甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞病理學(xué)診斷規(guī)范Diagnosisspecificationsforcytopathologyofthyroid中國(guó)檢驗(yàn)檢測(cè)學(xué)會(huì)發(fā)布I前言 II 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14樣本采集和制片 14.1樣本采集 14.2樣本處理及固定 24.3樣本送檢 24.4染色與封片 35細(xì)胞病理學(xué)診斷 36免疫細(xì)胞化學(xué)診斷 56.1細(xì)胞蠟塊制備 56.2免疫細(xì)胞化學(xué)染色 56.3免疫標(biāo)志物選擇 57分子檢測(cè) 67.1檢測(cè)樣本 67.2標(biāo)志物選擇 67.3檢測(cè)平臺(tái) 68診斷報(bào)告 6參考文獻(xiàn) 7本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由北京醫(yī)院和國(guó)軍標(biāo)(北京)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)研究院提出。本文件由中國(guó)檢驗(yàn)檢測(cè)學(xué)會(huì)歸口。本文件起草單位：北京醫(yī)院、國(guó)軍標(biāo)(北京)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)研究院、上海市第六人民醫(yī)院、山東省腫瘤醫(yī)院、濰坊市人民醫(yī)院、智泉生物科技(濟(jì)南)有限公司、北大荒集團(tuán)總醫(yī)院、北京實(shí)安科技有限公司、北京列伯實(shí)驗(yàn)室技術(shù)交流中心、北京醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)、北京中檢體外診斷工程技術(shù)研究中心、廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)集團(tuán)股份有限公司、廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司、廣州錕元方青醫(yī)療科技有限公司、齊齊哈爾市第一醫(yī)院、上海睿璟生物科技有限公司、臺(tái)州市中心醫(yī)院(臺(tái)州學(xué)院附屬醫(yī)院)。本文件主要起草人：劉東戈、劉萬(wàn)陽(yáng)、劉志艷、趙苗青、張恒明、武卿嘩、王艷峰、李娜、穆紅、戴其全、李然、楊婧、張淑正、蘇鉅銘、李勝男、陳文靜、洪跟東、陳龍飛、盧洪勝。1和診斷報(bào)告的要求。本文件適用于各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞進(jìn)行病理學(xué)診斷。2規(guī)范性引用文件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T42060醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室樣品采集、運(yùn)送、接收和處理的要求下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。在超聲引導(dǎo)下對(duì)可疑甲狀腺結(jié)節(jié)進(jìn)行穿刺，通過(guò)22G~23G穿刺細(xì)針(如注射針頭)抽吸獲取組織細(xì)胞樣本的一項(xiàng)病理診斷技術(shù)。4樣本采集和制片4.1樣本采集4.1.1操作人員資質(zhì)間宜控制在5s～10s。4.1.3適應(yīng)證a)超聲評(píng)估結(jié)果表現(xiàn)為：1)TI-RADS3類或4a類結(jié)節(jié)應(yīng)復(fù)查；3)直徑>1cm,超聲提示惡性征象的結(jié)節(jié)。b)直徑≤1cm的結(jié)節(jié)(應(yīng)符合以下任一條件):1)超聲提示惡性征象；23)童年期頸部放射線暴露史或輻射污染接觸史；4)甲狀腺癌家族史或甲狀腺癌綜合征病史；6)血清降鈣素水平異常升高。4.1.4禁忌證a)絕對(duì)禁忌證：2)穿刺路徑可能損傷鄰近重要器官(如大血管、氣管)。1)長(zhǎng)期服用抗凝藥物；2)患者無(wú)法配合(如頻繁咳嗽、吞咽);3)女性月經(jīng)期(應(yīng)評(píng)估出血風(fēng)險(xiǎn));4)穿刺部位感染(應(yīng)控制感染后操作)。4.1.5采集過(guò)程4.1.5.1應(yīng)對(duì)穿刺部位皮膚進(jìn)行消毒，在超聲引導(dǎo)下準(zhǔn)確定位病變區(qū)域。4.1.5.2使用穿刺針進(jìn)入病灶內(nèi)部，宜快速反復(fù)抽提3s~5s,利用針頭切割作用獲取細(xì)胞；拔出穿刺針后，應(yīng)立即按壓針孔止血。