2025年生物實驗室職業(yè)健康安全試題庫及答案一、單項選擇題（每題2分，共40分）1.依據(jù)《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2022），二級生物安全實驗室（BSL-2）操作非感染性材料時，必須配備的基礎(chǔ)防護設(shè)備是：A.獨立通風系統(tǒng)B.生物安全柜（II級）C.高壓蒸汽滅菌器D.洗眼裝置答案：B（BSL-2實驗室處理感染性材料時需在II級生物安全柜中進行，處理非感染性材料時雖非強制，但基礎(chǔ)防護需配備生物安全柜）2.實驗室使用的一次性塑料移液管被HBV陽性血清污染后，正確的處理流程是：A.直接投入黃色醫(yī)療廢物袋B.浸泡于含有效氯2000mg/L的消毒液中30分鐘后高壓滅菌C.用75%酒精擦拭后丟棄D.放入專用銳器盒密封后焚燒答案：B（感染性塑料器皿需先化學消毒再高壓滅菌，不可直接焚燒或丟棄）3.關(guān)于實驗室個人防護裝備（PPE）的使用規(guī)范，錯誤的是：A.處理高濃度細菌懸液時需佩戴雙層手套B.生物安全柜操作時，實驗服袖口應完全覆蓋手套腕部C.離開實驗室前需在緩沖間脫去防護服，內(nèi)層衣物可穿離污染區(qū)D.佩戴N95口罩時需進行密合性測試答案：C（內(nèi)層衣物不可穿離污染區(qū)，所有可能接觸污染物的衣物均需在緩沖間脫除）4.高壓蒸汽滅菌器使用時，判斷滅菌效果的金標準是：A.觀察壓力表達到103kPaB.溫度顯示121℃持續(xù)15分鐘C.使用生物指示劑（嗜熱脂肪芽孢桿菌）D.化學指示卡變色答案：C（生物指示劑通過芽孢存活情況驗證滅菌效果，是最可靠方法）5.實驗室配制1mol/LNaOH溶液時，正確的操作是：A.在通風櫥內(nèi)將NaOH固體直接倒入容量瓶中溶解B.佩戴丁腈手套和護目鏡，在燒杯中先加水再緩慢加入NaOHC.使用聚丙烯容器配制，避免玻璃容器受熱破裂D.配制后直接將廢液排入實驗室下水道答案：B（NaOH溶解放熱需緩慢加入水中，需在燒杯中操作，不可直接用容量瓶；聚丙烯容器可耐堿但非必須；強堿廢液需中和后排放）6.處理結(jié)核分枝桿菌（BSL-3級病原體）的實驗活動中，必須使用的呼吸防護裝備是：A.醫(yī)用外科口罩B.半面罩空氣凈化呼吸器（P2級）C.正壓供氣式呼吸防護系統(tǒng)D.普通紗布口罩答案：C（BSL-3實驗室操作高風險病原體時，需使用正壓供氣式呼吸防護系統(tǒng)或全面罩空氣凈化呼吸器（P3級））7.實驗室冰箱管理中，不符合規(guī)范的是：A.標識“危險化學品專用冰箱”，禁止存放食品B.冷凍室存放菌株時，使用密封離心管并外套自封袋C.冰箱內(nèi)物品按“上輕下重”原則擺放，留出10cm散熱空間D.每周清理過期試劑，廢棄的福爾馬林溶液直接倒入廢液桶答案：D（福爾馬林含甲醛，屬于有害廢液，需分類收集后交有資質(zhì)單位處理）8.進行細胞培養(yǎng)操作時，若生物安全柜突然斷電，正確的應急措施是：A.立即打開安全柜門取出培養(yǎng)瓶B.關(guān)閉安全柜所有電源，記錄事件并報告主管C.保持安全柜門關(guān)閉，30分鐘后待氣溶膠沉降再處理D.繼續(xù)操作至完成當前步驟答案：C（斷電后安全柜氣流停止，需保持柜門關(guān)閉防止氣溶膠擴散，等待足夠時間沉降）9.實驗室生物安全風險評估的核心內(nèi)容不包括：A.病原體的傳播途徑和致病能力B.實驗人員的操作熟練程度C.實驗室設(shè)施設(shè)備的防護水平D.廢棄物處理的成本預算答案：D（風險評估關(guān)注生物危害、防護能力和操作風險，不涉及成本預算）10.關(guān)于實驗室銳器傷的預防，錯誤的是：A.使用后立即將針頭放入專用銳器盒，禁止回套針帽B.傳遞銳器時需使用托盤，避免徒手傳遞C.處理破碎玻璃時，直接用戴手套的手撿拾碎片D.選用防穿刺手套（如凱夫拉材質(zhì)）處理銳器答案：C（破碎玻璃需用鑷子或?qū)Ｓ霉ぞ邠焓?，禁止徒手?1.實驗室配制75%乙醇消毒液時，正確的濃度計算依據(jù)是：A.體積分數(shù)（V/V）B.質(zhì)量分數(shù)（m/m）C.