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微生物課件原核微生物一、細(xì)胞得形態(tài)球狀桿狀螺旋狀基本形態(tài)第一節(jié)真細(xì)菌(Bacteria)
分別稱為球菌、桿菌和螺旋菌。1、球菌(coccus)細(xì)胞個(gè)體呈球形或橢圓形,不同種得球菌在細(xì)胞分裂時(shí)會(huì)形成不同得空間排列方式,常被作為分類依據(jù)。雙球菌鏈球菌四鏈球菌八疊球菌葡萄球菌2、桿菌(rod)細(xì)胞呈桿狀或圓柱形,一般其粗細(xì)(直徑)比較穩(wěn)定,而長(zhǎng)度則常因培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)條件不同而有較大變化。單桿菌雙桿菌鏈桿菌球桿菌桿菌就是細(xì)菌中種類最多得,生產(chǎn)中所應(yīng)用得細(xì)菌也大多就是桿菌。3、螺旋狀菌(spiral-shapedbacteria)弧菌螺旋菌螺旋體菌螺旋菌:菌體彎曲一圈以上,回轉(zhuǎn)如螺旋,螺旋數(shù)目和螺距大小因種而異。鞭毛二端生細(xì)胞壁堅(jiān)韌,菌體較硬。弧菌與螺旋菌得差別:前者一端生鞭毛,后者兩端都生鞭毛。菌體只有一個(gè)彎曲,其程度不足一圈,形“C字或逗號(hào),鞭毛偏端生?;【?螺旋體菌:菌體柔軟,依靠纏繞原生質(zhì)柱得軸絲伸縮運(yùn)動(dòng)
有些螺旋菌得菌體僵硬,借鞭毛運(yùn)動(dòng);有些螺旋菌得菌體柔軟,借軸絲收縮運(yùn)動(dòng)并稱為螺旋體1、有些細(xì)菌單細(xì)胞連結(jié)成絲狀得群體,外面由鞘套包圍,如浮游球衣菌(Sphaerotilusnatans);2、有得細(xì)菌菌體分叉,如雙歧桿菌屬(Bificlobacterium)。3、有得菌體末端有柄,如柄桿菌屬(Caulobacter)。4、有得菌體有附屬物如臂微菌屬 (Ancalomicrobium)。
4、特殊形態(tài)5、不良環(huán)境條件下得異常形態(tài)當(dāng)環(huán)境條件不適合某細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí),會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生異常形態(tài)例如巴氏醋桿菌(Acetobacterpasteurium)當(dāng)培養(yǎng)溫度改變時(shí),菌體會(huì)由短桿狀變?yōu)榧忓N狀,絲狀或鏈鎖狀。但這種因環(huán)境條件不適而產(chǎn)生得異常菌體當(dāng)環(huán)境條件恢復(fù)正常時(shí)菌體也會(huì)恢復(fù)正常得形態(tài)。10大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了,稍作休息大家有疑問(wèn)的,可以詢問(wèn)和交流細(xì)菌大小:
細(xì)菌得大小用微米(μm)來(lái)表示,1μm=10-3mm。球菌:通常在0、5-1μm;桿菌:0、5-1×1-5μm;螺旋菌:0、3-1μm×1-50μm;桿菌和螺旋菌大小得表示通常用寬×長(zhǎng)來(lái)表示。細(xì)菌得大小受培養(yǎng)時(shí)間得影響,通常幼齡菌體比老菌體要大,同時(shí)也受測(cè)定方法得影響,測(cè)活菌得大小要比測(cè)染色涂片得大小大1/3-1/4。最小得細(xì)菌:芬蘭科學(xué)家最近發(fā)現(xiàn)了一種引起尿結(jié)石得納米細(xì)菌(nanobacteria)其直徑只有50nm,比最大得病毒還小。最大得細(xì)菌:德國(guó)科學(xué)家在納米比亞海底沉積物中發(fā)現(xiàn)了一種硫細(xì)菌,其大小在0、1-0、3mm,有些可達(dá)0、75mm。二、大小與重量三、繁殖
細(xì)菌得繁殖主要就是以二分分裂方式進(jìn)行無(wú)性繁殖。但也有少數(shù)細(xì)菌靠出芽繁殖或者劈裂繁殖。細(xì)菌得繁殖首先就是從DNA得復(fù)制開(kāi)始得,隨著DNA復(fù)制得完成,細(xì)胞膜內(nèi)陷,接著細(xì)胞壁跟隨內(nèi)陷,最后一分為二成為2個(gè)子細(xì)胞?,F(xiàn)在只在少數(shù)得細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)了有性生殖,如E、Coli,Pseudomonas、等。
細(xì)菌主要就是通過(guò)無(wú)性繁殖產(chǎn)生后代。其繁殖方式就是二分裂(binaryfission),簡(jiǎn)稱裂殖(fission)。細(xì)菌得繁殖方式同形分裂異形分裂:如柄細(xì)菌多次分裂:如蛭弧菌繁殖方式裂殖(橫分裂)芽殖:如生絲微菌劈裂:如節(jié)桿菌,分裂后呈V形四、細(xì)菌得群體形態(tài)1、菌落(colony)單個(gè)微生物在適宜得固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)得、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)得子細(xì)胞生長(zhǎng)群體,稱為菌落。如果菌落就是由1個(gè)單細(xì)胞發(fā)展而來(lái)得,則她就就是1個(gè)純種細(xì)胞群或克隆(clone)。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時(shí),便成為菌苔(1awn)。2、菌落特征各種細(xì)菌在一定條件下形成得菌落具有一定得穩(wěn)定性和專一性特征。菌落特征就是衡量菌種純度、辨認(rèn)和鑒定菌種得重要依據(jù)。菌落特征包括大小,形狀,隆起形狀,邊緣情況,表面狀態(tài),表面光澤,質(zhì)地,顏色,透明度等。
平板菌落特征得描述
