Q/LB.□XXXXX-XXXX職業(yè)衛(wèi)生實驗室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范第5部分：生物樣本類范圍本文件適用于職業(yè)衛(wèi)生實驗室研制生物樣本類質(zhì)量控制樣品（QCM）。本文件規(guī)定了該類QCM的技術(shù)要求、制備步驟、規(guī)范使用等原則。本文件的基本用戶是需要研制特定的QCM的實驗室人員。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T15000.1標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則(1)在技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)中陳述標(biāo)準(zhǔn)樣品的一般規(guī)定GB/T15000.2標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則第2部分：常用術(shù)語及定義GB/T15000.3標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則(3)標(biāo)準(zhǔn)樣品定值的一般原則和統(tǒng)計方法GB/T15000.7標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則第7部分：標(biāo)準(zhǔn)樣品生產(chǎn)者能力的通用要求CNAS-GL003能力驗證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南CNAS-GL005實驗室內(nèi)部研制質(zhì)量控制樣品的指南GBZ/T224職業(yè)衛(wèi)生名詞術(shù)語ISO/IEC指南99國際計量學(xué)詞匯-基本及一般概念和相關(guān)術(shù)語ISO3534-1統(tǒng)計學(xué)-術(shù)語及符號：第一部分通用統(tǒng)計學(xué)及概率論術(shù)語術(shù)語、定義GB/T15000.2-2019、ISO/IEC指南99、ISO3534-1、GBZ/T224-2010中界定的術(shù)語和定義適用于本文件。生物樣本類質(zhì)量控制樣品的技術(shù)要求基體要求生物樣本原料成分一般比較復(fù)雜，選擇的生物樣本類QCM的基體應(yīng)與日常檢測樣品的基體相同或者盡可能接近，均勻性穩(wěn)定性能達到使用要求，且目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)本底值較低。生物樣本原料總量可在考慮實驗室一定周期（如每年）的QCM需求量及研制過程用量后確定。制備過程中使用5/10mL西林瓶或者聚乙烯塑料小瓶分裝，小瓶需使用同一生產(chǎn)商的同一批次產(chǎn)品，驗收合格后使用。目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)儲備液采用國家一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。選擇符合要求的分液瓶，移液器，真空冷凍干燥器。特性和特性值生物樣本類QCM的特性與所需進行質(zhì)量控制的測量特性一致，其特性值的范圍可在考慮該目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)的職業(yè)衛(wèi)生限值、日常樣品濃度、標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍等因素后確定。均勻性和穩(wěn)定性均勻性：運用單因素方差分析統(tǒng)計分析抽取樣品的檢測結(jié)果有無顯著性差異，判定該批次QCM均勻性是否符合要求。穩(wěn)定性：各存放條件下，各考察時間點抽取樣品的檢測結(jié)果與均勻性檢驗的總體均值運用t檢驗法進行統(tǒng)計分析，無顯著性差異時間點前該批次QCM的穩(wěn)定性符合要求。生物樣本類質(zhì)量控制樣品的研制步驟使用一種實用且簡便的方法來確保QCM的均勻性和穩(wěn)定性，以達到開發(fā)成本和預(yù)期用途之間的平衡，可為實驗室提供較有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（CRM）更為經(jīng)濟的識別測量波動的方法。研制過程除需具備一定技術(shù)水平和能力的組織外，研制人員還應(yīng)有豐富的樣品知識并熟悉相關(guān)過程。