第第PAGE\MERGEFORMAT1頁(yè)共NUMPAGES\MERGEFORMAT1頁(yè)細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室安全題庫(kù)及答案解析（含答案及解析）姓名：科室/部門/班級(jí)：得分：題型單選題多選題判斷題填空題簡(jiǎn)答題案例分析題總分得分

一、單選題（共20分）

1.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)，通常使用的壓力和溫度參數(shù)是？

A.0.1MPa,121℃

B.0.2MPa,134℃

C.0.15MPa,110℃

D.0.05MPa,95℃

2.在細(xì)胞房操作過(guò)程中，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，最可能的原因是？

A.細(xì)胞密度過(guò)高

B.培養(yǎng)基pH值異常

C.細(xì)菌污染

D.溫度波動(dòng)

3.以下哪種操作不屬于細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“無(wú)菌操作”范疇？

A.瓶口火焰滅菌

B.超凈工作臺(tái)內(nèi)操作

C.直接用手接觸細(xì)胞瓶表面

D.使用酒精棉球擦拭操作臺(tái)面

4.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室中，酒精棉球的酒精濃度通常設(shè)置為？

A.30%

B.50%

C.75%

D.95%

5.若細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的潔凈度等級(jí)為ISO5級(jí)，其空氣中的懸浮粒子（≥0.5μm）濃度應(yīng)控制在？

A.≥3,520個(gè)/立方英尺

B.≤352個(gè)/立方英尺

C.≥352個(gè)/立方英尺

D.≤3,520個(gè)/立方英尺

6.細(xì)胞凍存時(shí)，通常使用哪種溶液作為保護(hù)劑？

A.DMSO（二甲基亞砜）

B.甘露醇

C.葡萄糖

D.乙二醇

7.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室中，以下哪種行為可能違反“生物安全柜操作規(guī)范”？

A.操作前關(guān)閉紫外燈

B.使用前檢查高效過(guò)濾器（HEPA）

C.手套破損后繼續(xù)操作

D.操作結(jié)束后清理工作臺(tái)面

8.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，pH值通常維持在？

A.6.5-7.0

B.7.5-8.0

C.5.5-6.0

D.8.5-9.0

9.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“環(huán)境監(jiān)測(cè)”通常包括哪些內(nèi)容？

A.溫濕度、潔凈度、壓差

B.氣體純度、pH值、CO?濃度

C.紫外燈強(qiáng)度、酒精濃度

D.以上全部

10.若細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室發(fā)生火情，應(yīng)優(yōu)先采取哪種措施？

A.使用滅火器滅火

B.立即撤離人員

C.關(guān)閉電源

D.打開窗戶通風(fēng)

11.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，通常需要將細(xì)胞懸液緩慢降至哪個(gè)溫度？

A.-80℃

B.4℃

C.-20℃

D.室溫

12.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室中，以下哪種物品屬于“銳器”？

A.細(xì)胞培養(yǎng)瓶

B.吸管

C.注射器針頭

D.移液器槍

13.細(xì)胞凍存管標(biāo)簽上必須標(biāo)注哪些信息？

A.細(xì)胞類型、凍存日期、凍存濃度

B.操作人員姓名、凍存編號(hào)

C.保存位置、凍存溫度

D.以上全部

14.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“生物安全柜”分為哪兩種類型？

A.I級(jí)和II級(jí)

B.I級(jí)和III級(jí)

C.II級(jí)和III級(jí)

D.IV級(jí)和V級(jí)

15.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞聚集在一起，可能的原因是？

A.細(xì)胞密度過(guò)高

B.細(xì)胞接觸抑制

C.培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)不足

D.以上全部

16.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“壓差”通常要求？

A.工作區(qū)相對(duì)外界為正壓

B.工作區(qū)相對(duì)外界為負(fù)壓

C.工作區(qū)內(nèi)部無(wú)壓差

D.以上均不對(duì)

17.細(xì)胞凍存時(shí)，通常需要將細(xì)胞懸液在多少℃的條件下預(yù)冷10-15分鐘？

A.-20℃

B.-80℃

C.4℃

D.室溫

18.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“廢棄物處理”應(yīng)遵循哪種原則？

A.分類收集、消毒滅菌、統(tǒng)一處理

B.隨意丟棄、集中焚燒

C.僅需消毒后丟棄

D.以上均不對(duì)

