保定市人民醫(yī)院「腎臟病理」樣本處理技術(shù)考核一、單選題（每題2分，共20題）1.在接收腎臟活檢樣本時(shí)，首選的保存方法是？A.置于生理鹽水中B.置于10%甲醛溶液中C.置于4%多聚甲醛溶液中D.直接置于冰袋上冷卻答案：C2.腎臟活檢樣本固定時(shí)間通常為？A.6小時(shí)B.12小時(shí)C.24小時(shí)D.48小時(shí)答案：C3.以下哪種方法不屬于腎臟病理樣本的脫水步驟？A.乙醇梯度脫水B.丙酮脫水C.透明劑處理D.乙醚脫水答案：D4.腎臟病理樣本包埋時(shí)，最常用的包埋劑是？A.石蠟B.樹(shù)脂C.膠水D.甘油答案：A5.腎臟病理切片厚度通常為？A.1μmB.4μmC.10μmD.20μm答案：B6.腎臟病理染色中最常用的染色方法是？A.蘇木精-伊紅染色（H&E）B.免疫熒光染色C.電鏡染色D.積分染色答案：A7.腎臟病理樣本制備過(guò)程中，切片干燥時(shí)間為？A.30分鐘B.1小時(shí)C.2小時(shí)D.4小時(shí)答案：B8.腎臟病理免疫熒光染色中，常用的封閉液是？A.胎牛血清B.磷酸緩沖液（PBS）C.甲醇D.乙醇答案：A9.腎臟病理電鏡樣本制備時(shí)，關(guān)鍵步驟是？A.固定B.脫水C.脫水與滲透平衡D.包埋答案：C10.腎臟病理樣本運(yùn)輸過(guò)程中，溫度應(yīng)控制在？A.4℃B.25℃C.37℃D.-20℃答案：A二、多選題（每題3分，共10題）1.腎臟病理樣本固定時(shí)，常用的固定液包括？A.10%中性甲醛B.4%多聚甲醛C.Bouin’s液D.戊二醛答案：A,B2.腎臟病理切片染色中，常用的特殊染色包括？A.Masson三色染色B.VanGieson染色C.Periodicacid-Schiff（PAS）染色D.Gram染色答案：A,B,C3.腎臟病理免疫熒光染色中，常用的二抗包括？A.羊抗鼠IgGB.兔抗人IgGC.鼠抗人IgGD.兔抗鼠IgG答案：A,B4.腎臟病理樣本制備過(guò)程中，脫水步驟的目的是？A.去除水分B.準(zhǔn)備包埋C.防止變形D.增強(qiáng)染色效果答案：A,B,C5.腎臟病理電鏡樣本制備中，常用的染色方法包括？A.醋酸鈾染色B.鋨酸染色C.甲基藍(lán)染色D.乙?；旧鸢福篈,B6.腎臟病理樣本運(yùn)輸時(shí)，應(yīng)注意？A.快速運(yùn)輸B.保持低溫C.避免擠壓D.使用專(zhuān)用容器答案：A,B,C,D7.腎臟病理免疫熒光染色中，常用的熒光標(biāo)記包括？A.異硫氰酸熒光素（FITC）B.羅丹明（TRITC）C.藻紅蛋白D.藍(lán)色熒光素答案：A,B8.腎臟病理樣本固定時(shí)，影響固定效果的因素包括？A.固定液濃度B.固定時(shí)間C.樣本大小D.溫度答案：A,B,C,D9.腎臟病理切片干燥時(shí)，常用的干燥方法包括？A.溫箱干燥B.自然干燥C.金屬干燥器干燥D.真空干燥答案：A,B,C10.腎臟病理電鏡樣本制備中，常用的固定液包括？A.2.5%戊二醛B.4%多聚甲醛C.鋨酸D.甲醇答案：A,B三、判斷題（每題2分，共10題）1.腎臟病理樣本固定時(shí)，固定液濃度越高越好。（×）2.腎臟病理切片染色時(shí)，H&E染色是最常用的染色方法。（√）3.腎臟病理免疫熒光染色時(shí)，一抗和二抗不能同時(shí)使用。（×）4.腎臟病理電鏡樣本制備時(shí)，樣品必須完全脫水。（×）5.腎臟病理樣本運(yùn)輸時(shí)，應(yīng)避免劇烈晃動(dòng)。（√）6.腎臟病理切片干燥時(shí)，干燥時(shí)間越長(zhǎng)越好。（×）7.腎臟病理免疫熒光染色時(shí)，封閉液必須使用胎牛血清。（×）8.腎臟病理電鏡樣本制備時(shí)，樣品必須進(jìn)行滲透平衡。（√）9.腎臟病理樣本固定時(shí)，固定時(shí)間越長(zhǎng)越好。（×）10.腎臟病理切片染色時(shí)，染色深度與染色時(shí)間成正比。（√）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共5題）1.簡(jiǎn)述腎臟病理樣本固定的目的和常用方法。答案：固定目的是使組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)保持原狀，常用方法包括10%中性甲醛和4%多聚甲醛。2.簡(jiǎn)述腎臟病理切片脫水的步驟和目的。答案：脫水步驟包括乙醇梯度脫水，目的去除水分，準(zhǔn)備包埋。