PCR崗前培訓(xùn)結(jié)業(yè)考試題及答案

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)的基本原理是（C）。A.基因重組B.基因測序C.基因擴(kuò)增D.基因編輯2.在PCR反應(yīng)中，通常需要加入的酶是（B）。A.DNA連接酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.蛋白酶3.PCR反應(yīng)中常用的引物長度一般為（A）。A.18-22個(gè)堿基對B.25-30個(gè)堿基對C.12-16個(gè)堿基對D.20-24個(gè)堿基對4.PCR反應(yīng)的退火溫度通常是根據(jù)（C）來確定的。A.引物的長度B.DNA的濃度C.引物的Tm值D.DNA的G-C含量5.PCR反應(yīng)中，dNTPs指的是（A）。A.deoxynucleotidetriphosphatesB.deoxyribonucleotidetriphosphatesC.ribonucleotidetriphosphatesD.deoxyribonucleotidediphosphates6.在PCR反應(yīng)中，哪個(gè)步驟是使引物與模板DNA結(jié)合的過程（B）。A.變性B.退火C.延伸D.聚合7.PCR反應(yīng)中，變性溫度通常設(shè)置在（C）。A.20-30°CB.40-50°CC.80-95°CD.60-70°C8.PCR反應(yīng)中，延伸溫度通常設(shè)置在（D）。A.20-30°CB.40-50°CC.60-70°CD.72°C9.PCR反應(yīng)中，哪個(gè)步驟是使DNA聚合酶合成新的DNA鏈（C）。A.變性B.退火C.延伸D.聚合10.PCR反應(yīng)中，哪個(gè)步驟是使模板DNA變性成單鏈（A）。A.變性B.退火C.延伸D.聚合答案：1.C2.B3.A4.C5.A6.B7.C8.D9.C10.A二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)中需要的試劑包括（ABCD）。A.DNA模板B.引物C.DNA聚合酶D.dNTPs2.PCR反應(yīng)的三個(gè)主要步驟包括（ABC）。A.變性B.退火C.延伸D.聚合3.PCR反應(yīng)中，影響反應(yīng)效率的因素包括（ABCD）。A.引物的設(shè)計(jì)B.DNA模板的質(zhì)量C.DNA聚合酶的活性D.反應(yīng)條件的優(yōu)化4.PCR反應(yīng)中，引物的作用是（AB）。A.特異性地結(jié)合到模板DNA上B.為DNA聚合酶提供起始位點(diǎn)C.參與DNA的復(fù)制D.變性DNA5.PCR反應(yīng)中，退火溫度的設(shè)置依據(jù)包括（AB）。A.引物的Tm值B.DNA模板的復(fù)雜性C.DNA聚合酶的活性D.反應(yīng)體系的pH值6.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間的選擇依據(jù)包括（AB）。A.目標(biāo)DNA片段的大小B.DNA聚合酶的延伸速率C.引物的Tm值D.DNA模板的濃度7.PCR反應(yīng)中，可以影響PCR反應(yīng)效率的因素包括（ABCD）。A.DNA模板的純度B.引物的特異性C.DNA聚合酶的濃度D.反應(yīng)體系的pH值8.PCR反應(yīng)中，可以用于檢測PCR產(chǎn)品的方法包括（ABCD）。A.凝膠電泳B.熒光檢測C.數(shù)字PCRD.基因芯片9.PCR反應(yīng)中，引物設(shè)計(jì)的原則包括（ABCD）。A.引物長度適中B.引物Tm值接近C.引物之間無互補(bǔ)D.引物不形成二聚體10.PCR反應(yīng)中，可以用于提高PCR反應(yīng)效率的方法包括（ABCD）。A.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)B.提高DNA模板的濃度C.增加DNA聚合酶的濃度D.優(yōu)化反應(yīng)條件答案：1.ABCD2.ABC3.ABCD4.AB5.AB6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)可以在室溫下進(jìn)行。（×）2.PCR反應(yīng)中，引物的濃度越高越好。（×）3.PCR反應(yīng)中，DNA聚合酶的濃度越高越好。（×）4.PCR反應(yīng)中，dNTPs的濃度越高越好。（×）5.PCR反應(yīng)中，退火溫度越高越好。（×）6.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間越長越好。（×）7.PCR反應(yīng)中，DNA模板的濃度越高越好。