病理生理學實驗教程實驗一、實驗性缺氧實驗二、急性高鉀血癥實驗三、急性肺水腫實驗四、單純性酸堿平衡紊亂實驗五、失血性休克-（綜合性實驗）實驗六、急性彌散性血管內凝血實驗七、實驗性急性右心衰竭-（綜合性實驗）實驗八、呼吸功能不全-（綜合性實驗）【實驗目的】1、通過復制缺氧的動物模型，進一步掌握缺氧的原因和分類、發(fā)生機制及機體缺氧時病理2、通過觀察缺氧對機體呼吸、皮膚、內臟、血液顏色等的影響，了解不同性質缺氧時學研3、了解急性缺氧對心血管功能的影響。4、探討影響缺氧耐受性的因素?！緦嶒炘怼咳毖跏侵附M織供氧不足或用氧障礙，從而引起機體代謝、功能、以致形態(tài)結構發(fā)生異常變化的病理過程。按缺氧的原因和血氧變化，一般將缺氧分為四種類型：①低張性缺氧；②織性缺氧的動物模型，觀察動物在缺氧時循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、中樞神經系統(tǒng)的機能狀態(tài)變化、皮膚、粘膜顏色變化、內臟（主要是肝）及血液顏色的變化?！緦嶒瀸ο蟆啃“资?0只，體重18-22g，雌雄兼用?！緦嶒炂鞑暮退幤贰繙y耗氧量裝置一套、CO發(fā)生裝置一套、小白鼠缺氧瓶、小天平、1ml注射器、溫度計、剪刀、鑷子、滴管、碎冰塊、凹面玻片、搪瓷碗。鈉石灰、苦味酸、0.25%氯丙嗪、1﹪咖啡因、甲酸、濃硫酸、5%NaOH、5%NaNO2、0.9%NaCl、1%美蘭溶液、0.05%KCN?！居^察指標】動物的全身狀態(tài)、行為、痙攣、排便、呼吸、存活時間等;皮膚及粘膜的顏色變化；尸體解剖觀察肝臟及血液的變化。【方法和步驟】一、低張性缺氧1.取六只內先盛有鈉石灰（約5g）的缺氧瓶（圖1-1），標明瓶號（1-6號），然后取六只小白鼠稱重（體重要相近），用苦味酸標記后作如下處理：(2)2號鼠腹腔注射0.25%氯丙嗪10ml/㎏，待其安靜后（待藥效充分發(fā)揮時）放入2號缺氧瓶中，蓋緊瓶塞。（3）3號鼠腹腔注射1﹪咖啡因10ml/kg，10-20分鐘后將其放入3號缺氧瓶中，蓋緊瓶塞。（4）4號鼠腹腔注射生理鹽水10ml/kg，待動物安靜后15-20分鐘放入4號缺氧瓶中，蓋緊瓶塞。（5）5號鼠放入5號缺氧瓶中，再將缺氧瓶放入盛有40～42℃熱水（6）6號鼠放入6號缺氧瓶中，再將缺氧瓶放入盛有0～4℃冷水（加冰塊）的搪瓷碗中。2.觀察各鼠在瓶中的一般行為、呼吸變化情況（見圖1-2），準確記錄其死亡時間（由蓋緊瓶塞到小鼠死亡時間）。3.5、6號鼠死亡后馬上將缺氧瓶置于室溫下平衡15分鐘（注意不要打開缺氧瓶蓋），然后測定耗氧量并計算出耗氧率（測定方法見附注）。4.尸解小鼠，觀察皮膚、粘膜、血液及內臟顏色變化。二、血液性缺氧(1)取小白鼠一只，觀察小鼠皮膚粘膜的顏色后，放入缺氧瓶內，蓋上瓶蓋，與CO發(fā)生裝置（2）取甲酸3ml左右滴入CO發(fā)生裝置的燒瓶內，用酒精燈加熱燒瓶，再經分液漏斗一滴一滴地滴入濃硫酸2～3ml，即產生CO。然后將產生的CO通入缺氧瓶內，觀察小白鼠的變化、并記錄存活時間。（3）對CO中毒死亡的小鼠進行解剖，觀察肝臟顏色，再用滴管吸取3滴血液置于凹面玻片上，加5%NaOH3滴，觀察血液顏色的變化。