ICS65.150

CCSB50

4505

北海市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB4505/T0008—2023

島礁貝類生態(tài)增殖技術(shù)規(guī)范

Technicalspecificationforecologicalenhancementof

reef-inhabitingshellfish

2023-03-08發(fā)布2023-04-08實(shí)施

北海市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB4505/T0008—2023

目次

前言................................................................................III

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語(yǔ)和定義.........................................................................1

4海域選擇...........................................................................2

自然條件.......................................................................2

海水理化條件...................................................................2

5物種選擇...........................................................................2

6種苗培育及苗種要求.................................................................2

7苗種檢驗(yàn)檢疫.......................................................................2

檢驗(yàn)資質(zhì)機(jī)構(gòu)要求...............................................................2

抽檢原則與數(shù)量要求.............................................................3

檢驗(yàn)內(nèi)容與方法.................................................................3

8生態(tài)增殖...........................................................................3

苗種的適應(yīng)性馴化及優(yōu)選.........................................................3

苗種運(yùn)輸方法...................................................................3

底播增殖.......................................................................4

9增殖容量...........................................................................4

10貝類豐度監(jiān)測(cè)......................................................................4

潛水員和設(shè)備..................................................................4

潛水?dāng)嗝嬖O(shè)置..................................................................4

豐度監(jiān)測(cè)與計(jì)算................................................................4

11效果評(píng)估..........................................................................4

基于貝類豐度的增殖效果評(píng)估....................................................4

基于環(huán)境DNA的增殖效果評(píng)估....................................................5

基于增殖群體回捕占比率的增殖效果評(píng)估..........................................5

12管理..............................................................................6

附錄A（規(guī)范性）貝類生態(tài)增殖放流情況記錄表...........................................7

附錄B（資料性）基于環(huán)境DNA的貝類豐度計(jì)算...........................................8

B.1特異性qPCR擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)........................................................8

B.2PCR擴(kuò)增、質(zhì)粒構(gòu)建及質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)模板制備............................................8

B.3DNA標(biāo)準(zhǔn)定量曲線制作............................................................8

B.4環(huán)境DNA的qPCR擴(kuò)增及貝類豐度計(jì)算..............................................8

附錄C（資料性）基于微衛(wèi)星分子標(biāo)記的貝類增殖群體回捕占比率計(jì)算......................10

I

DB4505/T0008—2023

C.1樣本采集.......................................................................10

C.2樣本保存.......................................................................10

C.3樣本DNA提取...................................................................10

C.4多態(tài)性SSR位點(diǎn)的篩選...........................................................10

C.5PCR擴(kuò)增及基因分型.............................................................10

C.6貝類回捕抽樣樣本的遺傳區(qū)分及回捕占比率計(jì)算.....................................10

II

DB4505/T0008—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由北海市海洋局提出并歸口。

本文件起草單位：中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所、海南大學(xué)、廣西科學(xué)院、廣西精工海洋科技有限公

司、湛江市東海島東方實(shí)業(yè)有限公司。

本文件主要起草人：胡超群、黃勃、張躍環(huán)、劉文廣、陳償、羅鵬、李軍、馬海濤、秦艷平、陳袳、

張華、王小兵、姜發(fā)軍、柯志新、宋建強(qiáng)、陳文林。

III

DB4505/T0008—2023

島礁貝類生態(tài)增殖技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了島礁貝類生態(tài)增殖的海域選擇、物種選擇、種苗培育、苗種檢驗(yàn)檢疫及增殖容量要求，

描述了生態(tài)增殖效果監(jiān)測(cè)與評(píng)估的方法，提供了貝類生態(tài)增殖管理的指導(dǎo)意見(jiàn)。

本文件適用于北海市轄區(qū)內(nèi)島礁貝類的生態(tài)增殖。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB11607漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

