ICS13.020

CCSc51

44

廣東省地方標準

DB44/TXXXX—XXXX

陸地水域浮游植物監(jiān)測技術(shù)指南

Technicalguidanceofphytoplanktonmonitoringininlandwaters

（征求意見稿）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施

廣東省市場監(jiān)督管理局??發(fā)布

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陸地水域浮游植物監(jiān)測技術(shù)指南

1范圍

本文件提供了浮游植物監(jiān)測工作中采樣、樣品固定及保存、定性分析、豐度分析、生物量計算等步

驟的指導性建議，其中浮游植物豐度分析提供了0.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法和Uterm?hl沉降器-倒置顯

微鏡計數(shù)法兩種方法。

本文件適用于水庫、湖泊、江河等陸地水域的浮游植物（粒徑＞2μm）監(jiān)測。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

SL733-2016內(nèi)陸水域浮游植物監(jiān)測技術(shù)規(guī)程

HJ1216-2021水質(zhì)浮游植物的測定0.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

浮游植物phytoplankton

水體中全部或大部分生活史營浮游生活的藻類，包括原核的藍藻和各類真核藻類。

浮游植物豐度phytoplanktonabundance

單位水體中活體浮游植物的細胞數(shù)量，通常以每升水含有的細胞數(shù)表示，單位為cells/L。

浮游植物生物量phytoplanktonbiomass

單位水體中活體浮游植物的重量，通常以每升水含有的浮游植物濕重表示，單位為mg/L。

浮游植物優(yōu)勢種dominantspeciesofphytoplankton

浮游植物群落中占有優(yōu)勢地位、對群落特征起決定性作用的種類。本文件推薦種群豐度或生物量超

過群落總豐度或總生物量15％的種類均為優(yōu)勢種。

藻類水華algalbloom

通常指水體中浮游植物過度繁殖的一種生態(tài)現(xiàn)象，表現(xiàn)為大量浮游植物懸浮在水中或聚集在水體表

面導致水體顏色發(fā)生明顯變化。具體評價工作中，是指水體中浮游植物豐度或生物量等指標達到了規(guī)定

的限值。

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敞水區(qū)thepelagiczone

指湖庫、河流遠離岸邊的寬闊水域，通常情況下浮游植物為生存在該水域的唯一自養(yǎng)生物。

顯微鏡視野microscopefieldofview

指通過顯微鏡的目鏡所觀察到的圓形區(qū)域，其直徑與目鏡視場直徑成正比、與物鏡放大倍數(shù)成反比。

4試劑及用途

魯哥氏碘液

配置方法：先后稱取60g碘化鉀和40g碘溶于l00mL新制備的去離子水或蒸熘水中，充分攪拌至完

全溶解，加新制備的去離子水或蒸熘水定容至l000mL，儲存于棕色磨口玻璃瓶，室溫避光保存。

用途：用于固定浮游植物定量或定性樣品。

甲醛溶液

規(guī)格：ω（HCHO）=37%～40%。

用途：用于固定浮游植物定性樣品及需長期保存的浮游植物定量樣品。

甘油（丙三醇）

規(guī)格：ω（HOCH2CHOHCH2OH）=99.5%。

用途：用于密封0.1mL浮游植物計數(shù)框。

5儀器和設(shè)備

野外采樣與現(xiàn)場監(jiān)測儀器設(shè)備

5.1.1采水器：有機玻璃或不銹鋼材質(zhì)，圓柱形，配置能滿足采樣深度要求的繩索，容量2L～5L。

5.1.2浮游生物網(wǎng)：網(wǎng)孔直徑約為38μm（400目）。

5.1.3定量樣品瓶：透明廣口聚乙烯瓶，規(guī)格為1000mL或2500mL等。

5.1.4定性樣品瓶：透明廣口聚乙烯瓶，規(guī)格為50mL～100mL。

5.1.5便攜式多參數(shù)測定儀。

5.1.6溫度計。

5.1.7數(shù)碼相機。

5.1.8救生衣。

5.1.9GPS定位器。

5.1.10其他實驗室常用儀器設(shè)備

樣品濃縮與稀釋儀器設(shè)備

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5.2.1浮游植物濃縮裝置：帶有體積刻度的圓柱形的沉淀器或分液漏斗或量筒等，規(guī)格為l000mL～