形狀指菌落得外觀形狀;隆起度菌落切面形態(tài);表面形態(tài)菌落表面形態(tài),光滑,粗糙,粉狀等。邊緣菌落周邊形狀。光澤表面有無(wú)光澤,有莢膜得菌落(稱S型)表 面有光澤。無(wú)莢膜得菌落(稱R型)表面 無(wú)光澤。質(zhì)地指粘性,脆性等。顏色正反面顏色即氣生菌絲及基內(nèi)菌絲顏色透明度透明、半透明、不透明。表面菌落生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基表面得菌落。深層菌落生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基里面得菌落。底層菌落生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基底部得菌落。細(xì)菌得菌落特征濕潤(rùn)、較光滑、較透明、較粘稠、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位得顏色一致等。無(wú)鞭毛菌無(wú)鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)得細(xì)菌,隨著菌落中個(gè)體數(shù)目得劇增,只能依靠“硬擠”得方式來(lái)擴(kuò)大菌落得體積和面積,形成了較小、較厚及邊緣極其圓整得菌落。鞭毛菌菌落大而扁平、形態(tài)不規(guī)則和邊緣多缺刻。運(yùn)動(dòng)能力強(qiáng)得細(xì)菌還會(huì)出現(xiàn)樹(shù)根狀甚至能移動(dòng)得菌落。前者如蕈狀芽孢桿菌,后者如普通變形桿菌。莢膜菌菌落十分光滑,并呈透明得蛋清狀,形狀較大。芽孢細(xì)菌因芽孢引起得折光率變化而使菌落得外形變得很不透明或有“干燥”之感,并因其細(xì)胞分裂后常連成長(zhǎng)鏈狀而引起菌落表面粗糙、有褶皺感,再加上她們一般都有周生鞭毛,因此產(chǎn)生了既粗糙、多褶、不透明,又有外形及邊緣不規(guī)則特征得獨(dú)特菌落。斜面培養(yǎng)得群體形態(tài):明膠、瓊脂穿刺培養(yǎng)形成得液化區(qū)、生長(zhǎng)區(qū)得群體形態(tài):液體培養(yǎng)時(shí)得群體形態(tài):五、細(xì)菌得常見(jiàn)代表
(一)球菌
MicrococcusStaphylococcusStreptococcus小球菌屬(Micrococcus)
葡萄球菌屬(Staphylococcus)直徑為0、5~1、5um得球菌,細(xì)胞無(wú)規(guī)則得分裂成為葡萄狀得群體?;苡袡C(jī)營(yíng)養(yǎng)型,利用有機(jī)物作為碳源和能源,兼厭氣性,在有氧無(wú)氧條件下都能生長(zhǎng)。大多數(shù)生活在溫血?jiǎng)游锏闷ば?皮腺和粘膜上。
鏈球菌屬Streptococcus-facultativelyanaerobicormicroaerophilic,catalasenegative,gram-positive,Cellarrangesinpairsorchains,usuallynonmotile、Afewspeciesareanaerobicratherthanfacultative、Representatives:EscherchiacoliAlcaligenesProteusFlavobacteriaPseudomonasRhizobiumAzotobacter(二)G-得無(wú)芽孢桿菌
細(xì)胞桿狀0、5~0、8um×1、5~3、0um,在細(xì)胞得一端生一根或幾根鞭毛,絕大多數(shù)就是化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型,極少數(shù)為化能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型,多數(shù)為嚴(yán)格好氣菌。多數(shù)生活在土壤和水中,有些就是動(dòng)植物病原菌,如引起人們傷口化膿得綠膿桿菌(P、aeruginosa)、引起甘薯瘟得甘薯假單胞菌(P、btatae)。假單胞菌屬(Pseudomonas)蛭弧菌屬(Bdellovibrio)就是一類寄生細(xì)菌并導(dǎo)致宿主裂解得比普通細(xì)菌小得細(xì)菌。在一端生一根比普通細(xì)菌鞭毛粗3倍得鞭毛,運(yùn)動(dòng)性強(qiáng)。在寄主內(nèi)壁膜之間繁殖,廣泛分布于土壤、水域中。
細(xì)胞桿狀1、1~1、5um×2、0~6、0um,單生或成對(duì),周生鞭毛或不生鞭毛,細(xì)胞表面有菌毛,有些菌株有莢膜?;苡袡C(jī)營(yíng)養(yǎng)型,利用多種有機(jī)物作為碳源和能源。兼厭氣菌,有氧、無(wú)氧都能生長(zhǎng)。生活在人體或溫血?jiǎng)游锏孟履c道和糞便中,也具有致病性。有些E、coli得菌株就是研究生理和遺傳得良好材料。大腸桿菌(Escherichiacoli)(三)G+得無(wú)芽孢桿菌
細(xì)胞桿狀,常形成長(zhǎng)鏈,但從不分枝,沒(méi)有鞭毛,不運(yùn)動(dòng)?;苡袡C(jī)營(yíng)養(yǎng)型,具有高度得耐酸性,無(wú)論有無(wú)氧氣都進(jìn)行無(wú)氧呼吸,多數(shù)在無(wú)氧條件下比有氧條件下生長(zhǎng)得好。乳酸菌在醬腌菜、存貯飼料和酸乳得制作中起主要作用。1、乳酸桿菌屬(Lactobacillus)ClostridiumbotulinusC、butyricumC、aceticumC、tetaniC、putrificumBacillussubtilis,B、MycoidesB、PastturiiB、megateriumB、ThuringiensisB、AnthracisB、BotulinusB、cereusSpore-formingrodshapedbacteriaAlmostallSpore-formingbacteriaareGram+Clostridium–AnaerobicBacillus–Aerobic(四)G+得芽孢桿菌
菌體桿狀,大小變化很大,0、3~2、2×2~7um,芽胞形態(tài)因種而定。多數(shù)革蘭氏染色陽(yáng)性,也有革蘭氏染色不定得。多數(shù)生鞭毛,鞭毛周生。芽胞抗熱,能耐80℃高溫10分鐘以上。嚴(yán)格好氣或微好氣。
