1溫室棉花單株苗期抗旱評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范本文件提供了溫室棉花單株苗期（兩葉一心期）抗旱評(píng)價(jià)的術(shù)語(yǔ)和定義、基本要求、脅迫濃度預(yù)實(shí)驗(yàn)、單株抗旱脅迫指標(biāo)測(cè)定、綜合抗旱評(píng)價(jià)流程及抗旱等級(jí)劃分的指導(dǎo)。本文件適用于我國(guó)棉花主產(chǎn)區(qū)溫室環(huán)境下，棉花品種苗期（兩葉一心期）抗旱性鑒定與評(píng)價(jià)，亦適用于棉花抗旱育種中單株材料的早期篩選。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本使用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4407.1GB/T8321經(jīng)濟(jì)作物種子第1部分：纖維類農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（所有部分）GB/T19165-2019日光溫室和塑料大棚結(jié)構(gòu)與性能要求GB/T34812作物節(jié)水灌溉氣象等級(jí)棉花GB/T51057-2015農(nóng)業(yè)溫室結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)規(guī)范NY/T2544-2014作物抗旱性鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范NY/T1143NY/T1276NY/T1925播種機(jī)質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則在用噴桿噴霧機(jī)質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范JJF1070定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則（電子天平、烘箱等儀器校準(zhǔn)參考）3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1兩葉一心期Two-leafandone-heartstage棉花種子萌發(fā)出土后，第2片真葉完全展開、第3片真葉露心的生長(zhǎng)階段，依品種及溫室環(huán)境而異，持續(xù)約10～15天。23.2生物學(xué)重復(fù)Biologicalreplication在相同溫室環(huán)境、相同處理?xiàng)l件下，獨(dú)立設(shè)置的3～4個(gè)單株樣本單元，用于減少單株生長(zhǎng)差異、操作誤差，結(jié)果以“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。3.315%PEG6000模擬干旱15%PEG6000simulateddrought采用質(zhì)量濃度15%的PEG6000（聚乙二醇6000）溶液調(diào)節(jié)土壤滲透壓，誘導(dǎo)棉花單株產(chǎn)生干旱響應(yīng)的脅迫方式。3.4存活率Survivalrate脅迫處理后，存活單株數(shù)占總單株數(shù)的百分比。3.5D值D-value基于主成分分析權(quán)重與隸屬函數(shù)值計(jì)算的綜合抗旱指數(shù)。3.6單株指標(biāo)相對(duì)值Relativevalueofindividualplantindex干旱脅迫組單株指標(biāo)測(cè)定均值與正常供水對(duì)照組單株指標(biāo)均值的比值，用于消除品種固有生長(zhǎng)差異。3.7葉片相對(duì)含水量Relativewatercontentofleaf反映葉片水分狀況的生理指標(biāo)，指葉片實(shí)際含水量與飽和含水量的百分比，用于輔助判斷單株干旱脅迫程度。