2013-2408232013.11.21PCT/JP2014/0806052014WO2015/076286JA2015.05.28地址日本千葉縣(72)發(fā)明人花輪壽彥日向須美子合田幸廣利商標(biāo)事務(wù)所11038代理人吳宗頤A61K36/00(2006.01)A61P25/04(2006.01)A61P31/16(2006.01)A61P35/00(2006.01)A61P35/04(2006.01)麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物及其制備本發(fā)明提供一種從麻黃提取物中除去了麻黃屬生物堿而得到的麻黃屬生物堿除去型麻黃器器63麻黃屬生物堿除去型藤黃提取物21.麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其從麻黃提取物中除去了麻黃屬生物堿。2.權(quán)利要求1所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其以0.23%以下的量含有麻黃屬生物堿。3.權(quán)利要求1所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其以0.023%以下的量含有麻黃屬生物堿。4.權(quán)利要求1所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其以0.05ppm(檢測極限)以下的量含有麻黃屬生物堿。5.權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其含有麻黃的提取液/或提取物的水溶液所含成分中的沒有吸附于陽離子交換樹脂的成分。6.中藥制劑，其含有權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物。7.權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的制備方法，其特征在于，通過離子交換色譜法從麻黃的提取液和/或提取物中除去麻黃屬生物堿。8.抗癌、抗轉(zhuǎn)移藥，其將權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分。9.疼痛抑制藥，其將權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分。10.抗流感病毒藥，其將權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分。3麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物及其制備方法及用途[0001]本發(fā)明涉及一種安全性更高的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物、用于制備其的方背景技術(shù)intermediaSchrenketC.A.Meyer)或木賊麻黃(EphedraequisetinaBunge)(麻黃科)的地上莖。麻黃為自古以來所使用的最重要的生藥，作為含有麻黃作為構(gòu)成生藥的中藥(中前，在收載在健康保險(xiǎn)的中藥方劑中，含有麻黃作為構(gòu)成生藥的中藥方劑可舉出以下的16[0003]作為麻黃的有效成分，麻黃屬生物堿類((-)-麻黃堿，(+)-偽麻黃堿，)是有名的，在日本藥典中，對中麻黃或木賊麻黃(麻黃科)的地上莖的干燥物進(jìn)行定量時(shí)，規(guī)定含有總生物堿(麻黃堿及偽麻黃堿)0.7%以上。麻黃已知有中樞神經(jīng)興奮作用、交感神經(jīng)興奮作用、發(fā)汗作用、鎮(zhèn)咳作用、抗炎作用、抗過敏作用(非專利文獻(xiàn)1),這些藥理作用認(rèn)為來自麻黃屬生物堿(非專利文獻(xiàn)2)。進(jìn)而，麻黃被用于身體疼痛的各種癥狀，麻黃的鎮(zhèn)痛作用通過偽麻黃堿的抗炎作用來說明(非專利文獻(xiàn)3)。另一方面，作為麻黃的新的藥理作用，本發(fā)明人等從使用小鼠的體內(nèi)分析闡明了經(jīng)由癌細(xì)胞的運(yùn)動能力抑制作用的癌轉(zhuǎn)移抑制效果、或經(jīng)由癌細(xì)胞的增殖抑制效果的抗腫瘤效果(非專利文獻(xiàn)4),作為其分子機(jī)制，報(bào)道了是由作為肝細(xì)胞增殖因子(HGF)的受體Met抑制導(dǎo)致的HGF-Met-Akt信號抑制所引起的(專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)5)。這些作用在單獨(dú)的麻黃屬生物堿中觀察不到，因此，探索活性成分的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)了類黃酮化合物草棉黃素(Herbacetin)配糖體(非專利文獻(xiàn)6)。但是，草棉黃素配糖體的含量低至約0.005%,僅該成分不能說明麻黃的新的藥理作用，認(rèn)為多種成分參與[0004]由于麻黃具有交感神經(jīng)刺激作用及中樞神經(jīng)刺激作用，因此，有心絞痛、心肌梗不眠、發(fā)疹等必需注意(非專利文獻(xiàn)8)。這些副作用被認(rèn)為來自麻黃屬生物堿(非專利文獻(xiàn)FDA對含有麻黃等麻黃屬生物堿的物質(zhì)，規(guī)定禁止一切出售，對消耗者也提醒注意(2004年4麻黃禁止令)。