另取一正常小鼠作對照，觀察其皮膚、粘膜顏色后，從球后靜脈叢采血滴入凹面玻片上，再加入5%NaOH3滴，觀察2.亞硝酸鈉中毒（1）取兩只體重相近的小鼠，觀察其呼吸、皮膚、粘膜的顏色。（2）甲鼠：腹腔注射5%NaNO210ml/kg后，再腹腔注入0.9%NaCl10ml/kg。（3）乙鼠：腹腔注射5%NaNO210ml/kg后，再腹腔注入1%美蘭10ml/kg。觀察小鼠呼吸、皮膚、粘膜顏色的變化，記錄存活時間。三、組織性缺氧取小白鼠一只，于腹腔內注射0.05%KCN40ml/kg。觀察小鼠呼吸、皮膚、粘膜顏色的變化，記錄存活時間。【注意事項】1.缺氧瓶須密閉，動物要做好標記，以免實驗動物混淆。2.腹腔注射時針頭要朝下并稍靠左下腹，勿損傷肝臟，避免藥液注入膀胱或腸腔。3.小白鼠的體重最好相近，以免由于體重的差異造成實驗結果的不準確。4.復制CO中毒時不可太熱以至液體煮沸，因CO產生過多過快動物會迅速死亡。5.實驗內容多，可根據條件選擇性進行或分組進行?！靖阶ⅰ啃“资蠛难趼实臏y定1.原理：小白鼠在密閉的缺氧瓶內不斷地消耗氧氣，產生CO2，而CO2可被鈉石灰吸收。由于小白鼠不斷地消耗氧，使缺氧瓶內氧分壓逐漸下降并進而形成負壓。當缺氧瓶與測耗氧量裝置連通后，其移液管內液面因瓶內負壓而上升，量筒內液面下降的體積數（ml）即為耗氧體積（為小白鼠的總耗氧量）。其裝置如圖（1-4）所示。2.方法與步驟（1）向量筒內加水至一定刻度，然后將玻璃管接頭與缺氧瓶上的一個橡皮管相連。（2）打開橡皮管上的螺旋夾，待移液管內水面下降穩(wěn)定后讀出量筒內液面下降的毫升數，（3）結合小白鼠體重（m）存活時間（t）按下式計算出小白鼠耗氧率（R）。R=V/m.t-【思考題】4.如果要觀察年齡因素對小白鼠缺氧耐受性的影響，你改如何設計？【實驗目的】1、學會復制高鉀血癥的動物模型。2、觀察高鉀血癥對心臟的毒性作用，掌握高鉀血癥時心電圖改變的特征。3、聯系臨床，了解高鉀血癥的搶救和治療方案?！緦嶒炘怼库涬x子是人體內重要的電解質之一，通常以血鉀濃度的高低分為低鉀血癥和高鉀血癥。血鉀的正常值為3.5-5.5mmol/l。高鉀血癥對機體的危害主要表現在心臟，可是心臟有效不應期縮短、興奮性和傳導性呈雙向變化，可引起多種心律失常。本實驗通過靜脈推注不同濃度的氯化鉀，復制高鉀血癥模型，觀察高鉀血癥對心臟的作用。【實驗對象】家兔，體重2.0kg左右【器材和藥品】壓力換能器、兔手術器械一套、固定臺、BL-420微機化實驗教學系統(tǒng)、5ml注射器、小兒頭皮針、氣管插管、動脈插管，膠布。20％氨基甲酸乙酯、5％氯化鉀、10％氯化鉀、10％氯化鈣?！痉椒ê筒襟E】1.家兔稱重后用20％氨基甲酸乙酯5ml/kg注入耳緣靜脈麻醉，仰臥固定。2.剪去頸部被毛，沿正中線切開皮膚，分離氣管并作氣管插管以利通氣；分離頸總動脈并作動脈插管；給動脈插管后，通過壓力換能器連接至D－95第3通道，用于測定血壓。3.用注射針頭作為記錄電極，分別插入家兔心尖部和心底部皮下，以記錄監(jiān)護II導聯心電圖。各電極分別連接BL-420微機化實驗教學系統(tǒng)的第1通道輸入端（紅夾子連心尖，4.