細(xì)菌的接種和注意事項(xiàng)終極第一頁(yè)，共33頁(yè)。（優(yōu)選）細(xì)菌的接種和注意事項(xiàng)終極版第二頁(yè)，共33頁(yè)。第三頁(yè)，共33頁(yè)。滅菌接種環(huán)1.要充分滅菌接種環(huán)，以免污染其標(biāo)本。2.要適當(dāng)冷卻再取標(biāo)本，以免帶不出標(biāo)本中的菌種。第四頁(yè)，共33頁(yè)。第五頁(yè)，共33頁(yè)。取標(biāo)本1.蘸取標(biāo)本時(shí)應(yīng)適量，以免標(biāo)本太少漏檢。2.液體標(biāo)本，如尿液，應(yīng)注意混勻。第六頁(yè)，共33頁(yè)。接種1.細(xì)菌的接種方法有很多，如平板劃線法、斜面接種法、穿刺接種法，等等。但我們用的最多的是：★平板劃線法—意義指把混雜在一起的微生物，用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過(guò)分區(qū)劃線，稀釋得到較多的獨(dú)立分布的單個(gè)菌落，即將樣本在固體培養(yǎng)基表面多次做由點(diǎn)到線稀釋而達(dá)到分純的目的。第七頁(yè)，共33頁(yè)?！镆粎^(qū)：所占區(qū)域大約是平板面積的1/5~1/4二區(qū)：由一區(qū)向二區(qū)帶出三四條平行線三區(qū)：由二區(qū)引出三四次，但三區(qū)面積最大第八頁(yè)，共33頁(yè)。第九頁(yè)，共33頁(yè)。CO2在細(xì)菌培養(yǎng)中的意義第十頁(yè)，共33頁(yè)。1有些細(xì)菌在初次分離培養(yǎng)時(shí)，需要5﹪-10﹪的CO2。因?yàn)榧?xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中能夠分解培養(yǎng)基中的某些含氮物質(zhì)產(chǎn)生氮，對(duì)該菌有殺滅作用，而CO2能中和細(xì)菌產(chǎn)生的氮，以減少對(duì)細(xì)菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布魯菌等。

2.為細(xì)菌提供碳源，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。如肺炎鏈球菌，草綠色鏈球菌。在細(xì)菌室的培養(yǎng)箱上有一個(gè)CO2的開關(guān)，為什么要用CO2呢？第十一頁(yè)，共33頁(yè)。常見細(xì)菌的鑒別及其特點(diǎn)第十二頁(yè)，共33頁(yè)。陽(yáng)性球菌葡萄球菌---金黃色葡萄球菌第十三頁(yè)，共33頁(yè)。金葡特點(diǎn)是人類化膿性感染最常見的病原菌，可以引起局部感染，也可以引起全身感染。血漿凝固酶，陽(yáng)性。血平板上呈黃色菌落，大而凸起，表面光滑，有β溶血環(huán)。G+陽(yáng)性球菌，葡萄狀排列，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜。1.2.3.4.第十四頁(yè)，共33頁(yè)。葡萄球菌---表面葡萄球菌第十五頁(yè)，共33頁(yè)。表葡特點(diǎn)正常存在于人體皮膚、黏膜表面，多見于院內(nèi)感染，如體內(nèi)異物留置，靜脈導(dǎo)管等血漿凝固酶，陰性表葡形態(tài)同金葡相似，但是為白色、扁平菌落，無(wú)溶血環(huán)1.2.3.3.第十六頁(yè)，共33頁(yè)。鏈球菌

常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌。

根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)不同可以把鏈球菌分為A、B、C、D等二十個(gè)群，但對(duì)人類有致病性的大多數(shù)屬于A群，少量屬于B群。第十七頁(yè)，共33頁(yè)。根據(jù)在血平板上溶血分為以下三種：甲型（α型）溶血性鏈球菌，又稱草綠色鏈球菌，菌落周圍有草綠色溶血環(huán)，致病力弱，是條件致病菌。乙型（β型）溶血性鏈球菌，產(chǎn)生強(qiáng)烈的溶血毒素，在血平板上可使菌落周圍出現(xiàn)2～4mm的無(wú)色透明溶血環(huán)。丙型（r-）鏈球菌，菌落周圍無(wú)溶血環(huán)，又叫不溶血性鏈球菌，通常不致病。