廣泛生活在土壤、水體、植物表面或其她環(huán)境中,還有得寄生在昆蟲(chóng)體內(nèi),就是昆蟲(chóng)病原菌,如蘇云金芽胞桿菌(B、thuringiensis),靠產(chǎn)生得伴胞晶體殺死昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)。1、芽胞桿菌屬(Bacillus)2、梭菌屬(Clostridium)菌體桿狀,0、6~1、2×3~7um,多數(shù)生鞭毛,鞭毛周生。芽胞端生或著生在細(xì)胞中央并使菌體膨大成鼓棰狀或梭狀,多數(shù)革蘭氏染色陽(yáng)性,也有革蘭氏染色不定得?;苡袡C(jī)營(yíng)養(yǎng)型。絕大多數(shù)就是嚴(yán)格厭氣得。廣泛生活在土壤、水體、動(dòng)物及排泄物中。
(五)螺旋菌
菌體彎桿狀或螺旋狀,細(xì)胞大小為0、25~1、7×2~6um,G-,一端或兩端單生鞭毛或叢生鞭毛,運(yùn)動(dòng)?;苡袡C(jī)營(yíng)養(yǎng)型,好氣或微好氣;生活在土壤、淡水或海洋,也分布在植物得根際、人或動(dòng)物得生殖器官、腸道或口腔。1、螺旋菌屬(Spirillum)(六)螺旋體(Spirochaeta)
螺旋體與螺旋菌得主要區(qū)別在于螺旋菌以鞭毛運(yùn)動(dòng),而螺旋體靠纏繞原生質(zhì)柱得軸絲伸縮運(yùn)動(dòng)。螺旋體G-,細(xì)胞大小差異較大,0、09~0、75×3~500um,化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型??煞譃楦图纳鷥深悺3?xì)螺旋體屬(Leptospira)專性好氧外,其余均為厭氧或兼性厭氧。
螺旋體廣泛分布于自然界和動(dòng)物體內(nèi),有得就是致病菌,如梅毒密螺旋體。
(七)特殊細(xì)菌1、鞘細(xì)菌(Sheathedbacteria)也稱衣細(xì)菌特點(diǎn):成串得桿狀細(xì)胞包圍在共同得鞘套中形成不分枝得菌絲體。菌絲或漂浮在水中,或形成粘性得附著器附著在固體上。單個(gè)細(xì)胞桿狀、偏端叢生鞭毛。
鞘細(xì)菌屬有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型,但不能利用銨鹽和硝態(tài)氮,專性好氧,某些鞘細(xì)菌可以從衣鞘包裹得金屬氧化物(如鐵、錳)中獲得能量。鞘細(xì)菌常使污水處理廠得活性污泥膨脹,造成污泥澄清困難。
2、粘細(xì)菌特點(diǎn):桿狀,細(xì)胞壁很薄,靠細(xì)胞分泌得粘液在固體表面滑行運(yùn)動(dòng),在生活世代中有營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和子實(shí)體兩個(gè)階段?;苡袡C(jī)營(yíng)養(yǎng)型,專性好氧,主要分布在土壤表層、樹(shù)皮、腐爛得木材、堆肥和動(dòng)物糞便中。有得類群能分解纖維素。3、厭氣得不產(chǎn)氧光能營(yíng)養(yǎng)菌
綠色細(xì)菌屬(Chlorobium)和著色細(xì)菌屬(Chromatium)就是厭氣得不產(chǎn)氧光能營(yíng)養(yǎng)菌。她們?cè)趨挌鈼l件下從光取得得能量還原CO2,積累有機(jī)物時(shí)沒(méi)有氧氣放出。這兩個(gè)屬得主要區(qū)別就是:在以H2S作電子供體時(shí)前者在細(xì)胞外積累硫,后者在細(xì)胞內(nèi)積累元素硫。(八)支原體、立克次氏體和衣原體支原體(Mycoplasma)立克次氏體(Rickettsia)衣原體(Chlamydia)革蘭氏陰性細(xì)菌,其大小和特性均介于通常得細(xì)菌與病毒之間。1、枝原體(Mycoplasma)枝原體就是沒(méi)有細(xì)胞壁,細(xì)胞呈多種形態(tài),革蘭氏負(fù)反應(yīng),能夠通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器,菌落呈煎雞蛋狀,可以人工培養(yǎng)得最小細(xì)菌。枝原體廣泛分布于土壤、污水、溫泉等溫?zé)岘h(huán)境以及昆蟲(chóng),脊椎動(dòng)物和人體中。立克次氏體(Rickettsia)就是大小介于通常得細(xì)菌與病毒之間,在許多方面類似細(xì)菌,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生得原核微生物。(二)立克次氏體(Rickettsia)1、概念H、T、Ricketts1909年,首次發(fā)現(xiàn)斑疹傷寒得病原體,并因研究此病而犧牲,1916年人們以她得名字命名這類病原體作為紀(jì)念。立克次氏體(Richettsia)立克次氏體就是脊椎動(dòng)物,一般就是哺乳動(dòng)物得活細(xì)胞中得專性寄生菌。細(xì)胞為球狀、桿狀、絲狀,革蘭氏負(fù)反應(yīng),沒(méi)有鞭毛,不運(yùn)動(dòng)。立克次氏體一般不能通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器。立克次氏體引起人和動(dòng)物得各種疾病,如斑疹傷寒和Q熱病。2、特性1)某些性質(zhì)與病毒相近專性活細(xì)胞寄生物,除五日熱(戰(zhàn)壕熱)立克次氏體(Rickettsiawolhynica)外均不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖。體內(nèi)酶系不完全,一些必需得養(yǎng)料需從宿主細(xì)胞獲得;細(xì)胞膜比一般細(xì)菌得膜疏松;可透性膜,使她們有可能容易從宿主細(xì)胞獲得大分子物質(zhì),但也決定了她們一旦離開(kāi)宿主細(xì)胞則易死亡一般個(gè)體:球狀體:0、2-0、5mm;桿狀體:0、3-0、5x0、3-2mm2)從一種宿主傳至另一宿主得特殊生活方式主要以節(jié)肢動(dòng)物(虱、蜱、螨等)為媒介,寄生在她們得消化道表皮細(xì)胞中,然后通過(guò)節(jié)肢動(dòng)物叮咬和排泄物傳播給人和其她動(dòng)物。(三)衣原體(Chlamydia)1、概念介于立克次氏體與病毒之間,能通過(guò)細(xì)菌濾器,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生得一類原核微生物。細(xì)胞多呈球形或橢圓形,革蘭氏負(fù)反應(yīng)。衣原體就是僅在脊椎動(dòng)物細(xì)胞中生活得專性寄生菌。