實(shí)驗(yàn)動(dòng)物餌料適應(yīng)性評(píng)估規(guī)程一、概述

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物餌料適應(yīng)性評(píng)估規(guī)程旨在系統(tǒng)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)特定餌料（如飼料、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑）的接受程度、消化吸收能力及生理反應(yīng)，確保餌料滿足實(shí)驗(yàn)需求，避免因餌料不適應(yīng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本規(guī)程適用于各類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（如小鼠、大鼠、豚鼠等）在不同研究場(chǎng)景下的餌料適應(yīng)性測(cè)試。

二、評(píng)估準(zhǔn)備

（一）實(shí)驗(yàn)材料

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選擇健康、同批次、同品系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，體重、年齡符合實(shí)驗(yàn)要求。

2.餌料：待評(píng)估的餌料，需明確成分、生產(chǎn)日期及保質(zhì)期。

3.對(duì)照餌料：常用標(biāo)準(zhǔn)餌料（如基礎(chǔ)飼料），用于對(duì)比測(cè)試。

4.檢測(cè)設(shè)備：天平（精度0.1g）、飲水器、糞便稱量裝置、生化分析儀等。

（二）實(shí)驗(yàn)環(huán)境

1.實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所：清潔、恒溫（20±2℃）、恒濕（50±10%）、通風(fēng)良好的動(dòng)物房。

2.標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)：動(dòng)物單籠飼養(yǎng)，自由攝食、飲水，光照周期12h/12h（光照/黑暗）。

三、評(píng)估方法

（一）短期適應(yīng)性測(cè)試（7天）

1.分組：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為餌料組（n≥10）和對(duì)照組（n≥10）。

2.攝食量記錄：每日定時(shí)記錄各組動(dòng)物攝食量，計(jì)算日均攝食量（g/動(dòng)物·天）。

3.糞便稱重：每日稱量糞便濕重，計(jì)算糞便排出率（%）。

4.生理指標(biāo)監(jiān)測(cè)：

(1)體重變化：每日稱重，計(jì)算體重增長(zhǎng)率（%）。

(2)水合狀態(tài)：觀察皮膚彈性、眼球凹陷程度。

(3)行為觀察：記錄活動(dòng)量、攝食姿勢(shì)等異常行為。

（二）中期生化評(píng)估（14天）

1.樣本采集：

(1)血液：麻醉后采集血清，檢測(cè)總蛋白、白蛋白、血糖、總膽固醇等指標(biāo)。

(2)糞便：收集24小時(shí)糞便，檢測(cè)氮、磷、鈣含量及糞便代謝率。

2.數(shù)據(jù)分析：對(duì)比餌料組與對(duì)照組生化指標(biāo)差異，采用t檢驗(yàn)或ANOVA評(píng)估統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05為顯著差異）。

（三）長(zhǎng)期觀察（30天）

1.生長(zhǎng)性能：記錄終體重、飼料轉(zhuǎn)化率（kg餌料/kg體重增長(zhǎng)）。

2.組織病理學(xué)檢查：處死動(dòng)物后，取肝臟、腎臟、腸道進(jìn)行HE染色，觀察細(xì)胞形態(tài)。

3.統(tǒng)計(jì)分析：采用重復(fù)測(cè)量方差分析評(píng)估餌料對(duì)多指標(biāo)的影響。

四、結(jié)果判定

（一）合格標(biāo)準(zhǔn)

1.攝食量：餌料組日均攝食量不低于對(duì)照組的85%。

2.體重增長(zhǎng)：餌料組體重增長(zhǎng)率與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）。

3.糞便性狀：糞便成型，水分含量40%-60%。

4.生化指標(biāo)：血清總蛋白、白蛋白等關(guān)鍵指標(biāo)在正常范圍內(nèi)。

（二）不合格處理

1.若餌料組攝食量顯著低于對(duì)照組（P<0.05），需更換餌料或調(diào)整配方。

2.異常行為或病理?yè)p傷需進(jìn)一步排查原料安全性。

五、注意事項(xiàng)

