動物實驗環(huán)境監(jiān)測辦法一、總則

動物實驗環(huán)境監(jiān)測是保障實驗動物健康、確保實驗結(jié)果準確性和可靠性的重要環(huán)節(jié)。通過建立科學、規(guī)范的環(huán)境監(jiān)測體系，可以及時發(fā)現(xiàn)并糾正環(huán)境中的不利因素，從而提高動物實驗的質(zhì)量和效率。本辦法旨在明確動物實驗環(huán)境監(jiān)測的基本原則、監(jiān)測內(nèi)容、監(jiān)測方法、監(jiān)測頻率以及數(shù)據(jù)處理等要求，為動物實驗環(huán)境的規(guī)范化管理提供依據(jù)。

（一）監(jiān)測原則

1.科學性：監(jiān)測方法應(yīng)符合科學原理，確保監(jiān)測數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。

2.完整性：監(jiān)測內(nèi)容應(yīng)全面覆蓋動物實驗環(huán)境的各個關(guān)鍵因素，確保不遺漏重要指標。

3.可行性：監(jiān)測方案應(yīng)兼顧經(jīng)濟性和實用性，確保在有限的資源條件下達到監(jiān)測目的。

4.動態(tài)性：監(jiān)測結(jié)果應(yīng)定期分析，并根據(jù)實際情況調(diào)整監(jiān)測方案，形成動態(tài)管理機制。

（二）監(jiān)測內(nèi)容

1.空氣質(zhì)量：包括溫度、濕度、空氣流速、氨氣濃度、二氧化碳濃度、粉塵濃度等。

2.水質(zhì)：包括飲用水和實驗用水的pH值、濁度、電導(dǎo)率、總有機碳、重金屬含量等。

3.環(huán)境衛(wèi)生：包括動物房間的清潔度、消毒效果、廢棄物處理等。

4.設(shè)備運行狀態(tài)：包括通風系統(tǒng)、空調(diào)系統(tǒng)、供暖系統(tǒng)等設(shè)備的運行情況。

二、監(jiān)測方法

（一）空氣質(zhì)量監(jiān)測

1.溫度和濕度：使用溫濕度計進行實時監(jiān)測，記錄每日的最低值、最高值和平均值。

2.空氣流速：使用風速儀測量動物房間的空氣流速，確保其在適宜范圍內(nèi)（例如，0.2-0.5米/秒）。

3.氨氣濃度：使用氨氣檢測儀進行實時監(jiān)測，氨氣濃度應(yīng)控制在0.5ppm以下。

4.二氧化碳濃度：使用二氧化碳檢測儀進行實時監(jiān)測，二氧化碳濃度應(yīng)控制在1000ppm以下。

5.粉塵濃度：使用粉塵檢測儀進行定期監(jiān)測，粉塵濃度應(yīng)控制在10μg/m3以下。

（二）水質(zhì)監(jiān)測

1.飲用水：使用水質(zhì)檢測儀進行每日監(jiān)測，主要指標包括pH值（6.5-7.5）、濁度（<1NTU）、電導(dǎo)率（<500μS/cm）、總有機碳（<2mg/L）。

2.實驗用水：使用水質(zhì)檢測儀進行每周監(jiān)測，主要指標包括pH值（5.0-7.0）、濁度（<2NTU）、電導(dǎo)率（<1000μS/cm）、重金屬含量（<0.1mg/L）。