2000mL。

5.2.2虹吸管：硅膠材質(zhì)，管內(nèi)直徑約為2mm～3mm。

5.2.3篩絹：2500～3000目篩絹，網(wǎng)孔直徑約為4μm～5μm，用于封蓋虹吸管進水端。

5.2.4其他實驗室常用儀器設(shè)備

樣品分析儀器設(shè)備

5.3.10.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法所需儀器設(shè)備

5.3.1.1正置光學生物顯微鏡：物鏡5×（或4×）、10×、20×、40×，目鏡10×（或15×）。

5.3.1.20.1mL浮游植物計數(shù)框：樣品池面積20mm×20mm、容量0.1mL，樣品池內(nèi)均勻劃分橫豎

各10行，共計100方格。

5.3.1.3目鏡測微尺：用于測量顯微鏡不同放大倍率下的視野直徑或浮游植物尺寸。

5.3.1.4成像裝置：可實時瀏覽或拍攝顯微鏡視野內(nèi)畫面，同時具有測量尺寸等功能。

5.3.1.5微量移液器：最大量程不低于100μL。

5.3.1.6寬口移液器吸頭：最大量程≥0.1mL，推薦進水口內(nèi)直徑為1.9mm，寬口可有效防止阻擋大

尺寸浮游植物，確保移液取樣具有代表性。

5.3.1.7計數(shù)器。

5.3.1.8蓋玻片：面積22mm×22mm，厚約0.17mm。

5.3.1.9其他實驗室常用儀器設(shè)備

5.3.2Uterm?hl沉降器-倒置顯微鏡計數(shù)法所需儀器設(shè)備

5.3.2.1倒置光學生物顯微鏡：物鏡5×（或4×）、10×、20×、40×，目鏡10×（或15×）。

5.3.2.2Uterm?hl沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)：包括組合式沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)（沉淀杯規(guī)格為10mL、25mL、

50mL、100mL）和一體式沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)（沉淀杯規(guī)格為5mL、10mL、25mL）兩種；相較組合

式沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)，應(yīng)用一體式沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)可省去移除上清液步驟，制片操作更為簡單，且

最大程度上避免了制片過程的浮游植物損失。

5.3.2.3沉降杯蓋玻片：直徑23mm、厚度2mm。

5.3.2.4計數(shù)框蓋玻片（適用于組合式沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)）：面積30mm×30mm，厚0.8mm。

5.3.2.5目鏡測微尺：用于測量顯微鏡不同放大倍數(shù)下的視野直徑或浮游植物尺寸。

5.3.2.6計數(shù)器。

5.3.2.7成像裝置：可實時瀏覽或拍攝顯微鏡視野內(nèi)畫面，具有測量尺寸等功能。

5.3.2.8其他實驗室常用儀器設(shè)備

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6點位布設(shè)與監(jiān)測頻次

點位布設(shè)

6.1.1點位布設(shè)原則

6.1.1.1應(yīng)充分依據(jù)調(diào)查研究目的和水域的類型、形態(tài)特點。

6.1.1.2應(yīng)布設(shè)在遠離水域岸邊的敞水區(qū)。

6.1.1.3宜覆蓋水域典型生境，能夠反映監(jiān)測水域整體狀況。

6.1.1.4宜爭取以最少的點位獲取能夠代表水域整體狀況的監(jiān)測信息。

6.1.1.5宜盡量沿用歷史已有監(jiān)測點位，維持監(jiān)測數(shù)據(jù)的連續(xù)性。

6.1.1.6宜與已有水文、水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測點位相結(jié)合。

6.1.1.7藻類水華應(yīng)急監(jiān)測時，監(jiān)測點位布設(shè)應(yīng)能反映水華發(fā)生與擴散范圍及其對供水安全影響情況。