1.避免應(yīng)激：操作前對(duì)動(dòng)物進(jìn)行輕度麻醉，減少干擾。

2.數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化：所有檢測(cè)需同步進(jìn)行，減少環(huán)境因素影響。

3.倫理審批：實(shí)驗(yàn)前需通過(guò)機(jī)構(gòu)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（編號(hào)示例：XXAEC-2023-005）。

六、結(jié)論

**一、概述**

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物餌料適應(yīng)性評(píng)估規(guī)程旨在系統(tǒng)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)特定餌料（如飼料、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑）的接受程度、消化吸收能力及生理反應(yīng)，確保餌料滿足實(shí)驗(yàn)需求，避免因餌料不適應(yīng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本規(guī)程適用于各類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（如小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、猴子等）在不同研究場(chǎng)景下的餌料適應(yīng)性測(cè)試。通過(guò)科學(xué)、標(biāo)準(zhǔn)化的評(píng)估，為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供安全、營(yíng)養(yǎng)均衡的飲食支持，保障動(dòng)物福利，提升實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。本規(guī)程涵蓋了從實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、實(shí)施到結(jié)果判定和后續(xù)處理的全部流程。

**二、評(píng)估準(zhǔn)備**

（一）實(shí)驗(yàn)材料

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：

(1)來(lái)源：選擇信譽(yù)良好的供應(yīng)商，確保動(dòng)物健康、遺傳背景清晰、無(wú)特定病原體（SPF）或指定病原體（SD）證明（如適用）。

(2)品系與性別：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的品系（如C57BL/6小鼠、SD大鼠）和性別比例，通常采用同性別、同周齡動(dòng)物以減少個(gè)體差異。

(3)基礎(chǔ)信息：記錄動(dòng)物的體重范圍（如小鼠：20-25g）、年齡（如：6-8周齡）、健康狀況及編號(hào)。

2.餌料：

(1)待評(píng)估餌料：明確餌料名稱、生產(chǎn)廠家、批次號(hào)、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期及主要成分表。如為特殊配方餌料，需提供詳細(xì)配方說(shuō)明。

(2)對(duì)照餌料：通常選用符合AAFCO（美國(guó)飼料管理協(xié)會(huì)）或其他國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的常規(guī)基礎(chǔ)飼料，確保其營(yíng)養(yǎng)全面且穩(wěn)定。

3.輔助材料：

(1)飼料容器：適合動(dòng)物采食的飼料碗或料槽，材質(zhì)清潔、無(wú)毒、不易引發(fā)動(dòng)物損傷。

(2)飲水系統(tǒng)：清潔的飲水瓶或自動(dòng)飲水器，確保提供充足、清潔的飲用水。

(3)稱量設(shè)備：電子天平（精度0.1g或更高，用于稱量餌料和糞便）、普通天平（精度1g，用于籠具總重）。

(4)標(biāo)記工具：用于標(biāo)記籠具的記號(hào)筆或貼紙。

4.檢測(cè)設(shè)備：

(1)生化檢測(cè)：全自動(dòng)生化分析儀（用于檢測(cè)血液生化指標(biāo)）。

(2)微量元素分析儀（如需檢測(cè)糞便中的礦物質(zhì)含量）。

(3)組織病理學(xué)設(shè)備：顯微鏡、切片機(jī)、染色劑（如HE染色液）。

（二）實(shí)驗(yàn)環(huán)境

1.動(dòng)物設(shè)施：

(1)動(dòng)物房：環(huán)境清潔、通風(fēng)良好（換氣次數(shù)≥15次/小時(shí)），溫濕度控制穩(wěn)定（溫度20±2℃，濕度50±10%），光照周期12小時(shí)明/12小時(shí)暗（光照/黑暗）。

(2)欄具：符合動(dòng)物福利標(biāo)準(zhǔn)的籠具，如標(biāo)準(zhǔn)大小鼠籠（符合ISO或NRC標(biāo)準(zhǔn)），確保動(dòng)物有足夠的活動(dòng)空間和休息平臺(tái)。

