(guān)于低溫誘導(dǎo)染色體加倍實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是A．原理：低溫抑制染色體著絲點(diǎn)分裂，使子染色體不能分別移向兩極B．解離：鹽酸酒精混合液和卡諾氏液都可以使洋蔥根尖解離C．染色：改良苯酚品紅溶液和醋酸洋紅溶液都可以使染色體著色D．觀察：顯徽鏡下可以看到大多數(shù)細(xì)胞的染色體數(shù)目發(fā)生改變3．下列有關(guān)植物生長(zhǎng)素生理作用的敘述，正確的是A．同一植物發(fā)育程度不同的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素的敏感性不同B．不同濃度生長(zhǎng)素對(duì)同種植物同一器官的作用效果不會(huì)相同C．根的向地性和莖的向光性都體現(xiàn)了生長(zhǎng)素作用的兩重性D．高濃度的生長(zhǎng)素通過(guò)對(duì)基因組表達(dá)的調(diào)控促進(jìn)植物的生長(zhǎng)4．在大腸桿菌的培養(yǎng)與分離實(shí)驗(yàn)中，下列相關(guān)操作正確的是（）A．在LB固體培養(yǎng)基配制過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要利用無(wú)菌水進(jìn)行配制B．實(shí)驗(yàn)中所需的棉花應(yīng)使用脫脂棉，因?yàn)槊撝薏灰孜梢苑乐闺s菌污染C．滅菌后，通常將實(shí)驗(yàn)用具放入40~50℃烘箱中烘干，以除去滅菌時(shí)的水分D．倒平板應(yīng)在無(wú)菌超凈臺(tái)進(jìn)行，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后先置于水平桌面上，再晃動(dòng)5．下列有關(guān)生物進(jìn)化的敘述，正確的是（）A．不同種群都向適應(yīng)無(wú)機(jī)環(huán)境的方向進(jìn)化就是共同進(jìn)化B．種群基因頻率的變化趨勢(shì)能反映變異的方向C．種群基因型頻率發(fā)生改變，說(shuō)明生物在發(fā)生進(jìn)化D．精明捕食者是指捕食者對(duì)獵物不造成過(guò)度捕食，能保持其食物源6．2015年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)?lì)C給了研究DNA修復(fù)細(xì)胞機(jī)制的三位科學(xué)家。P53蛋白對(duì)細(xì)胞分裂起監(jiān)視作用。P53蛋白可判斷DNA損傷的程度，如果損傷較小，該蛋白就促使細(xì)胞自我修復(fù)（過(guò)程如下圖所示）；若損傷較大，該蛋白則誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．抑制P53蛋白基因的表達(dá)，細(xì)胞將不能分裂B．P53蛋白可使DNA受損的細(xì)胞分裂間期延長(zhǎng)C．P53蛋白可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的基因選擇性表達(dá)D．細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)因子有多種7．有關(guān)“轉(zhuǎn)基因猴”、“克隆猴”和“試管猴”的說(shuō)法合理的是（）A．三種猴都繼承了雙親的優(yōu)良性狀B．三種猴培育過(guò)程都體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性C．三種猴培育過(guò)程都應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)D．為提高繁殖效率三者都可采用原腸胚期的胚胎進(jìn)行胚胎分割8．（10分）圓褐固氮菌具有較強(qiáng)的固氮能力（將大氣中的固定成)，并且能夠分泌植物生長(zhǎng)素，促進(jìn)植株生長(zhǎng)和果實(shí)發(fā)育。某研究小組從土壤中分離固氮菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后制成菌肥施入土壤中以增加土壤肥力，提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．圓褐固氮菌固定的氮能直接被植物吸收利用B．可用酚紅對(duì)選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進(jìn)行鑒定C．篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中要加入有機(jī)氮源D．可通過(guò)平板劃線法對(duì)所培養(yǎng)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)二、非選擇題9．（10分）某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，讓青蒿素合成過(guò)程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿素中過(guò)量表達(dá)，其過(guò)程如圖所示：回答下列問題：（1）酶1和酶2分別是______________、___________________。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90~95℃，目的是破壞了DNA分子中的___________鍵。在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過(guò)程中，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的_______________中。（2）檢驗(yàn)?zāi)康幕蚴欠裾系角噍锼鼗蚪M，可以將放射性同位素標(biāo)記的_________________做成分子探針與青蒿素基因組DNA雜交。理論上，與野生型相比，該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿素DNA形成的雜交帶的量____________（填“較多”或“較少”）。（3）據(jù)圖分析，農(nóng)桿菌的作用是______________________。判斷該課題組的研究目的是否達(dá)到，必須檢測(cè)轉(zhuǎn)基因青蒿素植株中的______________________________。