在以此為根據(jù)的地區(qū)報(bào)告中，對龐大數(shù)量的論文和包括呈報(bào)到FDA的百數(shù)十件的死亡例的1萬數(shù)千件的副作用報(bào)告進(jìn)行了周密地驗(yàn)證，得出結(jié)論：麻黃制劑具有心悸或惡心嘔吐等輕度至中度的副作用(非專利文獻(xiàn)10)。在日本，麻黃被分類為作為專門藥物使用的材料，雖然允許其作為藥物使用，但在醫(yī)療現(xiàn)場，擔(dān)心因患者的體質(zhì)和癥狀的不同而產(chǎn)[0005]迄今為止，相信麻黃的藥效幾乎全部起因于麻黃屬生物堿。其根據(jù)是非專利文獻(xiàn)2中記載的脫生物堿麻黃提取物全部失去了麻黃具有的藥效。由此，認(rèn)為將麻黃的主作用和副作用分離是困難的，為了除去麻黃的副作用，從麻黃中除去麻黃屬生物堿的設(shè)想迄今為止完全沒有。但是，如上所述，本發(fā)明人等在麻黃中發(fā)現(xiàn)了不依賴于麻黃屬生物堿的有用的藥效，至此實(shí)現(xiàn)了通過選擇性地除去作為副作用的原因物質(zhì)的麻黃屬生物堿，可以提供作為安全性高的藥物的麻黃提取物的想法。[0006]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)[0007]專利文獻(xiàn)[0008]專利文獻(xiàn)1:“以麻黃為成分的MET抑制劑”,日本特愿2009-86363(2009年3月31天)[0009]非專利文獻(xiàn)[0012]非專利文獻(xiàn)3:中藥中的鎮(zhèn)痛劑的定位和種類、疼痛和臨床，5(3),262-268,2005。[0013]非專利文獻(xiàn)4:BasicresearchontheuseofKampomedicinestoprotectagainstcancerrecurrenceandmetastasis,J.Trad.Med.,30(1),1926,201[0014]非專利文獻(xiàn)5:Ephedraeherba,amajorcomponentofmaoto,inhibitstheHGF-inducedmotilityofhumanbreastcancerMDA-MB-231cellsthroughsuppressionofexpression.J.Trad.Med.,28,12[0015]非專利文獻(xiàn)6:CharacterizationofphenolicconstitutesfromEphedraHerbaextract.Molecules,18,5326-5334,2013。[0016]非專利文獻(xiàn)7:麻黃提取物中含有的成分研究，日本藥學(xué)會年會要旨集133年會2[0017]非專利文獻(xiàn)8:花輪壽彥著,“漢方診療的教程”,增補(bǔ)版，p46-47,金原出版，2003[0018]非專利文獻(xiàn)9:HallerCA,BenowitzNL.,Adversec[0019]非專利文獻(xiàn)10:FinalRuleDeclaringDietarySupplementsContainingEphedrineAlkaloidsAdulteratedBecauseTheyPresentanRisk.FederalRegister:69(28),pp6787-6854,2004。發(fā)明內(nèi)容[0020]發(fā)明要解決的課題5[0021]本發(fā)明的目的在于，提供一種用于通過從原樣保持麻黃所具有的幾種藥效的麻黃提取物中除去麻黃屬生物堿，來制備安全性高的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的方法以及以其為有效成分的抗癌、抗轉(zhuǎn)移藥、疼痛抑制藥及抗流感病毒藥。[0022]解決課題的手段[0023]非專利文獻(xiàn)2中記載了：通過將麻黃用NH?OH及醚進(jìn)行處理而除去生物堿，制作脫生物堿麻黃提取物的方法。但是，用該方法制作的脫生物堿麻黃提取物以高濃度(0.33-0.5%)含有殘存總生物堿，進(jìn)而，由于NH?OH處理在植物成分的結(jié)構(gòu)上引起化學(xué)變化(大原208,1990),因此認(rèn)為含有了與原來的麻黃提取物不同的人造成分。非專利文獻(xiàn)2的作者也提及了該情況。另外，由于非專利文獻(xiàn)2中記載的脫生物堿麻黃提取物全部喪失了麻黃具有的藥理效果，因此是對麻黃的藥效產(chǎn)生影響的制備方法，對于從麻黃中除去麻黃屬生物堿而作為藥物利用來說，為不適當(dāng)?shù)姆椒?。[0024]本發(fā)明人等克服了脫生物堿麻黃提取物的高生物堿含量和所含成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)變化、以及藥效消失等問題點(diǎn)，為了解決上述的課題，反復(fù)進(jìn)行了深入研究，結(jié)果成功地開發(fā)出了：在不影響麻黃提取物所含有的成分的結(jié)構(gòu)、原樣保持藥效的情況下從麻黃提取物中簡便地除去麻黃屬生物堿的溫和的制備方法。進(jìn)而發(fā)現(xiàn)，所得到的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物保持抗癌、抗轉(zhuǎn)移作用，此外還保持疼痛抑制作用和抗流感病毒作用，至此完成[0026](1)一種麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其從麻黃提取物中除去了麻黃屬生物堿(Ephedrinealkaloids,麻黃堿類生物堿)。