3.8Z-score標(biāo)準(zhǔn)化Z-scorestandardization消除指標(biāo)量綱差異的數(shù)據(jù)處理方法，用于主成分分析前的數(shù)據(jù)分析預(yù)處理。3.9主成分分析Principalcomponentanalysis是將一組相互關(guān)聯(lián)的指標(biāo)進(jìn)行信息濃縮,簡(jiǎn)化為少數(shù)幾個(gè)主成分的多元統(tǒng)計(jì)分析方法。3.10隸屬函數(shù)值Membershipfunctionvalue模糊集合中會(huì)用到的函數(shù)，是一般集合中指示函數(shù)的一般化，用于量化指標(biāo)對(duì)干旱抗性的貢獻(xiàn)程度。3.11Grubbs檢驗(yàn)法Grubbstest一種異常值判定方法，通過(guò)計(jì)算可疑值與數(shù)據(jù)均值的偏離程度與標(biāo)準(zhǔn)差的比值，結(jié)合預(yù)設(shè)的顯著性水平，判斷該值是否為異常值，用于數(shù)據(jù)預(yù)處理中的異常值剔除。4符號(hào)和縮略語(yǔ)下列符號(hào)和縮略語(yǔ)適用于本文件，符號(hào)及縮略語(yǔ)清單見(jiàn)附錄A。5基本要求5.1溫室環(huán)境a）建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)：溫室建設(shè)應(yīng)符合GB/T51057-2015和GB/T19165-2019的要求，確保結(jié)構(gòu)穩(wěn)固、通風(fēng)系統(tǒng)完好、透光率需達(dá)到85%以上，覆蓋材料無(wú)破損，滿足溫濕度與光照的精準(zhǔn)調(diào)控；b）溫度要求：25±2℃,晝夜溫差≤5℃,低溫不低于18℃,高溫不高于32℃;c）相對(duì)濕度：60%～70%，通過(guò)通風(fēng)、除濕設(shè)備控制，避免濕度過(guò)高引發(fā)病害；d）光照：光照強(qiáng)度300～400μ??m-2?s-1，每日光照時(shí)長(zhǎng)12h，陰天可通過(guò)LED植物生長(zhǎng)燈補(bǔ)充光照，確保每日光照總量≥3.6??m-2；e）環(huán)境監(jiān)控：采用溫濕度記錄儀、光照傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，每日記錄數(shù)據(jù)，波動(dòng)幅度≤±5%，避免非干旱因素（如光照驟變、低溫脅迫）干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5.2種子質(zhì)量要求棉花種子質(zhì)量應(yīng)符合GB4407.1的要求，選用飽滿、無(wú)病蟲害的種子，千粒重差異≤2%，發(fā)芽率≥85%，播種前可采用55℃溫水浸種15min消毒，避免種子帶菌影響育苗。5.3儀器設(shè)備a）播種工具：符合NY/T1143的精量播種器，保證穴播精度≥90%，用于育苗期單粒播種；b）測(cè)定儀器：電子天平（精度0.001g，符合JJF1070的規(guī)定，每年校準(zhǔn)1次）、烘箱（控溫精度±1℃,烘干室容積≥50L）、直尺（精度0.1cm，不銹鋼材質(zhì)防變形）、盆具（盆徑20cm、高25cm，底部帶3個(gè)排水孔，孔徑0.5cm防土壤流失）；c）脅迫工具：容量瓶（1000mL，A級(jí)玻璃材質(zhì)）、移液管（精度0.1mL，帶刻度校準(zhǔn)線）、噴壺（符合NY/T1925的小型噴桿噴霧器，霧化均勻度≥80%）；d）監(jiān)控設(shè)備：溫濕度記錄儀（測(cè)量范圍0℃~50℃、0%～100%RH，精度±0.5℃、±3%RH）、5.4基質(zhì)與試劑5.4.1基質(zhì)采用121℃高壓蒸汽持續(xù)30min對(duì)壤土進(jìn)行滅菌，用于殺滅病原菌與雜草種子，確保土壤的pH值在6.5～7.5、有機(jī)質(zhì)含量≥1.5%、速效氮≥80mg/kg、速效磷≥30mg/kg、速效鉀≥100mg/kg，每盆裝土量1.8kg±5%，確保每盆基質(zhì)重量一致；5.4.2試劑及要求a）PEG6000：分析純，分子量5800～6200；b）蒸餾水：電導(dǎo)率≤10μS/cm；4c）除草劑：需符合GB/T8321的要求，選用棉田安全型除草劑，如精喹禾靈，育苗期雜草株高5cm時(shí)噴施。