GB/T12763.6海洋調(diào)查規(guī)范第6部分：海洋生物調(diào)查

SC/T2106牡蠣人工繁育技術(shù)規(guī)范

SC/T2108鮑人工繁育技術(shù)規(guī)范

SC/T9401.6水生生物增殖放流技術(shù)規(guī)程第6部分：放流物種質(zhì)量

SC/T9401.11水生生物增殖放流技術(shù)規(guī)程第11部分：投放

農(nóng)業(yè)部公告第1125號(hào)一、二、三類動(dòng)物疫病病種目錄（水生動(dòng)物部分）

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

原生種originalspecies

在無(wú)人為干預(yù)的野生環(huán)境下自然演化而來(lái)的物種。

生態(tài)增殖ecologicalenhancement

采用放流、移植或栽培、底播等人工方式，在生態(tài)系統(tǒng)承載力范圍內(nèi)，利用天然生產(chǎn)力增加生物種

群產(chǎn)量的過(guò)程。

適應(yīng)性馴化adaptivedomestication

增殖放流苗種適應(yīng)野外海域環(huán)境的人工處理過(guò)程。

底播增殖bottomsowingforstockenhancement

通過(guò)播撒底棲生物苗種到適合的海底生境中，利用天然生產(chǎn)力增加放流種群產(chǎn)量的過(guò)程。

環(huán)境DNAenvironmentalDNA

從環(huán)境樣本中提取的所有DNA的集合，包括環(huán)境微生物以及從生物體上脫落下來(lái)的活細(xì)胞DNA和因

生物死亡后細(xì)胞破碎而游離出的胞外DNA。

1

DB4505/T0008—2023

4海域選擇

自然條件

根據(jù)島礁環(huán)境特點(diǎn)，結(jié)合歷史資料、捕撈生產(chǎn)信息以及資源生態(tài)環(huán)境的本底調(diào)查資料，針對(duì)不同種

類的貝類，篩選確定貝類生態(tài)增殖的海域。增殖海域應(yīng)生態(tài)環(huán)境良好、餌料生物豐富、水流暢通。

海水理化條件

增殖海域的海水理化因子應(yīng)符合表1的要求。

表1增殖海域海水理化因子要求

海水理化因子參數(shù)

水溫18℃～35℃

鹽度25～35

pH8.0～8.5

底層溶解氧≥5.0mg/L

其它水質(zhì)因子符合GB11607的規(guī)定

5物種選擇

選擇目標(biāo)海區(qū)或周邊海區(qū)的礁棲貝類原生種，禁止采用外來(lái)種、雜交種、轉(zhuǎn)基因種以及其他不符合

生態(tài)要求的貝類物種進(jìn)行生態(tài)增殖。適宜生態(tài)增殖的礁棲貝類種類主要為大珠母貝（Pinctadamaxima）、

馬氏珠母貝（P.fucata）、珠母貝（P.margaritifera）、企鵝珍珠貝（Pteriapenguin）、雜色鮑（Haliotis

diversicolor）、塔形馬蹄螺（Trochuspyramis）和福建牡蠣（Crassostreaangulata）。

6種苗培育及苗種要求

參照SC/T2108規(guī)定的方法進(jìn)行鮑類種苗培育，參照SC/T2106規(guī)定的方法進(jìn)行牡蠣和螺類的種

苗培育。

用于生態(tài)增殖的貝苗應(yīng)活力強(qiáng)、外觀無(wú)損傷、無(wú)畸形、規(guī)格整齊。規(guī)格應(yīng)符合表2的要求。

表2生態(tài)增殖貝類苗種規(guī)格

體長(zhǎng)

規(guī)格等級(jí)

cm

小規(guī)格[0.5,1）

中規(guī)格[1,1.5）

大規(guī)格[1.5,2）

7苗種檢驗(yàn)檢疫

檢驗(yàn)資質(zhì)機(jī)構(gòu)要求

由具備相應(yīng)檢驗(yàn)資質(zhì)的單位進(jìn)行檢驗(yàn)，并出具正式報(bào)告。

2

DB4505/T0008—2023

抽檢原則與數(shù)量要求

隨機(jī)取樣，常規(guī)質(zhì)量檢驗(yàn)每次取樣不少于50個(gè)。

檢驗(yàn)內(nèi)容與方法

苗種質(zhì)量的檢驗(yàn)內(nèi)容、檢驗(yàn)方法與要求見(jiàn)表1。

表3苗種質(zhì)量的檢驗(yàn)內(nèi)容、檢驗(yàn)方法與要求

檢驗(yàn)內(nèi)容檢驗(yàn)方法與要求

感官質(zhì)量規(guī)格整齊、外觀完整

可數(shù)指標(biāo)規(guī)格合格率≥90％以上，死亡個(gè)體比例、傷殘率、畸形率之和＜5％

參照SC/T9401.6方法檢測(cè)，無(wú)病害,不得檢出農(nóng)業(yè)部公告第1125號(hào)規(guī)定的水

病害

生動(dòng)物疫病病種

8生態(tài)增殖

苗種的適應(yīng)性馴化及優(yōu)選

8.1.1苗種的適應(yīng)性馴化

貝類苗種的適應(yīng)性馴化方法如下：

a)在室內(nèi)人工養(yǎng)殖環(huán)境下，從稚貝開始，根據(jù)貝類的種類，投喂天然藻類餌料，對(duì)貝類進(jìn)行適應(yīng)