6.1.1.8宜借助GPS定位器確定與記錄監(jiān)測點位具體位置。

6.1.1.9點位布設(shè)應(yīng)保障野外采樣與監(jiān)測人員安全。

6.1.2湖庫常規(guī)監(jiān)測點位布設(shè)方法

6.1.2.1根據(jù)湖庫的水面面積大小和具體形態(tài)，將湖庫劃分為若干個最具代表性區(qū)域，在每個代表性

區(qū)域的敞水區(qū)布設(shè)監(jiān)測點位，如大型水庫一般可將主要進水口與出水口附近、庫心、大的庫灣等劃分為

代表性區(qū)域。

6.1.2.2河道型水庫應(yīng)分別在上游、中游、下游中心河段的敞水區(qū)設(shè)置監(jiān)測點位。

6.1.2.3湖庫浮游植物豐度異常區(qū)域可適當增加監(jiān)測點位，或根據(jù)調(diào)查研究需要增加監(jiān)測點位。

6.1.3河流常規(guī)監(jiān)測點位布設(shè)方法

6.1.3.1一般應(yīng)在河流的上中下游、城市河段、納污水域、水源保護區(qū)等代表性水域的敞水區(qū)，分別

布設(shè)監(jiān)測點位。

6.1.3.2對于建有水利樞紐的河流，應(yīng)分別在各樞紐上游河段敞水區(qū)設(shè)置合理數(shù)量的監(jiān)測點位。

6.1.3.3河流浮游植物豐度異常區(qū)域可適當增加監(jiān)測點位，或根據(jù)調(diào)查研究需要增加監(jiān)測點位。

6.1.4藻類水華應(yīng)急監(jiān)測點位布設(shè)方法

6.1.4.1應(yīng)在湖庫各代表性區(qū)域的敞水區(qū)設(shè)置監(jiān)測點位，以確定藻類水華發(fā)生范圍。

6.1.4.2應(yīng)在湖庫取水口附近設(shè)置監(jiān)測點位，以評估藻類水華對供水安全影響情況。

6.1.4.3宜在湖庫閘壩下游水域設(shè)置監(jiān)測點位，以評估庫區(qū)藻類水華對下游的輸送與影響情況。

6.1.4.4宜根據(jù)江河長度和水利樞紐、主要支流匯入口、取水口的分布情況，將江河劃分為若干代表

性河段，并在各代表性河段的敞水區(qū)設(shè)置監(jiān)測點位，以確定藻類水華分布、擴散及其對供水安全影響的

情況。

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6.1.5采樣深度

6.1.5.1采樣深度應(yīng)滿足調(diào)查研究目的要求，可根據(jù)監(jiān)測目的設(shè)置分層采樣。

6.1.5.2浮游植物常規(guī)監(jiān)測，一般在水面下0.5m處布設(shè)一個采樣點位。

6.1.5.3藻類水華應(yīng)急監(jiān)測時，應(yīng)格外關(guān)注取水口附近水域的浮游植物與藻毒素垂直分布情況，除了

采集水面下0.5m深處樣品外，宜根據(jù)水深情況分別采集水面下2或5的倍數(shù)深度(m)樣品，通過監(jiān)測

水體中水華優(yōu)勢種及藻毒素（如柱孢藻毒素、微囊藻毒素）垂直分布情況，結(jié)合取水口深度評估水華和

相關(guān)藻毒素對供水安全的影響。

監(jiān)測頻次和時間

6.2.1應(yīng)根據(jù)調(diào)查研究目的確定浮游植物監(jiān)測頻率及采樣時間。

6.2.2宜根據(jù)所監(jiān)測水體的功能、營養(yǎng)水平和監(jiān)測能力等實際情況，確定浮游植物常規(guī)監(jiān)測頻率；一

般可按月份、季度、水期（豐水期、平水期、枯水期）進行，采樣時間宜在一天的9:00-16:00。

6.2.3藻類水華應(yīng)急監(jiān)測期間，應(yīng)根據(jù)水華嚴重程度、藻毒素超標狀況、對供水安全影響等實際情況

增加監(jiān)測頻次，一般最低應(yīng)為1次/周。

6.2.4浮游植物監(jiān)測采樣應(yīng)力求與水質(zhì)監(jiān)測采樣同步。

7野外監(jiān)測與采樣

現(xiàn)場記錄與監(jiān)測

7.1.1浮游植物采樣前，應(yīng)先對與采樣和浮游植物監(jiān)測相關(guān)的環(huán)境因子進行記錄、拍照和觀測。

7.1.2在采樣表上記錄采樣日期、天氣狀況、水體名稱、點位名稱、點位坐標、周圍環(huán)境、采樣方法、

采樣工具、水體顏色等信息。