10．（14分）酒精性肝炎是長(zhǎng)期過(guò)量飲酒所致的一種肝臟疾病，患者會(huì)發(fā)生肝細(xì)胞損傷、肝臟炎癥反應(yīng)甚至肝衰竭。研究人員發(fā)現(xiàn)酒精性肝炎患者糞便中糞腸球菌占菌群的1．19%，而健康人糞便菌群中此類細(xì)菌僅占2．223%，據(jù)此認(rèn)為酒精性肝炎與糞腸球菌有關(guān)，并開展了系列研究。（1）肝細(xì)胞能夠____，在人體的血糖調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。另外，肝細(xì)胞還具有分泌膽汁和解毒等重要作用。（2）某些糞腸球菌能夠分泌一種外毒素——溶細(xì)胞素，研究人員根據(jù)溶細(xì)胞素基因特異性序列設(shè)計(jì)引物，對(duì)三組志愿者的糞便進(jìn)行PCR檢測(cè)，結(jié)果如圖1所示。①圖1中對(duì)照組是____的志愿者。檢測(cè)結(jié)果顯示酒精性肝炎患者組____________顯著高于另外兩組。②繼續(xù)追蹤酒精性肝炎患者的存活率（圖2），此結(jié)果表明____________。這兩組結(jié)果共同說(shuō)明糞腸球菌產(chǎn)生的溶細(xì)胞素與酒精性肝炎患者的發(fā)病和病情密切相關(guān)。（3）為進(jìn)一步研究酒精、糞腸球菌和溶細(xì)胞素與酒精性肝炎發(fā)展的關(guān)系，研究人員將小鼠分為4組，進(jìn)行了下表所示實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)處理1234灌胃溶液成分不產(chǎn)溶細(xì)胞素的糞腸球菌產(chǎn)溶細(xì)胞素的糞腸球菌不產(chǎn)溶細(xì)胞素的糞腸球菌產(chǎn)溶細(xì)胞素的糞腸球菌灌胃后提供的食物不含酒精不含酒精含酒精含酒精肝臟中出現(xiàn)糞腸球菌個(gè)體所占比例2283%81%肝臟中出現(xiàn)容細(xì)胞素個(gè)體所占比例22281%綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，長(zhǎng)期過(guò)量攝入酒精能夠使腸道菌群中糞腸球菌所占比例顯著升高，而且酒精能夠破壞腸道屏障，導(dǎo)致____，使酒精性肝炎患者病情加重。（4）為進(jìn)一步檢驗(yàn)溶細(xì)胞素對(duì)肝臟細(xì)胞的毒害作用是否依賴于酒精的存在，研究人員利用體外培養(yǎng)的肝臟細(xì)胞、提純的溶細(xì)胞素和酒精進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。①請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)的分組處理及檢測(cè)指標(biāo)____________。②若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為____，則表明溶細(xì)胞素和酒精對(duì)肝臟細(xì)胞的毒害作用是獨(dú)立發(fā)生的。11．（14分）蜘蛛絲是自然界中機(jī)械性能最好的天然蛋白纖維，其強(qiáng)度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維，有廣泛的應(yīng)用前景，但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直未解決。近期，中國(guó)科學(xué)家利用基因工程技術(shù)成功的在家蠶絲腺細(xì)胞中大量表達(dá)蜘蛛絲蛋白。（1）在轉(zhuǎn)基因過(guò)程中，若利用圖所示質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要用_____________酶來(lái)切割目的基因，該切割方法的優(yōu)點(diǎn)是_____________________________________________(答出一點(diǎn)即可)。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用_______________技術(shù)對(duì)該基因進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)__________種引物。進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)需先加熱至90～95℃，加入引物后冷卻至55~60℃，以上調(diào)控溫度操作的目的是____________________。（3）載體中的啟動(dòng)子是____________酶的識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)，以便于驅(qū)動(dòng)遺傳信息的表達(dá)過(guò)程；而載體本身的擴(kuò)增，需借助于載體上的_________________；載體上的標(biāo)記基因的作用是_____________________________。（4）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號(hào)位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50％，這項(xiàng)成果用到的生物工程技術(shù)為____________________________。12．人參是一種名貴藥材,具有良好的滋補(bǔ)作用?？诜?干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程,①~④表示相關(guān)的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶,它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請(qǐng)回答下列問題:(1)步驟①中,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí),設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是____________。科研人員還在兩種引物的一端分別加上了________和________序列,以便于后續(xù)的剪切和連接。