5.4.3PEG6000溶液配制準(zhǔn)備工作——電子天平需提前30min預(yù)熱校準(zhǔn)；——1000mL容量瓶一只，用蒸餾水潤(rùn)洗3次；——燒杯；——玻璃棒；——25℃恒溫水浴鍋；——配制PEG6000所需的蒸餾水及PEG6000固形物。稱量在燒杯中加入500mL蒸餾水，稱取150gPEG6000；溶解將燒杯放入25℃恒溫水浴鍋，用玻璃棒攪拌30min，攪拌速度50r/min，避免產(chǎn)生大量氣泡，至PEG6000完全溶解為溶液透明無(wú)顆粒狀態(tài)。定容將溶液冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶，用少量蒸餾水潤(rùn)洗燒杯3次，洗液一并轉(zhuǎn)入容量瓶，最后加蒸餾水至刻度線，搖勻。保存配制完成后立即使用，未用完的溶液需4℃冷藏保存在密封容器內(nèi)以避免污染，保存時(shí)間不得超過(guò)6PEG6000脅迫濃度預(yù)實(shí)驗(yàn)6.1預(yù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)6.1.1供試材料隨機(jī)選取5個(gè)具抗旱梯度的棉花品種，并將其設(shè)置為編號(hào)V1-強(qiáng)抗旱、V2-中抗旱、V3-中抗旱、V4-較敏感、V5-干旱敏感，每個(gè)品種種子經(jīng)浸種消毒后催芽至露白（芽長(zhǎng)0.5cm）后播種。6.1.2處理設(shè)置PEG6000濃度梯度5——0%（CK，正常供水，土壤相對(duì)含水量70%～80%）；——10%；）；——20%。生物學(xué)重復(fù)設(shè)置每個(gè)品種每個(gè)濃度設(shè)3次重復(fù)，按照1重復(fù)=1盆1株的方式，共設(shè)置5×4×3=60盆，盆具按完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)擺放，要求3個(gè)重復(fù)為1個(gè)區(qū)組，區(qū)組間間距50cm，避免相互干擾。育苗管理播種后覆蓋1cm厚滅菌細(xì)土，溫室溫度保持28±2℃至出苗，出苗后降至25±2℃,每日澆水保持基質(zhì)濕潤(rùn)。苗根系完整性保護(hù)操作1)脫盆：用手輕捏盆壁四周，使基質(zhì)與盆壁分離，然后將盆倒置，輕拍盆底，使帶土根系完整脫出（避免用力拉扯導(dǎo)致主根斷裂）；2）洗根：將根系放入盛有蒸餾水的燒杯中，用軟毛刷（刷毛硬度≤0.1mm）輕輕刷去附著的基質(zhì)顆粒（避免刷傷須根），必要時(shí)可更換蒸餾水2～3次；3）檢查：洗根后將根系放在濾紙上，觀察是否有主根斷裂（主根斷裂長(zhǎng)度＞1cm則樣本作廢）、須根脫落（須根保留率＜80%則樣本作廢）；4）吸干：用吸水紙（無(wú)絨毛，避免粘在根系上）輕輕包裹根系，吸干表面水分（時(shí)間≤30s，避免水分流失過(guò)多影響RFW測(cè)定）。6.2脅迫處理6.2.1脅迫時(shí)機(jī)棉花生長(zhǎng)至兩葉一心期，選擇晴朗上午9:00前開始處理。6.2.2澆灌方式采用“一次性澆透法”，每盆緩慢澆灌對(duì)應(yīng)濃度PEG溶液200mL±2mL，并確保溶液均勻滲入基質(zhì)，無(wú)外流。之后每日上午補(bǔ)充50mL±1mL對(duì)應(yīng)濃度PEG溶液，維持基質(zhì)濕度穩(wěn)定，持續(xù)脅迫7天。