（×）8.PCR反應(yīng)中，PCR產(chǎn)品可以通過凝膠電泳檢測。（√）9.PCR反應(yīng)中，引物設(shè)計(jì)需要考慮引物的特異性。（√）10.PCR反應(yīng)中，PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化可以提高反應(yīng)效率。（√）答案：1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.×8.√9.√10.√四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR反應(yīng)的基本原理。PCR反應(yīng)的基本原理是利用DNA聚合酶在引物的作用下，以DNA模板為模板，合成新的DNA鏈。PCR反應(yīng)包括三個(gè)主要步驟：變性、退火和延伸。變性步驟使模板DNA變性成單鏈，退火步驟使引物與模板DNA結(jié)合，延伸步驟使DNA聚合酶合成新的DNA鏈。2.簡述PCR反應(yīng)中引物設(shè)計(jì)的原則。PCR反應(yīng)中引物設(shè)計(jì)的原則包括：引物長度適中，一般為18-22個(gè)堿基對；引物Tm值接近，通常在55-65°C之間；引物之間無互補(bǔ)，避免形成二聚體；引物特異性高，只與目標(biāo)DNA序列結(jié)合。3.簡述PCR反應(yīng)中影響反應(yīng)效率的因素。PCR反應(yīng)中影響反應(yīng)效率的因素包括：引物的設(shè)計(jì)，引物的特異性和Tm值；DNA模板的質(zhì)量和濃度；DNA聚合酶的活性和濃度；反應(yīng)條件的優(yōu)化，包括退火溫度、延伸時(shí)間和反應(yīng)體積等。4.簡述PCR反應(yīng)中PCR產(chǎn)品的檢測方法。PCR反應(yīng)中PCR產(chǎn)品的檢測方法包括：凝膠電泳，通過凝膠電泳可以將PCR產(chǎn)品進(jìn)行分離和檢測；熒光檢測，通過熒光標(biāo)記的探針或引物檢測PCR產(chǎn)品；數(shù)字PCR，通過將PCR反應(yīng)體系進(jìn)行分區(qū)，可以實(shí)現(xiàn)對PCR產(chǎn)品的絕對定量；基因芯片，通過基因芯片可以同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)基因的PCR產(chǎn)品。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論P(yáng)CR反應(yīng)中優(yōu)化引物設(shè)計(jì)的重要性。PCR反應(yīng)中優(yōu)化引物設(shè)計(jì)的重要性在于：引物設(shè)計(jì)直接影響PCR反應(yīng)的特異性和效率。如果引物設(shè)計(jì)不合理，可能會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增或擴(kuò)增效率低下。因此，優(yōu)化引物設(shè)計(jì)可以提高PCR反應(yīng)的特異性和效率，減少非特異性擴(kuò)增的干擾，從而獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2.討論P(yáng)CR反應(yīng)中優(yōu)化反應(yīng)條件的重要性。PCR反應(yīng)中優(yōu)化反應(yīng)條件的重要性在于：反應(yīng)條件的優(yōu)化可以提高PCR反應(yīng)的特異性和效率。如果反應(yīng)條件不合適，可能會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增或擴(kuò)增效率低下。因此，優(yōu)化反應(yīng)條件可以提高PCR反應(yīng)的特異性和效率，減少非特異性擴(kuò)增的干擾，從而獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3.討論P(yáng)CR反應(yīng)中DNA模板質(zhì)量的影響。PCR反應(yīng)中DNA模板質(zhì)量的影響在于：DNA模板的質(zhì)量直接影響PCR反應(yīng)的特異性和效率。如果DNA模板質(zhì)量差，可能會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增或擴(kuò)增效率低下。因此，提高DNA模板的質(zhì)量可以提高PCR反應(yīng)的特異性和效率，減少非特異性擴(kuò)增的干擾，從而獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4.討論P(yáng)CR反應(yīng)中PCR產(chǎn)品檢測方法的選擇依據(jù)。PCR反應(yīng)中PCR產(chǎn)品檢