生物樣本類QCM研制步驟為：原材料準(zhǔn)備→原材料制備→加料制備→分裝→冷凍干燥→輻照滅菌→均勻性評估→賦值→穩(wěn)定性評估→研制文件整理→貯存/使用。材料及其處理、分裝、包裝和輻照等均可由具有一定經(jīng)驗和特定設(shè)備的第三方完成。生物樣本類質(zhì)量控制樣品的制備材料準(zhǔn)備按照4.1要求，準(zhǔn)備一定數(shù)量的同基質(zhì)生物樣本原材料，經(jīng)過均質(zhì)化處理（例如尿樣：振蕩混勻、離心、過濾等步驟），制備更加均勻的原材料；準(zhǔn)備足夠量的低本底西林瓶或聚乙烯塑料瓶；準(zhǔn)備分液器，移液槍，真空冷凍干燥機。按照4.2要求準(zhǔn)備符合要求的目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)儲備液。加料封裝目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)的添加可根據(jù)生物樣本原材料的性質(zhì)采取一次直接添加或分步添加。（例如血液樣本相對比較粘稠，為了增加均勻性我們可以采取分步添加。以1L血液為例，我們可以將其按3：3：4的比例分成3份，用移液槍準(zhǔn)確定量吸取目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)儲備液添加入第一份樣本中，充分混合均勻后再依次于第二、第三份樣本混合，并充分混合均勻。）制備好的加料生物樣本用分液器準(zhǔn)確定量分裝到各個西林瓶（或聚乙烯瓶）中，經(jīng)真空冷凍干燥箱制備成凍干粉，加蓋密封。該批次QCM全部完成加料封裝后還應(yīng)給每個樣品貼上清晰的標(biāo)簽，標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)包括樣品名稱和材料描述、編號、批號等內(nèi)容。輻照滅菌后-18℃冷凍保存均勻性評估從該批次QCM中隨機抽取不少于10個樣品用于均勻性檢驗。使用目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)規(guī)定/推薦測定方法程序測定，每個樣品重復(fù)測定3次。樣品的重復(fù)測定可按隨機次序進行，以降低測量飄移對均勻性評估的影響。采用單因素方差分析法對測定結(jié)果進行統(tǒng)計處理，若F＜自由度為（f1，f2）及給定顯著性水平α（通常α=0.05）的臨界值Fα（f1，f2），P>0.05，則表明樣品內(nèi)和樣品間無顯著性差異，樣品是均勻的。定值將6.3中均勻性評估研究獲得的樣本總平均值作為指示值，3倍總評均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差建立指示值的控制限。穩(wěn)定性評估-18℃存放條件下，按照每個考察時間點（時間點的確定可參考附錄B）隨機抽取6個樣本，使用目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)規(guī)定/推薦測定方法程序測定，每個樣品重復(fù)測定3次。各時間點檢測結(jié)果與均勻性檢驗的總體均值運用t檢驗法進行統(tǒng)計分析，無顯著性差異時間點前該批次QCM的穩(wěn)定性符合要求。各時間點樣本測定前，應(yīng)使用CRM等對實驗室測量程序進行校準(zhǔn)，以降低實驗室長期再現(xiàn)性對穩(wěn)定性評估的影響。QCM復(fù)溶后于4℃保存，按照考察時間點，將樣本取出恢復(fù)至室溫，使用目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)規(guī)定/推薦測定方法程序測定，每個樣品重復(fù)測定3次。各時間點檢測結(jié)果與均勻性檢驗的總體均值運用t檢驗法進行統(tǒng)計分析，無顯著性差異時間點前該QCM的復(fù)溶穩(wěn)定性符合要求。各時間點樣本測定前，應(yīng)使用CRM等對實驗室測量程序進行校準(zhǔn)，以降低實驗室長期再現(xiàn)性對穩(wěn)定性評估的影響。樣品信息文件QCM的單個樣品除應(yīng)有清晰、合適的標(biāo)簽外，還應(yīng)附有使用說明文件。文件信息應(yīng)包括制備日期、貯存條件、有效期、預(yù)期的用途、指示值、制備單位、使用的安全注意事項等內(nèi)容。樣品的貯存/運輸/使用貯存QCM制備完成后，應(yīng)嚴(yán)格按照樣品信息文件中的貯存條件來貯存，確保包裝容器密封、遠(yuǎn)離熱源、避光和防潮。此外，還應(yīng)定期監(jiān)測貯存條件（如：冰箱溫度）并記錄，以確保貯存條件合適。運輸本文件所述QCM通常無需廣泛分發(fā)，如需要運輸還有必要進行運輸穩(wěn)定性評估，可參考ISO指南35。使用生物樣本類QCM的使用應(yīng)嚴(yán)格按照有效期、預(yù)期用途、使用安全注意事項等內(nèi)容進行。生物樣本類QCM啟封復(fù)溶后在一定存儲條件下重復(fù)使用，4℃冰箱冷藏條件下可以穩(wěn)定一個月，應(yīng)定期監(jiān)測貯存條件（如：冰箱溫度）并記錄，以確保貯存條件合適。

