2025年免疫學(xué)免疫學(xué)抗體檢測技術(shù)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)考察試卷答案及解析一、單項(xiàng)選題1.免疫比濁法中，最常用于檢測的是（）A.透射比濁法B.散射比濁法C.速率散射比濁法D.終點(diǎn)散射比濁法2.下列哪種標(biāo)記物不用于免疫熒光技術(shù)（）A.異硫氰酸熒光素B.四乙基羅丹明C.辣根過氧化物酶D.藻紅蛋白3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，最常用的酶是（）A.辣根過氧化物酶B.堿性磷酸酶C.葡萄糖氧化酶D.脲酶4.放射免疫分析中，標(biāo)記抗原的放射性核素通常是（）A.125IB.3HC.32PD.14C5.免疫印跡法中，蛋白質(zhì)的分離通常采用（）A.聚丙烯酰胺凝膠電泳B.瓊脂糖凝膠電泳C.等電聚焦電泳D.毛細(xì)管電泳6.下列哪種方法可用于檢測細(xì)胞表面抗原（）A.免疫熒光技術(shù)B.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)C.放射免疫分析D.免疫印跡法7.免疫沉淀試驗(yàn)中，最常用的沉淀劑是（）A.硫酸銨B.聚乙二醇C.硫酸鈉D.氯化鈉8.下列哪種抗體檢測技術(shù)可用于檢測自身抗體（）A.免疫熒光技術(shù)B.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)C.放射免疫分析D.免疫沉淀試驗(yàn)9.免疫比濁法中，影響檢測結(jié)果的因素不包括（）A.抗原抗體比例B.反應(yīng)溫度C.反應(yīng)時(shí)間D.標(biāo)本采集時(shí)間10.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，終止反應(yīng)的常用試劑是（）A.硫酸B.鹽酸C.氫氧化鈉D.碳酸鈉二、多項(xiàng)選題1.免疫熒光技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括（）A.特異性高B.靈敏度高C.可定位D.可用于檢測多種抗原2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的類型包括（）A.雙抗體夾心法B.間接法C.競爭法D.捕獲法3.放射免疫分析的特點(diǎn)包括（）A.靈敏度高B.特異性強(qiáng)C.可自動(dòng)化D.放射性污染4.免疫印跡法的主要步驟包括（）A.蛋白質(zhì)樣品制備B.電泳分離C.轉(zhuǎn)膜D.免疫反應(yīng)5.免疫沉淀試驗(yàn)的應(yīng)用包括（）A.抗原或抗體的定性檢測B.抗原或抗體的定量檢測C.抗原或抗體的純化D.免疫復(fù)合物的檢測三、填空題1.免疫比濁法分為_____和_____兩種類型。2.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光標(biāo)記物有_____、_____等。3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，固相載體常用的有_____、_____等。4.放射免疫分析中，標(biāo)記抗原與未標(biāo)記抗原競爭結(jié)合_____。5.免疫印跡法中，轉(zhuǎn)膜的方法有_____、_____等。四、判斷題（√/×）1.免疫比濁法只能用于檢測抗原。（）2.免疫熒光技術(shù)只能用于檢測細(xì)胞內(nèi)抗原。（）3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，底物顯色后應(yīng)立即終止反應(yīng)。（）4.放射免疫分析中，放射性核素的半衰期越長越好。（）5.免疫印跡法中，轉(zhuǎn)膜后可直接進(jìn)行免疫反應(yīng)。（）6.免疫沉淀試驗(yàn)中，抗原抗體比例合適時(shí)才會(huì)出現(xiàn)沉淀線。（）7.免疫熒光技術(shù)的靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。（）8.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，包被抗體的濃度越高越好。（）9.放射免疫分析中，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制是基于標(biāo)記抗原與未標(biāo)記抗原的競爭結(jié)合。（）10.免疫印跡法可用于檢測蛋白質(zhì)的分子量。（）五、簡答題1.簡述免疫比濁法的基本原理。2.簡述酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的操作步驟。六、案例分析患者，女，35歲，因“反復(fù)關(guān)節(jié)疼痛1年，加重伴發(fā)熱1周”入院?；颊?年前無明顯誘因出現(xiàn)雙手近端指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)疼痛，呈對稱性，伴晨僵，持續(xù)約1小時(shí)。1周前上述癥狀加重，伴發(fā)熱，體溫最高達(dá)38.5℃，無皮疹、口腔潰瘍等。體格檢查：雙手近端指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)腫脹、壓痛，活動(dòng)受限，余關(guān)節(jié)無異常。實(shí)驗(yàn)室檢查：血常規(guī)：白細(xì)胞10.5×10?/L，中性粒細(xì)胞0.80，紅細(xì)胞沉降率50mm/h，C反應(yīng)蛋白30mg/L。類風(fēng)濕因子陽性，抗環(huán)瓜氨酸肽抗體陽性。問題1：該患者的初步診斷是什么？問題2：為明確診斷，還需進(jìn)行哪些檢查？試卷答案一、單項(xiàng)選題（答案）1.答案：C解析：速率散射比濁法是免疫比濁法中最常用的方法，具有快速、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。2.答案：C解析：辣根過氧化物酶是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中常用的酶，不用于免疫熒光技術(shù)。3.答案：A解析：辣根過氧化物酶是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中最常用的酶，具有活性高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。4.答案：A解析：125I是放射免疫分析中常用的放射性核素，具有半衰期適中、標(biāo)記容易等優(yōu)點(diǎn)。5.答案：A解析：聚丙烯酰胺凝膠電泳是免疫印跡法中常用的蛋白質(zhì)分離方法，具有分辨率高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。6.答案：A解析：免疫熒光技術(shù)可用于檢測細(xì)胞表面抗原和細(xì)胞內(nèi)抗原，具有特異性高、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。7.