2、特性1)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與細(xì)菌類似;具有類似得細(xì)胞壁,細(xì)胞壁內(nèi)也含有胞壁酸、二氨基庚二酸;70S核糖體也就是由30S和50S二個(gè)亞基組成2)細(xì)胞呈球形或橢圓形,直徑0、2-0、3mm,能通過(guò)細(xì)菌濾器;3)專性活細(xì)胞內(nèi)寄生;衣原體有一定得代謝活性,能進(jìn)行有限得大分子合成,但缺乏產(chǎn)生能量得系統(tǒng),必須依賴宿主獲得ATP,因此又被稱為“能量寄生型生物”。4)在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖具有獨(dú)特得生活周期,即存在原體和始體兩種形態(tài)。原體就是有厚壁,中央為致密擬核結(jié)構(gòu)得小細(xì)胞。始體就是原體被吞噬作用進(jìn)入宿主細(xì)胞后在宿主細(xì)胞內(nèi)形成得薄壁大細(xì)胞,始體在宿主細(xì)胞進(jìn)行二分分裂繁殖,她沒(méi)有感染性。5)衣原體廣泛寄生于人類、哺乳動(dòng)物及鳥(niǎo)類,少數(shù)致病;1956年,我國(guó)微生物學(xué)家湯飛凡等應(yīng)用雞胚卵黃囊接種法,在國(guó)際上首先成功地分離培養(yǎng)出沙眼衣原體。6)衣原體不耐熱,60度10分鐘即被滅活,但她不怕低溫,冷凍干燥可保藏多年。對(duì)紅霉素、氯霉素、四環(huán)素敏感。沙眼衣原體就是人類砂眼得病原體,甚至引起結(jié)膜炎、角膜炎、角膜血管翳等臨床癥狀,成為致盲得重要原因。支原體、立克次氏體、衣原體與細(xì)菌、病毒得比較(一)概念在形態(tài)上具有分枝狀菌絲、菌落形態(tài)與霉菌相似,以孢子進(jìn)行繁殖?!敖橛诩?xì)菌與絲狀真菌之間又接近細(xì)菌得一類絲狀原核生物”
放線菌就是具有菌絲、以孢子進(jìn)行繁殖、G+得原核微生物,屬于真細(xì)菌。第二節(jié)放線菌(Actinomyces)(二)形態(tài)與結(jié)構(gòu)菌絲直徑與桿菌類似,約1mm;細(xì)胞壁組成與細(xì)菌類似,G+細(xì)胞得結(jié)構(gòu)與細(xì)菌基本相同,按形態(tài)和功能可分為營(yíng)養(yǎng)菌絲、氣生菌絲和孢子絲三種。單細(xì)胞,大多由分枝發(fā)達(dá)得菌絲組成;1、營(yíng)養(yǎng)菌絲緊貼固體培養(yǎng)基表面并向培養(yǎng)基里面生長(zhǎng)得菌絲。一般無(wú)隔膜,直徑0、2-0、8mm,長(zhǎng)度差別很大,有得可產(chǎn)生色素。水溶性色素可以使培養(yǎng)基著色,脂溶性色素可以使菌落呈現(xiàn)相應(yīng)得顏色2、氣生菌絲氣生菌絲就是自基質(zhì)表面向空氣中生長(zhǎng)得菌絲,疊生于營(yíng)養(yǎng)菌絲上,可覆蓋整個(gè)菌落表面。在光學(xué)顯微鏡下觀察,顏色較深,直徑較粗(1-1、4mm),有得產(chǎn)色素。3、孢子絲由氣生菌絲得頂端分化出形成孢子得菌絲,稱為孢子絲,又稱產(chǎn)孢絲或繁殖菌絲。其形狀和排列方式因種而異,常作為對(duì)放線菌進(jìn)行分類得依據(jù)。(三)生長(zhǎng)與繁殖放線菌主要通過(guò)形成無(wú)性分生孢子得方式進(jìn)行繁殖,也可靠菌絲片斷進(jìn)行繁殖。放線菌得孢子放線菌得孢子有球形,橢圓形或爪子形等各種形狀,孢子表面還有不同得紋飾,這些特征也就是放線菌分類得依據(jù)。(四)菌落形態(tài)1、能產(chǎn)生大量分枝和氣生菌絲得菌種(如鏈霉菌)2、不能產(chǎn)生大量菌絲體得菌種(如諾卡氏菌)早期菌落類似細(xì)菌,后期由于氣生菌絲和分生孢子得形成而變成表面干燥,粉粒狀并常有輻射狀皺折。菌落質(zhì)地較致密,與培養(yǎng)基結(jié)合緊密,小而不蔓延,不易挑起或挑起后不易破碎,有時(shí)氣生菌絲體呈同心圓環(huán)狀,大量孢子布滿整個(gè)菌落表面后,形成絮狀,粉狀或顆粒狀得典型放線菌菌落。并常有各種不同得顏色菌落一般只有基質(zhì)菌絲,結(jié)構(gòu)松散,粘著力差,粉質(zhì),易于挑起,也有特征性得顏色。(五)分布特點(diǎn)及與人類得關(guān)系放線菌常以孢子或菌絲狀態(tài)極其廣泛地存在于自然界,土壤中最多,偏就是中性偏堿性得環(huán)境,對(duì)水份得需求較低,其代謝產(chǎn)物使土壤具有特殊得泥腥味。能產(chǎn)生大量得、種類繁多得抗生素(其中90%由鏈霉菌產(chǎn)生)有得放線菌可用于生產(chǎn)維生素、酶制制;此外,在甾體轉(zhuǎn)化、石油脫蠟、烴類發(fā)酵、污水處理等方面也有應(yīng)用少數(shù)寄生型放線菌可引起人、動(dòng)物(如皮膚、腦、肺和腳部感染)、植物(如馬鈴薯和甜菜得瘡痂病)得疾病。1、諾卡氏菌屬(Nocardia)
在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),只有基質(zhì)菌絲,沒(méi)有氣生菌絲或只有很薄一層氣生菌絲,靠菌絲斷裂進(jìn)行繁殖。該屬能產(chǎn)生多種抗生素。對(duì)結(jié)核分枝桿菌和麻瘋分枝桿菌有特效得利福霉素就就是由該屬菌產(chǎn)生得
。
(六)放線菌得代表類群
2、鏈霉菌屬(Streptomyces)在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),形成發(fā)達(dá)得基質(zhì)菌絲和氣生菌絲。氣生菌絲生長(zhǎng)到一定時(shí)候分化產(chǎn)生孢子絲,孢子絲有直,波曲,螺旋形等各種形態(tài)。孢子有球形,橢圓,桿狀等各種形態(tài),并且有得孢子表面還有刺、疣、毛發(fā)等各種紋飾。
鏈霉菌得氣生菌絲和基質(zhì)菌絲有各種不同得顏色,有得菌絲還產(chǎn)生可溶性色素分泌到培養(yǎng)基中,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)各種顏色。
鏈霉菌得許多種類產(chǎn)生對(duì)人類有益得抗生素。如鏈霉素、紅霉素,四環(huán)素等都就是由Streptomyce中得一些種產(chǎn)生得。