[0027](2)根據(jù)(1)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其以0.23%以下的量含有麻黃屬生物堿。[0028](3)根據(jù)(1)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其以0.023%以下的量含有麻黃屬生物堿。[0029](4)根據(jù)(1)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其以0.05ppm(檢測極限)以下的量含有麻黃屬生物堿。[0030](5)根據(jù)(1)～(4)任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其含有麻黃的提取液/或提取物的水溶液所含成分中的沒有吸附于陽離子交換樹脂的成分。[0031](6)一種中藥制劑，其含有(1)～(5)任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取[0032](7)根據(jù)(1)～(5)任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的制備方法，其特征在于，通過離子交換色譜法從麻黃的提取液和/或提取物中除去麻黃屬生物堿。[0033](8)一種抗癌·抗轉(zhuǎn)移藥，其將(1)～(5)任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分。[0034](9)一種疼痛抑制藥，其將(1)～(5)任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分。[0035](10)一種抗流感病毒藥，其將(1)～(5)任一項(xiàng)所述的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分。6[0036]發(fā)明效果[0037]本發(fā)明方法是可以僅使麻黃提取物通液于某種陽離子交換柱而將麻黃屬生物堿除去至0.23%以下、或0.023%以下、或0.05ppm(檢測極限)以下的極其簡便且有效的制備方法。另外，本發(fā)明的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物將作為麻黃的抗轉(zhuǎn)移作用的機(jī)制已同樣地濃度依賴性地抑制Met高表達(dá)人肺癌細(xì)胞株H1975的細(xì)胞增殖。由以上結(jié)果可知，本發(fā)明的制備方法顯示出：可以在原樣保持麻黃提取物所具有的通過MET抑制的抗癌、抗轉(zhuǎn)移作用的情況下除去麻黃屬生物堿，可以提供將麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成[0038]麻黃劑(將麻黃作為主藥的中藥)作為關(guān)節(jié)痛的治療藥也被頻繁使用，因此，著眼于麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的鎮(zhèn)痛效果，通過使用小鼠的疼痛試驗(yàn)(福爾馬林試驗(yàn))進(jìn)行評價(jià)。其結(jié)果：通過麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的經(jīng)口給藥，顯著地抑制疼痛，比麻黃提取物顯示更高的疼痛抑制效果。迄今為止，一直認(rèn)為麻黃的鎮(zhèn)痛效果來自偽麻黃堿，因此，該結(jié)果的發(fā)現(xiàn)顛覆了迄今為止對麻黃的認(rèn)知。因此可知：根據(jù)本發(fā)明，可以提供將麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分的疼痛抑制藥。[0039]作為麻黃劑之一的麻黃湯被用于流感初期的治療，因此，麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物可以抑制流感病毒的感染，或通過使用MDCK細(xì)胞的流感病毒感染試驗(yàn)進(jìn)行評價(jià)。其結(jié)果：麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物與原本的麻黃提取物同等程度地抑制流感病毒感染。因此明了，可以提供將麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為有效成分的抗流感病毒藥。[0040]綜上，本發(fā)明的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物期待作為安全性更高的抗癌、抗轉(zhuǎn)移藥、疼痛抑制藥及抗流感病毒藥的利用。進(jìn)而，麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物成為可以同時(shí)進(jìn)行癌癥治療和癌性疼痛的治療新的癌癥治療藥。[0041]由于麻黃作為中藥的構(gòu)成生藥被廣泛使用，因此，通過將含有麻黃的中藥中的麻黃替換為麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，可以提供安全性更高的新的中藥制劑。