（三）環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測

1.清潔度：使用表面消毒劑進行定期擦拭，并使用無菌棉簽進行采樣，檢測細菌總數(shù)（<100cfu/cm2）。

2.消毒效果：使用消毒劑進行定期消毒，并使用無菌瓊脂平板進行采樣，檢測消毒后的細菌存活率（<1%）。

3.廢棄物處理：定期檢查廢棄物處理設(shè)施，確保廢棄物分類準確、處理及時。

（四）設(shè)備運行狀態(tài)監(jiān)測

1.通風系統(tǒng)：使用風量計和壓力計進行定期監(jiān)測，確保通風系統(tǒng)的正常運行。

2.空調(diào)系統(tǒng)：使用溫度和濕度記錄儀進行定期監(jiān)測，確?？照{(diào)系統(tǒng)的制冷和制熱效果。

3.供暖系統(tǒng)：使用溫度記錄儀進行定期監(jiān)測，確保供暖系統(tǒng)的供暖效果。

三、監(jiān)測頻率

（一）空氣質(zhì)量監(jiān)測

1.溫度和濕度：每日監(jiān)測一次。

2.空氣流速：每周監(jiān)測一次。

3.氨氣濃度：每日監(jiān)測一次。

4.二氧化碳濃度：每周監(jiān)測一次。

5.粉塵濃度：每月監(jiān)測一次。

（二）水質(zhì)監(jiān)測

1.飲用水：每日監(jiān)測一次。

2.實驗用水：每周監(jiān)測一次。

（三）環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測

1.清潔度：每周監(jiān)測一次。

2.消毒效果：每月監(jiān)測一次。

3.廢棄物處理：每日檢查一次。

（四）設(shè)備運行狀態(tài)監(jiān)測

1.通風系統(tǒng)：每月監(jiān)測一次。

2.空調(diào)系統(tǒng)：每月監(jiān)測一次。

3.供暖系統(tǒng)：每月監(jiān)測一次。

四、數(shù)據(jù)處理

1.數(shù)據(jù)記錄：使用電子記錄表格或?qū)Ｓ帽O(jiān)測軟件進行數(shù)據(jù)記錄，確保數(shù)據(jù)的完整性和準確性。

2.數(shù)據(jù)分析：定期對監(jiān)測數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，識別環(huán)境中的不利因素，并采取相應(yīng)的改進措施。

3.報告編制：每月編制環(huán)境監(jiān)測報告，報告內(nèi)容應(yīng)包括監(jiān)測結(jié)果、分析結(jié)論以及改進措施。

4.數(shù)據(jù)存檔：將監(jiān)測數(shù)據(jù)和分析報告進行存檔，存檔期限不少于三年。

**二、監(jiān)測方法**

（一）空氣質(zhì)量監(jiān)測

1.溫度和濕度：

(1)監(jiān)測設(shè)備：選用精度不低于±0.5℃的溫度計和±2%RH（相對濕度）的濕度計。建議使用帶有數(shù)據(jù)記錄功能的設(shè)備，以便自動記錄時間戳和數(shù)值。

(2)測點選擇：在動物實驗區(qū)域內(nèi)選擇具有代表性的地點進行布點。通常應(yīng)在動物飼養(yǎng)區(qū)、操作區(qū)、清潔區(qū)等不同區(qū)域分別設(shè)點。每個區(qū)域至少設(shè)置3個測點，以獲取該區(qū)域平均狀況。測點應(yīng)遠離通風口、門口等可能產(chǎn)生局部氣流變化的區(qū)域，距離地面高度通常為1.5米。

(3)監(jiān)測方法：每日在固定時間點（如早、中、晚各一次）進行讀數(shù)。對于配備數(shù)據(jù)記錄功能的設(shè)備，需定期檢查設(shè)備運行狀態(tài)并導(dǎo)出數(shù)據(jù)。記錄時需注明具體時間、地點、設(shè)備編號等信息。

(4)結(jié)果判讀：將監(jiān)測結(jié)果與標準要求進行對比（例如，恒溫動物房溫度通常要求維持在20-26℃，濕度要求維持在40%-70%）。若超出范圍，需立即調(diào)查原因并采取調(diào)控措施（如調(diào)整空調(diào)或加濕/除濕設(shè)備）。

2.空氣流速：

(1)監(jiān)測設(shè)備：使用熱式或超聲波風速儀，精度應(yīng)滿足實驗要求（例如，±0.05m/s）。設(shè)備需定期校準。

(2)測點選擇：在需要監(jiān)測氣流速度的區(qū)域（如動物籠架上方、操作孔附近），選擇代表性的高度和位置進行測量。通常在動物活動區(qū)域中心高度（如1.5米）進行測量。

