1衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑藥效試驗(yàn)及評(píng)價(jià)殺蠅幼劑本文件規(guī)定了衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑殺蠅幼劑室內(nèi)和現(xiàn)場(chǎng)藥效試驗(yàn)的方法和評(píng)價(jià)指標(biāo)。本文件適用于殺蠅幼劑的室內(nèi)和現(xiàn)場(chǎng)藥效試驗(yàn)及評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T23796—2009GB/T38739—2020NY/T1151.5—2014NY/T1964.1—2010病媒生物密度監(jiān)測(cè)方法蠅類衛(wèi)生殺蟲(chóng)藥劑安全使用準(zhǔn)則滅幼劑類農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)藥效試驗(yàn)方法及評(píng)價(jià)農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)試驗(yàn)試蟲(chóng)養(yǎng)殖方法第5部分：蚊幼防治劑第1部分：家蠅3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1殺蠅幼劑flylarvicides用于殺滅或阻止蠅幼正常生長(zhǎng)發(fā)育的化學(xué)殺蟲(chóng)劑、微生物類殺蟲(chóng)劑及昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等藥物。[來(lái)源：GB/T38739—2020，3.1，有修改]3.2相對(duì)殺滅率therelativeofkillingflylarvae將殺蠅幼劑區(qū)藥劑處理前后的實(shí)際蠅幼密度，用對(duì)照區(qū)蠅幼蠅幼密度的自然變化系數(shù)予以校正，反映蠅幼數(shù)量減少值的百分率。[來(lái)源：NY/T1151.5—2014，3.1，有修改]3.3相對(duì)羽化抑制率therelativeinhibitionrateofeclosion將殺蠅幼劑區(qū)的成蠅羽化數(shù)與處理前蠅幼密度之比，用對(duì)照區(qū)成蠅自然羽化數(shù)與蠅幼密度之比予以校正，反映蠅幼數(shù)量減少值的百分率。[來(lái)源：NY/T1151.5—2014，3.2，有修改]4室內(nèi)藥效試驗(yàn)4.1供試靶標(biāo)實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的敏感品系家蠅（Muscadomestica）幼蟲(chóng)，2齡末或3齡初，生長(zhǎng)健康。24.2試驗(yàn)環(huán)境條件溫度：25℃~27℃,相對(duì)濕度：50%~70%。4.3試驗(yàn)容器塑料圓碗，容積為500毫升。4.4藥劑配制設(shè)置噴灑量為1L/m2，使藥劑能充分滲透到幼蟲(chóng)活動(dòng)處。根據(jù)試驗(yàn)藥劑的推薦用藥量稀釋藥劑，備4.5試驗(yàn)步驟4.5.1在試驗(yàn)容器中加入幼蟲(chóng)飼料（50g麥麩和2.5g奶粉混勻，加90mL清水?dāng)嚢杈鶆颍伷?，厚度約5cm。4.5.2向試驗(yàn)容器中投放100條生理狀態(tài)一致的試蟲(chóng)。待試蟲(chóng)恢復(fù)正?；顒?dòng)后，根據(jù)試驗(yàn)容器面積在飼料表面均勻噴灑稀釋藥液，并以噴灑等量清水作為空白對(duì)照。測(cè)試應(yīng)設(shè)置不少于3次重復(fù)。用紗布覆蓋試驗(yàn)容器，在試驗(yàn)環(huán)境條件下進(jìn)行飼養(yǎng)。4.5.3化學(xué)或微生物殺蟲(chóng)劑，于施藥后24h、48h、72h分別觀察并記錄幼蟲(chóng)死亡數(shù)，觀察期限內(nèi)化蛹的試蟲(chóng)計(jì)入活蟲(chóng)數(shù)。4.5.4昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，施藥后逐天將蠅蛹及死亡幼蟲(chóng)撿出并計(jì)數(shù)，直至所有幼蟲(chóng)化蛹或死亡。蠅蛹放入飼養(yǎng)籠中，環(huán)境條件按照NY/T1964.1—2010中第4章規(guī)定的飼養(yǎng)條件設(shè)置，觀察記錄蠅蛹羽化數(shù)，至施藥后第12天。4.5.5幼蟲(chóng)變?yōu)闇\褐色且輕觸無(wú)反應(yīng)或變?yōu)楹谏卸樗劳觥?.6結(jié)果計(jì)算4.6.1死亡率將化學(xué)或微生物殺蟲(chóng)劑重復(fù)測(cè)試所得數(shù)據(jù)的均值，按式（1）和式（2）計(jì)算空白對(duì)照組和試驗(yàn)組死應(yīng)進(jìn)行校正；空白對(duì)照組死亡率>20%，試驗(yàn)無(wú)效。