[0042]例如，將麻黃湯作為抗癌、抗轉(zhuǎn)移藥利用時(shí)，可以賦予新的效能效果，并且也可擴(kuò)大應(yīng)用于對以往的麻黃湯敏感性的患者。[0043]另外，例如可以應(yīng)用于高齡者的關(guān)節(jié)痛。高齡者的關(guān)節(jié)痛成為生活質(zhì)量(QOL)降低的原因之一，其大多因變形性關(guān)節(jié)病而產(chǎn)生。這樣的關(guān)節(jié)痛占高齡者的要援助和要護(hù)理的原因的約十分之一，成為要援助的原因的首位(Matsui,Y.,NationalCenterforGeriatrics&Gerontology,42,1-4,2013)。就關(guān)節(jié)痛的治療而言，以非甾體類抗炎藥(NSAID)為中心，但由于胃腸障礙的副作用，因此難以長期服用，謀求替代NSAID的鎮(zhèn)痛藥。最近，某些制藥企業(yè)進(jìn)行具有鎮(zhèn)痛作用的抗體藥物的開發(fā)，進(jìn)行了臨床實(shí)驗(yàn)，但在一部分患者中，變形性關(guān)節(jié)病惡化而試驗(yàn)中止(Yamaguchi,A,DrugDeliverySystem,26(5),457-460,2011)。該癥狀惡化的原因認(rèn)為是，由于強(qiáng)的鎮(zhèn)痛效果，患者的行動急劇增加。另一方面，含有麻黃的中藥(葛根湯、麻杏苡甘湯、越婢加術(shù)湯、薏苡仁湯等)對關(guān)節(jié)痛的治療是有效的，由于其鎮(zhèn)痛效果緩慢，因此，不易招致患者的急劇的活動增加，不會引起變形性關(guān)節(jié)含麻黃的中藥的高齡者的給藥。通過使用將這些中藥中的麻黃替換為麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的中藥制劑，不會引起變形性關(guān)節(jié)病的惡化，可以安全地控制高齡者的關(guān)節(jié)痛，7可有助于QOL(生活質(zhì)量)的改善。[0044]進(jìn)而，報(bào)道了用于流感初期治療的麻黃湯由臨床研究可知，具有與西藥奧司他韋同等程度的流感治療效果(Nabeshima,S.,等人，J.Trad.Med.,27,148-156,2010;木本博史，治療學(xué)，40,385-388,2006),由于麻黃的副作用，有必要控制對高齡者或麻黃敏感性患者的給藥。但是，如果使用將麻黃替換為麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的麻黃湯，則可以進(jìn)行對高齡者或麻黃敏感性的患者的給藥。另外，麻黃湯因麻黃的副作用，是難以長期給藥的中藥，但如果采用使用麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的麻黃湯，則可以以流感感染預(yù)防為目的，對感染的高危人群進(jìn)行長期的預(yù)防性給藥。[0045]根據(jù)本發(fā)明可知，麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物具有作為麻黃提取物所具有的抗癌、抗轉(zhuǎn)移藥、疼痛抑制藥及抗流感病毒藥的作用，且確認(rèn)可以用作選擇性除去作為副作用的原因物質(zhì)的麻黃屬生物堿的安全性高的藥物。本發(fā)明為用于將麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物作為藥物提供的非常重要的基礎(chǔ)技術(shù)。期待本發(fā)明在臨床領(lǐng)域中的利用。附圖說明[0046]圖1表示實(shí)施例4中記載的、離子交換色譜法精制前后的麻黃提取物及麻黃屬生物[0047]圖2表示實(shí)施例5中記載的、離子交換色譜法精制前后的麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的指紋。[0048]圖3表示實(shí)施例6中記載的、離子交換色譜法精制前后的麻黃提取物及麻黃屬生物[0049]圖4表示實(shí)施例7中記載的、麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的MET激酶抑制作用。[0050]圖5表示實(shí)施例8中記載的、麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物對人非小細(xì)胞肺癌H1975細(xì)胞的增殖的抑制作用。[0051]圖6表示實(shí)施例9中記載的、麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的疼痛抑制作用。[0052]圖7A表示實(shí)施例10中記載的、麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的流感病毒感染抑制作用。[0053]圖7B表示實(shí)施例10中記載的、麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的流感病毒感染抑制作用。具體實(shí)施方式[0054]麻黃提取物[0055]本發(fā)明中所使用的麻黃使用麻黃科植物中麻黃(EphedraintermediaSchrenketC.A.Meyer)或木賊麻黃(EphedraequisetinaBunge)(麻黃科)的地上莖?？