（資料性）

尿中鎘QCM研制（示例）材料準(zhǔn)備：健康人尿：經(jīng)0.22μm濾膜過濾后混合備用（1L）；水中鎘成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW086121000μg/mL）；西林瓶及瓶蓋（或聚乙烯瓶），分液器，真空冷凍干燥機。加工制備：尿中鎘質(zhì)量控制樣品（QCM）內(nèi)部研制的步驟：取健康人尿→過濾→混合均勻→加標(biāo)充分混勻→分裝→冷凍干燥→輻照滅菌→冷凍保存→均勻性檢驗→定值→穩(wěn)定性檢驗→樣本信息成文。將1000μg/mL鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液用1%硝酸釋成10μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液備用。取1mL10μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液備，直接加入到1L尿中，充分?jǐn)嚢杈鶆?。用分液器?zhǔn)確取5mL加標(biāo)尿液于各個西林瓶（或聚乙烯瓶）中，分裝約200瓶左右。經(jīng)真空冷凍干燥機凍干處理，待成凍干粉后密封。該批次尿鎘全部完成加料封裝后，再逐一貼上包括“尿鎘、批號、編號”等信息的標(biāo)簽。輻照滅菌后-18℃冷凍保存。均勻性評估：從該批次尿中鎘QCM中隨機抽取10瓶用于均勻性檢驗。取尿鎘QCM恢復(fù)至室溫，加入5mL純水，待溶解后充分混勻，靜置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法或GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，每個樣品重復(fù)測定3次，測定結(jié)果見表1。樣品的重復(fù)測定應(yīng)按隨機次序進行（可參考如下示例），以降低測量漂移對均勻性評估的影響。采用單因素方差分析法對測定結(jié)果進行統(tǒng)計處理，樣品間均值無顯著性差異則表明樣品是均勻的，單因素方差分析結(jié)果見表2。示例：10個樣品，重復(fù)測量3次，適合的測量方案如下：第一次測量順序：1、3、5、7、9、2、4、6、8、10第二次測量順序：10、9、8、7、6、5、4、3、2、1第三次測量順序：2、4、6、8、10、1、3、5、7、9表1尿中鎘均勻性測定結(jié)果(μg/L)石墨爐樣號 測定次數(shù)123110.099.919.84210.289.9510.30310.2510.1010.3049.689.869.96510.369.549.96610.2210.0310.2879.769.8410.30810.3810.199.8699.849.6710.32109.869.9910.41總平均值10.04標(biāo)準(zhǔn)偏差0.24表2單因素方差分析結(jié)果方差來源自由度平方和均方F單元間90.4650.0520.825重復(fù)測定201.2510.063F臨界值F0.05(9,20)=2.39。計算的F值為0.825，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，該批次尿中鎘QCM是均勻的。定值：將均勻性評估研究中獲得的10瓶尿中鎘QCM的總平均值作為指示值，3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差建立指示值的控制限，本批次尿中鎘QCM的指示值及控制限為：10.04±0.72（μg/L）。穩(wěn)定性評估：-18℃冷凍條件下按照0、1個月、3個月、6個月、12個月存放時間（存放條件及時間點的選擇可參考附錄B），各時間點取出6個樣本恢復(fù)至室溫，加入5mL純水，待溶解后充分混勻，靜置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法或GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，每個樣品重復(fù)測定3次進行測定，測定結(jié)果見表3。