(3)監(jiān)測方法：在通風系統(tǒng)運行穩(wěn)定時，進行多次（如5-10次）讀數(shù)取平均值。記錄測量時間、地點、設(shè)備讀數(shù)、通風系統(tǒng)運行狀態(tài)（如風機開關(guān)）等信息。

(4)結(jié)果判讀：將監(jiān)測結(jié)果與實驗動物種類及實驗要求相關(guān)的標準進行對比（例如，小鼠籠養(yǎng)環(huán)境推薦空氣流速為0.2-0.5m/s）。過高或過低的氣流都可能對動物健康和實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。

3.氨氣濃度：

(1)監(jiān)測設(shè)備：優(yōu)先選用電化學氨氣傳感器或半導(dǎo)體氨氣傳感器，具有實時監(jiān)測和報警功能者為佳。傳感器需定期校準，并根據(jù)使用說明進行維護，避免中毒或失效。

(2)測點選擇：在動物飼養(yǎng)區(qū)、籠具下方、通風不良區(qū)域等氨氣可能積聚的地方設(shè)置監(jiān)測點。同樣建議在關(guān)鍵區(qū)域設(shè)置多個測點，并記錄每個測點的具體位置。

(3)監(jiān)測方法：可進行連續(xù)實時監(jiān)測，并設(shè)定報警閾值（例如，短期平均值超過0.5ppm或瞬時值超過1ppm時報警）。同時，每日至少進行一次定點采樣并使用標準比色管進行比對測定，以校準實時監(jiān)測數(shù)據(jù)。

(4)結(jié)果判讀：監(jiān)測結(jié)果應(yīng)低于國家或行業(yè)標準限值（例如，許多指南建議將氨氣濃度控制在0.5ppm以下）。超標時需立即加強通風，清理濕墊料，檢查飼料和飲水，并排查是否存在尿糞積聚等問題。

4.二氧化碳濃度：

(1)監(jiān)測設(shè)備：使用非色散紅外（NDIR）原理的二氧化碳傳感器，確保測量范圍和精度滿足需求（例如，測量范圍0-5000ppm，精度±50ppm）。

(2)測點選擇：在動物房內(nèi)代表空氣交換效率的位置進行布點，通常在人員活動區(qū)域和動物飼養(yǎng)區(qū)域的交集處。對于層流潔凈動物房，則在操作區(qū)域中心。

(3)監(jiān)測方法：可進行連續(xù)實時監(jiān)測，并記錄數(shù)據(jù)。建議每日進行一次校準（使用標準氣體）。

(4)結(jié)果判讀：監(jiān)測結(jié)果應(yīng)低于設(shè)定限值，通常建議低于1000ppm。二氧化碳濃度升高通常意味著通風不足或動物密度過高，需評估并調(diào)整。

5.粉塵濃度：

(1)監(jiān)測設(shè)備：使用激光散射式空氣粒子計數(shù)器，能夠區(qū)分不同粒徑的顆粒物（如PM2.5,PM10）。設(shè)備需定期校準。

(2)測點選擇：在動物房內(nèi)清潔度要求較高的區(qū)域（如操作區(qū)、動物飼養(yǎng)區(qū)非籠底區(qū)域）進行測量。測點應(yīng)遠離塵源（如門口、飼料投喂口）。

(3)監(jiān)測方法：在代表性的時間點進行采樣測量，記錄不同粒徑段的顆粒物濃度。對于潔凈動物房，需按照潔凈度等級要求進行監(jiān)測。

(4)結(jié)果判讀：將監(jiān)測結(jié)果與潔凈度等級標準（如ISO14644或相應(yīng)機構(gòu)規(guī)定）進行對比。例如，ISO7級潔凈室要求空氣中≥0.5μm的粒子數(shù)≤3500個/立方英尺（約1960個/立方米），≥5μm的粒子數(shù)≤200個/立方英尺（約112個/立方米）。超標需查找塵源并改善清潔程序。