6.3指標(biāo)測(cè)定6.3.1存活率測(cè)定觀測(cè)頻率脅迫開始時(shí)，記錄所有單株均為存活，作為基準(zhǔn)。脅迫后第3天、第7天分別觀測(cè)，以脅迫第76天的存活狀態(tài)作為最終判定依據(jù)。存活標(biāo)準(zhǔn)單株生長(zhǎng)點(diǎn)無(wú)褐變，手觸硬實(shí)有彈性，且至少1片子葉或真葉保持≥50%綠色面積，無(wú)完全焦枯、脫落。數(shù)據(jù)計(jì)算存活率（%）=某處理存活單株數(shù)/該處理總單株數(shù)×100，結(jié)果表示為“3次重復(fù)均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。6.3.2同步驗(yàn)證指標(biāo)葉片相對(duì)含水量RWC每重復(fù)選取存活單株的倒數(shù)第二片真葉，避開主脈剪取1cm×1cm葉塊，立即稱鮮重（FW）并記錄數(shù)據(jù)，隨后在25℃避光環(huán)境中使用蒸餾水浸泡4h后稱飽和鮮重（SW）并記錄數(shù)據(jù)，最后在80℃環(huán)境下烘干至恒重稱干重（DW），將記錄的三組數(shù)據(jù)按公式計(jì)算RWC。單株地上部干重SDW存活單株地上部份，從子葉節(jié)處剪斷，用105℃殺青30min，用于終止生理活動(dòng)，隨后以80℃烘干6h至恒重，電子天平稱量，取3次重復(fù)均值。6.4濃度驗(yàn)證結(jié)論當(dāng)15%PEG6000處理滿足以下3個(gè)條件時(shí)，確定為后續(xù)正式實(shí)驗(yàn)的脅迫濃度：——中度脅迫效應(yīng)：抗旱品種V2、V3（抗旱品種等級(jí)劃分見(jiàn)第九章表3）存活率60%～80%，且存活株葉片下垂角度≤45°;——差異顯著性：品種間存活率、RWC、SDW的差異均達(dá)極顯著水平（顯著性概率值＜0.01，獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)）；——環(huán)境一致性：存活株RWC65%～75%，與大田中度干旱（土壤相對(duì)含水量50%～60%）下棉花苗期RWC范圍一致。77單株抗旱指標(biāo)測(cè)定（15%PEG6000脅迫）7.1樣本準(zhǔn)備處理設(shè)置：每品種設(shè)15%PEG脅迫組與0%PEG對(duì)照組，按照1重復(fù)=1盆1株的方式各3次重復(fù)，每個(gè)品種共6盆；生長(zhǎng)調(diào)控：播種至兩葉一心期的管理同，確保各重復(fù)單株株高差異≤10%，無(wú)病蟲害；脅迫周期：兩葉一心期開始脅迫，持續(xù)7天后單株生長(zhǎng)指標(biāo)差異已顯現(xiàn)，且無(wú)大量死亡，并開始采樣。7.2十項(xiàng)單株指標(biāo)測(cè)定基于單株抗旱指標(biāo)測(cè)定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，十項(xiàng)單株指標(biāo)測(cè)定數(shù)量遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：a）每品種設(shè)2組處理：15%PEG6000脅迫組和0%PEG6000對(duì)照組（CK）；b）每組設(shè)3次生物學(xué)重復(fù)，1重復(fù)=1盆1株（即每組獨(dú)立測(cè)定3株單株，避免樣本干擾）；c）數(shù)據(jù)精度要求及數(shù)據(jù)保留要求見(jiàn)附錄B。最終每個(gè)指標(biāo)的測(cè)定總量：每個(gè)品種脅迫組3株、對(duì)照組3株，所有指標(biāo)均針對(duì)“單株”獨(dú)立測(cè)定，數(shù)據(jù)不合并計(jì)算，僅后續(xù)計(jì)算相對(duì)值時(shí)用組內(nèi)3株均值。