記錄一段正常心電圖，并記錄血壓和計算心率。5.用小兒頭皮針插入耳緣靜脈，用膠布固定或縫一針將頭皮針固定在耳廓上，向靜脈內緩化鉀2ml，直至出現波形異常。繼續(xù)間歇性注入5％氯化鉀，每次2ml，描記異常心電圖波形，并注意血壓、心率的改變。6.觀察高鉀血癥時的心電圖改變后（特別是出現室顫后），運用已學知識，自行設計搶救7.最后注入10％氯化鉀，邊注射邊觀察心電圖波形的改變。出現室即開胸觀察心臟停跳情況、肺水腫、胸水、肝淤血等臟器改變，記錄其變化并分析形成【注意事項】1.動物對氯化鉀的耐受性有個體差異。有的動物需要注入較大量的氯化鉀才會異常心電2.注意針電極要插在皮下，誤插入肌肉可致肌電干擾。動物固定臺要保持干燥?！舅伎碱}】【實驗目的】1.復制家兔急性肺水腫模型。2.了解急性肺水腫臨床表現及其發(fā)生機理。3.探討急性肺水腫的治療方案?！緦嶒炘怼糠嗡[是由于液體從毛細血管滲透至肺間質或肺泡所造成的。本實驗主要是通過靜脈大量滴注生理鹽水并注射腎上腺素導致急性心源性肺泡性肺水腫。中毒劑量的腎上腺素使心動速度加快，左心室不能把注入的血液充分排出，左心室舒張期末壓力遞增，可引起左心房的壓力增高，從而使肺靜脈發(fā)生淤血，肺毛細血管液體靜壓隨之升高，一旦超過血漿膠體滲透壓，使組織液形成增多，不能為淋巴充分回流，即可形成肺水腫?！緦嶒瀯游铩考彝茫菩鄄幌蕖酒鞑暮退幤贰縿用}插管、氣管插管、靜脈導管及靜脈輸液裝置、注射器、兔手術器械一套、燒杯、紗布、線、膠布、兔手術臺、血氣分析儀、BL-420微機化實驗教學系統(tǒng)、嬰兒秤。生理鹽水、氨基甲酸乙酯（20%）、腎上腺素（0.1%）、肝素（3g/L）、鹽酸(10g/L)、速尿（0.1%）、鹽酸消旋山莨菪堿注射液（1%）?！痉椒ê筒襟E】2.稱重后，用20%氨基甲酸乙酯5ml/kg耳緣靜脈注射麻醉，固定于兔臺上。3.進行頸部手術，分離氣管和一側頸總動脈，一側頸外靜脈。作氣管插管。4.將動物肝素化后，作動脈插管和靜脈插管，靜脈管連于輸液裝置。進行腹股溝手術準備5.各組動物分別描記正常呼吸和血壓曲線，股動脈取血，進行血氣分析。6.輸入生理鹽水（輸入總量按100ml/kg,輸入速度150～200滴/分），待滴注接近完畢時立即向輸液瓶中加入腎上腺素(0.5ml/kg)繼續(xù)輸液（對照組不加腎上腺素）。7.輸液完畢，立即股動脈取血，進行血氣分析。8.取血完畢治療組立即進行搶救。速尿治療組耳緣靜脈注射速尿（1ml/kg）,觀察療效；山莨菪堿治療組耳緣靜脈注射山莨菪堿（1.5ml/kg）,觀察療效。9.密切觀察呼吸改變和氣管插管內是否有分紅色泡沫液體流出，死亡動物記錄死亡時間，存活動物造病后30min則夾住氣管，放血處死。所有動物均打開胸腔，用線在氣管分叉處結扎以防止肺水腫液滲出，在結扎處以上切斷氣管，將肺取出，10.用濾紙吸去肺表面的水份后稱重，根據“肺系數=肺重量(g)/體重(kg)”的公式計算肺系數，然后肉眼觀察肺大體改變，并切開肺，觀察切面的改變?！咀⒁馐马棥?.手術時間不能過長，以免家兔不能耐受，影響機體功能。2.手術時注意止血，以免失血過多造成家兔失血性休克，導致實驗失敗。