3.簡(jiǎn)述腎臟病理免疫熒光染色的基本流程。答案：流程包括樣本制備、封閉、一抗孵育、二抗孵育、熒光顯微鏡觀(guān)察。4.簡(jiǎn)述腎臟病理電鏡樣本制備的關(guān)鍵步驟。答案：關(guān)鍵步驟包括固定、脫水、滲透平衡、包埋、切片、染色。5.簡(jiǎn)述腎臟病理樣本運(yùn)輸?shù)淖⒁馐马?xiàng)。答案：注意快速運(yùn)輸、保持低溫、避免擠壓、使用專(zhuān)用容器。五、論述題（每題10分，共2題）1.論述腎臟病理樣本固定對(duì)染色效果的影響。答案：固定不良會(huì)導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)變形，影響染色效果。固定液濃度、固定時(shí)間、溫度等因素都會(huì)影響固定效果。2.論述腎臟病理免疫熒光染色的原理和應(yīng)用。答案：原理是通過(guò)熒光標(biāo)記抗體檢測(cè)組織中的特定抗原。應(yīng)用包括診斷腎小球疾病、評(píng)估免疫復(fù)合物沉積等。答案與解析一、單選題1.C-4%多聚甲醛溶液是腎臟病理樣本固定的首選方法。2.C-固定時(shí)間通常為24小時(shí)，確保組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。3.D-乙醚脫水不屬于腎臟病理樣本的脫水方法。4.A-石蠟是腎臟病理樣本包埋最常用的包埋劑。5.B-腎臟病理切片厚度通常為4μm。6.A-蘇木精-伊紅染色（H&E）是腎臟病理最常用的染色方法。7.B-切片干燥時(shí)間通常為1小時(shí)。8.A-胎牛血清是腎臟病理免疫熒光染色常用的封閉液。9.C-電鏡樣本制備的關(guān)鍵步驟是脫水與滲透平衡。10.A-腎臟病理樣本運(yùn)輸溫度應(yīng)控制在4℃。二、多選題1.A,B-10%中性甲醛和4%多聚甲醛是常用的固定液。2.A,B,C-Masson三色染色、VanGieson染色、PAS染色是常用的特殊染色。3.A,B-羊抗鼠IgG和兔抗人IgG是常用的二抗。4.A,B,C-脫水步驟的目的是去除水分、準(zhǔn)備包埋、防止變形。5.A,B-醋酸鈾染色和鋨酸染色是電鏡常用的染色方法。6.A,B,C,D-運(yùn)輸時(shí)注意快速運(yùn)輸、保持低溫、避免擠壓、使用專(zhuān)用容器。7.A,B-異硫氰酸熒光素（FITC）和羅丹明（TRITC）是常用的熒光標(biāo)記。8.A,B,C,D-影響固定效果的因素包括固定液濃度、固定時(shí)間、樣本大小、溫度。9.A,B,C-切片干燥方法包括溫箱干燥、自然干燥、金屬干燥器干燥。10.A,B-電鏡樣本制備常用的固定液包括2.5%戊二醛和4%多聚甲醛。三、判斷題1.×-固定液濃度過(guò)高可能導(dǎo)致組織硬化。2.√-H&E染色是腎臟病理最常用的染色方法。3.×-一抗和二抗可以同時(shí)使用，提高染色效率。4.×-電鏡樣本制備時(shí)，樣品必須進(jìn)行滲透平衡，但不需要完全脫水。5.√-運(yùn)輸時(shí)應(yīng)避免劇烈晃動(dòng)，防止樣本損壞。6.×-切片干燥時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致切片收縮變形。7.×-封閉液可以選擇PBS或封閉液，不限于胎牛血清。8.√-電鏡樣本制備時(shí)，樣品必須進(jìn)行滲透平衡。9.×-固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致組織變脆。10.√-染色深度與染色時(shí)間成正比，但需控制時(shí)間。四、簡(jiǎn)答題1.固定目的是使組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)保持原狀，常用方法包括10%中性甲醛和4%多聚甲醛。2.脫水步驟包括乙醇梯度脫水，目的去除水分，準(zhǔn)備包埋。3.免疫熒光染色流程包括樣本制備、封閉、一抗孵育、二抗孵育、熒光顯微鏡觀(guān)察。4.電鏡樣本制備關(guān)鍵步驟包括固定、脫水、滲透平衡、包埋、切片、染色。5.樣本運(yùn)輸注意快速運(yùn)輸、保持低溫、避免擠壓、使用專(zhuān)用容器。五、論述題1.固定不良會(huì)導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)變形，影響染色效果