（二）水質(zhì)監(jiān)測

1.飲用水：

(1)監(jiān)測項目：pH值、濁度、電導(dǎo)率、總有機碳（TOC）、菌落總數(shù)（CFU/mL）、總硬度、余氯（如適用）。

(2)監(jiān)測設(shè)備與頻率：

-pH計：精度0.1，每日使用標準緩沖液校準一次，并監(jiān)測至少3個點。

-濁度計：使用標準濁度液校準，每日監(jiān)測至少3個點。

-電導(dǎo)率儀：使用標準溶液校準，每日監(jiān)測至少3個點。

-TOC分析儀：按需使用標準物質(zhì)校準，每周或根據(jù)儀器穩(wěn)定性監(jiān)測至少2-3次。

-菌落總數(shù)：使用標準平板計數(shù)法，每周監(jiān)測至少3個點。

-總硬度：使用滴定法或儀測法，每月監(jiān)測至少2次。

-余氯：如使用含氯消毒，每日監(jiān)測至少2次。

(3)樣品采集：在動物房內(nèi)直接飲用水的龍頭或取水點采集樣品。采樣前需沖洗龍頭30秒-1分鐘。樣品采集后應(yīng)盡快分析或在冷藏條件下保存。

(4)結(jié)果判讀：所有指標均需對照相關(guān)標準（如《生活飲用水衛(wèi)生標準》或?qū)嶒瀯游镲嬘盟畼藴剩＠?，pH值通常要求在6.5-7.5之間，濁度<1NTU，電導(dǎo)率<500μS/cm，菌落總數(shù)<1000CFU/mL（具體限值需根據(jù)動物種類和實驗要求確定）。

2.實驗用水（如純水、去離子水）：

(1)監(jiān)測項目：pH值、濁度、電導(dǎo)率、總有機碳（TOC）、菌落總數(shù)、電阻率（或電導(dǎo)率的倒數(shù)）、金屬離子含量（如適用）。

(2)監(jiān)測設(shè)備與頻率：

-pH計、濁度計、電導(dǎo)率儀：同飲用水監(jiān)測，校準頻率和監(jiān)測點數(shù)根據(jù)要求確定。

-TOC分析儀：按需校準和監(jiān)測。

-菌落總數(shù)：使用標準平板計數(shù)法，每周監(jiān)測至少2-3次。

-電阻率：使用高精度電阻率儀，每日監(jiān)測至少3個點，或根據(jù)純水系統(tǒng)穩(wěn)定性監(jiān)測。

-金屬離子：使用原子吸收光譜法或電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-OES）等，每月監(jiān)測至少一次，監(jiān)測項目根據(jù)實驗需求確定（如鉛、銅、鋅等）。

(3)樣品采集：在純水器出水口或使用點采集樣品。采樣方法和保存要求同飲用水。

(4)結(jié)果判讀：對照實驗所需的純水標準（如純水國家標準或?qū)嶒炇覂?nèi)部標準）。例如，電阻率通常要求>1MΩ·cm，電導(dǎo)率<0.5μS/cm，菌落總數(shù)<1CFU/mL。具體限值需根據(jù)實驗需求確定。

（三）環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測

1.清潔度：

(1)監(jiān)測方法：采用無菌棉簽擦拭采樣法。

-采樣區(qū)域：動物籠具內(nèi)壁、地面、籠架、飼喂器、飲水器、操作臺面、環(huán)境表面（如墻角、設(shè)備表面）等。

-采樣操作：使用無菌棉簽在規(guī)定面積（如5cm×5cm）內(nèi)擦拭，確保覆蓋整個區(qū)域。然后將有采樣面的棉簽放入含適當無菌稀釋液的試管中，充分震蕩混勻。

