中國獸醫(yī)協(xié)會發(fā)布I請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。1實驗動物生物樣本處理規(guī)范GB/T27025檢測和校準GB/Z44314生物技術(shù)生物樣本保藏動物生物樣本保4縮略語DNA：脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicaciEDTA：乙二胺四乙酸（EthylenediamineTetraaceticAc2OCT：最佳切片溫度（OptimumCuttingTempeRNA：核糖核酸（Ribonucleic5實驗動物生物樣本的處理準備5.1樣本處理方案的制定5.2設(shè)備與耗材確認根據(jù)處理方案、樣本類型和規(guī)格等提前準備試劑和耗材。設(shè)備及耗材應(yīng)符合GB/Z44314要5.3樣本儲存條件確認5.4個人防護準備5.5場地、人員要求），3整個過程應(yīng)避免在OCT包埋劑中產(chǎn)生氣泡，去除任何產(chǎn)生在組織樣本周圍的氣泡。將包埋好修切至1.0cm×1.0cm×0.36.1.4.2脫水，選擇使用合適的水溶性有機溶劑進行組織梯度脫水，將組織中的水分充分置換。選擇使用合適的透明劑，將組織中的有機溶劑充分置換。用6.1.4.3包埋。組織樣本經(jīng)過固定脫水后，將組織樣本放入石蠟包埋盒中并注入融化的石蠟，冷卻凝6.2.1血液樣本在采集完成后，宜在6.2.2.1根據(jù)不同實驗需求，應(yīng)選用含有適宜種類抗凝劑的抗凝采血），6.2.2.4使用合適的移液槍或一次性巴氏吸管小心吸取血漿層，避免破壞白膜層。6.2.4.1將裝有血液樣本的普通血清管（無添加血管）室溫靜置5min或惰性分離膠促凝管（含惰6.2.4.3離心機停止后，取出采血管。血樣分為兩層（普通或快速血清管），上層為淺黃色澄清血清6.2.4.4使用合適的移液槍或一次性巴氏吸管小心吸取血清層，避免吸取血凝塊層或分離膠層，將血），46.2.6.2向上步少漿血中加入全血稀釋液（少漿血6.2.6.3根據(jù)血量準備合適體積的離心管，將適量體積的細胞分離液（具體參考試劑說明）注入離心6.2.6.4將血樣小心加于細胞分離液之液面，置水平離心機中6.2.6.5離心后，離心管中由上至下細胞分為四層：第一層為血漿層，第二層為環(huán)狀乳白色單個核細6.2.6.6收集第二層單個核細胞至另一干凈離心管中，加入適量細胞洗滌液，離心，棄去上清，將沉6.2.6.7收集所得血液中的單個核細胞按預(yù)期要求進行下一步處6.3.1根據(jù)預(yù)期研究目的，可選擇添加合適的唾液保存液(如脫氧核糖核酸酶（DNase）核酸酶（RNase）抑制劑、蛋白酶抑制劑根據(jù)預(yù)期研究目的，可選擇以下方法之一對唾液進行離心6.4.2將精液與稀釋液同時置30℃左右的恒溫箱或水浴鍋內(nèi)，進行短暫的時，分兩步進行，先加入稀釋液總量的1/3~1/2，混合均勻后再加入6.5.1根據(jù)后續(xù)實驗用途選取適應(yīng)的6.5.2陰道內(nèi)液樣本采集完后，將拭子頭放入盛有保存液的保存管中，折斷拭子，保留拭子頭在管中，蓋上管蓋，振蕩10~20次，使得保存液充分浸潤拭子頭。6.5.3如采用沖洗法進行采集，則將陰道沖洗液直接加入盛有保存液的保存管中，蓋上管蓋，振6.5.4應(yīng)用于檢查雌性動物的生理周期等特征時，直接進行涂片6.6.1為維持樣本的完整性，宜在采集后4h內(nèi)，在2℃~8℃56.6.2乳汁樣本可能含細胞和其他成分，宜在6.7.1.1防腐處理。應(yīng)根據(jù)研究方案或樣本檢測目的，添加合適的防腐劑（6.7.1.2蛋白酶抑制處理。應(yīng)根據(jù)研究方案或樣本檢測目的，確定是否加入蛋白酶抑制劑以防止樣本6.7.1.3核酸保護處理。應(yīng)根據(jù)研究方案或樣本檢測目的，確定是否加入核酸保護液以防止樣本中核完成預(yù)處理的樣本在儲存前可根據(jù)研究方案或樣本檢測目的采用以下分裝處理方式之一選擇適宜a)未經(jīng)離心處理的尿液樣本可直接分裝成全尿樣本進行儲存或后續(xù)應(yīng)用研究。b)尿液樣本經(jīng)離心處理后獲得的尿液上清，可直接分裝后進行儲存或后續(xù)應(yīng)用研究。c)尿液樣本經(jīng)離心處理后獲得的尿沉渣樣本，可根據(jù)不同的研究方案添加相應(yīng)的試劑（如戊二），d)經(jīng)特殊處理的尿液樣本（如膜干燥真空保存部分尿液成分）應(yīng)按要求及時處理。驟，建立、成文并執(zhí)行質(zhì)量控制程序，評估DNA的重要質(zhì)量特性，包括穩(wěn)定性及滿足預(yù)期研究用6.9.2實驗室的環(huán)境和設(shè)施應(yīng)符合GB/T27025的規(guī)定。為了有效防止核酸污染，實驗室宜根據(jù)步驟設(shè)置不同的工作區(qū)域，所有實驗操作宜在規(guī)定的6.9.4核酸提取宜使用商品化試劑，具體操作流程宜參照商品化試劑的使用說明書。無商品化試6.9.5核酸提取可采用全自動核酸提取66.9.6核酸提取過程中宜避免物理因素（如剪切力、高溫等）、化學(xué)因素（如強酸、