各時間點檢測結(jié)果與均勻性檢驗的總體均值運用t檢驗法進行統(tǒng)計分析，如無顯著性差異，此時間點前該批次尿中鎘QCM的穩(wěn)定性符合要求。表3尿中鎘穩(wěn)定性測定結(jié)果(μg/L)樣號 存放時間（月）013612110.0410.17210.20310.19410.1359.50610.31平均值10.08標(biāo)準(zhǔn)偏差0.29t0.31按下式計算t值：t=式中：x─n次測量的平均值；μ─參考值(指示值)；n─測量次數(shù)；S─n次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n≥6。表3結(jié)果顯示，室溫條件下存放1個月、3個月、6個月、12個月后，各時間點測定6個樣本計算所得t值均小于臨界值t(0.05,5)=2.57，各時間點平均值與參考值之間無顯著性差異，表明室溫條件下該批次尿中鎘QCM至少可穩(wěn)定存放12個月。復(fù)溶樣本穩(wěn)定性評估：取6份尿中鎘QCM恢復(fù)至室溫，加入5mL純水復(fù)溶，待溶解后充分混勻，靜置20min，于4℃冰箱保存，分別于第1天、第7天、第15天、第30天取出，恢復(fù)至室溫后，混勻，按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法或GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，每個樣品重復(fù)測定3次，測定結(jié)果見表4。各時間點檢測結(jié)果與均勻性檢驗的總體均值運用t檢驗法進行統(tǒng)計分析，如無顯著性差異，此時間點前復(fù)溶樣本尿中鎘QCM的穩(wěn)定性符合要求。表4復(fù)溶樣本尿中鎘穩(wěn)定性測定結(jié)果(μg/L)樣號 存放時間（天）0171530110.0410.0010.109.879.87210.1110.0410.4510.45310.0210.5010.1310.13410.099.8110.3210.32510.289.8810.3310.33610.4410.119.719.71平均值10.1510.0710.1310.13標(biāo)準(zhǔn)偏差0.170.240.290.29t1.560.270.700.70按下式計算t值：t=式中：x─n次測量的平均值；μ─參考值(指示值)；n─測量次數(shù)；S─n次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n≥6。表4結(jié)果顯示，于4℃冰箱件下存放1天、7天、14天、30天后，各時間點測定6個樣本計算所得t值均小于臨界值t(0.05,5)=2.57，各時間點平均值與參考值之間無顯著性差異，表明于4℃冰箱件下存放的復(fù)溶樣本尿中鎘QCM至少可穩(wěn)定存放1個月。樣品信息文件：為該批次尿中鎘的QCM逐一貼上帶有編號、“尿中鎘”等信息的標(biāo)簽，再將制備日期、貯存條件、有效期、預(yù)期的用途、指示值、使用的安全注意事項等信息以文件形式匯總，作為該批次QCM的信息文件。

（資料性）

常見生物樣本類QCM貯存條件及有效期參考信息序號名稱存放條件有效期1尿中鎘-18℃12個月2尿中鉛-18℃12個月3尿中砷-18℃12個月4尿中氟-18℃12個月5牛血中鉛/鎘-18℃12個月

（資料性）

生物樣本類QCM真空干燥參考條件預(yù)凍：-40℃12h無真空主干燥：-40℃12h<10mbar-35℃6h<10mbar-25℃6h<10mbar-20℃6h<10mbar-10℃10h<10mbar-5℃5h<10mbar0℃10h<10mbar終末干燥：5℃3h<10mbar10℃3h<10mbar15℃3h<10mbar20℃2h<10mbar30℃2h<10mbar地方標(biāo)準(zhǔn)編制說明一、目的意義隨著機構(gòu)改革的推進和新版《中華人民共和國職業(yè)病防治法》的施行，我省于2019-2023年連續(xù)5年分別通過現(xiàn)場核查、人員考核、盲樣考核、實驗室比對等形式，對全省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機構(gòu)實驗室進行了現(xiàn)狀調(diào)查，通過對結(jié)果數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)我省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機構(gòu)實驗室存在部分類別項目檢測能力有待提升，部分實驗室未嚴(yán)格按照《職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機構(gòu)檢測工作規(guī)范》（下稱“規(guī)范”）規(guī)定要求采取必要質(zhì)量控制措施等問題。