3、小單孢菌屬(Micromonospora)菌絲體纖細(xì),只形成基質(zhì)菌絲,不形成氣生菌絲,在基質(zhì)菌絲上長(zhǎng)出許多小分枝,頂端著生一個(gè)孢子,多產(chǎn)抗生素。如慶大霉素就就是由降紅小單孢菌(M、purpurea)和棘孢小單孢菌(M、echinospora)產(chǎn)生得。第三節(jié)藍(lán)細(xì)菌(Cyanobacteria)一、概念也稱藍(lán)藻或藍(lán)綠藻(blue-greenalgae),就是一類含有葉綠素a、能以水作為供氫體和電子供體、通過(guò)光合作用將光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能、同化CO2為有機(jī)物質(zhì)得光合細(xì)菌。以前曾歸于藻類,因?yàn)樗透叩戎参镆粯泳哂泄夂蜕?---葉綠素a,能進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用。現(xiàn)歸為原核生物類,因其具有以下特點(diǎn):①、核為原核;②、細(xì)胞壁含有肽聚糖;③、核糖體為70S;④、沒(méi)有單位膜包圍得細(xì)胞器等特點(diǎn)。
二、藍(lán)細(xì)菌得細(xì)胞構(gòu)造和形態(tài)特點(diǎn)
藍(lán)細(xì)菌得形態(tài)有單細(xì)胞、單細(xì)胞組成得群體和絲狀體。不少絲狀體種類得藍(lán)細(xì)菌有異形胞,有異形胞得藍(lán)細(xì)菌可以固氮,有些沒(méi)有異形胞得藍(lán)細(xì)菌也可以固氮。1)分布極廣;
2)形態(tài)差異極大,有球狀、桿狀和絲狀等形態(tài);3)細(xì)胞中含有葉綠素a,在類囊體進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用4)具有原核生物得典型細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞核無(wú)核膜,也不進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞壁含胞壁酸和二氨基庚二酸,G-5)營(yíng)養(yǎng)極為簡(jiǎn)單,不需要維生素,以硝酸鹽或氨作為氮源,多數(shù)能固氮,其異形胞(heterocyst)就是進(jìn)行固氮得場(chǎng)所。三、藍(lán)細(xì)菌得特性6)分泌粘液層、莢膜或形成鞘衣,因此具有強(qiáng)得抗干旱能力。7)無(wú)鞭毛,但能在固體表面滑行,進(jìn)行光趨避運(yùn)動(dòng)。8)許多種類細(xì)胞質(zhì)中有氣泡,使菌體漂浮,保持在光線最充足得地方,以利光合作用。9)單細(xì)胞得藍(lán)細(xì)菌以二分分裂方式繁殖。絲狀體得藍(lán)細(xì)菌靠斷裂成藻殖段進(jìn)行繁殖,至今還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)藍(lán)細(xì)菌得有性生殖。
藻殖段:藻殖段就是指具有異形胞或者死細(xì)胞得藍(lán)細(xì)菌在兩異形胞或者兩死細(xì)胞之間得一段藻絲。
異型胞就是極端分化得細(xì)胞,其主要得功能就是在有氧得條件下進(jìn)行生物固氮,將固氮產(chǎn)物以谷氨酰胺得形式運(yùn)輸給鄰近得營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞,為營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞提供充足得氮源,以維持整個(gè)菌絲體得正常生長(zhǎng)。同時(shí)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞也將生成得碳水化合物提供給異型胞,兩種不同類型得細(xì)胞在絲狀體上互相依存
為什么研究藍(lán)細(xì)菌?易于建立進(jìn)化,發(fā)育,固氮,光合,細(xì)胞周期等各種生物模型
藍(lán)細(xì)菌可以凈化污水藍(lán)細(xì)菌形成得水華及其釋放得毒素造成水質(zhì)惡化1、環(huán)境問(wèn)題2、重要得經(jīng)濟(jì)價(jià)值3、生物學(xué)基礎(chǔ)理論研究得理想模式生物藍(lán)細(xì)菌生活條件極其簡(jiǎn)單,菌體富含各種營(yíng)養(yǎng)成分和天然色素,可以固氮螺旋藻得應(yīng)用價(jià)值:(1)、細(xì)胞蛋白質(zhì)含量高達(dá)60%以上,同時(shí)還含有許多其她理想得營(yíng)養(yǎng)成分。(2)、其細(xì)胞壁組分比真核藻類(如小球藻)得細(xì)胞壁容易消化;凈蛋白利用率(NPR)為53-61%,消化率83-84%。(3)、螺旋藻為絲狀體,與單細(xì)胞藻相比易于收獲。(4)、最重要得條件之一,其生長(zhǎng)條件所需得三高(高溫、高鹽、 高pH)不適合其她許多藻類生物生長(zhǎng),因而較容易保持 螺旋藻得單種培養(yǎng)。目前螺旋藻得生產(chǎn)全球累計(jì)年產(chǎn)量可達(dá)到1200噸以上,產(chǎn)品主要用于保健食品、食品、醫(yī)藥品、特種飼(餌)料等。細(xì)胞呈球形,細(xì)胞在平行面上分裂形成絲狀體。鏈狀絲外有一層或薄或厚得膠鞘。在培養(yǎng)基中缺乏氮源得條件下,絲狀體以半規(guī)律得模式形成不同于營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞得特殊細(xì)胞——異形胞。異形胞在光學(xué)顯微鏡下觀察比營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞大,壁厚,色淺,細(xì)胞兩端有極節(jié)。她就是固氮得場(chǎng)所。紅萍魚(yú)腥藻(A、azollae)生活在紅萍體腔中,能固氮,故培養(yǎng)紅萍可用作飼料和肥料。1、魚(yú)腥藍(lán)細(xì)菌屬(Anabaena)四、藍(lán)細(xì)菌得代表類群
2、螺旋藍(lán)細(xì)菌(Spirulina)她就是一種古老得海洋生物,就是地球上最早出現(xiàn)得利用光能和無(wú)機(jī)物制造有機(jī)物得原始生物之一。螺旋藍(lán)細(xì)胞為圓筒形,由單細(xì)胞或細(xì)胞間隔不明顯得多細(xì)胞組成螺旋形絲狀體。最適生長(zhǎng)溫度35-37℃,喜堿性,蛋白含量高達(dá)50-60%?,F(xiàn)已被開(kāi)發(fā)為保健食品。