(2)過(guò)程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有_______,過(guò)程③中需先用____處理根瘤農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。

(3)過(guò)程④中,科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后,先通過(guò)____過(guò)程獲得DNA,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若最終未能檢測(cè)出干擾素基因,其可能原因是________________________。

(4)科研人員認(rèn)為,將轉(zhuǎn)干擾素基因的人參愈傷組織加工成的藥物比單純干擾素的療效要好,其依據(jù)是__。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

分析題圖：圖中為某基因的局部示意圖，其中①為磷酸，②為脫氧核糖，③為含氮堿基，④為氫鍵，⑤為脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，⑥為核苷酸內(nèi)部的化學(xué)鍵。【詳解】A、密碼子位于mRNA上，因此圖中ACA不能稱為一個(gè)密碼子，A錯(cuò)誤；B、DNA分子的穩(wěn)定性與①②有關(guān)，多樣性與③的排列順序有關(guān)，B錯(cuò)誤；C、限制酶作用與⑤磷酸二酯鍵，C正確；D、對(duì)該基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，不需要使用解旋酶，通過(guò)加熱使④氫鍵斷裂，D錯(cuò)誤。故選C。2、C【解析】

低溫誘導(dǎo)染色體加倍實(shí)驗(yàn)的原理：低溫能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細(xì)胞也不能分成兩個(gè)子細(xì)胞．實(shí)驗(yàn)步驟是：固定（卡諾氏液）→解離（鹽酸酒精混合液）→漂洗→染色（改良苯酚品紅溶液或醋酸洋紅溶液）→制片→觀察．【詳解】A、原理：低溫抑制紡錘體的形成，使子染色體不能分別移向兩極，A錯(cuò)誤；

B、卡諾氏液的作用是固定細(xì)胞形態(tài)，不是使洋蔥根尖解離，B錯(cuò)誤；

C、染色體易被堿性染料染成深色，因此用改良苯酚品紅溶液或醋酸洋紅溶液都可以使染色體著色，C正確；

D、顯微鏡下可看到大多數(shù)細(xì)胞的染色體數(shù)目未發(fā)生改變，只有有絲分裂后期和末期細(xì)胞中染色體數(shù)目發(fā)生改變，D錯(cuò)誤。

故選C。3、A【解析】

A、同一植物發(fā)育程度不同的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素的敏感性不同，幼嫩的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素敏感，老細(xì)胞則比較遲鈍，A項(xiàng)正確；B、生長(zhǎng)素對(duì)植物的生長(zhǎng)效應(yīng)表現(xiàn)出兩重性，即低濃度促進(jìn)生長(zhǎng)，高濃度抑制生長(zhǎng)，在促進(jìn)效應(yīng)從小變大再變小的過(guò)程中可能有兩種濃度對(duì)生長(zhǎng)的促進(jìn)效應(yīng)是相同的，B項(xiàng)錯(cuò)誤；C、將植物平放后，根向地生長(zhǎng)，是因?yàn)檫h(yuǎn)地側(cè)生長(zhǎng)素濃度低，促進(jìn)生長(zhǎng)，近地側(cè)生長(zhǎng)素濃度高，抑制生長(zhǎng)，體現(xiàn)了生長(zhǎng)素生理作用的兩重性。而莖的向光性中背光側(cè)和向光側(cè)均為促進(jìn)作用，未體現(xiàn)生長(zhǎng)素生理作用的兩重性，故C項(xiàng)錯(cuò)誤；D、高濃度的生長(zhǎng)素通過(guò)對(duì)基因組表達(dá)的調(diào)控抑制植物的生長(zhǎng)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。故選A。4、D【解析】