規(guī)范要求每批樣品測定前及測定過程中均需要通過質(zhì)量控制樣品（QCM）的測定來判斷是否符合質(zhì)控要求，單個項目每批次樣品測定需要QCM兩個以上。規(guī)范明確QCM可通過外購或自制獲得，省內(nèi)暫無相關(guān)產(chǎn)品供應(yīng)單位，國內(nèi)主要供應(yīng)商為國家疾控職業(yè)衛(wèi)生所、國家衛(wèi)健委職研中心、廣東省職防院等三家單位，單價在130元左右，按照實驗室年平均使用量800份估算，外購QCM需要10萬元左右，成本較高。機構(gòu)實驗室又普遍存在自制能力不足情況，導(dǎo)致部分實驗室在檢測過程中QCM未能按規(guī)范足量使用，制約了實驗室檢測能力的提升，亟需制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對省內(nèi)相關(guān)實驗室自制QCM進行規(guī)范和指引，補足其QCM自制能力，促進QCM的使用，進而提升我省相關(guān)機構(gòu)實驗室檢測質(zhì)量、能力；新標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行也可促進我省培育出一批具備規(guī)范制備QCM能力的實驗室，為盡快推動我省自有高水平QCM供應(yīng)商的產(chǎn)生夯實技術(shù)基礎(chǔ)。標(biāo)準(zhǔn)附錄部分通過示例詳細(xì)描述了此類QCM材料準(zhǔn)備、加料封裝、均勻性評估、定值、穩(wěn)定性評估、具體數(shù)據(jù)處理、信息文件書寫等過程，一般此類實驗室均具備研制基礎(chǔ)條件，可操作性較強。申請單位江蘇省疾病預(yù)防控制中心（江蘇省公共衛(wèi)生研究院）是江蘇省衛(wèi)生地方標(biāo)準(zhǔn)掛靠單位，國內(nèi)率先成立江蘇省地方衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)委員會。中心“十三五”期間承擔(dān)國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)等各類標(biāo)準(zhǔn)超過50項，有豐富的標(biāo)準(zhǔn)研制、評估能力和經(jīng)驗。單位每年用于標(biāo)準(zhǔn)制定的經(jīng)費在100萬元左右。第一起草人承擔(dān)了近4年我省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機構(gòu)實驗室比對工作樣品制備工作。經(jīng)濟效益：本標(biāo)準(zhǔn)的制訂、實施可有力促進我省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機構(gòu)實驗室逐步具備QCM自制能力，按照單個職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機構(gòu)實驗室每周需使用20份，年使用量800份估算，可為省內(nèi)實驗室節(jié)約外購QCM費用10萬元左右，全省現(xiàn)有該類實驗室100余家，預(yù)計可為省內(nèi)相關(guān)企事業(yè)單位節(jié)約外購QCM費用1000萬元。社會效益：QCM制備標(biāo)準(zhǔn)的制訂實施可對省內(nèi)相關(guān)實驗室自制QCM進行規(guī)范和指引，補足其QCM自制能力，促進QCM的使用，進而提升我省相關(guān)機構(gòu)實驗室檢測質(zhì)量、能力；保證我省工作場所職業(yè)衛(wèi)生監(jiān)測質(zhì)量，有力保障我省1500萬接觸職業(yè)病危害因素勞動者健康。新標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行也可促進我省培育出一批具備規(guī)范制備QCM能力的實驗室，為盡快推動我省自有高水平QCM供應(yīng)商的產(chǎn)生夯實技術(shù)基礎(chǔ)。