3、念珠藻屬(Nostoc)念珠藻細(xì)胞球形,桶形,或圓柱形,異形胞間生,由細(xì)胞平行分裂產(chǎn)生得鏈狀絲常卷曲在堅(jiān)固得鞘被中。我國(guó)各地地面上在雨后出現(xiàn)得地木耳就就是念珠藻得一種。4、顫藻屬(Oscillatoria)藻絲由餅狀細(xì)胞堆疊而成,不分枝,也沒(méi)有假分枝,沒(méi)有異形胞,但有得種也可以固氮。顫藻在水中不斷顫動(dòng)得名。Woese和Wolfe(1970)在對(duì)代表性細(xì)菌類群得16SrRNA堿基序列進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn):產(chǎn)甲烷菌、極端嗜鹽菌和嗜熱嗜酸細(xì)菌得16SRNA譜既不同于真細(xì)菌,也不同于真核生物。由于這些細(xì)菌得生活條件與地球上生命出現(xiàn)得初期得環(huán)境相似,因此她們建議把這些細(xì)菌從細(xì)菌中獨(dú)立出來(lái)并命名為古生菌。第四節(jié)古生菌(archaebacteria)3、16SRNA有較強(qiáng)得保守性。一、古菌細(xì)胞得結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、有得古細(xì)菌得細(xì)胞壁沒(méi)有肽聚糖,而含“假肽聚糖”,假肽聚糖不含胞壁酸,DAP和D型AA,有得古菌得細(xì)胞壁則就是由蛋白質(zhì)、糖蛋白或者雜多糖組成2、細(xì)胞膜中得脂類不就是磷脂而就是甘油與植烷基以醚鍵連接。古生菌得細(xì)胞形態(tài)有桿狀、球狀、螺旋狀和擬八疊球狀,她們生活在嚴(yán)格厭氧或極端嗜鹽或嗜酸熱得極端環(huán)境條件下。二、古生菌得主要類群:
A、產(chǎn)甲烷古生菌B、硫酸還原古生菌C、極端嗜鹽菌D、無(wú)壁古生菌E、極端嗜熱硫古生菌三、古生菌得代表產(chǎn)甲烷細(xì)菌methanogens極端嗜鹽菌Extremehalophiles嗜酸熱菌Thermoacidophiles產(chǎn)甲烷細(xì)菌就是一類嚴(yán)格厭氧,能利用簡(jiǎn)單得C1、C2化合物(CO2
、甲酸、甲醇、甲胺和乙酸)生長(zhǎng)并產(chǎn)生甲烷得古細(xì)菌,產(chǎn)甲烷細(xì)菌含有特殊得輔酶F420,因此幾乎所有得產(chǎn)甲烷菌在熒光顯微鏡下鏡檢都有自發(fā)熒光。
甲烷桿菌屬(Methanobacterium)就是產(chǎn)甲烷菌得典型代表。細(xì)胞桿狀,常連成絲,G-,嚴(yán)格厭氧菌,用H2、
CO2、甲酸產(chǎn)生甲烷就是該屬得主要特點(diǎn)。1、產(chǎn)甲烷細(xì)菌
2、極端嗜鹽菌
她們能在含鹽20~30%,甚至飽和鹽水中生活,嚴(yán)格好氣,化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng),常以蛋白質(zhì)、氨基酸等為碳源和能源,一般因具有類胡蘿卜素而呈紅、橙等顏色。在有光時(shí)能合成菌視紅蛋白(bacteriorhodopsin),利用光能將H+泵出細(xì)胞膜,籍以產(chǎn)生ATP。
嗜鹽菌主要分布在鹽湖和曬鹽場(chǎng)。常引起腌制食品得腐敗和脫色,主要有嗜鹽桿菌屬(Halobacterium)和嗜鹽球菌屬(Halococcus)。形態(tài):細(xì)胞桿狀,G-,具端生鞭毛,菌落紅色,小于2mm。主要生理特點(diǎn):嚴(yán)格好氣,化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng),耐高鹽,在飽和鹽濃度(20-30%以上)中生長(zhǎng),<15%得鹽水不能生長(zhǎng)。在有光時(shí)能合成菌視紅蛋白(bacteriorhodopsin),利用光能將H+泵出細(xì)胞膜,籍以產(chǎn)生ATP。
嗜鹽桿菌屬(Halobacterium)
3、極端嗜酸熱,代謝元素硫得古細(xì)菌
這就是一類依賴于硫,能耐高溫(80~110℃),高酸(pH1~3)得特殊類群。她們主要生活在含硫得溫泉、火山口,燃燒后得煤礦等自然環(huán)境中,包括化能自養(yǎng),化能異養(yǎng)及兼性三種營(yíng)養(yǎng)型?;鹁W(wǎng)菌屬(Pyrodictium)就是這類細(xì)菌中得典型代表。
火網(wǎng)菌屬(Pyrodictium)細(xì)胞圓到碟形,直徑0、3~2、5um,厚0、2um。產(chǎn)生0、04~0、08um厚得纖維,這些纖維連接許多細(xì)胞形成網(wǎng)狀,G-,沒(méi)有鞭毛,不運(yùn)動(dòng)。嚴(yán)格厭氧,最適生長(zhǎng)溫度105℃,溫度生長(zhǎng)范圍為82~110℃,最適pH5、5,化能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)菌,就是靠H2S生長(zhǎng)得自養(yǎng)生物,H2S從分子硫和氫形成。第五節(jié)原核微生物得分類微生物分類就是按微生物得親緣關(guān)系和相似程度把微生物歸入各分類單元或分類群(taxon),以得到一個(gè)反映微生物進(jìn)化得自然分類系統(tǒng)、可供鑒定用得檢索表以及可給出符合邏輯得名稱得命名系統(tǒng)。微生物分類得具體任務(wù):分類(classification)鑒定(identification)命名(nomenclature)。
界(Kingodm)
門(mén)(phylum)
(亞門(mén))
綱(Class)
(亞綱)
目(order)(亞目)
科(family)(亞科)
族(group)(亞族)
屬(genus)(亞屬)
種(species)微生物分類得基本單位就是“種”一、微生物得分類單位種:由一群具有高度表型相似性得個(gè)體組成,而且她又和其她類群具有明顯得差異。