3.解剖肺臟時，慎防損傷和擠壓肺組織，以免水腫液丟失影響結果。【思考題】3.各實驗組動物的表現有何不同？為什么【實驗目的】1、學會復制單純性酸堿平衡紊亂的動物模型。2、根據酸堿平衡紊亂時血液酸堿指標的變化判斷其類型?！緦嶒炘怼坎捎弥苯虞斎胨岷蛪A的方法復制單純性代謝性酸中毒和代謝性堿中毒的動物模型，觀察代謝性酸中毒和代謝性堿中毒對呼吸功能的影響?！緦嶒瀸ο蟆考彝?.5～2.5kg【器材和藥品】固定臺、兔頭固定器、哺乳動物手術器械一套、線、頸動脈插管、1ml和5ml注射器、試管、血氣分析儀。3%的戊巴比妥鈉溶液，生理鹽水，蒸餾水，4%NaH2PO4溶液，2%NaHCO3溶液【方法和步驟】1.稱重，背位交叉固定后，耳緣靜脈注入3%的戊巴比妥鈉溶液（30mg/kg）。2.頸部剪毛，沿著頸正中線做一個長4-6cm的皮膚切口，逐層鈍性分離皮下組織，分離一側頸總動脈和另一側頸外靜脈，穿線備用。頸總動脈的特點是搏動明顯.粉紅色.壁韌，很容易分辨。把頸總動脈小心分離出來，盡量游離得長一些，下面穿兩根線備用。3.頸總動脈插管，結扎遠心端，動脈夾夾閉近心端，用眼科剪在靠近遠心端處剪開一個"V"形斜口。插管完成以后，為了防止插管滑脫，我們可以把結扎線順著插管的方向捋直，用膠布把它們固定在一起，再把插管固定在兔頭固定器上。頸總動脈插管，以備動脈取血。頸外靜脈插管以備輸液。4.動脈取血1ml，用血氣分析儀測各項指標，同時注意觀察動物的呼吸頻率與深度。A組靜脈滴入NaH2PO4(5ml/kg)，20-30滴/分，滴完后，取動脈血測定各項指標，同時注意觀察動物的呼吸頻率與深度。B組靜脈滴入NaHCO3(3ml/kg)，20-30滴/分,滴完后，取動脈血測定各項指標，同時注意觀察動物的呼吸頻率與深度。將實驗結果填入下表HCO3-Na+根據實驗結果分析A組和B組動物酸堿平衡紊亂的類型?！咀⒁馐马棥?.取學時注意與空氣隔絕?！舅伎碱}】【實驗目的】1、復制家兔失血性休克模型。3、探討失血性休克的發(fā)病機制。【實驗原理】休克是指各種原因引起的有效循環(huán)血量減少，微循環(huán)灌流障礙，引起重要生命器官血液灌注不足，從而導致多系統(tǒng)多器官功能衰竭的病理過程。休克的原因有很多，本實驗直接采用動脈放血造成家兔失血性休克，及時補充血容量并合理應用血管活性藥物來改善微循環(huán)的狀態(tài)。通過復制家兔失血性休克模型，進一步掌握休克發(fā)生發(fā)展過程中微循環(huán)、心、肺、腎功能改變及血管活性藥物等治療措施的影響?！緦嶒瀸ο蟆考彝靡恢唬w重2kg以上）【器材和藥品】計算機實驗記錄系統(tǒng)、壓力換能器、微循環(huán)灌流裝置1套（恒溫水浴灌流盒、解剖顯微鏡）中心靜脈壓裝置1套、靜脈輸液裝置1套、固定臺、手術器械1套、氣管插管、動脈導3%戊巴比妥鈉、1%肝素、生理鹽水、2.5%酚妥拉明、0.01%硫酸異丙腎上腺素【方法和步驟】1.取家兔1只稱重后經耳緣靜脈注射3%戊巴比妥鈉（按1ml/kg/劑量）麻醉后，將家兔仰臥2.頸部剪毛（注意勿傷動物皮膚），沿正中切開頸部皮膚、暴露皮下組織及肌肉，按常規(guī)操作，依次分離氣管、左頸總動脈和右頸外靜脈，各穿雙線備用。