7.3數(shù)據(jù)記錄溫室棉花單株苗期抗旱指標(biāo)測(cè)定，記錄每重復(fù)的原始數(shù)據(jù)，不得涂改（有誤需劃改并簽字原始記錄保存期不得少于3年，溫室棉花單株苗期抗旱指標(biāo)測(cè)定記錄表格式見(jiàn)附錄C。8綜合抗旱評(píng)價(jià)流程8.1數(shù)據(jù)預(yù)處理8.1.1指標(biāo)相對(duì)值計(jì)算通過(guò)脅迫組3次重復(fù)均值與對(duì)照組3次重復(fù)均值的比值，得出指標(biāo)相對(duì)值，若相對(duì)值＞1.2或＜0.8，需核查：a）儀器是否校準(zhǔn)；b）操作步驟是否有誤；c）樣本是否異常。確認(rèn)無(wú)誤后保留數(shù)據(jù)。8.1.2異常值剔除采用Grubbs檢驗(yàn)法(α=0.05），計(jì)算Grubbs統(tǒng)計(jì)量，公式如下：8G值查Grubbs臨界值表（如樣本數(shù)n=10時(shí)，G=2.176若G值＞2.176則判定為異常值，予以剔除；若某指標(biāo)異常值占比＞30%，需重新開展該品種的實(shí)驗(yàn)，以避免數(shù)據(jù)量不足影響評(píng)價(jià)，異常值判定見(jiàn)附錄。。8.1.3數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化采用Z-score標(biāo)準(zhǔn)化處理指標(biāo)相對(duì)值，消除量綱差異，計(jì)算公式為：8.2相關(guān)性與主成分分析本規(guī)范中相關(guān)性分析與主成分分析（PCA）所用軟件為SPSS26.0或R4.2.0（搭配corrplot包兩種軟件均可滿足數(shù)據(jù)分析需求，結(jié)果具有一致性，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)操作習(xí)慣選擇使用。8.2.1相關(guān)性分析輸入數(shù)值：輸入所有供試品種的10項(xiàng)單株指標(biāo)相對(duì)值（即各品種脅迫組3次重復(fù)均值與對(duì)照組3次重復(fù)均值的比值，包含SFW相對(duì)值、RFW相對(duì)值、TFW相對(duì)值、PH相對(duì)值、HM相對(duì)值、SDW相對(duì)值、RDW相對(duì)值、TDW相對(duì)值、RSR相對(duì)值、PWC相對(duì)值），形成“品種-指標(biāo)相對(duì)值”數(shù)據(jù)矩陣。得到結(jié)果：輸出包含10項(xiàng)指標(biāo)間兩兩關(guān)聯(lián)的Pearson相關(guān)系數(shù)矩陣，以及每個(gè)相關(guān)系數(shù)對(duì)應(yīng)的顯著性P值。對(duì)照結(jié)果得到答案：1）通過(guò)P值判斷指標(biāo)與抗旱性的關(guān)聯(lián)程度——保留P＜0.05的指標(biāo)（此類指標(biāo)與抗旱性顯著相關(guān)，可用于后續(xù)抗旱評(píng)價(jià)）；92）通過(guò)相關(guān)系數(shù)絕對(duì)值判斷指標(biāo)冗余性——若兩項(xiàng)指標(biāo)間相關(guān)系數(shù)|r|＞0.8（表明指標(biāo)信息高度重疊），結(jié)合生物學(xué)意義剔除1項(xiàng)（如PH相對(duì)值與HM相對(duì)值高度相關(guān)時(shí)，因PH更全面反映單株整體生長(zhǎng)狀況，故保留PH相對(duì)值、剔除HM相對(duì)值最終篩選出無(wú)冗余且與抗旱性顯著相關(guān)的核心指標(biāo)。