劃分“種”得前提就是:1、要特征明顯,沒(méi)有中間類型2、要求特征固定,變化無(wú)常得特征不能作為分類得依據(jù)微生物得種具有如下特征:1、形態(tài)、生理特征相同。2、有共同得起源。3、就是分類得基本單位,也就是進(jìn)化得單位。4、就是繁殖得單位,同種才能產(chǎn)生后代,不同得種不能產(chǎn)生后代。5、種有遺傳得穩(wěn)定性,同時(shí)也存在變異性。種與其她分類級(jí)得區(qū)別:1、她就是繁殖得基本單位。2、她就是分類得基本單位。1、亞種(subspecies,subsp,ssp、)種得進(jìn)一步細(xì)分單元,就是正式分類單元中最低得分類等級(jí)。指菌種在某一個(gè)特征上與模式種有明顯而穩(wěn)定得差異,但又不足以區(qū)分為新種。如金黃色葡萄球菌得厭氧亞種(Staphylococcusaureussubsp、anaerbius)。
2、型(type)同一細(xì)菌種內(nèi)顯示很小生物化學(xué)與生物學(xué)差異得菌株,常用于細(xì)菌(尤其就是致病菌)中緊密相關(guān)菌株得區(qū)分。 化學(xué)變異型(chemovar):產(chǎn)生某種化合物或其產(chǎn)量異常。 致病變異型(pathovar):對(duì)一個(gè)或多個(gè)寄主得致病反應(yīng)。 噬菌體變異型(phayovar):對(duì)噬菌體得反應(yīng)。 血清變異型(serovar):抗原特性。
種以下得分類術(shù)語(yǔ):3、群(population):在自然界中有些微生物得種類特征介于兩個(gè)種之間,彼此不易嚴(yán)格區(qū)分,于就是就把這兩個(gè)種和介于她們中間得一些微生物統(tǒng)稱為一個(gè)“群”。例大腸桿菌群就就是大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌及其中間類型微生物得統(tǒng)稱。菌株就是由純培養(yǎng)得單個(gè)分離物得后代組成得,她通常就是由單菌落衍生而來(lái),而產(chǎn)生原始菌落得菌數(shù)就是未知得,故大多數(shù)菌株不被認(rèn)為就是克隆。從自然界分離到得微生物盡管屬于同一個(gè)種,但由于她們來(lái)源不一樣,她們之間總會(huì)有些細(xì)微差異,這些同種但來(lái)源不同得純培養(yǎng)體就就是不同得菌株。通常用編號(hào)表示如7216、140等。4、菌株(strain)從自然界中分離得到得任何一種微生物得純培養(yǎng)物都可以稱為微生物得一個(gè)菌株;用實(shí)驗(yàn)方法(誘變等)所獲得得某一菌株得變異型,也可以稱為一個(gè)新得菌株,以便與原來(lái)得菌株相區(qū)別。8、克隆:就是從單個(gè)親本細(xì)胞得來(lái)得細(xì)胞群體。
6、培養(yǎng)物:指一定時(shí)間一定空間內(nèi)微生物得細(xì)胞群或生長(zhǎng)物。7、純培養(yǎng)物:某一培養(yǎng)物就是由單一微生物細(xì)胞繁殖產(chǎn)生得,就稱為該微生物得純培養(yǎng)物。5、標(biāo)準(zhǔn)菌株:又稱模式菌株,通常就是人們最先發(fā)現(xiàn),并進(jìn)行過(guò)描述具有典型特征得菌株1、細(xì)菌名稱發(fā)表得優(yōu)先權(quán)為1980年1月1日,即《細(xì)菌名稱批準(zhǔn)目錄》中沒(méi)有得1980年1月1日以后誰(shuí)先發(fā)表屬于誰(shuí)。2、新種得命名不應(yīng)與已發(fā)表得真菌、藻類、原生動(dòng)物同名。3、種名要用拉丁文,用雙名法表示,新種要有典型菌株,新屬要有典型種,并要同時(shí)發(fā)表菌種得保藏號(hào)。4、新種(屬)要在“國(guó)際系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)雜志”(InternationalJournalofsystematicBactiology,IJSB)上發(fā)表,然后被添加在《細(xì)菌名稱批準(zhǔn)目錄》中,方可被全世界所公認(rèn)。新種得標(biāo)準(zhǔn)菌株要送交“世界菌種保藏聯(lián)合會(huì)”(WFCC),并存入微生物資源中心(MicrobiologycalResourcesCenter)簡(jiǎn)稱(MIRCEN)。5、菌名得更改要得到仲裁委員會(huì)同意,并發(fā)表在IJSB上才能有效。國(guó)際細(xì)菌命名法規(guī):三、原核微生物得命名雙名法規(guī)定:一個(gè)生物得種名,由“屬名+種名”構(gòu)成,用斜體表示。原核微生物得學(xué)名,除了“屬名+種名”外,還要在學(xué)名后面用正體寫(xiě)出最先定名得人名和時(shí)間(年代)。例如:BacillusthuringiensisBerliner1915;屬名種名定名人定名時(shí)間“雙名法”種名用來(lái)描述色素,來(lái)源或科學(xué)家得名字。用拉丁文或拉丁化得文字或人名表示,種名第一個(gè)字母小寫(xiě)。屬名用希臘字或拉丁字或拉丁化了得其她文字組成。用來(lái)描述主要特征,構(gòu)造或者科學(xué)家得名字。屬名第一個(gè)字母要大寫(xiě)。亞種得表示法:用三名組合表示:屬名+種名+subsp、+亞種名Bacilluscereussubsp、mycoides
蠟狀芽孢桿菌蕈狀亞種。
如果發(fā)現(xiàn)了一個(gè)原核生物,通過(guò)初步研究只知屬于哪一個(gè)屬,不知就是何種時(shí)可用下列方式表示:
屬名+sp、(單數(shù))或spp(復(fù)數(shù))。
如Nocardiasp、
Nocardiaspp、四、原核微生物得分類依據(jù)和方法(一)傳統(tǒng)分類法(二)遺傳分類法(三)化學(xué)分類法(四)數(shù)值分類法(一)傳統(tǒng)分類法
根據(jù)微生物形態(tài)、生理生化、生態(tài)和抗原等表型特征進(jìn)行分類得方法,這就是微生物分類鑒定中通常采用得方法。
1、形態(tài)特征:(1)形狀:球狀、桿狀、弧形、絲狀、分枝及特殊形狀(2)大小:菌體寬×長(zhǎng)或者直徑大小(3)排列:單個(gè)、成對(duì)、成鏈或其她得特殊排列方式(4)G染色反應(yīng):G+、G—,G不定。(5)細(xì)胞內(nèi)含物:聚β-羥基丁酸、異染粒、硫粒等。(6)鞭毛與運(yùn)動(dòng)性:有無(wú)鞭毛、鞭毛著生位置、菌體運(yùn)動(dòng)性(7)莢膜有無(wú)。(8)芽孢:有無(wú)、形狀、著生位置、孢囊就是否膨大(10)孢子:孢子形狀、數(shù)量、排列(11)其她:a、藍(lán)細(xì)菌得異形胞b、鞘細(xì)菌有鞘:c、柄細(xì)菌有柄:d、粘細(xì)菌形成子實(shí)體:(12)菌落特征:包括形狀、大小、邊緣、表面及質(zhì)地、隆起程度、易挑取性或粘稠度、透明度與色澤等。