3.自兔耳緣靜脈注入1%肝素生理鹽水1ml/kg，使動物肝素化。4.腹股溝內側剪毛，作一長約5cm切口，分離出股動脈，插入已肝素化的細塑料管一根，結扎固定，以備放血用。5.在恥骨聯合上方正中作一長約5cm切口，找出膀胱，排空尿液后輕輕拉出，找到雙側輸尿管，插入輸尿管導管，記錄每分鐘尿滴數。7.插入氣管插管，一側與呼吸描記裝置相連，以記錄呼吸頻率和幅度。8.用動脈夾夾住右頸外靜脈近心端，結扎遠心端，用眼科剪在近心端剪一“v”形小口，通過三通管與中心靜脈壓測量裝置和輸液裝置相連，輸液并記錄正常中心靜脈壓。9.用動脈夾夾住左頸總動脈近心端，結扎遠心端，用眼科剪在近心端剪一“v”形小口，（1）向恒溫水浴灌流盒內注入38℃左右的灌流液（臺氏液加1%明膠配成）。（2）選擇一段游離度較大的小腸袢，從腹腔拉出后（操作一定要輕，以防腸系膜出血影響使液面剛覆蓋過腸系膜，用透射光源或側射光源在解剖顯微鏡下觀察。（3）在鏡下選好視野，分清腸系膜動脈、靜脈和毛細血管，以便固定視野作動態(tài)前后比較。（4）放血前觀察并記錄動物下列各項指標：呼吸、血壓、中心靜脈壓、心率、微循環(huán)（血流速度、血管管徑、血液流動情況（線流、線粒流、擺動及淤滯）、尿量。（5）從股動脈放血（至燒杯內），放至動脈血壓降至5.3kpa（40mmHg）時，觀察并記錄上述各項指標的變化。（6）靜脈輸入0.01%硫酸異丙腎上腺素0.1ml/㎏,觀察并記錄呼吸、血壓及心率等改變。（7）靜脈輸入2.5%酚妥拉明0.2ml/㎏，觀察并記錄呼吸、血壓及心率等改變。（8）于第一次失血后20分鐘左右(此時血壓已回升)，再次放血至5.3kpa(40mmHg)時，觀察并記錄上述各項指標的變化。（9）靜脈注射生理鹽水，觀察上述各項指標的變化。呼吸頻率【注意事項】1.本實驗自始至始要嚴格控制輸液，輸液速度限制在5-10滴/分鐘。2.要保持一定的麻醉深度，麻醉過淺，動物可因疼痛而產生神經源性休克，麻醉過深，動物可因過度抑制而使實驗失敗。3.插管所用的塑料管均應肝素化，以防止凝血。4.復制失血性休克的動物模型時放血后的20分鐘內必須準確維持血壓5.3kpa(40mmHg)。5.本實驗項目多手術多，可進行分組實驗，以確保實驗的成功率。【思考題】1.復制家兔失血性休克時，其腸系膜微循環(huán)有哪些變化2.分析比較實驗結果，討論失血性休克的發(fā)病機理。3.血管活性藥物在失血性休克救治時的作用及應用原則是什么？4.如果實驗不成功，分析失敗的原因。實驗六急性彌散性血管內凝血【實驗目的】2、觀察急性DIC時血液循環(huán)的變化過程，分析產生原因和病理意義。2、初步了解急性DIC的診斷標準和實驗室檢查方法?！緦嶒炘怼緿IC是指在某些致病因子作用下，凝血因子和血小板被激活，引起血管內微血栓形成，同時或繼發(fā)纖溶亢進，從而出現器官功能障礙的病理過程。在DIC發(fā)生發(fā)展過程中，各種凝血因子和血小板因大量消耗而明顯減少，FDP增多，引起出血和器官功能障礙。本實驗通過復制急性實驗性DIC動物模型，測定幾項血液學指標，討論急性DIC的發(fā)病機制。