二、任務(wù)來源《省市場監(jiān)管局關(guān)于下達2023年度江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)項目計劃的通知》（蘇市監(jiān)標(biāo)〔2023〕173號），由江蘇省疾病預(yù)防控制中心等單位申報的地方標(biāo)準(zhǔn)項目《職業(yè)衛(wèi)生實驗室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范》已通過江蘇省市場監(jiān)管局批準(zhǔn)獲得立項。三、編制過程按時間節(jié)點或工作進度簡述編制過程。2023年8月標(biāo)準(zhǔn)立項后，為廣泛吸收各利益相關(guān)方參與標(biāo)準(zhǔn)制定工作，凝練形成廣泛共識，充分保障標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量，推動標(biāo)準(zhǔn)后續(xù)應(yīng)用實施，牽頭單位就標(biāo)準(zhǔn)參與起草單位及起草人進行了公開征集，并對部分申請單位進行了現(xiàn)場評估，根據(jù)申請、評估情況，遴選南京市疾病預(yù)防控制中心等12家單位參與起草。2024年3月召開研制《職業(yè)衛(wèi)生實驗室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范》系列地方標(biāo)準(zhǔn)工作會議，探討研制方法，確定各子標(biāo)準(zhǔn)起草單位和起草人。標(biāo)準(zhǔn)第5部分：生物樣本類主要起草單位有：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、無錫市疾病預(yù)防控制中心、蘇州工業(yè)園區(qū)疾病防治中心、蘇州市疾病預(yù)防控制中心、東南大學(xué)。2024年3-4月儀器、材料、人員準(zhǔn)備，制備條件摸索。2024年5月-10月尿中鎘質(zhì)量控制樣品（QCM）制備，樣本定值、均勻性、穩(wěn)定性、存儲條件、運輸穩(wěn)定性等評估，完成《職業(yè)衛(wèi)生實驗室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范》的第5部分標(biāo)準(zhǔn)文本編寫、示例補充、編制說明編寫、征求意見匯總等工作。四、主要內(nèi)容本文件適用于職業(yè)衛(wèi)生實驗室研制質(zhì)量控制樣品（QCM）,對研制QCM的總體技術(shù)要求、研究步驟、制備過程、貯存/使用等內(nèi)容進行了規(guī)范，基本用戶是需要研制特定的QCM的實驗室人員。本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草，分為以下5個部分：——第1部分：固體吸附劑管類；——第2部分：濾料類；——第3部分：吸收液類；——第4部分：粉塵類（游離二氧化硅測定）；——第5部分：生物樣本類。五、技術(shù)指標(biāo)確定的依據(jù)起草組通過實地調(diào)研北京、廣東等國內(nèi)質(zhì)控樣研制單位、查閱GB/T15000標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則、CNAS-GL003-2018能力驗證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南、CNAS-GL005-2018實驗室內(nèi)部研制質(zhì)量控制樣品的指南等相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、指南，各子標(biāo)準(zhǔn)逐一開展試驗論證，專家論證等確立主要技術(shù)指標(biāo)。2024年3月，無錫市疾病預(yù)防控制中心成立了質(zhì)控樣品研制小組，進行了質(zhì)控品制備材料采購收集工作，對研制人員進行了質(zhì)控品制備物資準(zhǔn)備驗收、質(zhì)控品制備、質(zhì)控品定值、研制規(guī)范起草等相關(guān)環(huán)節(jié)的分工，收集比對單位的信息。2024年4月，進行分裝小瓶的本底驗收和冷凍干燥實驗條件的摸索?？疾炝?種不同樣品瓶本底，凍干過程中沸騰起泡效應(yīng)，最終選擇10mL西林瓶來儲存質(zhì)控品，驗收結(jié)果見表1。驗收方法:隨機抽取10個小瓶，其中加入純水5mL,加蓋靜置浸泡24小時，測定前于混勻儀上滾動混勻20min，按照目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)規(guī)定/推薦測定方法程序進行驗收，測定其中鎘含量。凍干過程中觀察沸騰起泡現(xiàn)象。