7.1.3宜現(xiàn)場應(yīng)用便攜式多參數(shù)測定儀測定氣溫、水溫、透明度、pH、溶解氧、水深等理化指標。

7.1.4若具備相關(guān)條件，應(yīng)記錄或測定水體流速、流量、水位等水文參數(shù)。

7.1.5宜同步采集0.5m深水樣以備實驗室測定總磷、總氮等與浮游植物生長密切相關(guān)的水質(zhì)指標。

定量樣品采集

7.2.1用采水器在目標水層采集不少于2000mL水樣，取1000mL至定量樣品瓶。

7.2.2若水體透明度大于5m，應(yīng)酌情將定量樣品取水量增加至2000mL～3000mL。

7.2.3定量樣品瓶不應(yīng)裝滿，以便在實驗室內(nèi)搖勻。

7.2.4定量樣品瓶需貼好標簽，注明樣品類別、體積、采樣日期、水體名稱、點位名稱和采樣人信息。

定性樣品采集

7.3.1浮游植物定性樣品的采集應(yīng)在定量樣品采集結(jié)束之后進行。

7.3.2推薦應(yīng)用網(wǎng)孔直徑約為38μm的浮游生物網(wǎng)采集浮游植物定性樣品。

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7.3.3采集前打開浮游生物網(wǎng)末端的活塞，清洗浮游生物網(wǎng)，清洗結(jié)束后關(guān)閉活塞。

7.3.4采樣時，應(yīng)在水面下的水平和垂直方向分別進行拖網(wǎng)。

7.3.5將浮游生物網(wǎng)末端活塞沉入水面下約1m深處，通過拽拉繩索而拖動浮游生物網(wǎng)在3m～5m

水域范圍內(nèi)來回移動，拖動過程中保持整個浮游生物網(wǎng)呈伸直狀態(tài)，且保持水從浮游生物網(wǎng)網(wǎng)口進入而

從網(wǎng)孔濾出；拖動5～8個來回后將浮游生物網(wǎng)緩慢提起，待網(wǎng)內(nèi)的水從網(wǎng)孔濾出后，打開浮游生物網(wǎng)

旋塞將濃縮于網(wǎng)末端的水樣注入定性樣品瓶中，收集定性樣品約30～50mL。

7.3.6再次將浮游生物網(wǎng)沉入透光層底部（以3倍透明度計），上下來回拖動5～8次后將浮游生物網(wǎng)

提起，待網(wǎng)內(nèi)水從網(wǎng)孔濾出后，打開旋塞收集濃縮于浮游生物網(wǎng)末端水樣30～50mL，與水平拖網(wǎng)所獲

水樣混合。

7.3.7定性樣品瓶需貼好標簽，注明樣品類別、采樣日期、水體名稱、點位名稱和采樣人信息。

7.3.8定性樣品采集完成后應(yīng)及時清洗浮游生物網(wǎng)。

8樣品固定和保存

樣品固定

8.1.1除了鏡檢活體樣品不加固定劑外，定性與定量樣品采集后應(yīng)立即加入固定劑；固定劑加入后，

應(yīng)將樣品充分搖勻。

8.1.2使用甲醛溶液時需采取安全保護措施，應(yīng)保持操作環(huán)境通風。

8.1.3使用甲醛溶液固定定性樣品時，加入甲醛溶液的體積宜為水樣體積的1%。

8.1.4應(yīng)使用魯哥氏碘液固定定量樣品，以確保比重小于1的浮游植物種類能夠充分沉降。

8.1.5使用魯哥氏碘液固定定性或定量樣品，加入魯哥氏碘液的體積宜為水樣體積的1%～1.5%。

8.1.6當發(fā)生藻類水華時，加入定量樣品的魯哥氏碘液體積應(yīng)增加至水樣體積的2%，以確保浮游植物

細胞全部被固定并沉降。

樣品保存

8.2.1定性樣品應(yīng)在4℃～10℃環(huán)境條件下避光保存，保存時間不宜超過1周。需儲存一周以上時，

應(yīng)每100mL水樣補充加入2mL～3mL甲醛溶液。

8.2.2定量樣品室溫避光條件下可保存3周，1℃～5℃冷藏避光條件下可保存12個月，定量樣品保

存過程中，應(yīng)每周檢查魯哥氏碘液的被氧化程度，如果樣品顏色變淺，則應(yīng)向樣品中補加適量的魯哥氏

碘液，直至樣品顏色恢復為黃褐色。定量樣品需儲存12個月以上時，應(yīng)每100mL定量樣品補充加入2

mL～3mL甲醛溶液。

9樣品分析

定性樣品分析

9.1.1將定性樣品上下倒轉(zhuǎn)以充分搖勻，用滴管移取2～3滴至載玻片制成標本片，在顯微鏡下觀察浮

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游植物進行種類鑒定?？赏瓿蓚€體粒徑大于浮游生物網(wǎng)孔徑（38μm）的群體、絲體和單細胞種類的鑒