【實驗對象】【器材和藥品】酸鈉溶液、生理鹽水、飽和氯化鈉溶液，【方法和步驟】1.實驗兔一只，稱重。固定于兔臺上。普魯卡因4ml/kg皮下注射局麻后，分離一側頸總動脈和另一側的頸外靜脈，穿線備用。于頸總動脈內插入帶有三通針頭的細塑料管，用于取血樣。行頸外靜脈插管用于滴注生理鹽水兔腦浸出液。2.由頸總動脈插管取血，最先流出的數滴血棄去，然后收集1.5ml血放入經肝素抗凝的試5.幾項血液學檢查○1取被檢血漿0.1ml，置于小試管中，放入37℃水浴中；○2加入p試液0.2ml，開動秒表，觀察方法同上，測定凝固時間：（2）纖維蛋白原定量（飽和鹽水法）勻，置7℃水浴中孵育3min，取出后再○2以生理鹽水代替飽和氯化鈉溶液，進行同樣操作，作為對照；○3用對照管調零點，測出光密度（波長520nm）后，按下式計算纖維蛋白原含量；吸取血小板稀釋液0.38ml于一試管內，用血紅蛋白吸管吸血20μl立即加入血小板稀釋液內，充分搖勻后，用滴管將上述混懸液一小滴滴入計算室內，靜置15min后，用高倍鏡記數，數5個中方格內之血小板數×109/L【注意事項】1．本試驗中,兔腦生理鹽水浸出液的制備及滴注速度對試驗成敗影響很大。①兔腦生理鹽水取上清液過濾后，供靜脈滴注用。或將兔腦凝血活酶凍干制劑稀釋后靜脈注入。②在注入兔腦生理鹽水浸出液的過程中，密切觀察動物的呼吸情況，必要時酌情調整滴注速度。2．本實驗中所用試劑，血漿樣本及吸管較多，同一吸管只能吸取某一試劑或血漿樣本，避【附注】P試液：實驗前稱取200mg兔腦粉，加入5ml生理鹽水，重復混勻后放入370C水浴中吸取上清液，再加入等量的0.025mol/L氯化鈣溶液，用前搖勻，作PT試驗用?！舅伎碱}】2.本實驗出現了那些器官的病理改變，依據是什么？為什么會發(fā)生這種變化？【實驗目的】1．了解實驗性急性右心衰竭的模型的復制方法。2．觀察右心衰竭時血流動力學的主要變化。3．觀察增加前、后負荷對心臟功能的影響。4.通過對實驗的觀察和分析，加深對心力衰竭發(fā)生機制及病理變化的理解。【實驗原理】引起右心前負荷增加。由于右心前、后負荷的過度增加，造成右心室收縮和舒張功能降低，而導致急性右心衰竭。【實驗對象】家免一只1.5—2.5kg【器材和藥品】動物手術器械一套，兔手術臺，兔頭固定器，BL-420微機化實驗教學系統(tǒng)(或血壓描記裝置)，輸液及中心靜脈壓測量裝置，連接三通活塞的靜脈導管，動脈導管，氣管插管，動脈夾，聽診器，注射器(50ml、l0ml、5ml、lml各一支)，針頭。1﹪肝素溶液，生理鹽水，1﹪普魯卡因，3﹪戊巴比妥鈉(或20﹪氨基甲酸乙酯溶液).【方法和步驟】1.稱重:取健康家兔一只，稱重。需掌握捉拿家兔的正確方法——用一只手的拇指與其他四指抓住家兔頸背部皮膚，再以另一只手托住其臀部，將其重心承托在掌上；切忌以手抓提兔耳或捉拿腰背部（可傷耳，造成皮下出血）。2.麻醉：由耳緣靜脈注射20﹪氨基甲酸乙酯0.5～lg／kg體重麻醉后，若全麻不滿意，可在頸部正中皮下注射l﹪普魯卡因2～3ml局部浸潤麻醉。3.固定：背位交叉固定法。先把固定帶系4個活扣，分別套在家兔的四肢上，前肢套在腕關節(jié)以上，后肢套在踝關節(jié)以上，抽緊固定帶的長頭。