8.2.2主成分分析（PCA）輸入數(shù)值：輸入經(jīng)相關(guān)性分析篩選后的“核心指標(biāo)Z-score標(biāo)準(zhǔn)化值”（即對(duì)保留的無(wú)冗余、與抗旱性顯著相關(guān)的指標(biāo)，按規(guī)范中Z-score標(biāo)準(zhǔn)化公式處理后的數(shù)據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)化后數(shù)據(jù)均值為0、標(biāo)準(zhǔn)差為1），形成“品種-核心指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化值”數(shù)據(jù)矩陣。得到結(jié)果：輸出適用性檢驗(yàn)結(jié)果（KMO檢驗(yàn)值、Bartlett球形檢驗(yàn)P值）、主成分載荷矩陣（各核心指標(biāo)在不同主成分上的載荷系數(shù)）、各主成分的特征值與方差貢獻(xiàn)率（含單個(gè)主成分方差貢獻(xiàn)率、累計(jì)方差貢獻(xiàn)率）、各品種的主成分得分（每個(gè)品種在提取出的各主成分上的具體得分）。對(duì)照結(jié)果得到答案：1）判斷數(shù)據(jù)是否適合PCA——若KMO＞0.5且Bartlett球形檢驗(yàn)P＜0.001，說(shuō)明核心指標(biāo)間存在顯著相關(guān)性，數(shù)據(jù)適合進(jìn)行主成分分析；2）確定主成分提取數(shù)量——提取“特征值＞1.0”的主成分，且需保證這些主成分的“總累計(jì)方差貢獻(xiàn)率≥85%”（確保保留核心指標(biāo)的大部分信息若累計(jì)貢獻(xiàn)率不足85%，需增加主成分提取數(shù)量直至滿足要求；3）公因子歸類——將“主成分載荷矩陣中絕對(duì)值＞0.5”的核心指標(biāo)歸為同一公因子（如SDW標(biāo)準(zhǔn)化值、RDW標(biāo)準(zhǔn)化值、TDW標(biāo)準(zhǔn)化值在某主成分上載荷均＞0.5，可將該主成分歸為“生物量因子”4）計(jì)算主成分權(quán)重——以各主成分的“單個(gè)方差貢獻(xiàn)率”占“總累計(jì)方差貢獻(xiàn)率”的比例作為該主成分的權(quán)重（Wi），權(quán)重之和為1，用于后續(xù)綜合D值的計(jì)算。8.3D值計(jì)算（隸屬函數(shù)法）8.3.1隸屬函數(shù)值計(jì)算因本規(guī)范中10項(xiàng)指標(biāo)均為“正向指標(biāo)”（指標(biāo)值越大，單株抗旱性越強(qiáng)采用升型隸屬函數(shù)。式中：）；8.3.2綜合D值計(jì)算按主成分權(quán)重加權(quán)求和。D值=Σwi×μ(PCi)式中：D值——結(jié)果表示為“D±SD”（SD為3次重復(fù)D值的標(biāo)準(zhǔn)差，反映數(shù)據(jù)穩(wěn)定性，SD＜0.05為穩(wěn)定Σ——對(duì)一系列數(shù)值進(jìn)行求和；wi——主成分的權(quán)重；8.4結(jié)果驗(yàn)證輸入數(shù)值：輸入所有供試棉花品種的綜合抗旱指數(shù)D值，形成“品種-D值”數(shù)據(jù)矩陣（如品種V1的D值為0.62±0.02、品種V2的D值為0.55±0.03等）。得到結(jié)果：1）輸出聚類結(jié)果樹狀圖與聚類分組表；2）樹狀圖直觀展示各品種間的聚類關(guān)系，可清晰識(shí)別不同品種因D值差異形成的聚類分支；3）聚類分組表明確標(biāo)注每個(gè)品種最終所屬的聚類組（如組1包含D值≥0.59的品種、組2包含0.51≤D＜0.59的品種等）。