19.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，若直接將細(xì)胞懸液倒入培養(yǎng)皿，可能導(dǎo)致什么后果？

A.細(xì)胞失活率降低

B.細(xì)胞污染風(fēng)險(xiǎn)增加

C.細(xì)胞生長(zhǎng)速度加快

D.以上均不對(duì)

20.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“環(huán)境監(jiān)測(cè)”頻率通常為？

A.每日一次

B.每周一次

C.每月一次

D.每季度一次

二、多選題（共15分，多選、錯(cuò)選均不得分）

21.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室中，以下哪些物品可能屬于“生物安全風(fēng)險(xiǎn)源”？

A.細(xì)胞培養(yǎng)瓶

B.移液器槍

C.空氣過(guò)濾器（HEPA）

D.細(xì)胞凍存管

22.細(xì)胞凍存時(shí)，以下哪些操作可能導(dǎo)致細(xì)胞損傷？

A.凍存速度過(guò)快

B.凍存溫度過(guò)低

C.凍存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

D.凍存保護(hù)劑濃度不足

23.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“環(huán)境監(jiān)測(cè)”通常包括哪些指標(biāo)？

A.溫濕度

B.潔凈度

C.壓差

D.紫外燈強(qiáng)度

24.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，以下哪些步驟是必要的？

A.緩慢解凍細(xì)胞懸液

B.用培養(yǎng)基沖洗細(xì)胞

C.直接將細(xì)胞接種到培養(yǎng)皿

D.檢查細(xì)胞活力

25.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“銳器傷”預(yù)防措施包括哪些？

A.使用可重復(fù)使用的注射器針頭

B.正確處理廢棄針頭（如使用銳器盒）

C.操作時(shí)佩戴手套

D.避免用手直接接觸細(xì)胞瓶

三、判斷題（共10分，每題0.5分）

26.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“潔凈度”越高，空氣中的懸浮粒子越多。（×）

27.細(xì)胞凍存時(shí)，DMSO溶液濃度越高越好。（×）

28.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“紫外燈”主要用于日常消毒。（√）

29.細(xì)胞復(fù)蘇后，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞聚集在一起，應(yīng)立即更換培養(yǎng)基。（×）

30.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“壓差”通常要求工作區(qū)相對(duì)外界為5Pa的正壓。（√）

31.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，pH值的波動(dòng)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒有影響。（×）

32.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“廢棄物”可以直接倒入普通垃圾桶。（×）

33.細(xì)胞凍存時(shí)，凍存管標(biāo)簽上必須清晰標(biāo)注所有相關(guān)信息。（√）

34.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“生物安全柜”操作時(shí)，應(yīng)避免雙手同時(shí)接觸內(nèi)壁。（√）

35.細(xì)胞復(fù)蘇后，若細(xì)胞活力低于70%，應(yīng)放棄該批次細(xì)胞。（×）

四、填空題（共15分，每空1分）

36.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的潔凈度等級(jí)為ISO5級(jí)，其空氣中的懸浮粒子（≥0.5μm）濃度應(yīng)控制在______個(gè)/立方英尺。

37.細(xì)胞凍存時(shí)，通常使用______作為保護(hù)劑，以防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。

38.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“壓差”通常要求工作區(qū)相對(duì)外界為______的正壓。

39.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，pH值通常維持在______-______之間。

40.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“環(huán)境監(jiān)測(cè)”通常包括______、______、______等指標(biāo)。

41.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，通常需要將細(xì)胞懸液緩慢降至______℃的條件下預(yù)冷10-15分鐘。

42.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“廢棄物”應(yīng)遵循______、______、______的處理原則。

43.細(xì)胞凍存管標(biāo)簽上必須標(biāo)注______、______、______等信息。

44.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“生物安全柜”分為______級(jí)和______級(jí)兩種類型。

45.細(xì)胞復(fù)蘇后，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞活力低于70%，應(yīng)______該批次細(xì)胞。

五、簡(jiǎn)答題（共20分）

46.簡(jiǎn)述細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的步驟及注意事項(xiàng)。

47.結(jié)合實(shí)際案例，分析細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室中常見的細(xì)菌污染原因及預(yù)防措施。