定。

9.1.2將已完成計數(shù)的定量樣品上下倒轉(zhuǎn)以充分搖勻，用滴管移取2～3滴至載玻片制成標本片，在顯

微鏡下鑒定定性樣品中未出現(xiàn)的個體粒徑低于38μm的浮游植物種類。

9.1.3每個定性樣品觀察應(yīng)不少于3個標本片。

9.1.4重要的或優(yōu)勢浮游植物種類應(yīng)拍照記錄。

9.1.5將定性樣品和定量樣品鑒定到的種類匯總填寫到浮游植物定性檢測結(jié)果表（可參照SL733附錄

B)。

定量樣品分析

9.2.1定量樣品濃縮與稀釋

9.2.1.10.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法

9.2.1.1.1先根據(jù)經(jīng)驗或水體營養(yǎng)水平初步判斷0.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法所用定量樣品的浮游植

物豐度數(shù)量級范圍，若無法判斷，宜先直接取混勻樣品按照9.3提供的方法進行制片和預檢，隨機選取

計數(shù)框中若干小格或視野進行計數(shù)，初步估算樣品浮游植物豐度數(shù)量級范圍，根據(jù)判斷或預檢估算結(jié)果

確定定量樣品需濃縮或稀釋的倍數(shù)。

9.2.1.1.2將需濃縮的定量樣品混勻后倒入濃縮裝置中，用封口膜將濃縮裝置頂端密封以防碘揮發(fā)，

在恒溫、避光環(huán)境靜置沉淀48h以上，或按0.25cm/h的沉淀速度計算所需沉淀時間。為減少浮游植

物吸附在濃縮裝置內(nèi)壁，靜置初期應(yīng)適時輕敲濃縮裝置器外壁。

9.2.1.1.3沉淀完成后，用虹吸管（插入水面端用2500～3000目篩絹封蓋）小心緩慢抽掉上清液。虹

吸過程中，隨液面下降將虹吸管插入水面一端緩慢向下移動，使虹吸管插入水面端保持在水面下1cm

左右，且距離樣品底部沉淀物不小于3cm。虹吸流速不宜超過100mL/min，可通過調(diào)整虹吸管兩端高

度差控制流速。虹吸過程應(yīng)避免擾動樣品下層的沉淀物，若發(fā)生擾動應(yīng)重新靜置沉淀。

9.2.1.1.4虹吸后余下的水樣體積，一般控制在20mL～50mL之間。將余下水樣轉(zhuǎn)入量筒，用少許上

清液沖洗濃縮裝置內(nèi)壁，沖洗液同樣加入量筒，最后將量筒中水樣定容至目標體積。

9.2.1.1.5將定容后的量筒中的樣品轉(zhuǎn)移到樣品瓶，貼好標簽，注明采樣日期、地點、樣品類別、水

體名稱、點位名稱、濃縮前后體積及采樣人等信息。

9.2.1.1.6藻類水華應(yīng)急監(jiān)測過程中，可不經(jīng)濃縮直接對定量樣品中水華優(yōu)勢種類進行鏡檢計數(shù)，或

將定量樣品稀釋至適宜倍數(shù)后鏡檢計數(shù)。

9.2.1.2Uterm?hl沉降器-倒置顯微鏡計數(shù)法

9.2.1.2.1用于Uterm?hl沉降器-倒置顯微鏡計數(shù)法的定量樣品，無需進行濃縮處理。

9.2.1.2.2樣品中浮游植物豐度過高時，宜對定量樣品進行稀釋處理，通過9.2.1.1.1提供的方法進

行判斷或預檢估算，而后將樣品中浮游植物豐度稀釋至可直接加入組合式Uterm?hl沉降器的計數(shù)框進

行計數(shù)的水平。

9.2.1.2.3藻類水華應(yīng)急監(jiān)測過程中，可直接將定量樣品加入組合式Uterm?hl沉降器的計數(shù)框中對水

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華優(yōu)勢種進行鏡檢計數(shù)，或?qū)⒍繕悠废♂屩吝m宜倍數(shù)后加入組合式Uterm?hl沉降器的計數(shù)框?qū)λA