表1分樣小瓶驗收結(jié)果不同類型的分裝小瓶鎘本底值ng沸騰起泡效應(yīng)10毫升聚乙烯塑料瓶0.010強10毫升西林瓶<0.005弱10毫升玻璃瓶0.045弱2.摸索了合適的尿鎘質(zhì)控品的冷凍干燥條件，見表2。表2尿鎘QCM真空干燥條件預(yù)凍：-40℃12h無真空主干燥：-40℃12h<10mbar-35℃6h<10mbar-25℃6h<10mbar-20℃6h<10mbar-10℃10h<10mbar-5℃5h<10mbar0℃10h<10mbar終末干燥：5℃3h<10mbar10℃3h<10mbar15℃3h<10mbar20℃2h<10mbar30℃2h<10mbar2024年5月，制備200瓶尿中鎘質(zhì)量控制樣本，利用石墨爐原子吸收光譜儀和電感耦合等離子體質(zhì)譜儀考察了尿鎘質(zhì)控品的均勻性，進行了初步定值，并對兩種測定方法進行了比較。1.均勻性評估：從該批次尿中鎘QCM中隨機抽取10瓶用于均勻性檢驗。取尿鎘QCM恢復(fù)至室溫，加入5mL純水，待溶解后充分混勻，靜置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法以及GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，每個樣品重復(fù)測定3次，測定結(jié)果見表3。樣品的重復(fù)測定應(yīng)按隨機次序進行（可參考如下示例），以降低測量飄移對均勻性評估的影響。采用單因素方差分析法對測定結(jié)果進行統(tǒng)計處理，樣品間均值無顯著性差異則表明樣品是均勻的，單因素方差分析結(jié)果見表2。示例：10個樣品，重復(fù)測量3次，適合的測量方案如下：第一次測量順序：1、3、5、7、9、2、4、6、8、10第二次測量順序：10、9、8、7、6、5、4、3、2、1第三次測量順序：2、4、6、8、10、1、3、5、7、91.1按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法進行測定，結(jié)果詳見表3、表4表3尿中鎘均勻性測定結(jié)果(μg/L)石墨爐法樣號 測定次數(shù)123110.099.919.84210.289.9510.30310.2510.1010.3049.689.869.96510.369.549.96610.2210.0310.2879.769.8410.30810.3810.199.8699.849.6710.32109.869.9910.41總平均值10.04標(biāo)準(zhǔn)偏差0.24表4單因素方差分析結(jié)果方差來源自由度平方和均方F單元間90.4650.0520.825重復(fù)測定201.2510.063F臨界值F0.05(9,20)=2.39。計算的F值為0.825，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，該批次尿中鎘QCM是均勻的。定值：將均勻性評估研究中獲得的10瓶尿中鎘QCM的總平均值作為指示值，3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差建立指示值的控制限，本批次尿中鎘QCM的指示值及控制限為：10.04±0.72（μg/L）。1.2按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，結(jié)果詳見表5、表6表5尿中鎘均勻性測定結(jié)果(μg/L)ICP-MS法樣號 測定次數(shù)123110.0910.0910.09210.1310.1210.15310.2310.1610.10410.2310.2210.08510.2810.2110.16610.1910.0910.09710.1810.1410.10810.1310.1410.03910.2410.2610.191010.1410.2210.11總平均值10.15標(biāo)準(zhǔn)偏差0.063表6單因素方差分析結(jié)果方差來源自由度平方和均方F單元間90.0570.0062.26重復(fù)測定200.0560.003F臨界值F0.05(9,20)=2.39。計算的F值為2.26，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，該批次尿中鎘QCM是均勻的。定值：將均勻性評估研究中獲得的10瓶尿中鎘QCM的總平均值作為指示值，3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差建立指示值的控制限，本批次尿中鎘QCM的指示值及控制限為：10.15±0.18（μg/L）。