式中：M——死亡率，%；K——死亡幼蟲(chóng)數(shù)，單位為只；N——處理總蟲(chóng)數(shù)，單位為只。式中：M1——校正死亡率，%；Mt——試驗(yàn)組死亡率，%；3Mc——空白對(duì)照組死亡率，%。4.6.2羽化抑制率將昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑重復(fù)測(cè)試所得數(shù)據(jù)的均值，按式（3）和式（4）計(jì)算空白對(duì)照組未羽化率和試驗(yàn)組羽化抑制率、校正羽化抑制率，結(jié)果保留2位小數(shù)?？瞻讓?duì)照組未羽化率<5%，無(wú)需校正；空白對(duì)照組未羽化率在5%~20%，應(yīng)進(jìn)行校正；空白對(duì)照組未羽化率>20%，試驗(yàn)無(wú)效。式中：P——羽化抑制率或未羽化率，%；S——羽化數(shù)，單位為只；N——處理總蟲(chóng)數(shù)，單位為只。式中：P1——校正羽化抑制率，%；Pt——試驗(yàn)組羽化抑制率，%；Pc——空白對(duì)照組未羽化率，%。4.7評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)或微生物殺蟲(chóng)劑根據(jù)死亡率評(píng)價(jià)對(duì)蠅幼蟲(chóng)的室內(nèi)藥效，死亡率≥90%為合格。昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑根據(jù)羽化抑制率評(píng)價(jià)對(duì)蠅幼蟲(chóng)的室內(nèi)藥效，羽化抑制率≥90%為合格。5現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)5.1供試靶標(biāo)現(xiàn)場(chǎng)孳生，主要蠅種宜屬于家蠅屬（Musca）。5.2場(chǎng)所要求試驗(yàn)場(chǎng)所適合靶標(biāo)蠅幼蟲(chóng)孳生，且有蠅幼蟲(chóng)孳生。5.3藥劑配制設(shè)置噴灑量為1L/m2，使藥劑能充分滲透到幼蟲(chóng)活動(dòng)處。根據(jù)試驗(yàn)藥劑的推薦用藥量稀釋藥劑，備5.4試驗(yàn)步驟5.4.1取試驗(yàn)場(chǎng)所有蠅幼蟲(chóng)孳生的孳生物，堆積4堆在閑置的地面上，每堆面積約1m2，厚度約10cm。其中3個(gè)為試驗(yàn)組，1個(gè)為空白對(duì)照組。45.4.2堆積孳生物靜置至少30分鐘后進(jìn)行幼蟲(chóng)密度調(diào)查，以梅花形布點(diǎn)的方式選取堆積孳生物上5個(gè)10cm×10cm的點(diǎn)，快速挑出點(diǎn)中所有的孳生物，逐一記錄孳生物中的幼蟲(chóng)數(shù)量，計(jì)數(shù)后將孳生物與幼蟲(chóng)填回原位。按照GB/T23796—2009中3.4.3.2描述的計(jì)算公式，計(jì)算處理前每堆孳生物的蠅幼蟲(chóng)密度（單位為條每處或只每堆）。5.4.3密度調(diào)查完成后，每個(gè)試驗(yàn)組均勻噴灑稀釋后的藥液，空白對(duì)照組均勻噴灑等量清水。施藥后用16目以上的防蟲(chóng)網(wǎng)蓋住堆積的孳生物，避免孳生物中的幼蟲(chóng)羽化后飛離防蟲(chóng)網(wǎng)和環(huán)境蠅類飛入防蟲(chóng)5.4.4化學(xué)或微生物殺蟲(chóng)劑，于施藥后48h、72h分別調(diào)查處理后孳生物的蠅幼蟲(chóng)密度（單位為條每處），計(jì)算各觀察時(shí)段的相對(duì)殺滅率。5.4.5昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，于施藥后第3d開(kāi)始逐天檢查防蟲(chóng)網(wǎng)內(nèi)的成蠅數(shù)量，用手處死并記錄成蠅羽化數(shù)，觀察至空白對(duì)照組連續(xù)2天無(wú)成蠅羽化。將總羽化數(shù)作為處理后密度（單位為只每堆計(jì)算相對(duì)羽化抑制率。5.4.6根據(jù)試驗(yàn)場(chǎng)所當(dāng)?shù)靥鞖忸A(yù)報(bào)，記錄試驗(yàn)過(guò)程中每天天氣情況及溫濕度。5.5結(jié)果計(jì)算將現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)重復(fù)測(cè)試所得數(shù)據(jù)的均值，按式（5）計(jì)算相對(duì)殺滅率（相對(duì)羽化抑制率），結(jié)果保留2位小數(shù)。式中：IE——相對(duì)殺滅率（相對(duì)羽化抑制率），%；Ta——試驗(yàn)區(qū)處理后平均密度，單位為條每處或只每堆；Tb——試驗(yàn)區(qū)處理前平均密度，單位為條每處或只每堆；Ca——空白對(duì)照區(qū)處