對(duì)照結(jié)果得到答案：1）對(duì)照聚類分組表與D值：a）若同一聚類組內(nèi)所有品種的D值數(shù)值相近（如組內(nèi)品種D值均在0.51～0.59區(qū)間）b）不同聚類組間品種的D值差異顯著（如組1與組2的D值區(qū)間無(wú)重疊），說(shuō)明聚類結(jié)果能反映D值的內(nèi)在關(guān)聯(lián)；2）對(duì)照聚類分組與“8抗旱等級(jí)劃分”：a）若每個(gè)聚類組對(duì)應(yīng)的品種D值范圍、存活率及形態(tài)特征，均與規(guī)范“8抗旱等級(jí)劃分”中的某一抗旱等級(jí)（強(qiáng)抗旱型Ⅰ、中抗旱型Ⅱ等）完全匹配（如某聚類組品種均符合“中抗旱型”的D值范圍0.51≤D＜0.59、存活率70～90%），則判定D值評(píng)價(jià)結(jié)果可靠；b）若聚類分組與抗旱等級(jí)存在錯(cuò)位（如某聚類組同時(shí)包含強(qiáng)抗旱型與敏感型品種需核查D值計(jì)算過(guò)程（如指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化、主成分權(quán)重等）是否存在誤差，重新驗(yàn)證數(shù)據(jù)。9抗旱等級(jí)劃分結(jié)合15%PEG6000脅迫下的D值、存活率及單株形態(tài)特征，將棉花單株苗期抗旱性分為5個(gè)等級(jí)，等級(jí)間D值間隔≥0.08，避免交叉重疊。溫室棉花單株苗期抗旱等級(jí)劃分見(jiàn)表1。表1溫室棉花單株苗期抗旱等級(jí)劃分表ⅠⅡⅢⅣⅤ<0.31±0.05<50部分單株死亡，存活株葉片大量焦附錄A（資料性）符號(hào)及縮略語(yǔ)清單A.1符號(hào)清單下列符號(hào)適用于本文件。符號(hào)符號(hào)符號(hào)名稱符號(hào)名稱符號(hào)注釋符號(hào)注釋Xμσ反映同一指標(biāo)多次重復(fù)數(shù)據(jù)的離散程度，用于標(biāo)準(zhǔn)PCiΣ用于綜合抗旱指數(shù)（D值）的加權(quán)求和計(jì)算，即對(duì)A.2縮略語(yǔ)清單下列縮略語(yǔ)適用于本文件。PEG-溫室環(huán)境核心調(diào)控指標(biāo)，反映空氣中水汽含量------地上部收獲后經(jīng)吸干表面水分的重量，直接反根系經(jīng)沖洗、吸干表面水分后的重量，直接-單株地上部干重與根干重之和，反映單株整體生物量（TD-反映單株整體水分狀況，按公式PWC（%）=(TFW-TDW)/TF-主成分分析適用性檢驗(yàn)指標(biāo)，KMO＞0.5表明數(shù)--附錄B（規(guī)范性）十項(xiàng)單株指標(biāo)測(cè)定結(jié)果保留3位小數(shù)-），），----（資料性）溫室棉花單株苗期抗旱指標(biāo)測(cè)定記錄表附錄D（規(guī)范性）溫室棉花單株苗期抗旱評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)異常值判定、處理及Grubbs臨界值表D.1附錄目的本附錄為資料性附錄，緊密配合正文“8.1數(shù)據(jù)預(yù)處理”中“8.1.2異常值剔除”條款使用，明確單株抗旱指標(biāo)（如地上部鮮重SFW、根干重RDW、葉片相對(duì)含水量RWC等）測(cè)定數(shù)據(jù)的異常值類型、判定標(biāo)準(zhǔn)、處理流程，同時(shí)提供Grubbs檢驗(yàn)法(α=0.05，雙尾檢驗(yàn)）的臨界值數(shù)據(jù)，確保用于D值計(jì)算的數(shù)據(jù)具備可靠性與有效性，符合本規(guī)范“精準(zhǔn)評(píng)價(jià)棉花單株苗期抗旱性”的核心目標(biāo)。D.2異常值類型定義結(jié)合本規(guī)范第5章和第7章的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作要求，數(shù)據(jù)異常值分為以下3類，均與實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵環(huán)節(jié)直接關(guān)聯(lián)：儀器誤差類：因測(cè)定儀器（電子天平、烘箱、直尺等，需符合正文5.3儀器設(shè)備要求）未校準(zhǔn)或性能異常，導(dǎo)致指標(biāo)數(shù)據(jù)偏離真實(shí)值；操作誤差類：因樣本處理（根系脫盆沖洗、葉片取樣、烘