根尖細(xì)胞有絲分裂制片與觀察第一頁(yè)，共47頁(yè)。植物根尖的分生細(xì)胞的有絲分裂，每天都有分裂高峰時(shí)間，此時(shí)經(jīng)過(guò)適當(dāng)取材處理，加以固定、離析、染色、壓片等步驟，可以迅速地將細(xì)胞分散附著于載玻片和蓋玻片之間，再置于顯微鏡下觀察，可以看到大量處于有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞和染色體。細(xì)胞由第一次有絲分裂結(jié)束到第二次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過(guò)程為一個(gè)細(xì)胞分裂周期，包括間期、前期、中期、后期和末期。間期：一般持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng)，是核內(nèi)染色體DNA合成的過(guò)程，能看到核的變化，如核和其內(nèi)的核仁體積增大，核內(nèi)存在染色質(zhì)，一般情況看不到染色體。二、實(shí)驗(yàn)原理第二頁(yè)，共47頁(yè)。前期：細(xì)胞核內(nèi)染色體呈細(xì)絲狀，在核內(nèi)互相纏繞成團(tuán)。核仁開(kāi)始消失，核膜隨之破裂。此時(shí)染色體已由兩條染色單體所組成，只在著絲點(diǎn)處連結(jié)。中期：各染色體的著絲點(diǎn)排列在赤道面上，兩臂伸向赤道面的兩旁。紡錘體完全形成，其一端與染色體的著絲點(diǎn)相連結(jié)，另一端集中于細(xì)胞的極處。中期染色體高度濃縮，具有各物種染色體的典型形態(tài)，是染色體計(jì)數(shù)的最好時(shí)期。后期：每一染色體的著絲點(diǎn)分裂，兩條染色單體彼此分開(kāi)成兩個(gè)子染色體，子染色體在紡錘絲的牽引下，分別移向兩極。末期：移向兩極的染色體，逐漸松散成染色質(zhì)，紡錘絲逐漸消失，在赤道面上開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞板，把一個(gè)細(xì)胞分隔成兩個(gè)子細(xì)胞，核膜重新形成，核仁出現(xiàn)，逐漸進(jìn)入間期狀態(tài)。第三頁(yè)，共47頁(yè)。第四頁(yè)，共47頁(yè)。三、儀器與材料1、材料：小麥的根尖。2、用具及藥品：顯微鏡、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、染色缸、試劑瓶、酒精燈、鑷子、剪刀、紗布、吸水紙；無(wú)水乙醇、45%醋酸、卡諾固定液（無(wú)水乙醇∶冰醋酸=3∶1）、1N鹽酸、蒸餾水、1%醋酸洋紅、改良品紅。第五頁(yè)，共47頁(yè)。四、實(shí)驗(yàn)程序（1）取材：選取小麥種子浸泡于溫水中，使種子吸脹，再置于墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，于25℃條件下發(fā)芽，待根長(zhǎng)約1-2cm在大量細(xì)胞進(jìn)行分裂時(shí)剪根。（2）預(yù)處理：剪取的根尖放入盛有蒸餾水的小瓶，置于冰水溶液中，0-3℃處理24小時(shí)。（3）固定：主要是殺死細(xì)胞，盡可能保持生活時(shí)的真實(shí)狀態(tài)并便于染色。將經(jīng)過(guò)預(yù)處理的根尖沖洗干凈后，用濾紙吸去沾著的水滴，以卡諾固定液固定24小時(shí)。（4）解離：將固定好的根尖移入鹽酸酒精離析液中，在35℃下離析8分鐘，或在1N鹽酸中，60℃下離析15分鐘。第六頁(yè)，共47頁(yè)。（5）染色：將離解好的根尖用蒸餾水沖洗幾次，在1%醋酸洋紅中染色2-4小時(shí)；或置于染色缸里，加改良品紅溶液，靜置染色10-15分鐘。（6）壓片：取已染色的根尖，置于載玻片上，在分生組織處切取一小塊，加45%醋酸（或改良品紅）一滴，蓋上蓋玻片，用刀片架起蓋玻片一角，用鑷子尖輕敲幾下，使材料分散，移去架起的刀片，再輕敲幾下，在酒精燈上微微加熱，吸去多余的染液，用手指垂直壓片（切勿移動(dòng)蓋玻片），即可鏡檢。（7）觀察：在顯微鏡下觀察上述制片，先用低倍鏡找到分裂相后轉(zhuǎn)高倍鏡，可清楚觀察到有絲分裂各個(gè)時(shí)期的圖象。第七頁(yè)，共47頁(yè)。第八頁(yè)，共47頁(yè)。第九頁(yè)，共47頁(yè)。第十頁(yè)，共47頁(yè)。第十一頁(yè)，共47頁(yè)。第十二頁(yè)，共47頁(yè)。第十三頁(yè)，共47頁(yè)。第十四頁(yè)，共47頁(yè)。第十五頁(yè)，共47頁(yè)。第十六頁(yè)，共47頁(yè)。第十七頁(yè)，共47頁(yè)。第十八頁(yè)，共47頁(yè)。第十九頁(yè)，共47頁(yè)。第二十頁(yè)，共47頁(yè)。第二十一頁(yè)，共47頁(yè)。第二十二頁(yè)，共47頁(yè)。第二十三頁(yè)，共47頁(yè)。第二十四頁(yè)，共47頁(yè)。第二十五頁(yè)，共47頁(yè)。第二十六頁(yè)，共47頁(yè)。第二十七頁(yè)，共47頁(yè)。第二十八頁(yè)，共47頁(yè)。第二十九頁(yè)，共47頁(yè)。第三十頁(yè)，共47頁(yè)。第三十一頁(yè)，共47頁(yè)。第三十二頁(yè)，共47頁(yè)。第三十三頁(yè)，共47頁(yè)。第三十四頁(yè)，共47頁(yè)。第三十五頁(yè)，共47頁(yè)。第三十六頁(yè)，共47頁(yè)。第三十七頁(yè)，共47頁(yè)。第三十八頁(yè)，共47頁(yè)。第三十九頁(yè)，共47頁(yè)。第四十頁(yè)，共47頁(yè)。第四十