梢岳脤⑸?、干燥的或地上莖加工而成的物質(zhì)。[0056]在本發(fā)明的制備方法中進(jìn)行的麻黃的提取工序可以基于眾所周知的方法的任一8[0057]相對于麻黃的干燥重量，提取溶劑的量優(yōu)選為2-100重量份。提取溫度優(yōu)選為4-98波提取、超臨界提取等任意的方法進(jìn)行。[0058]對得到的提取液、或過濾提取液而得到的濾液、或濃縮濾液而得到的濃縮液、干燥濃縮液而得到的干燥物等這樣得到的提取成分，可以通過以下的陽離子交換色譜法實(shí)施于精制工序，但優(yōu)選之前將構(gòu)成成分粗略地分離。例如，通過使用適當(dāng)?shù)倪^濾器進(jìn)行過濾，或進(jìn)行離心分離，可以簡便地除去細(xì)的固體成分，在進(jìn)行以下的色譜法時(shí)，可以防止柱堵塞等[0059]在后述的實(shí)施例1中，這樣得到的麻黃提取物中的麻黃屬生物堿為4.74%(麻黃堿為3.19%、偽麻黃堿為1.55%)。[0060]麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物[0061]通過經(jīng)過上述工序而得到的麻黃提取物可以通過陽離子交換色譜法除去麻黃堿，經(jīng)過濃縮干燥，得到麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物。麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物也簡記為EFM(ephedrinealkaloids[0062]為了確定適于制備本發(fā)明麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的離子交換色譜法的填充劑，進(jìn)行了研究。在用各種離子交換樹脂處理麻黃提取物之后，用中所含的麻黃屬生物堿進(jìn)行分析。研究的離子交換樹脂為陽離子交換樹脂13種、兩性離子交換樹脂1種、陰離子交換樹脂8種，總計(jì)22種。其結(jié)果可知：適于除去麻黃屬生物堿的離子效果樹脂為陽離子交換樹脂。因此，使用弱酸性陽離子交換樹脂WK10、WK11、WK20、WK40L、對處理麻黃提取物之后的提取物中所含的麻黃屬生物堿含量通過HPLC進(jìn)行定量。將其結(jié)果示于下述的表。[0063][表1]濃度(%)0(1DX319濃度(%)0(1DX319[0065]綜上，適于制備麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的陽離子交換柱如下所述。在麻黃屬生物堿含量為0.23%以下的EFM的制備中，可以從弱酸性陽離子交換樹脂WK20、強(qiáng)酸性柱填充劑。在麻黃屬生物堿含量為0.023%以下的EFM制備中，可以從弱酸性陽離子交換樹作為柱填充劑。進(jìn)而，在麻黃屬生物堿含量為0.05ppm以下的EFM的制備中，可以選擇強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂PK216作為柱填充劑，此外，也可以從實(shí)施例2及實(shí)施例3中選擇強(qiáng)酸性陽離[0066]色譜法的具體的實(shí)施方法依據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的任一種方法來實(shí)施。[0067]干燥方法可以通過減壓干燥、冷凍干燥、噴霧干燥等任意的方法來進(jìn)行。根據(jù)需[0068]本發(fā)明的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物為從麻黃提取物中除去了麻黃屬生物9堿的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，其優(yōu)選以0.23%以下的量含有麻黃屬生物堿(麻黃堿和偽麻黃堿的合計(jì)),更優(yōu)選以0.023%以下的量含有麻黃屬生物堿，進(jìn)一步優(yōu)選以0.05ppm(檢測極限)以下的量含有麻黃屬生物堿。[0069]在日本藥典中，麻黃被規(guī)定為相對于中藥的干燥物含有總生物堿(麻黃堿及偽麻黃堿)0.7%以上，該量按麻黃提取物換算時(shí)，計(jì)算為含有約2.3%～3.5%以上，因此，本發(fā)明的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物與目前所使用的麻黃提取物明確相區(qū)別。[0070]予以說明，上述的麻黃提取物中的總生物堿含量的換算由非專利文獻(xiàn)(成川一郎，“漢方的主張一現(xiàn)代科學(xué)和漢方制劑”,p162-163,(株)健友館，1991年發(fā)行)及實(shí)施例1求出。從用于制備EFM的日本藥典的麻黃制作麻黃提取物時(shí)，麻黃中所含的麻黃屬生物堿幾乎全部轉(zhuǎn)移至麻黃提取物。但是，由麻黃得到的麻黃提取物的收率為20%～30%,因此，麻黃提取物中所含的總生物堿被濃縮成3.3倍～5倍。因此，將日本藥典中規(guī)定的麻黃的總生物堿0.7%以上的3.3倍～5倍的數(shù)值“2.3%～3.5%以上”作為麻黃提取物的總生物堿的規(guī)定值。[0071]該EFM的生物堿含量由以下的非專利文獻(xiàn)規(guī)定。