2個同學，一個同學抓住兩前肢和耳朵，另一個抓住兩后肢，把兔子翻過來仰臥位放在兔臺上，(翻轉過程中，家兔會出現劇烈的掙扎，同學們一定要抓住家兔，勿放松，以免被家兔抓傷)。先把兩后肢分開.固定在兔后固定在兔臺兩側的金屬框上，最后用兔頭固定器固定頭部，適當調整一下固定器的高度，使家兔的頸部保持平直（做到固定牢，體位正），便于手術操作。4.剪毛：手術部位是頸部和胸部，把這兩個部位的被毛剪干凈。剪毛的時候，用左手把皮膚繃緊，右手用粗剪刀貼近皮膚剪毛。5.分離血管：分離頸外靜脈，頸總動脈。將右側切開之后的皮膚，用手指在皮膚外面向上頂起，即可見到頸外靜脈(呈暗紫色的粗大血管)。用止血鉗沿血管走行方向鈍性分離，分離長度3～4cm，穿兩線備用。頸總動脈位于氣管兩側，用手觸之有搏動感。頸總動脈與頸部神經束在頸動脈鞘內，細心分離右側的頸動脈鞘膜，分離頸總動脈長4～5cm，穿兩根線備6.全身肝素化：耳緣靜脈注射1﹪肝素溶液lml／kg體重。(1)右側頸外靜脈插管用于輸液和中心靜脈壓測量。插管時先用動脈夾夾住靜脈近心端，待靜脈充盈后結扎遠心端。用眼科剪在靠近遠心端結扎處呈45o角剪一小口(約為管徑的1／3或1／2)，插入預先充滿生理鹽水的連有三通活塞的靜脈導管，插入導管長度約5~7cm。此時導管口在上腔靜脈近右心房入口處，結扎固定插管(最好能經頸外靜脈插管到右心房，進而插入右心室，通過壓力傳感器，用生物信號分析系統(tǒng)或生理記錄儀記錄右心室內壓力及壓力變化率，并據此壓力的波形和數值及插管的長度，判斷導管所到達的部位)。(2)左側頸總動脈插管用于描記動脈血壓。結扎頸總動脈遠心端，用動脈夾夾住近心端(使兩端距離盡可能長)。然后用眼科剪在靠近遠心端結扎處的動脈壁上剪一斜口(為管徑的1／3～1／2)，插入預先充滿生理鹽水的動脈導管，用已穿好的線結扎，并固定導管，以防滑脫，然后緩慢松開動脈夾。8.連接血壓描記裝置，打開生理記錄儀，描記正常血壓曲線，測量和記錄中心靜脈壓、血壓、心率、心音強度、呼吸頻率和深度，聽診胸背部有無水泡音，做肝—中心靜脈壓反流試驗(用手輕推壓右肋弓下3s，中心靜脈壓上升以cmH2O表示)。9.復制急性右心衰竭模型用lml注射器抽取預先加溫至38℃的液狀石蠟lml，以每分鐘0.2ml的速度緩慢注入耳緣靜脈，同時密切觀察血壓、中心靜脈壓(或心房壓、右心室內壓)、呼吸等變化。如有中心靜脈壓明顯上升或血壓明顯下降，即停止注射。待中心靜脈壓和血壓又恢復到原對照水平時，再緩慢注入液狀石蠟，直至中心靜脈壓有明顯升高及血壓有輕度下降時〔降低10～20mmHg(1.3～2.7kPa)〕為止(一般液狀石蠟用量為0.5～1.0ml，不超過0.5ml／kg)。10.待動物呼吸、血壓穩(wěn)定后，以每分鐘約5～10ml／kg鹽水，輸液過程中密切觀察各項指標的變化(呼吸、血壓、心率、心音強度、胸背部有無水泡音、中心靜脈壓以及肝—中心靜脈壓反流等)，直至動物死亡。11.動物死亡后，擠壓胸壁，觀察氣管內有無分泌物溢出。剖開胸、腹腔，觀察有無胸腔積液和腹水；肝臟有無淤血腫大；腸系膜血管有無淤血，腸壁有無水腫；心臟各腔室體積有何變化；肺臟有無水腫；最后切開腔靜脈，讓血液流出，觀察肝臟和心腔體積的變化。