答案：B解析：聚乙二醇是免疫沉淀試驗(yàn)中最常用的沉淀劑，具有沉淀效果好、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)。8.答案：A解析：免疫熒光技術(shù)可用于檢測自身抗體，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體等。9.答案：D解析：免疫比濁法的影響因素包括抗原抗體比例、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間等，標(biāo)本采集時(shí)間一般不會(huì)影響檢測結(jié)果。10.答案：A解析：硫酸是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中常用的終止反應(yīng)試劑，可使酶失活，終止反應(yīng)。二、多項(xiàng)選題（答案）1.答案：ABCD解析：免疫熒光技術(shù)具有特異性高、靈敏度高、可定位、可用于檢測多種抗原等優(yōu)點(diǎn)。2.答案：ABCD解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的類型包括雙抗體夾心法、間接法、競爭法、捕獲法等。3.答案：ABD解析：放射免疫分析具有靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但存在放射性污染的問題，且一般不能自動(dòng)化。4.答案：ABCD解析：免疫印跡法的主要步驟包括蛋白質(zhì)樣品制備、電泳分離、轉(zhuǎn)膜、免疫反應(yīng)等。5.答案：ABCD解析：免疫沉淀試驗(yàn)可用于抗原或抗體的定性檢測、定量檢測、純化以及免疫復(fù)合物的檢測等。三、填空題（答案）1.答案：透射比濁法、散射比濁法解析：免疫比濁法分為透射比濁法和散射比濁法兩種類型，根據(jù)光線通過反應(yīng)液時(shí)的吸收和散射情況來檢測抗原或抗體的含量。2.答案：異硫氰酸熒光素、四乙基羅丹明解析：免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光標(biāo)記物有異硫氰酸熒光素、四乙基羅丹明等，它們在特定波長的激發(fā)光下可發(fā)出熒光，從而實(shí)現(xiàn)對抗原或抗體的檢測。3.答案：聚苯乙烯微孔板、硝酸纖維素膜解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，固相載體常用的有聚苯乙烯微孔板和硝酸纖維素膜等，它們具有吸附蛋白質(zhì)的能力，可用于固定抗原或抗體。4.答案：特異性抗體解析：放射免疫分析中，標(biāo)記抗原與未標(biāo)記抗原競爭結(jié)合特異性抗體，通過測定標(biāo)記抗原與抗體結(jié)合的量來計(jì)算未標(biāo)記抗原的含量。5.答案：濕轉(zhuǎn)法、半干轉(zhuǎn)法解析：免疫印跡法中，轉(zhuǎn)膜的方法有濕轉(zhuǎn)法和半干轉(zhuǎn)法等，它們可將電泳分離后的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相膜上，以便進(jìn)行后續(xù)的免疫反應(yīng)。四、判斷題（答案）1.答案：×解析：免疫比濁法可用于檢測抗原和抗體。2.答案：×解析：免疫熒光技術(shù)可用于檢測細(xì)胞表面抗原和細(xì)胞內(nèi)抗原。3.答案：√解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，底物顯色后應(yīng)立即終止反應(yīng)，否則會(huì)影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。4.答案：×解析：放射免疫分析中，放射性核素的半衰期應(yīng)適中，過長或過短都會(huì)影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。5.答案：×解析：免疫印跡法中，轉(zhuǎn)膜后需要進(jìn)行封閉等處理，以減少非特異性結(jié)合，然后才能進(jìn)行免疫反應(yīng)。6.答案：√解析：免疫沉淀試驗(yàn)中，抗原抗體比例合適時(shí)才會(huì)出現(xiàn)沉淀線，比例過高或過低都不會(huì)出現(xiàn)沉淀線。7.答案：×解析：免疫熒光技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的靈敏度取決于多種因素，不能簡單地比較兩者的靈敏度高低。8.答案：×解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，包被抗體的濃度應(yīng)適當(dāng)，過高或過低都會(huì)影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。9.答案：√解析：放射免疫分析中，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制是基于標(biāo)記抗原與未標(biāo)記抗原的競爭結(jié)合，通過測定不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)抗原與抗體結(jié)合的量來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而計(jì)算未知樣品中抗原的含量。10.答案：√解析：免疫印跡法可用于檢測蛋白質(zhì)的分子量，通過與已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)進(jìn)行比較，可確定待測蛋白質(zhì)的分子量。五、簡答題（答案）1.答：免疫比濁法的基本原理是在一定量的抗體中分別加入遞增量的抗原，經(jīng)一定時(shí)間后形成抗原抗體復(fù)合物，在促聚劑（如聚乙二醇）的作用下，形成肉眼可見的免疫復(fù)合物沉淀。當(dāng)抗原抗體比例合適時(shí)，形成的免疫復(fù)合物最多，濁度最大。通過測定反應(yīng)液的濁度，可計(jì)算出樣品中抗原的含量。2.答：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的操作步驟包括：①包被：將抗原或抗體包被在固相載體上；②封閉：用無關(guān)蛋白質(zhì)封閉固相載體上未被包被的位點(diǎn)，以減少非特異性結(jié)合；③加樣：加入待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)品；④孵育：使抗原抗體充分結(jié)合；⑤洗滌：去除未結(jié)合的物質(zhì)；⑥加酶標(biāo)抗體：加入酶標(biāo)記的抗體，與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合；⑦孵育：使酶標(biāo)抗體與抗原抗體復(fù)合物充分結(jié)合；⑧洗滌：去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體；⑨加底物顯色：加入底物，在酶的作用下顯色；⑩終止反應(yīng)：加入終止液，終止反應(yīng)；?測定吸光度：用酶標(biāo)儀測定反應(yīng)液的吸光度，根據(jù)標(biāo)