制作中藥的安慰劑的情況下，將10%的實(shí)際藥物進(jìn)行混合(寺澤捷年、喜多敏明編集，“EBM漢方”,p8,2003年3月20日，醫(yī)齒藥出版株式會社),如果為十分之一以下的含量，則認(rèn)為其藥理作用出現(xiàn)的可能性非常低。由于在麻黃提取物中含有2.3%～3.5%以上的麻黃屬生物堿，因此，通過設(shè)定為其十分之一的0.23%～0.35%以下，認(rèn)為是麻黃屬生物堿的副作用出現(xiàn)的可能性極小的數(shù)值。在本發(fā)明中，為了與非專利文獻(xiàn)2的脫生物堿麻黃提取物(殘存生物堿含量0.33%～0.5%)明確地區(qū)別，設(shè)定為0.23%以下。為了進(jìn)一步提高可靠性，規(guī)定為0.023%以下。另外，更優(yōu)選為實(shí)施例1所示的0.05ppm以下(檢測極限以下)。[0072]含有麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的中藥制劑[0073]麻黃作為中藥的構(gòu)成生藥被廣泛使用，因此，通過將含有麻黃的中藥中的麻黃替換為麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，可以提供排除了由麻黃屬生物堿引起的副作用、安全性更高的中藥制劑。例如，用于關(guān)節(jié)痛治療的麻杏苡甘湯由麻黃、杏仁、薏苡仁、甘草構(gòu)生物堿除去型麻黃提取物，可以制作副作用小的麻杏苡甘湯。杏仁、甘草制成的提取物中添加麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，可以制作副作用小的麻黃湯。[0075]藥物組合物[0076]本發(fā)明進(jìn)而提供含有麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的組合物，組合物可以用作[0077]作為用于組合物的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，優(yōu)選上述麻黃屬生物堿的含量為0.23%以下或0.023%以下。更優(yōu)選麻黃屬生物堿的含量為0.05ppm(檢測極限)以下。[0078]本發(fā)明的組合物為藥物組合物時(shí)的給藥方法沒有特別限定，優(yōu)選可經(jīng)口給藥的劑型。本發(fā)明的藥物組合物可以設(shè)為各種劑型。學(xué)上可接受的各種載體。[0081]本發(fā)明的藥物組合物的給藥量換算為麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物時(shí)，作為成人的1天用量，可以在100mg～3g的范圍內(nèi)使用。以一般的麻黃提取物的給藥量為根據(jù)，換算為麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物時(shí)，作為成人的1天用量，可以估計(jì)為740mg～770mg,為了消除由麻黃屬生物堿引起的副作用，可以增加給藥量。[0082]當(dāng)然，也可以分別地根據(jù)所給藥的人的年齡、體重、癥狀、給藥途徑、給藥期間、治療經(jīng)過等而使其變化。[0083]也可以將每1天的量分成數(shù)次給藥。另外，也可以與其它疼痛抑制劑或抗癌劑組合而給藥。[0084]本發(fā)明的組合物也可以設(shè)為食品或營養(yǎng)輔助食品的形態(tài)。例如，通過在原材料中配合麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，可以設(shè)為面類、面包、糖果、果凍、餅、湯、健康飲料的形態(tài)。[0085]在這樣的食品、營養(yǎng)輔助食品中，除了麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物之外，可以加入鐵、鈣等無機(jī)成分、各種維生素類、低聚糖、殼聚糖等食物纖維、大豆提取物等蛋白質(zhì)、卵磷脂等脂質(zhì)、蔗糖、乳糖等糖類。[0087]可以將本發(fā)明組合物用作抗癌、抗轉(zhuǎn)移藥的癌癥的種類主要為MET表達(dá)癌。MET在胃癌、大腸癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌、骨肉瘤、腦瘤等各種癌細(xì)胞表面表達(dá)，因此可用于這些癌癥的治療。HGF-c-Met信號促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖、運(yùn)動能力、細(xì)胞分散、生存、血管新生，成為癌細(xì)胞的增殖、浸潤及轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵。因此，本發(fā)明的組合物作為防止癌癥的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的藥也是有效的。[0088]疼痛抑制藥[0089]作為可將本發(fā)明組合物用作疼痛抑制劑的疾病，可舉出肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、腰痛、風(fēng)[0090]抗流感病毒藥[0091]本發(fā)明組合物對流感病毒的感染預(yù)防及感染初期的治療有效。