-樣品處理：將樣品進行梯度稀釋，涂布在合適的瓊脂平板上（如營養(yǎng)瓊脂、胰酪大豆胨瓊脂）。

-菌落計數(shù)：將平板在37℃培養(yǎng)48-72小時，計數(shù)菌落形成單位（CFU）。

(2)頻率：動物飼養(yǎng)區(qū)表面（籠具等）每周監(jiān)測至少2-3次；環(huán)境表面（墻角、操作臺等）每月監(jiān)測至少1次。

(3)結(jié)果判讀：將菌落計數(shù)結(jié)果與標準對比（例如，清潔級動物房表面<100CFU/cm2）。超標需增加清潔頻次或檢查清潔方法有效性。

2.消毒效果：

(1)監(jiān)測方法：采用表面取樣法評估消毒劑使用后的效果。

-采樣區(qū)域：在消毒處理后1-2小時，選擇消毒過的表面（如操作臺、地面）。

-采樣操作：使用無菌棉簽按清潔度監(jiān)測方法進行擦拭采樣。

-樣品處理與計數(shù)：同清潔度監(jiān)測。

(2)頻率：每月監(jiān)測至少2次，或每次進行大規(guī)模清潔消毒后進行監(jiān)測。

(3)結(jié)果判讀：評估消毒后的細菌存活率。理想情況下，應(yīng)檢測不到活菌或菌落數(shù)極低（如<1CFU/cm2）。若仍有細菌生長，需評估消毒劑濃度、作用時間、作用溫度、被消毒物表面材質(zhì)等因素，并調(diào)整消毒方案。

3.廢棄物處理：

(1)監(jiān)測內(nèi)容：

-廢棄物分類：檢查是否按照規(guī)定分類（如感染性廢棄物、損傷性廢棄物、化學廢棄物、普通廢棄物），分類標簽是否清晰、規(guī)范。

-貯存狀態(tài)：檢查廢棄物貯存容器是否密閉、防滲漏，是否放置在指定區(qū)域，是否遠離動物飼養(yǎng)區(qū)和食品區(qū)。

-處理流程：檢查廢棄物從產(chǎn)生、收集、轉(zhuǎn)運到最終處置的整個流程是否符合規(guī)范。包括內(nèi)部轉(zhuǎn)運是否使用專用工具和路線，是否定期聯(lián)系有資質(zhì)的機構(gòu)進行最終處理。

-清潔消毒：檢查廢棄物處理區(qū)域的清潔消毒情況。

(2)頻率：每日巡查檢查，確保及時清理動物排泄物和更換墊料等。

(3)記錄：建立廢棄物處理記錄臺賬，記錄廢棄物產(chǎn)生日期、種類、數(shù)量、轉(zhuǎn)運日期、接收單位等信息。

（四）設(shè)備運行狀態(tài)監(jiān)測

1.通風系統(tǒng)：

(1)監(jiān)測內(nèi)容：風量、風壓、新風量、過濾器堵塞情況。

(2)監(jiān)測設(shè)備：使用風量計、壓力計、風速儀、壓差計、溫度計、濕度計。

(3)監(jiān)測方法：

-定期（如每月）檢查通風系統(tǒng)（HVAC）運行參數(shù)：記錄送風量、回風量、新風量是否達到設(shè)計值或設(shè)定值。檢查正壓差是否維持在規(guī)定范圍（如潔凈動物房維持10-20Pa的正壓）。

-檢查送風溫度、濕度是否在設(shè)定范圍內(nèi)。

-定期（如每季度或根據(jù)更換周期）檢查空氣過濾器（初效、中效、高效）的壓差。壓差顯著升高通常意味著濾網(wǎng)堵塞。記錄濾網(wǎng)使用時間和更換情況。

(4)異常處理：發(fā)現(xiàn)風量不足、風壓異常、濾網(wǎng)堵塞等問題時，及時聯(lián)系維保人員進行檢修或更換。

2.空調(diào)系統(tǒng)：

(1)監(jiān)測內(nèi)容：制冷/制熱效果、送風溫度、送風濕度。

(2)監(jiān)測設(shè)備：溫度計、濕度計、溫度記錄儀。

(3)監(jiān)測方法：

-定期（如每月）檢查空調(diào)系統(tǒng)是否能夠維持實驗區(qū)域設(shè)定的溫度和濕度范圍。記錄不同時間點的溫度、濕度數(shù)據(jù)。

-檢查制冷或制熱功能是否正常。

-對于需要精確控溫控