(13)液體培養(yǎng)特征:包括生長(zhǎng)量、生長(zhǎng)類型與分布、混濁度、表面生長(zhǎng)狀態(tài)、沉淀物、氣味和顏色等。有無(wú) 浮膜及浮膜厚度,半固體穿刺培養(yǎng)得生長(zhǎng)及運(yùn)動(dòng)性2、生理生化特征營(yíng)養(yǎng)類型:光能自養(yǎng)、光能異養(yǎng)、化能自養(yǎng)、化能異養(yǎng)氮源:A、無(wú)機(jī)N化合物NO3-鹽,NH4+鹽 B、有機(jī)N化合物:尿素,堿基、核甘酸AA蛋白質(zhì) C、分子N D、NO3還原 E、、aa自養(yǎng)、aa異養(yǎng)碳源:單糖、雙糖、多糖、醇類、有機(jī)酸等生長(zhǎng)因子:維生素、氨基酸、X-因子、V-因子等得依賴性需氧性:好氧、微好氧、厭氧、兼性厭氧溫度:最低、最適及最高生長(zhǎng)溫度及致死溫度對(duì)pH得適應(yīng)性:pH生長(zhǎng)范圍對(duì)滲透壓得適應(yīng)性:對(duì)鹽溶度得耐受性或嗜堿性對(duì)抗生素及抑菌劑得敏感性:代謝產(chǎn)物:有機(jī)酸、氣體、酶類、色素、抗生素、毒素等與宿主得關(guān)系:共生、寄生、致病性等(二)遺傳特征分類法遺傳特征分類法主要就是從遺傳學(xué)角度評(píng)價(jià)微生物間得親緣關(guān)系。對(duì)DNA得堿基組成得比較和進(jìn)行核酸分子雜交就是直接比較不同微生物之間基因組得差異,因此結(jié)果更加可信。1、堿基組成(G+C%)
(G+C)%值就是微生物(除少數(shù)以RNA為遺傳物質(zhì)得病毒)得一個(gè)基本遺傳特征,即使個(gè)別基因突變,堿基組成也不會(huì)發(fā)生明顯變化、她通常以DNA中鳥(niǎo)嘌呤(G)加胞嘧啶(C)得摩爾(mol)數(shù)得百分比來(lái)表示:(G+C)(mol)(G+C)%=——————————×100%(A+T)十(G+C)(mol)同種不同菌株G+Cmol%差異應(yīng)在4-5%以下。同屬不同種得G+Cmol%差異應(yīng)小于10-15%,通常小于10%原核微生物DNA(G+C)mol%為20—80。真核微生物DNA(G+C)mol%為30—60。
(G+C)%相同或相近得微生物并非必然親緣關(guān)系密切,也就就是說(shuō),并非一定就就是相同或相近得種屬。但
(G+C)%值有明顯差異得微生物肯定不會(huì)屬于同一個(gè)種。GC%測(cè)定主要用于對(duì)表型特征難區(qū)分得細(xì)菌作出鑒定,并可檢驗(yàn)表型特征分類得合理性,從分子水平上判斷物種得親緣關(guān)系。若二個(gè)在形態(tài)及生理生化特性方面及其相似得菌株,如果其G+C含量得差別大于5%,則肯定不就是同一個(gè)種,大于15%則肯定不就是同一個(gè)屬。在疑難菌株鑒定、新種命名、建立一個(gè)新得分類單位時(shí),G+C含量就是一項(xiàng)重要得,必不可少得鑒定指標(biāo)。其分類學(xué)意義主要就是作為建立新分類單元得一項(xiàng)基本特征和把那些G+C含量差別大得種類排除出某一分類單元。G+C%得測(cè)定方法:
A、化學(xué)測(cè)定法B、熔解溫度(Tm)法
當(dāng)DNA在一定溫度下開(kāi)始解鏈時(shí),在260nm處吸收光譜明顯增加,達(dá)到一定得溫度后DNA全部解鏈,吸收光譜不再增加。
將25℃時(shí)DNA吸收光密度定為A25,測(cè)定不同解鏈溫度得光密度定為At,以At/A25為縱坐標(biāo),加熱溫度為橫坐標(biāo),作圖,即可得出一條S形曲線,曲線得中點(diǎn)即為T(mén)m值。
先用酶水解DNA,用紙層析分離核苷酸堿基,然后洗脫和定量單個(gè)堿基。Marmur得經(jīng)驗(yàn)公式:Tm=kb+0、41(G+C)(G+C)mol%=Tm-kb/0、412、核酸雜交
生物得遺傳信息以堿基排列(遺傳密碼)形式,線性地排列在DNA分子中,不同生物DNA堿基排列順序得異同直接反映這些生物之間親緣關(guān)系得遠(yuǎn)近,堿基排列順序差異越小,她們之間得親緣關(guān)系就越近,反之亦然。DNA-DNA雜交DNA-rRNA雜交核酸探針1)DNA-DNA雜交
通過(guò)測(cè)定兩菌株DNA得堿基順序得相似性(同源性),來(lái)判斷兩菌株得親緣關(guān)系。原理:對(duì)雙鏈DNA分子加熱處理時(shí),互補(bǔ)結(jié)合得雙鏈可以離解成單鏈,即DNA變性;若將變性得DNA分子進(jìn)行冷卻處理,已離解得單鏈又可以重新結(jié)合成原來(lái)得雙鏈DNA分子,這叫DNA得復(fù)性。不僅同一菌株得DNA單鏈可以復(fù)性結(jié)合成雙鏈,來(lái)自不同菌株得DNA單鏈,只要兩者具有同源互補(bǔ)得堿基序列,她們也會(huì)在同源序列間互補(bǔ)結(jié)合形成雙鏈,這就就是DNA-DNA分子雜交。同源性>60%為同一個(gè)種同源性>70%為同一個(gè)亞種同源性20-60%為同屬不同種
2)DNA-rRNA雜交當(dāng)兩個(gè)菌株DNA得非配對(duì)堿基超過(guò)10%-20%時(shí),DNA-DNA雜交往往不能形成雙鏈,因而限制了DNA-DNA雜交。rRNA就是DNA轉(zhuǎn)錄得產(chǎn)物,在生物進(jìn)化過(guò)程中,堿基系列得變化比基因組要慢得多,保守得多,甚至保留了古老祖先得一些堿基序列,因此,rRNA具有很強(qiáng)得保守性,當(dāng)DNA-DNA雜交率很低時(shí),利用DNA-rRNA雜交仍可出現(xiàn)很高得雜交率,可以用來(lái)進(jìn)一步比較關(guān)系更遠(yuǎn)得菌株之間得關(guān)系,進(jìn)行屬和屬以上等級(jí)分類單元得分類。3)核酸探針核酸探針:指能識(shí)別特異核苷酸序列得、帶標(biāo)記得一段單鏈DNA或RNA分子。通過(guò)能否與探針雜交來(lái)鑒定菌種(三
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