[0092]實(shí)施例[0093]由此，通過以下的實(shí)施例詳細(xì)地說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于此。[0094]實(shí)施例1:麻黃提取物的制作。[0095]通過混合機(jī)粉碎麻黃的干燥原料，向其粉碎物50g中加入500mL水，一邊攪拌，一邊在95℃下提取1小時(shí)。進(jìn)行固液分離，將提取液以3000rpm進(jìn)行10分鐘離心分離。將得到的上清液在60℃下減壓濃縮后，在60℃下進(jìn)行一夜減壓干燥，得到麻黃提取物9.6g。[0096]實(shí)施例2:通過離子交換樹脂SK1B的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的制作。[0097]將麻黃的干燥原料通過混合機(jī)粉碎，向其粉碎物50g中加入500mL水，一邊攪拌，一邊在95℃下提取1小時(shí)。進(jìn)行固液分離，將提取液以3000rpm進(jìn)行10分鐘離心分離，使得到的上清液通液于25mL的強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂SK1B(三菱化學(xué)制)。將通過液用5%的NaHCO3調(diào)整至pH=5.2,在60℃下進(jìn)行減壓濃縮后，在60℃下進(jìn)行一夜減壓干燥，得到麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物6.3g。[0098]實(shí)施例3:通過離子交換樹脂IR120B的麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的制作。[0099]將麻黃的干燥原料通過混合機(jī)粉碎，向其粉碎物50g中加入500mL水，一邊攪拌，一邊在95℃下提取1小時(shí)。進(jìn)行固液分離，將提取液以3000rpm進(jìn)行10分鐘離心分離，使得到的上清液通液于25mL的強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂IR120B(有機(jī)社制)。將通過液用5%的NaHCO3調(diào)整至pH=5.2,在60℃下進(jìn)行減壓濃縮后，在60℃下進(jìn)行一夜減壓干燥，得到麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物6.3g。[0100]實(shí)施例4:通過高效液相色譜法(HPLC)的麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2和實(shí)施例3)中所含的麻黃堿的含量比較。[0101]將麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的HPLC圖示于圖1。[0102]分析條件[0104]流動相：月桂基硫酸鈉溶液(1→128)/乙腈/磷酸混合液(640:360:1)[0106]檢測：紫外線吸光光度計(jì)(測定波長：210nm)[0107]流速：0.6mL/分鐘(以麻黃堿為14分鐘左右的方式調(diào)整)[0108]樣品：取麻黃提取物或麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的干燥物各10mg,加入甲[0109]標(biāo)準(zhǔn)溶液：注入麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/50%甲醇10mL)及偽麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)溶液[0110]將得到的結(jié)果示于下表1。由以上結(jié)果可知：通過使用強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂SK1B、或IR120B的柱色譜法，可以從麻黃提取物中除去麻黃屬生物堿(麻黃堿及偽麻黃堿)至檢測極限(0.05ppm)以下。[0111][表2]0.05ppm以下0、05pp以下0.0Sppm以下0、0Spom以下[0113]實(shí)施例5:通過三維高效液相色譜法(3D-HPLC)的麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的組成成分的比較。[0114]分析條件[0116]流動相：(A)0.05[0118]0分鐘：B液10%→60分鐘：B液100%[0120]檢測：光電二極管陣列(PDA)[0122]樣品：取麻黃提取物或麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的干燥物各10mg,加入甲[0123]標(biāo)準(zhǔn)溶液：注入麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/10mL甲醇)及偽麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/[0125]通過3D-HPLC比較麻黃提取物和麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的組成成分的結(jié)果，在麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物中，麻黃屬生物堿的峰消失，但其它成分的圖案與麻黃提取物基本相同。