第十八頁(yè)，共33頁(yè)。肺炎鏈球菌菌落特點(diǎn)：在血平板上0.5～1.5mm,灰白色半透明，表面光滑，扁平，周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)放置24h以上的菌落，還會(huì)因?yàn)楫a(chǎn)生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而邊緣隆起，呈臍窩狀。第十九頁(yè)，共33頁(yè)。肺炎鏈球菌、Ａ群、Ｂ群的區(qū)分：

Ｏpt試驗(yàn)抑菌環(huán)>14,鑒定為肺鏈＋桿菌肽試驗(yàn)－＋－Ａ群CAMP試驗(yàn)＋B群第二十頁(yè)，共33頁(yè)。Opt實(shí)驗(yàn)第二十一頁(yè)，共33頁(yè)。桿菌肽實(shí)驗(yàn)第二十二頁(yè)，共33頁(yè)。11第二十三頁(yè)，共33頁(yè)。葡萄球菌與鏈球菌的鑒別：1.涂片—涂片革蘭染色，葡萄球菌呈葡萄串樣，鏈球菌呈鏈狀。2．M-H試驗(yàn)—當(dāng)染片不能區(qū)別時(shí)，接種到M-H平板，長(zhǎng)成菌落之后，可挑單個(gè)菌落做觸酶試驗(yàn)，+是葡萄球菌，－是鏈球菌。第二十四頁(yè)，共33頁(yè)。腸球菌腸球菌屬特點(diǎn)：Ｇ+，成圓球形或橢圓形，單個(gè)，成對(duì)，或短鏈，均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.5~1.0mm大小的菌落，可有溶血現(xiàn)象。第二十五頁(yè)，共33頁(yè)。以糞腸球菌和屎腸球菌為常見：阿拉伯糖山梨醇屎腸球菌陽(yáng)性陰性糞腸球菌陰性陽(yáng)性

第二十六頁(yè)，共33頁(yè)。陰性桿菌大腸桿菌：G-桿菌，有鞭毛、菌毛，無(wú)芽胞。菌落2~3mm,圓形凸起，灰白濕潤(rùn)，光滑半透明，邊緣整齊。某些菌落可產(chǎn)生有透明溶血環(huán)。第二十七頁(yè)，共33頁(yè)。鮑曼不動(dòng)桿菌菌落特點(diǎn)：圓形、凸起光滑、邊緣整齊不透明、灰白色有粘性的菌落多數(shù)菌落不溶血在中國(guó)蘭上為粉紅色菌落第二十八頁(yè)，共33頁(yè)。菌落特點(diǎn)：較大菌落、凸起、灰白色黏液型、相鄰菌落容易發(fā)生融合可挑出長(zhǎng)絲狀細(xì)絲肺炎克雷伯桿菌

第二十九頁(yè)，共33頁(yè)。變形桿菌遷徙生長(zhǎng)菌落特點(diǎn)：G-，兩邊鈍圓，有明顯的多形性，呈球形或絲狀，無(wú)芽胞無(wú)莢膜，有鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株呈遷徙擴(kuò)散生長(zhǎng)，迅速?gòu)浡２y狀薄膜布滿整個(gè)培養(yǎng)基表面。第三十頁(yè)，共33頁(yè)。嗜麥芽假單胞菌菌落特點(diǎn)：G-桿菌，細(xì)長(zhǎng)略彎曲。不透明，灰黃色菌落，在血平板上可產(chǎn)生氨味。本菌氧化酶陰性，與大多數(shù)假單胞菌不同。第三十一頁(yè)，共33頁(yè)。在普通瓊脂培養(yǎng)基上能