2.標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)：

(1)飼養(yǎng)密度：遵循推薦的最大飼養(yǎng)密度，避免過(guò)度擁擠。

(2)清潔消毒：實(shí)驗(yàn)期間每日清潔飲水器，每周至少?gòu)氐浊鍧嵒\具和底襯1次，使用安全、對(duì)動(dòng)物無(wú)害的消毒劑。

(3)飲用水：提供符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)的清潔飲用水，每日更換。

**三、評(píng)估方法**

（一）短期適應(yīng)性測(cè)試（7天）

1.分組與編號(hào)：

(1)隨機(jī)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為待評(píng)估餌料組（n≥10-20，根據(jù)動(dòng)物種類和實(shí)驗(yàn)要求確定）和對(duì)照餌料組（n≥10-20）。

(2)對(duì)所有動(dòng)物進(jìn)行統(tǒng)一編號(hào)，并記錄初始體重、健康狀況。

2.飼喂實(shí)施：

(1)前期適應(yīng)：所有動(dòng)物首先使用對(duì)照餌料飼養(yǎng)3-5天，以消除換餌應(yīng)激。

(2)正式測(cè)試：從第4天起，餌料組更換為待評(píng)估餌料，對(duì)照組繼續(xù)使用對(duì)照餌料。確保所有動(dòng)物采食量達(dá)到飽和或接近飽和。

3.攝食量記錄：

(1)方法：每日定時(shí)（如上午9:00）記錄各組消耗的餌料量，精確到0.1g。

(2)計(jì)算日均攝食量：每日消耗量÷籠內(nèi)動(dòng)物數(shù)量。

(3)異常記錄：記錄拒食、食欲不振等異常情況。

4.糞便稱重與性狀觀察：

(1)方法：每日定時(shí)（如上午9:00）收集各組動(dòng)物24小時(shí)的糞便，放入已知重量的稱量皿中，稱重后置于烘箱（60±5℃）烘干至恒重，再次稱重計(jì)算糞便含水量。

(2)計(jì)算糞便排出率：[(烘干糞便重量-稱量皿重量)/(初始糞便重量-稱量皿重量)]×100%。

(3)性狀觀察：記錄糞便的形狀（成型、軟便、水便）、顏色、氣味等。

5.生理指標(biāo)監(jiān)測(cè)：

(1)體重變化：每日定時(shí)稱量每只動(dòng)物體重，計(jì)算日均體重增長(zhǎng)率（%）。

(2)行為觀察：每日觀察并記錄動(dòng)物的活動(dòng)狀態(tài)、攝食姿勢(shì)、毛發(fā)光澤度、精神狀態(tài)、有無(wú)腹瀉、異常鳴叫等。

(3)水合狀態(tài)：觀察動(dòng)物眼睛、皮膚彈性等指標(biāo)。

（二）中期生化評(píng)估（14天）

1.樣本采集：

(1)血液采集：在適應(yīng)性測(cè)試第7或第14天，使用合適的麻醉方法（如異氟烷吸入麻醉）對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉，采用眼眶取血或心臟采血法采集血液（如需血清，需分離后-20℃凍存）。

(2)糞便采集：在測(cè)試結(jié)束前24小時(shí)，收集動(dòng)物糞便用于生化分析。

2.檢測(cè)項(xiàng)目：

(1)血清生化指標(biāo)：檢測(cè)總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽紅素（TBIL）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）等。

(2)糞便成分分析：檢測(cè)粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、鈣（Ca）、磷（P）、灰分等。

3.數(shù)據(jù)分析：使用統(tǒng)計(jì)軟件（如SPSS、GraphPadPrism）對(duì)餌料組與對(duì)照組的生化指標(biāo)進(jìn)行t檢驗(yàn)或方差分析，評(píng)估差異的顯著性（P值）。

（三）長(zhǎng)期觀察（30天）

1.生長(zhǎng)性能評(píng)估：

(1)終末體重：實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱量所有動(dòng)物體重。

(2)飼料轉(zhuǎn)化率：計(jì)算公式為（終末體重-初始體重）/消耗餌料總量。

2.組織病理學(xué)檢查：

(1)處死與取材：在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，采用人道方式處死動(dòng)物（如CO2吸入法），迅速解剖并取肝臟、腎臟、胰腺、腸道（空腸、回腸段）等器官，置于10%中性緩沖福爾馬林溶液中固定。