[0126]實(shí)施例6:通過LC/MS的麻黃提取物(實(shí)施例1)和麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的組成分析及比較研究[0127]分析條件[0129]流動相：0.1%HCOOH的水溶液(A)—0.1%HC[0137]通過LC/MS比較麻黃提取物和麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物的組成成分的結(jié)堿的各峰消失(圖3)。[0138]實(shí)施例7:麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的取物(2批),在室溫下培養(yǎng)1小時(shí)。反應(yīng)停止后，使用ADP-Glo試劑，測定依賴于ADP量的魯米[0140]由其結(jié)果可知：麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物與麻黃提取物同等程度地抑制MET激酶作用。將麻黃提取物(實(shí)施例1)和麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的MET激酶抑制曲線示于圖4。[0141]實(shí)施例8:對麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的來自人肺癌H1975細(xì)胞的增殖的抑制效果[0142]H1975細(xì)胞從美國生物資源庫(ATCC)購入。將H1975細(xì)胞懸浮于10%FCS-RPMI培養(yǎng)50、100、150、200μg/mL添加麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(3批次),對照則添加10%FCS-RPMI培養(yǎng)基。培養(yǎng)72小時(shí)后，將Cellcountingkit-8(細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8)添4個(gè)孔，由其平均值計(jì)算出相對細(xì)胞數(shù)(圖5)。[0143]由其結(jié)果可知：麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物與麻黃提取物同樣地，抑制來自人肺癌的H1975細(xì)胞的增殖。[0144]實(shí)施例9:對動物試驗(yàn)中的麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的疼痛的抑制效果[0145]實(shí)驗(yàn)動物使用4周齡的雄性ICR小鼠48只。在實(shí)驗(yàn)開始日進(jìn)行體重測定，以各組基本相同的方式分成對照組、麻黃提取物2組及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物2組(1天給藥量分別為350和700mg/kg)。在麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物中加入注射用蒸餾水，一邊在37℃下攪拌30分鐘，一邊使其懸浮。懸浮液在臨口服給藥前施加渦流而成為均勻后，用探針給藥。將第1天和第2天的單次給藥量設(shè)為175mg/kg,另外設(shè)為375mg/kg,一[0146]在第3天的上午的最終給藥6小時(shí)后，將2.5%福爾馬林溶液給藥于20μL足底部皮關(guān)聯(lián)行動而言，將在從給藥之后至10分鐘后產(chǎn)生的第1相和15分鐘以后至30分鐘產(chǎn)生的第2相設(shè)為對象，計(jì)測舔或咀嚼每一定時(shí)間的處置的足的行動時(shí)間。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析是將對照組和受試物質(zhì)給藥組的疼痛行動時(shí)間通過Dunnett試驗(yàn)進(jìn)行，顯著性水平設(shè)為5%。[0147]其結(jié)果，在給藥麻黃提取物700mg/kg的情況下，顯著性抑制第2相的疼痛關(guān)聯(lián)行動。麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物以350mg/kg及700mg/kg的兩個(gè)給藥量濃度依賴性地顯著性抑制第2相的疼痛關(guān)聯(lián)行動，與除去麻黃堿前的麻黃提取物相比，疼痛抑制作用提高(圖6)。由以上的結(jié)果可知：麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物與麻黃提取物相比，具有更高的疼痛抑制效果。[0148]實(shí)施例10:麻黃提取物(實(shí)施例1)及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物(實(shí)施例2)的流感病毒感染抑制作用[0149]就分析而言，通過因流感病毒的感染而使MDCK細(xì)胞溶解，通過用色素染色殘存細(xì)胞來進(jìn)行檢測。[0150]對于麻黃提取物及麻黃屬生物堿除去型麻黃提取物，分別用10%FBS-MEM在200μg/mL的溶液中制備，進(jìn)一步制作10個(gè)等級的2倍稀釋系列，作為試樣溶液。將含有流感病毒細(xì)胞在10%FB