【注意事項】1.注射液狀石蠟時一定要緩慢，出現血壓明顯降低時應立即停止注射，否則容易導致動2.頸外靜脈壁薄，易損傷出血，分離時應仔細行鈍性分離，忌用剪刀剪切。3.靜脈導管的插入深度為5～7cm，在插管過程中如遇阻力，可將導管稍微退出，調整方向后再插，切忌硬插，以免刺破血管。插好后可見中心靜脈壓隨呼吸明顯波動。4.尸檢時注意不要損傷胸、腹腔血管，以免影響對胸腹水的觀察?！舅伎碱}】1.本實驗中耳緣靜脈注入液體石蠟為何引起急性右心衰竭？哪些指標變化是右心衰竭所致?2.影響中心靜脈壓的因素有哪些？為什么右心衰竭會出現中心靜脈壓升高？【實驗目的】1、復制兩種不同類型的呼吸衰竭模型，觀察不同呼吸衰竭時血氣和呼吸的變化。2、觀察低氧和不同濃度CO2對呼吸運動的影響，進一步認識呼吸功能不全的基本發(fā)病機制及其對機體的影響。3、學習動脈取血和血氣測定方法?！緦嶒炘怼恐苯硬捎弥舷⒃斐蒊I型呼吸衰竭。用油酸注射，引起肺泡毛細血管膜損傷，復制I型呼吸衰竭模型。觀察兩種呼吸衰竭時血氣與呼吸的變化，分析其發(fā)生機制。通過人工吸入不同濃度的O2和CO2，觀察不同程度低氧和CO2潴留對呼吸功能的影響，分析化學感受器反射在呼吸運動中的調節(jié)作用。【實驗對象】大白鼠，重250－300克【器材和藥品】大鼠固定臺，注射器(1ml、2ml、5ml)各2只，氣管插管，動脈插管，手術器械一套，血氣分析儀,動物人工呼吸機，聽診器。2【方法和步驟】1.大白鼠先稱重，腹腔注射20%氨基甲酸乙酯（1g/kg體重）麻醉后仰臥固定于手2.頸部正中皮下注入1%普魯卡因做局部浸潤麻醉后，自頜下至胸骨上緣剪一切口，鈍性分離頸部肌肉、氣管、右側頸外靜脈和左側頸總動脈。作氣管插管。3.結扎頸總動脈遠心端，用動脈夾夾閉近心端，靠近動脈遠心端用眼科剪一約1/2-1/3周徑的斜口，插入已充滿肝素生理鹽水的動脈插管，結扎固定后打開動脈夾。待動物休息15分鐘后測定各項指標呼吸頻率、深度，全血PH值,PaCO2,PaO2。4.用注射器抽出動脈插管內的死腔液，然后用經肝素化處理的注射器取血，迅速套上帶有軟木塞的針頭作血氣分析。5.用肉眼觀察呼吸運動的變化。6.兩種類型的呼吸衰竭及呼吸運動的調節(jié)A組：窒息引起的呼吸衰竭①夾閉氣管插管，使動物處于完全窒息25S，立即取動脈血0.5ml作血氣分析，并觀察呼吸的變化，至30s時松開夾閉的氣管插管。②待動物呼吸恢復正常后記錄各指標，準備作C組實驗。B組：油酸引起的呼吸衰竭①頸外靜脈緩慢注入油酸（10～15ug/100g）于注射后30min、60min記錄各指標。②出現明顯呼吸變化后，迅速通過人工呼吸機給動物吸40﹪氧氣，并進行呼氣末正壓通C組：O2和CO2對呼吸的調節(jié)作用。①用A組恢復后的動物，動物氣管插管連接氣袋，吸入含6﹪O2的氣體2～5min，迅速記錄各指標，然后恢復正常通氣30min。②動物吸入含3﹪O2的氣體2～5min，記錄各指標后，恢復正常通氣30min。③動物吸入含3﹪CO2的氣體2～5min，記錄各指標后，恢復正常通氣30min。④動物吸入含6﹪CO2的氣體2～5min，記錄各