4.1.5.3超聲引導(dǎo)下甲狀腺FNA宜穿刺2次～3次。4.1.5.4初次開展FNA時(shí)，宜采用現(xiàn)場(chǎng)快速評(píng)估(rapidonsiteevaluation,ROSE)方法檢查樣本質(zhì)4.1.5.5宜保留針頭洗脫液，必要時(shí)用于甲狀腺球蛋白、降鈣素、甲狀旁腺素免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)和分子檢測(cè)等。4.2.1手工涂片法4.2.1.1應(yīng)使用符合QB/T5546要求的載玻片夾角用另一載玻片輕柔反向拉開。4.2.1.2涂片操作應(yīng)輕柔，不應(yīng)用力推拉或擠壓。4.2.1.3涂片應(yīng)均勻、厚度適中，使樣本在顯微鏡下呈現(xiàn)出平鋪、單層、完整的細(xì)胞形態(tài)。4.2.1.4制片后應(yīng)立即置于95%乙醇中固定5min后進(jìn)行染色。4.2.2.1穿刺完成后，應(yīng)立即將獲取物注入液基細(xì)胞保存液。4.2.2.2操作者應(yīng)觀察散布于保存液內(nèi)顆粒狀樣本量，如顆粒物較少，宜追加穿刺。4.2.2.3應(yīng)按照膜式或沉降式細(xì)胞相關(guān)制片流程處理液基細(xì)胞學(xué)樣本。4.2.3洗脫液制備4.2.3.1所有樣本均應(yīng)留取洗脫液備用。4.2.3.2可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室具體情況和具體用途，采用液基細(xì)胞保存液或細(xì)胞裂解液等進(jìn)行針頭涮洗。4.2.3.3手工涂片或液基細(xì)胞學(xué)樣本留樣后，應(yīng)將穿刺針頭在200μL裂解液或液基細(xì)胞保存液內(nèi)反復(fù)涮洗獲取洗脫液。4.3樣本送檢4.3.1應(yīng)詳細(xì)填寫患者基本信息和臨床資料，包括臨床診斷、相關(guān)病史、血清學(xué)檢查結(jié)果、超聲表現(xiàn)3及詳細(xì)的穿刺位置，并與樣本——對(duì)應(yīng)。4.3.2手工涂片、液基薄層細(xì)胞樣本瓶和細(xì)胞洗脫液樣本上均應(yīng)標(biāo)注患者姓名、身份標(biāo)識(shí)及穿刺部位等信息。4.3.3應(yīng)按照GB/T42060的要求建立樣本接收或拒收程序。4.4染色與封片4.4.1常規(guī)染色方法濕固定涂片時(shí)，全過(guò)程(固定、染色、脫水、封片)應(yīng)保持細(xì)胞涂片濕潤(rùn)，宜采用HE染色或巴氏染色。4.4.2快速評(píng)估染色方法細(xì)胞學(xué)穿刺質(zhì)量現(xiàn)場(chǎng)快速評(píng)估(如ROSE)時(shí)，宜采用干固定方法，采用羅曼諾夫斯基(Romanowsky)類染色，如吉姆薩(Giemsa)染色、瑞氏(Wright)染色等。5細(xì)胞病理學(xué)診斷甲狀腺FNA細(xì)胞病理學(xué)診斷分為6類，見(jiàn)表1。表1甲狀腺FNA細(xì)胞病理學(xué)診斷分類診斷類別惡性風(fēng)險(xiǎn)度(%)臨床處理說(shuō)明I類斷或標(biāo)本不●細(xì)胞量不足(濾泡上皮態(tài)不典型);●細(xì)胞團(tuán)數(shù)量不足(<6團(tuán)，每團(tuán)<10個(gè)完整濾泡上皮細(xì)胞);●涂片質(zhì)量差(固定不曲變形或富于血液樣●僅見(jiàn)少量囊性內(nèi)容物需判定為I類，宜重復(fù)穿刺次細(xì)針穿刺在報(bào)告中注明具體原因(如“血液稀釋”、“細(xì)良性病變符合良性濾泡結(jié)節(jié)、橋本甲臨床和超聲隨訪宜報(bào)告為良性病變，不宜報(bào)告為未見(jiàn)惡性腫瘤和II類意義不明確的不典型病變起源和非濾泡上皮細(xì)胞起源的病變，如甲狀腺濾泡旁細(xì)胞(C細(xì)胞)、淋巴細(xì)胞、甲狀旁腺細(xì)胞、間葉源性細(xì)志物檢測(cè)輔助明確診斷；如液，宜再次細(xì)子檢測(cè)該類為排除性診斷，其總4表1甲狀腺FNA細(xì)胞病理學(xué)診斷分類(續(xù))診斷類別惡性風(fēng)險(xiǎn)度(%)臨床處理說(shuō)明IV類性腫瘤甲狀腺腺葉切除或分子標(biāo)志物檢測(cè)輔助腫瘤，如細(xì)不規(guī)則或核透明嗜酸細(xì)胞腫酸細(xì)胞腫瘤具有75%的濾泡上皮細(xì)胞為嗜景一(可疑惡性腫瘤)乳頭狀癌確診斷甲狀腺近全切根據(jù)需要增加相免疫細(xì)胞化學(xué)輔助明確診斷可疑轉(zhuǎn)移癌樓要乳頭狀癌●乳頭狀/旋渦狀排列結(jié)構(gòu)”樣排列)●背景可見(jiàn)砂礫體2)核特征(至少滿足3項(xiàng)):●核增大(>紅細(xì)胞2倍)●核重疊/擁擠●縱行核溝("咖啡豆樣"核膜皺褶)●核內(nèi)假包涵體(邊界清晰的核內(nèi)空泡)●毛玻璃樣核染色質(zhì)●核膜增厚不規(guī)則3)高細(xì)胞型、柱狀細(xì)胞型、發(fā)風(fēng)險(xiǎn)高，基因型相對(duì)復(fù)雜甲狀腺近全切胞)的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，細(xì)胞量質(zhì)一免疫細(xì)胞化學(xué)有助于其診斷與鑒死等；胞癌一一5表1甲狀腺FNA細(xì)胞病理學(xué)診斷分類(續(xù))診斷類別惡性風(fēng)險(xiǎn)度(%)臨床處理說(shuō)明間變性癌同時(shí)具有上皮樣和梭形細(xì)胞形一一轉(zhuǎn)移性癌非甲狀腺源性細(xì)胞形態(tài)；一一單一形態(tài)異型淋巴細(xì)胞；一一包括篩狀桑葚型甲狀腺癌、副神經(jīng)節(jié)瘤、Langhans組織細(xì)胞增生癥、黏液表皮樣癌、分泌癌等一一注：我國(guó)II類惡性風(fēng)險(xiǎn)度45.5%～74.1%;“臨床處理規(guī)范應(yīng)結(jié)合其他檢查(如臨床甲狀腺球蛋白(部分病例)6表2特殊類型甲狀腺腫瘤免疫標(biāo)志物(續(xù))腫瘤類型間變性癌廣譜CK、P53BRAFV600E(突變檢測(cè))6.3.3轉(zhuǎn)移性癌、間葉源性腫瘤和淋巴瘤標(biāo)志物的選擇應(yīng)與其他器官一致。7.1.2分子檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者臨床、影像學(xué)及甲狀腺FNA細(xì)胞學(xué)結(jié)果進(jìn)行解讀。7.2標(biāo)志物選擇7.2.2如條件允許或形態(tài)學(xué)提示特定基因異?？赡?，可增加ALK、PPARG、PIK3CA、DICER1、AKT1等基因檢測(cè)。分子檢測(cè)平臺(tái)宜選用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)和二代測(cè)序。8.1診斷報(bào)告應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格證的病理醫(yī)師簽發(fā)，中間型病變和惡性病變的診斷應(yīng)由兩位細(xì)胞病理醫(yī)師復(fù)核確認(rèn)。8.2報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括：a)患者基本信息；b)穿刺解剖學(xué)位置(由操作醫(yī)師提供);e)診斷注釋；f)總結(jié)與建議(臨床處理指導(dǎo))。具綜合的甲狀腺細(xì)胞病理診斷報(bào)告。8.4每個(gè)診斷分類應(yīng)注明對(duì)應(yīng)的惡性風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)和基于循證醫(yī)學(xué)的臨床處理建議，參照表1。8.5可明確診斷的病變應(yīng)先出具細(xì)胞形態(tài)學(xué)報(bào)告，并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)及時(shí)發(fā)出。8.6分子檢測(cè)報(bào)告可單獨(dú)簽發(fā)，應(yīng)注明對(duì)應(yīng)的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本編號(hào)。8.7形態(tài)學(xué)診斷與分子檢測(cè)結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)出具補(bǔ)充報(bào)告并進(jìn)行綜合解釋。8.8Ⅲ類、IV類和V類病變可結(jié)合分子檢測(cè)結(jié)果或細(xì)胞免疫化學(xué)檢測(cè)綜合診斷。報(bào)告周期應(yīng)根據(jù)檢測(cè)方案相應(yīng)延長(zhǎng)。7[2]甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞病理學(xué)診斷專家共識(shí)編寫組，中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)細(xì)胞病理學(xué)組.甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞病理學(xué)診斷專家共識(shí)[J].中華病理學(xué)雜志，2023,52(5):441-446[3]上海市醫(yī)學(xué)會(huì)超聲醫(yī)學(xué)分會(huì)介入學(xué)組，上海市社聲專業(yè)委員會(huì).超聲引導(dǎo)下甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