大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)菌，所有操作都應(yīng)注意無(wú)菌操作?！驹斀狻緼、LB培養(yǎng)基配置完成后需要滅菌，因此在配置過(guò)程中無(wú)需用無(wú)菌水，A錯(cuò)誤；B、脫脂棉易吸水，容易引起雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中所需棉花不應(yīng)使用脫脂棉，B錯(cuò)誤；C、滅菌后，通常將實(shí)驗(yàn)用具放入60-80℃烘干箱中烘干，C錯(cuò)誤；D、倒平板應(yīng)在無(wú)菌超凈臺(tái)進(jìn)行，倒完平板應(yīng)先置于水平桌面上，再晃動(dòng)，D正確。故選D。本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分以及制備方法，識(shí)記無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容，同時(shí)要求考生具有一定的實(shí)驗(yàn)技能。5、D【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的內(nèi)容：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組，自然選擇及隔離是物種形成過(guò)程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，通過(guò)它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成?！驹斀狻緼、共同進(jìn)化是指不同物種之間、生物與無(wú)機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，A錯(cuò)誤；B、種群基因頻率的變化趨勢(shì)能反映進(jìn)化的方向，不能反映變異的方向，變異是不定向的，B錯(cuò)誤；C、生物種群中基因頻率的改變可說(shuō)明生物在發(fā)生進(jìn)化，C錯(cuò)誤；D、精明捕食者是指捕食者在進(jìn)化過(guò)程中能夠形成自我約束能力，對(duì)獵物不造成過(guò)度捕食，能保持其食物源，D正確。故選D。本題考查現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容，要求考生識(shí)記現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)對(duì)選項(xiàng)作出正確的判斷。6、A【解析】

分析圖圖中DNA發(fā)生損傷后，P53蛋白會(huì)和該DNA結(jié)合；此時(shí)細(xì)胞停止分裂，P53蛋白激活DNA修復(fù)酶；修復(fù)后的細(xì)胞再進(jìn)行正常的細(xì)胞分裂。【詳解】A、P53基因編碼的蛋白質(zhì)可阻止細(xì)胞的不正常增殖，故P53基因是一種抑癌基因，因此抑制P53蛋白基因的表達(dá)，細(xì)胞將會(huì)出現(xiàn)不正常的增殖，A錯(cuò)誤；B、DNA復(fù)制過(guò)程如出現(xiàn)受損，則P53蛋白修復(fù)過(guò)程需要相應(yīng)的時(shí)間，使間期延長(zhǎng)，B正確；C、P53基因可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，細(xì)胞凋亡是受基因控制的，因此與細(xì)胞內(nèi)基因的選擇性表達(dá)有關(guān)，C正確；D、根據(jù)題意可知，若DNA損傷較大，該蛋白則誘導(dǎo)細(xì)胞衰老和凋亡，此外誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的因子還有多種，如效應(yīng)T細(xì)胞激活靶細(xì)胞使其凋亡，D正確。故選A。7、C【解析】

“克隆猴”的產(chǎn)生：將體細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中誕生的新個(gè)體，說(shuō)明遺傳信息在細(xì)胞核中；“試管猴”是用人工方法讓卵子和精子在體外受精并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，然后移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育而誕生的嬰兒；“轉(zhuǎn)基因猴”是外源基因轉(zhuǎn)移到猴尚未融合的受精卵內(nèi)的卵細(xì)胞核或精子的細(xì)胞核中，再將早期胚胎移植到受體母猴中?！驹斀狻緼B、“克隆猴”的性狀主要來(lái)自于提供細(xì)胞核的供體，該過(guò)程可以體現(xiàn)細(xì)胞核的全能性；“試管猴”是有性生殖過(guò)程，可繼承雙親性狀，不能體現(xiàn)細(xì)胞核全能性，A、B錯(cuò)誤；C、由以上分析可知，三種猴培育過(guò)程都應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，C正確；D、胚胎分割的時(shí)期應(yīng)是桑椹胚或囊胚期，D錯(cuò)誤。故選C。掌握三種猴的產(chǎn)生過(guò)程是解題關(guān)鍵。8、B【解析】