優(yōu)勢種進行鏡檢計數(shù)。

9.2.2豐度分析

9.2.2.1制片

9.2.2.1.10.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法

a）將待鏡檢的定量樣品上下倒轉(zhuǎn)以充分搖勻后，立即用移液器（配合寬口吸頭）移取0.1mL樣品

注入0.1mL計數(shù)框內(nèi)，用蓋玻片將計數(shù)框完全封蓋。封蓋過程應(yīng)避免計數(shù)框內(nèi)產(chǎn)生氣泡，若產(chǎn)

生氣泡應(yīng)重新取樣制片。

b）當計數(shù)框樣品池內(nèi)浮游植物出現(xiàn)分層時，宜用少許甘油均勻涂抹蓋玻片四周（應(yīng)避免甘油滲入

計數(shù)框）以防止計數(shù)框樣品池內(nèi)水分蒸發(fā)，然后將計數(shù)框靜置15～30min，使懸浮在樣品池中

的浮游植物沉降至樣品池底部。

9.2.2.2Uterm?hl沉降器-倒置顯微鏡計數(shù)法

a）宜根據(jù)水體營養(yǎng)狀態(tài)選擇用于制片的沉降杯規(guī)格，中～富營養(yǎng)狀態(tài)水體宜選用5mL～10mL沉

降杯,貧營養(yǎng)狀態(tài)水體宜選用10mL～50mL沉降杯。

b）將定量樣品上下倒轉(zhuǎn)以充分搖勻后，立即緩慢注入Uterm?hl沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)的沉降杯，注

滿后用沉降杯蓋玻片密封，并避免留有氣泡。

c）將注入樣品后的Uterm?hl沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)置于恒溫、避光環(huán)境沉淀8h以上，或按0.25cm/h

的沉淀速度計算所需沉淀時間。

d）待浮游植物細胞全部沉淀至計數(shù)框底部后，若采用組合式沉降杯-計數(shù)框系統(tǒng)，用計數(shù)框蓋玻

片緩慢平移推動沉降杯以移除上清液，直至計數(shù)框完全被蓋玻片密封，移除上清液過程應(yīng)避免

擾動計數(shù)框內(nèi)浮游植物細胞，且密封的計數(shù)框不能出現(xiàn)氣泡；若采用一體式沉降杯-計數(shù)框系

統(tǒng)，則無需移除上清液，直接用于倒置顯微鏡計數(shù)。

水華應(yīng)急監(jiān)測過程，可不使用沉降柱，直接將定量樣品注入計數(shù)框并封蓋，而后沉淀、計數(shù)。

9.2.2.3浮游植物細胞計數(shù)

9.2.2.3.10.1mL計數(shù)框-顯微鏡計數(shù)法

a）在放大100倍條件下，對整個樣品池底部的浮游植物進行初步掃視，以了解樣品中浮游植物種

類組成、粒徑大小及各種類分布的大概情況，列出計數(shù)框中所有種類名錄。

b）根據(jù)單個計數(shù)格內(nèi)浮游植物個體數(shù)量（一個群體或一個絲體均為一個個體）選擇計數(shù)面積：若

單個計數(shù)格內(nèi)浮游植物個體數(shù)低于8個，應(yīng)對整個計數(shù)框內(nèi)的細胞進行計數(shù)；若單個計數(shù)格個