48.細(xì)胞凍存過(guò)程中，如何確保細(xì)胞存活率？請(qǐng)列舉至少三個(gè)關(guān)鍵步驟。

49.細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的“銳器傷”處理流程有哪些？

六、案例分析題（共15分）

50.某細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室在復(fù)蘇一批細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞活力顯著低于預(yù)期（僅50%），且部分細(xì)胞出現(xiàn)聚集現(xiàn)象。請(qǐng)分析可能的原因，并提出解決方案。

參考答案及解析

一、單選題

1.A

解析：高壓蒸汽滅菌通常使用0.1MPa（1.01atm）的壓力，對(duì)應(yīng)溫度為121℃。B選項(xiàng)溫度過(guò)高可能導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變性；C選項(xiàng)溫度過(guò)低無(wú)法有效滅菌；D選項(xiàng)壓力過(guò)低無(wú)法達(dá)到滅菌效果。

2.C

解析：細(xì)胞培養(yǎng)基渾濁通常提示細(xì)菌污染，需立即進(jìn)行無(wú)菌操作排查。A選項(xiàng)密度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基過(guò)早消耗；B選項(xiàng)pH值異常會(huì)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)但不會(huì)導(dǎo)致渾濁；D選項(xiàng)溫度波動(dòng)影響細(xì)胞代謝但不直接導(dǎo)致污染。

3.C

解析：無(wú)菌操作要求避免直接用手接觸細(xì)胞，防止污染。A、B、D均屬于無(wú)菌操作范疇。

4.C

解析：75%酒精消毒效果最佳，既能殺滅細(xì)菌又不易損傷細(xì)胞。30%酒精消毒效果差；50%酒精易揮發(fā)；95%酒精易產(chǎn)生氣泡影響操作。

5.D

解析：ISO5級(jí)潔凈度要求空氣中的懸浮粒子（≥0.5μm）濃度≤3,520個(gè)/立方英尺。A選項(xiàng)濃度過(guò)高；B選項(xiàng)濃度過(guò)低；C選項(xiàng)濃度仍高于標(biāo)準(zhǔn)。

6.A

解析：DMSO是常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑，能有效防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。B、C、D均不具備類似效果。

7.C

解析：手套破損后應(yīng)立即更換，繼續(xù)操作會(huì)增加污染風(fēng)險(xiǎn)。A、B、D均符合操作規(guī)范。

8.A

解析：細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，pH值通常維持在6.5-7.0之間，過(guò)高或過(guò)低均會(huì)影響細(xì)胞代謝。

9.D

解析：環(huán)境監(jiān)測(cè)包括溫濕度、潔凈度、壓差、氣體純度、pH值、CO?濃度等指標(biāo)，需全面評(píng)估實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

10.B

解析：火情發(fā)生時(shí)，應(yīng)優(yōu)先撤離人員，防止人員傷亡。A、C、D均為輔助措施。

11.B

解析：細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，通常需要將細(xì)胞懸液緩慢降至4℃的條件下預(yù)冷，防止細(xì)胞因溫度驟變受損。

12.C

解析：注射器針頭屬于銳器，易造成刺傷。A、B、D均不屬于銳器。

13.D

解析：細(xì)胞凍存管標(biāo)簽必須標(biāo)注細(xì)胞類型、凍存日期、凍存濃度、操作人員姓名、凍存編號(hào)、保存位置、凍存溫度等全部信息。

14.A

解析：生物安全柜分為I級(jí)和II級(jí)兩種類型，其中II級(jí)又分為A型和B型。B、C、D均不符合分類標(biāo)準(zhǔn)。

15.D

解析：細(xì)胞聚集可能由密度過(guò)高、接觸抑制、營(yíng)養(yǎng)不足等多種原因?qū)е?，需綜合判斷。

16.A

解析：細(xì)胞房實(shí)驗(yàn)室的壓差通常要求工作區(qū)相對(duì)外界為正壓，防止外環(huán)境空氣進(jìn)入污染。

17.B

解析：細(xì)胞凍存時(shí)，通常需要將細(xì)胞懸液在-80℃的條件下預(yù)冷10-15分鐘，防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。