(2)石蠟包埋與切片：將組織樣本進(jìn)行脫水、透明、浸蠟、包埋，制作5-7μm的石蠟切片。

(3)染色與觀察：采用HE染色法，使用顯微鏡觀察各器官的組織結(jié)構(gòu)，重點(diǎn)關(guān)注細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、有無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死或病變。

3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：對(duì)長(zhǎng)期觀察的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析或相關(guān)分析，評(píng)估餌料對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)和組織器官的影響。

**四、結(jié)果判定**

（一）合格標(biāo)準(zhǔn)

1.攝食量：餌料組的日均攝食量不低于對(duì)照組的85%，且拒食率低于5%。

2.體重增長(zhǎng)：餌料組的體重增長(zhǎng)率與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）。

3.糞便性狀：糞便成型良好，水分含量在40%-60%，無(wú)異常顏色或氣味。

4.行為觀察：動(dòng)物活動(dòng)正常，毛發(fā)光澤，無(wú)異常行為或明顯不適表現(xiàn)。

5.生化指標(biāo)：餌料組的關(guān)鍵血清生化指標(biāo)（如TP、ALB、GLU、BUN、CRE）均在正常生理范圍內(nèi)，且與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）。

6.糞便成分：糞便中關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)素含量（如粗蛋白、Ca、P）在合理范圍內(nèi)，消化吸收功能正常。

7.病理學(xué)結(jié)果：肝臟、腎臟、腸道等主要器官組織學(xué)檢查無(wú)明顯病變，細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常。

（二）不合格處理

1.若餌料組攝食量顯著低于對(duì)照組（P<0.05），或出現(xiàn)明顯拒食現(xiàn)象，表明動(dòng)物對(duì)該餌料接受性差，應(yīng)視為不合格。

2.若體重增長(zhǎng)顯著低于對(duì)照組（P<0.05），或出現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng)，表明餌料營(yíng)養(yǎng)無(wú)法滿足動(dòng)物生長(zhǎng)需求，應(yīng)視為不合格。

3.若糞便性狀異常（如持續(xù)軟便、水便、腹瀉），或出現(xiàn)脫水、水合狀態(tài)差，應(yīng)視為不合格。

4.若關(guān)鍵生化指標(biāo)顯著偏離正常范圍或與對(duì)照組存在顯著差異（P<0.05），提示餌料可能影響動(dòng)物生理功能或存在潛在毒性，應(yīng)視為不合格。

5.若病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)主要器官有明顯病變、炎癥或壞死，應(yīng)視為不合格。

6.不合格餌料的后續(xù)處理：對(duì)不合格餌料進(jìn)行標(biāo)識(shí)，禁止用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼喂，并記錄原因、相關(guān)數(shù)據(jù)和處置方式（如銷毀）。如需改進(jìn)，應(yīng)分析原因（如配方、工藝），調(diào)整后重新進(jìn)行適應(yīng)性評(píng)估。

**五、注意事項(xiàng)**

1.避免應(yīng)激：所有操作（如稱重、采樣）應(yīng)輕柔、快速，盡量減少對(duì)動(dòng)物的驚擾。必要時(shí)使用適宜的麻醉劑。

2.標(biāo)準(zhǔn)化操作：確保所有動(dòng)物來(lái)自同一批次、同一飼養(yǎng)環(huán)境，檢測(cè)方法、時(shí)間點(diǎn)保持一致，減少變量。

3.數(shù)據(jù)記錄：詳細(xì)、準(zhǔn)確、及時(shí)地記錄所有觀察結(jié)果和測(cè)量數(shù)據(jù)，使用統(tǒng)一的記錄表格。

4.設(shè)備校準(zhǔn)：定期校準(zhǔn)稱量設(shè)備、檢測(cè)儀器，確保測(cè)量精度。

5.生物安全：操作過(guò)程中注意個(gè)人防護(hù)，防止交叉污染。處理動(dòng)物組織和排泄物