體數(shù)在8～15個之間，選擇2、4、6、8、10行或列計數(shù)；若單個計數(shù)格個體數(shù)在15～40個之間，

采用行格計數(shù)方式，即選擇2、5、8行或列計數(shù)；若單個計數(shù)格內(nèi)個體數(shù)在40～100個之間，采

用對角線計數(shù)方式，即選擇位于計數(shù)框?qū)蔷€位置上的10個小方格計數(shù)；若單個計數(shù)格內(nèi)個體

數(shù)大于100個，宜采用隨機視野法。

c）計數(shù)視野應(yīng)均勻分布于計數(shù)框內(nèi)并避開邊緣區(qū)域。

d）一個制片的計數(shù)量應(yīng)不低于400個計數(shù)個體。

e）對計數(shù)面積范圍內(nèi)未出現(xiàn)但整個計數(shù)框內(nèi)存在的種類單獨進行補充計數(shù)。

9.2.2.3.2Uterm?hl沉降器-倒置顯微鏡計數(shù)法

8

DBFORMTEXT44/TFORMTEXTXXXX—FORMTEXTXXXX

a）在放大100倍條件下，對整個樣品池底部的浮游植物進行初步掃視，以了解樣品中浮游植物種

類組成、粒徑大小及各種類分布的大概情況，列出計數(shù)框中所有種類名錄。

b）采用隨機視野法進行計數(shù)，根據(jù)單個視野內(nèi)個體數(shù)確定計數(shù)視野數(shù)量：若單個視野內(nèi)個體數(shù)大

于40個，計數(shù)10個視野；若個體數(shù)在20～40個之間，計數(shù)20～10個視野；若個體數(shù)在10～20個

之間，計數(shù)20～40個視野；放大100倍條件下，若每個視野個體數(shù)不足10個，則應(yīng)對整個計數(shù)

框內(nèi)的細胞進行計數(shù)。

c）計數(shù)視野應(yīng)均勻分布于計數(shù)框內(nèi)并避開邊緣區(qū)域。

d）對計數(shù)面積范圍內(nèi)未出現(xiàn)但整個計數(shù)框內(nèi)存在的種類單獨進行補充計數(shù)。

9.2.2.3.3藻類水華應(yīng)急監(jiān)測過程中水華優(yōu)勢種類的計數(shù)

藻類水華應(yīng)急監(jiān)測過程中，若僅對水華優(yōu)勢種類進行計數(shù)，一個制片的計數(shù)不受400個計數(shù)個體的

約束，計數(shù)個體數(shù)達到100個時即可停止計數(shù)。

9.2.2.3.4大群體與絲狀體計數(shù)方法

a）對大群體的細胞進行計數(shù)，如微囊藻群體，可先計數(shù)若干大小相近子群體的細胞數(shù)，計算子群

體細胞數(shù)平均值，再將大群體分劃分若干子群體，子群體細胞平均值與子群體數(shù)相乘即大群體

細胞數(shù)。另外，也可采用超聲波處理定量樣品以打散浮游植物群體，而后進行計數(shù)。

b）對細胞間隔不明顯的絲狀體進行計數(shù)，如擬柱孢藻、澤絲藻等，可先在高放大倍率下(如400×)

選擇5～10個間隔相對清晰的細胞測量細胞長度，而后計算出平均細胞長度；通過測微尺測量

各個浮游植物絲狀體長度，以絲狀體總長度除以平均細胞長度，即為絲狀體的總細胞數(shù)。

9.2.2.3.5計數(shù)結(jié)果的質(zhì)量控制

應(yīng)對同一個樣品進行多次計數(shù)，控制相同計數(shù)面積的計數(shù)結(jié)之間的差異在0.95置信區(qū)間。

以第一次計數(shù)為X，置信區(qū)間為0.95，則：計數(shù)上限=x+2.42+1.96；下限

=x+1.42-1.96。若第二次計數(shù)結(jié)果落在該區(qū)間內(nèi)，則認為兩次計數(shù)沒有顯著性誤差，取兩次計

ulim

數(shù)的平均值做樣本值；若第二次計數(shù)結(jié)果在第一次計數(shù)置信上限和下限之外，則兩次計數(shù)差異顯著，需

uhim

再次計數(shù)，最終取誤差不顯著的計數(shù)均值做為計數(shù)結(jié)果。

例如，30個視野的計數(shù)面積，第一次計數(shù)結(jié)果為650個細胞，滿足0.95置信度的計數(shù)區(qū)間上限為702

個細胞，下限為601個細胞，若第二次計數(shù)結(jié)果落在601～702區(qū)間內(nèi)，則取兩次計數(shù)的平均值做樣本值；

若第二次計數(shù)超出區(qū)間，則兩次計數(shù)差異顯著，需再次制片計數(shù)，取多次計數(shù)誤差不顯著的均值做樣本

值。

9.2.2.4浮游植物豐度計算

1）樣品中物種i的豐度（Ni）計算公式

Ni=×××1000（1）

l

式中：