1.3對石墨爐原子吸收光譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法檢測結(jié)果進行方差分析。F臨界值F0.05(29,30)=1.85。計算的F值為0.87，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，制得的尿中鎘QCM通過兩種方法的檢測結(jié)果具有可比性。2.進行穩(wěn)定性評估2.1保存穩(wěn)定性評估:-18℃條件下按照0、1個月、3個月、6個月、12個月存放時間（存放條件及時間點的選擇可參考附錄B），各時間點取出6個樣本恢復(fù)至室溫，加入5mL純水，待溶解后充分混勻，靜置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法以及GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定或者第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，每個樣品重復(fù)測定3次進行測定，測定結(jié)果見表3。各時間點檢測結(jié)果與均勻性檢驗的總體均值運用t檢驗法進行統(tǒng)計分析，如無顯著性差異，此時間點前該批次尿中鎘QCM的穩(wěn)定性符合要求。結(jié)果見表7表7尿中鎘穩(wěn)定性測定結(jié)果(μg/L)樣號 存放時間（月）013612110.0410.17210.20310.19410.1359.50610.31平均值10.08標(biāo)準(zhǔn)偏差0.29t0.31按下式計算t值：t=式中：QUOTExx─n次測量的平均值；QUOTEμμ─參考值(指示值)；n─測量次數(shù)；S─n次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n≥6。表7結(jié)果顯示，室溫條件下存放1個月、3個月、6個月、12個月后，各時間點測定6個樣本計算所得t值均小于臨界值t(0.05,5)=2.57，各時間點平均值與參考值之間無顯著性差異，表明室溫條件下該批次尿中鎘QCM至少可穩(wěn)定存放12個月。2.2復(fù)溶樣本穩(wěn)定性評估:取6份尿中鎘QCM恢復(fù)至室溫，加入5mL純水復(fù)溶，待溶解后充分混勻，靜置20min，于4℃冰箱保存，分別于第1天、第7天、第15天、第30天取出，恢復(fù)至室溫后，混勻，按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法或GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進行測定，每個樣品重復(fù)測定3次，測定結(jié)果見表8。表8復(fù)溶樣本尿中鎘穩(wěn)定性測定結(jié)果(μg/L)樣號 存放時間（天）0171530110.0410.0010.109.879.87210.1110.0410.4510.45310.0210.5010.1310.13410.099.8110.3210.32510.289.8810.3310.33610.4410.119.719.71平均值10.1510.0710.1310.13標(biāo)準(zhǔn)偏差0.170.240.290.29t1.560.270.700.70按下式計算t值：t=式中：QUOTExx─n次測量的平均值；QUOTEμμ─參考值(指示值)；n─測量次數(shù)；S─n次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n≥6。表8結(jié)果顯示，于4℃冰箱件下存放1天、7天、14天、30天后，各時間點測定6個樣本計算所得t值均小于臨界值t(0.05,5)=2.57，各時間點平均值與參考值之間無顯著性差異，表明于4℃冰箱件下存放的復(fù)溶樣本尿中鎘QCM至少可穩(wěn)定存放1個月。2.3運輸穩(wěn)定性評估：3.為該批次尿中鎘的QCM逐一貼上帶有編號、“尿中鎘”等信息的標(biāo)簽，再將制備日期、貯存條件、有效期、預(yù)期的用途、指示值、使用的安全注意事項等信息以文件形式匯總，作為該批次QCM的信息文件。（4）將制備的尿鎘質(zhì)控品8瓶及SeronormTMTraceElementsurineL-2(LOT1403081)1瓶分發(fā)給蘇州市疾控中心、蘇州工業(yè)園區(qū)疾控中心、東南大學(xué)三家單位進行檢測結(jié)果驗證，樣本平行測定3次。(寄送日期：2024.5.28)四家單位采用的檢測儀器見表9表9四家單位使用儀器情況