18.A

解析：廢棄物處理應(yīng)遵循分類收集、消毒滅菌、統(tǒng)一處理的規(guī)范，防止環(huán)境污染。

19.B

解析：直接倒入培養(yǎng)皿可能導(dǎo)致細(xì)胞污染風(fēng)險(xiǎn)增加，應(yīng)緩慢加入培養(yǎng)基稀釋。

20.B

解析：環(huán)境監(jiān)測(cè)通常每周進(jìn)行一次，確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境穩(wěn)定。

二、多選題

21.A、B、C、D

解析：細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液器槍、HEPA過(guò)濾器、細(xì)胞凍存管均可能存在生物安全風(fēng)險(xiǎn)。

22.A、B、C、D

解析：凍存速度過(guò)快、溫度過(guò)低、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、保護(hù)劑濃度不足均可能導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

23.A、B、C

解析：環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)包括溫濕度、潔凈度、壓差，氣體指標(biāo)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求可能增加。

24.A、B、D

解析：細(xì)胞復(fù)蘇需緩慢解凍、用培養(yǎng)基沖洗、檢查細(xì)胞活力，直接接種可能導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

25.B、C、D

解析：銳器傷預(yù)防措施包括正確處理銳器、佩戴手套、避免直接接觸細(xì)胞。

三、判斷題

26.×

解析：潔凈度越高，空氣中的懸浮粒子越少，ISO5級(jí)要求最低。

27.×

解析：DMSO濃度過(guò)高可能損傷細(xì)胞，需根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整濃度。

28.√

解析：紫外燈主要用于日常消毒，但需注意避免直接照射細(xì)胞。

29.×

解析：細(xì)胞聚集可能由多種原因?qū)е?，需排查原因后再處理?/p>

30.√

解析：壓差正壓能有效防止外環(huán)境空氣進(jìn)入污染。

31.×

解析：pH值波動(dòng)會(huì)影響細(xì)胞代謝，甚至導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。

32.×

解析：廢棄物需分類處理，不能直接倒入普通垃圾桶。

33.√

解析：標(biāo)簽信息必須完整，確保后續(xù)操作可追溯。

34.√

解析：雙手同時(shí)接觸內(nèi)壁可能污染細(xì)胞，應(yīng)避免。

35.×

解析：低活力細(xì)胞仍可嘗試復(fù)蘇，需分析原因優(yōu)化條件。

四、填空題

36.3,520

37.DMSO

38.5

39.6.5,7.0

40.溫濕度,潔凈度,壓差

41.4

42.分類收集,消毒滅菌,統(tǒng)一處理

43.細(xì)胞類型,凍存日期,凍存濃度

44.I,II

45.放棄

五、簡(jiǎn)答題

46.高壓蒸汽滅菌步驟及注意事項(xiàng)

步驟：

①檢查滅菌鍋內(nèi)是否有積水；

②將物品放入滅菌鍋，確保排列均勻，留有空隙；

③關(guān)閉鍋蓋，抽真空至-0.08MPa；

④注入蒸汽至0.1MPa，121℃，保持15-20分鐘；

⑤停止加熱，待壓力降至0后開蓋取出物品。

注意事項(xiàng)：

①物品不能過(guò)密，需留有空隙；

②帶有金屬蓋的容器應(yīng)留有排氣孔；

③滅菌后應(yīng)自然冷卻，避免快速冷卻導(dǎo)致玻璃器皿破裂。

47.細(xì)菌污染原因及預(yù)防措施

原因：

①操作不規(guī)范，如未洗手或未佩戴手套；

②培養(yǎng)基滅菌不徹底；

③實(shí)驗(yàn)室環(huán)境潔凈度不足；

④設(shè)備未定期消毒。

預(yù)防措施：

①嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范；

②確保培養(yǎng)基滅菌徹底；

③定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)；

④定期消毒設(shè)備。

48.細(xì)胞凍存關(guān)鍵步驟

①緩慢降溫：將細(xì)胞懸液在4℃條件下預(yù)冷10-15分鐘；

②快速冷凍：將細(xì)胞懸液加入凍存管，置于-80℃冰箱或液氮中；

③預(yù)凍：在-80℃條件下預(yù)凍24小時(shí)；

④慢速解凍：在37℃水浴中解凍；

⑤培養(yǎng)復(fù)蘇：用培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞后接種。

49.銳器傷處理流程

①立即用流動(dòng)水沖洗傷口；

②用消毒劑（如碘伏）消毒傷口；

③戴手套，用無(wú)菌紗布按壓止血；

④向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告