根據(jù)題干信息分析，圓褐固氮菌具有較強(qiáng)的固氮能力，能夠?qū)⒋髿庵械腘2固定成NH3，這些NH3進(jìn)入土壤后提高了土壤肥力，進(jìn)而提高農(nóng)作物產(chǎn)量；圓褐固氮菌還能夠分泌植物生長(zhǎng)素，促進(jìn)植株生長(zhǎng)和果實(shí)發(fā)育?！驹斀狻緼、生物固氮生成的NH3經(jīng)過(guò)土壤中硝化細(xì)菌的作用，最終轉(zhuǎn)化成硝酸鹽，硝酸鹽可以被植物吸收利用，A錯(cuò)誤；B、酚紅指示劑在pH升高后將變紅，而圓褐固氮菌固氮產(chǎn)生的氨使得pH升高，因此可用酚紅對(duì)選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進(jìn)行鑒定，B正確；C、圓褐固氮菌具有固氮能力，因此篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中不要加入有機(jī)氮源，C錯(cuò)誤；D、平板劃線法只能用于菌種的分離，不能用于菌種的計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。故選B。二、非選擇題9、逆轉(zhuǎn)錄酶限制性核酸內(nèi)切酶氫T?DNAfps基因或fps基因的mRNA（寫出一項(xiàng)即可得分）較多農(nóng)桿菌可感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中青蒿素產(chǎn)量【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）據(jù)圖示可知，酶1促進(jìn)逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程，故為逆轉(zhuǎn)錄酶，酶2用于切割目的基因和質(zhì)粒，故為限制性核酸內(nèi)切酶，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90～95℃，目的是破壞了DNA分子中的氫鍵，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過(guò)程中，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T?DNA中。（2）檢驗(yàn)?zāi)康幕蚴欠裾系角噍锘蚪M，可用DNA分子雜交法，即將fps基因或fps基因的mRNA做成分子探針與青蒿基因組DNA雜交。由于產(chǎn)量增高，故與野生型相比，該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿DNA形成的雜交帶的量較多。（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞中常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，由圖可知，農(nóng)桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中，判斷該課題組的研究目的是否達(dá)到，必須檢測(cè)轉(zhuǎn)基因青蒿植株中的青蒿素產(chǎn)量，若產(chǎn)量增高，則說(shuō)明達(dá)到了目的。本題考查了基因工程在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟等，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確解答。10、合成和分解肝糖原（儲(chǔ)存和利用肝糖原）不攝入酒精（不飲酒）糞便中含有溶細(xì)胞素個(gè)體所占比例溶細(xì)胞素可降低酒精性肝炎患者的存活率糞腸球菌轉(zhuǎn)移到肝臟中，某些糞腸球菌分泌溶細(xì)胞素毒害肝細(xì)胞將肝細(xì)胞分為四組第1組：只加入細(xì)胞培養(yǎng)液，第2組：用加入溶細(xì)胞素的細(xì)胞培養(yǎng)液，第3組：用加入酒精的細(xì)胞培養(yǎng)液，第4組：用同時(shí)加入酒精和溶細(xì)胞素的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)，定期取樣檢測(cè)四組細(xì)胞的死亡率或損傷率第2、3組細(xì)胞死亡率顯著高于第1組；第4組細(xì)胞死亡率高于第2組、第3組，但不超過(guò)兩組之和（第4組細(xì)胞死亡率等于第2組、第3組之和）【解析】