性馴化；

b)投放貝類小規(guī)格苗種10000個(gè)或中規(guī)格苗種4000個(gè)或大規(guī)格苗種2000個(gè)，每10m2投放與貝

類苗種等規(guī)格的蟹5只，在底播生態(tài)增殖前對(duì)貝類苗種進(jìn)行為期7d的躲避天敵能力的適應(yīng)性

馴化；

c)第8d不投喂飼料，只進(jìn)行大量換水，并進(jìn)行吸底，以去除貝苗的排泄物。

8.1.2馴化苗種優(yōu)選

在馴化的貝類苗種中挑選健壯、活力好的個(gè)體，進(jìn)行運(yùn)輸和底播生態(tài)增殖。

苗種運(yùn)輸方法

包括適合長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)乃\(yùn)法或適合短途運(yùn)輸?shù)某錃飧蛇\(yùn)法。

8.2.1水運(yùn)法

一般采用水車，在車內(nèi)用空調(diào)將溫度控制在20℃～30℃，車內(nèi)配備充氣裝置及降溫設(shè)備，運(yùn)輸時(shí)

間宜控制在48h以內(nèi)，運(yùn)輸時(shí)間大于48h時(shí)，需就地暫養(yǎng)后再進(jìn)行運(yùn)輸。

8.2.2干運(yùn)法

8.2.2.1充氣干運(yùn)法：適合短途運(yùn)輸。將貝類苗種放入雙層塑料袋內(nèi)，密度控制在小規(guī)格貝苗150個(gè)

/L或中規(guī)格貝苗100個(gè)/L或大規(guī)格貝苗50個(gè)/L，注入純氧后，將塑料袋放入泡沫箱內(nèi)，密封。將泡沫

箱放入轉(zhuǎn)運(yùn)框中，蓋上頂蓋以防貝類逃逸。運(yùn)輸時(shí)間宜控制在10h以內(nèi)。

8.2.2.2非充氣干運(yùn)法：適合部分牡蠣苗種的短途運(yùn)輸。此方法一般用濕毛巾覆蓋在苗種上，保持苗

種及附著體濕潤(rùn)即可。

3

DB4505/T0008—2023

底播增殖

8.3.1底播時(shí)間

貝類苗種宜在每年的3～12月進(jìn)行底播。

8.3.2底播天氣

選擇晴朗、多云或陰天進(jìn)行貝類底播生態(tài)增殖，海面最大風(fēng)力≤5級(jí)，氣溫≤35℃。

8.3.3苗種運(yùn)輸

采用本文件8.2中的方法將貝類苗種運(yùn)輸至底播預(yù)定海域。

8.3.4苗種底播

船速：2m/s～4m/s，投放密度：0.1個(gè)/m2～0.2個(gè)/m2，苗種底播按照SC/T9401.11中的方法進(jìn)行，

記錄投放中心位點(diǎn)的經(jīng)緯度、投放數(shù)量和覆蓋范圍，填寫貝類增殖放流情況記錄表（見(jiàn)附錄A）。

9增殖容量

不超過(guò)增殖海域歷史上礁棲貝類最大捕撈產(chǎn)量的2倍。

10貝類豐度監(jiān)測(cè)

潛水員和設(shè)備

按GB/T12763.6的規(guī)定進(jìn)行潛水員配備和設(shè)備準(zhǔn)備。

潛水?dāng)嗝嬖O(shè)置

在生態(tài)增殖海域每平方公里設(shè)置1個(gè)監(jiān)測(cè)斷面，斷面應(yīng)均勻分布于增殖海域，每個(gè)斷面寬1.2m，直

線距離50m，斷面設(shè)置方法為：在監(jiān)測(cè)海域內(nèi)，通過(guò)潛水設(shè)定起點(diǎn)，沿礁石走向拉皮尺至終點(diǎn)，起點(diǎn)到

終點(diǎn)總距離為50m。

豐度監(jiān)測(cè)與計(jì)算

潛水員沿皮尺方向進(jìn)行斷面內(nèi)貝類調(diào)查，觀察到的貝類個(gè)體均計(jì)入貝類數(shù)量，并根據(jù)貝類形態(tài)辨別

貝類種類，進(jìn)行斷面內(nèi)貝類數(shù)量統(tǒng)計(jì)。調(diào)查海域的貝類豐度計(jì)算見(jiàn)公式（1）：

=∑