肝臟細(xì)胞能通過(guò)合成或分解糖原來(lái)調(diào)節(jié)血糖穩(wěn)定，肝臟細(xì)胞還具有解毒功能。根據(jù)圖1實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，長(zhǎng)期攝入酒精過(guò)量組溶細(xì)胞素陽(yáng)性在群體中的比例比對(duì)照組增加，而酒精性肝炎患者組溶細(xì)胞素陽(yáng)性在群體中的比例比對(duì)照組明顯增加，可推測(cè)酒精性肝炎與糞腸球菌有關(guān)。圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示溶細(xì)胞素陰性的個(gè)體存活率較高，而溶細(xì)胞素陽(yáng)性的個(gè)體隨時(shí)間的延長(zhǎng)存活率明顯降低。說(shuō)明溶細(xì)胞素可降低酒精性肝炎患者的存活率?！驹斀狻浚?）血糖升高時(shí)，肝細(xì)胞能夠合成肝糖原，使血糖降低；血糖降低時(shí)，肝細(xì)胞內(nèi)的肝糖原可分解形成葡萄糖，使血糖升高。（2）①本實(shí)驗(yàn)的目的是研究酒精性肝炎與糞腸球菌有關(guān)，而酒精性肝炎是長(zhǎng)期過(guò)量飲酒所致的一種肝臟疾病，所以本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組應(yīng)為不攝入任何酒精的正常個(gè)體。由圖可知酒精性肝炎患者組糞便中含有溶細(xì)胞素個(gè)體所占比例顯著高于另外兩組。②由圖可知，與不含溶細(xì)胞素的對(duì)照組相比，溶細(xì)胞素存在時(shí)間與患者存活率成反比例增長(zhǎng)，說(shuō)明溶細(xì)胞素可降低酒精性肝炎患者的存活率。（3）1、3組對(duì)比可知酒精會(huì)讓糞腸球菌轉(zhuǎn)移至肝臟，3、4組對(duì)比可知糞腸球菌可在酒精環(huán)境下產(chǎn)生大量溶細(xì)胞素毒害肝臟。（4）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菫檫M(jìn)一步檢驗(yàn)溶細(xì)胞素對(duì)肝臟細(xì)胞的毒害作用是否依賴于酒精的存在，所以自變量為是否加入酒精和溶細(xì)胞素，因變量為肝細(xì)胞的死亡率或損傷率，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)該遵循單一變量和等量原則，故實(shí)驗(yàn)的分組為：將肝細(xì)胞平均分為四組；第1組：只加入細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)肝細(xì)胞，第2組：用加入溶細(xì)胞素的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)肝細(xì)胞，第3組：用加入酒精的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)肝細(xì)胞，第4組：用同時(shí)加入酒精和溶細(xì)胞素的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)培養(yǎng)肝細(xì)胞。檢測(cè)指標(biāo)應(yīng)為四組肝細(xì)胞的死亡率或損傷率最。②若第2、3組細(xì)胞死亡率顯著高于第1組；第4組細(xì)胞死亡率高于第2組、第3組，但不超過(guò)兩組之和（第4組細(xì)胞死亡率等于第2組、第3組之和），則表明溶細(xì)胞素和酒精對(duì)肝臟細(xì)胞的毒害作用是獨(dú)立發(fā)生的。本題主要考查肝細(xì)胞的作用和對(duì)溶細(xì)胞素作用條件的實(shí)驗(yàn)探究，意在考查考生的實(shí)驗(yàn)探究能力。設(shè)計(jì)和分析實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是分清自變量、因變量和無(wú)關(guān)變量。11、XbaI和SacI防止目的基因自身環(huán)化、防止目的基因反向連接PCR2使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上RNA聚合酶復(fù)制原點(diǎn)重組DNA的鑒別與選擇蛋白質(zhì)工程【解析】

1、基因工程的操作步驟包括：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。其中基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建：①過(guò)程：一般用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，再用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。②目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。③基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。（1）啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；（3）標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。2、PCR擴(kuò)增技術(shù)：PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：（1）模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。（2）模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。（3）引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。【詳解】（1）識(shí)圖分析可知，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因需要插入到啟動(dòng)子和終止子之間，圖中啟動(dòng)子和終止子之間存在XbaI和SacI的酶切位點(diǎn)，因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因，以產(chǎn)生與質(zhì)粒相同的末端，相比用同一種酶進(jìn)行酶切，用兩種酶切割可以防止目的基因自身環(huán)化或防止目的基因反向連接。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用PCR擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增目的基因。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)2種引物分別與2條模板鏈結(jié)合；進(jìn)行PCR時(shí)需加熱至90~95℃然后冷卻至55~60℃，此操作的目的是使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上。（3）基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子能夠與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合，才能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程，而載體本身的擴(kuò)增，需借助于載體上的復(fù)