質(zhì)量體積比（m/V）D.摩爾濃度（mol/L）答案：A（乙醇消毒液濃度通常指體積分數(shù)，即75ml無水乙醇加25ml水定容至100ml）12.處理HIV陽性血液樣本時，實驗室臺面消毒應選擇：A.75%乙醇擦拭1次B.0.5%過氧乙酸浸泡30分鐘C.含有效氯1000mg/L的消毒液擦拭，作用15分鐘D.3%過氧化氫噴霧后自然干燥答案：C（HIV對含氯消毒液敏感，1000mg/L有效氯作用15分鐘可滅活）13.實驗室生物安全管理體系中，“雙人雙鎖”制度適用于：A.普通化學試劑柜B.感染性樣本保存冰箱C.實驗動物飼養(yǎng)籠具D.清潔區(qū)辦公用品柜答案：B（高致病性病原微生物樣本需實行雙人雙鎖管理，防止被盜或誤用）14.進行PCR擴增實驗時，正確的分區(qū)操作是：A.試劑準備區(qū)→樣本處理區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)，單向流動B.樣本處理區(qū)→試劑準備區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)，可逆向流動C.所有操作在同一區(qū)域完成，減少交叉污染D.產(chǎn)物分析區(qū)可兼作樣本處理區(qū)答案：A（PCR實驗室需嚴格分區(qū)，按試劑準備→樣本處理→擴增→產(chǎn)物分析單向流動，避免污染）15.實驗室發(fā)生液氮罐泄漏時，現(xiàn)場人員首先應：A.立即關(guān)閉液氮罐閥門B.佩戴防凍手套嘗試修復漏點C.撤離至通風良好區(qū)域，報告主管并啟動應急預案D.用清水沖洗泄漏區(qū)域降低低溫風險答案：C（液氮泄漏會導致缺氧和低溫傷害，人員應優(yōu)先撤離，再進行后續(xù)處理）16.關(guān)于實驗動物的生物安全管理，錯誤的是：A.感染性動物實驗需在ABSL-2及以上實驗室進行B.實驗結(jié)束后，動物尸體需裝入防滲漏袋，高壓滅菌后焚燒C.接觸動物的人員需提前進行結(jié)核菌素試驗和疫苗接種D.動物籠具可在普通實驗室清洗，無需專用設(shè)施答案：D（感染性動物籠具需在專用清洗區(qū)或高壓滅菌后再清潔，避免污染擴散）17.實驗室氣體鋼瓶的管理要求中，正確的是：A.氫氣鋼瓶與氧氣鋼瓶同柜存放，標識清晰B.鋼瓶直立固定，減壓閥定期校驗，使用后關(guān)閉總閥C.乙炔鋼瓶倒置使用，防止瓶內(nèi)丙酮流出D.惰性氣體鋼瓶（如氮氣）無需標識使用期限答案：B（氣體鋼瓶需分類存放，氫氣與氧氣需隔離；乙炔鋼瓶必須直立；所有鋼瓶需標注檢驗日期）18.進行支原體檢測實驗時，若培養(yǎng)板被打翻，正確的處理步驟是：A.立即用紙巾擦拭，噴灑75%乙醇消毒B.用吸水材料覆蓋，噴灑含有效氯5000mg/L的消毒液，作用30分鐘后清理C.直接用掃帚清掃碎片，放入普通垃圾桶D.戴手套收集碎片，放入銳器盒，臺面用肥皂水處理答案：B（支原體培養(yǎng)物屬于生物危害材料，需用高濃度含氯消毒液（5000mg/L）覆蓋消毒后清理）19.實驗室應急照明系統(tǒng)的測試頻率應為：A.每月1次B.每季度1次C.每半年1次D.每年1次答案：A（應急照明需每月測試，確保斷電時能正常工作，保障人員疏散）20.關(guān)于實驗室人員健康監(jiān)測，錯誤的是：A.新入職人員需進行結(jié)核菌素試驗、乙肝表面抗體檢測B.接觸布魯氏菌的人員每半年進行血清學檢測C.孕婦可正常參與BSL-2實驗室常規(guī)操作D.出現(xiàn)發(fā)熱癥狀的實驗人員需暫停工作并報告答案：C（孕婦屬于高風險人群，應避免參與可能接觸生物危害因子的實驗活動）二、判斷題（每題1分，共15分）1.二級生物安全實驗室可處理所有已知無致病性的微生物。（×）（BSL-2實驗室處理的是具有中等危害的病原微生物，無致病性微生物可在BSL-1實驗室操作）2.實驗室手套破損后，可直接在外部套戴一副新手套繼續(xù)操作。（×）（破損手套需立即更換，不可疊加使用，避免污染內(nèi)層）3.高壓蒸汽滅菌時，為提高效率，可將物品緊密堆疊放置。（×）（需留出間隙保證蒸汽流通，否則會導致滅菌不徹底）4.實驗室廢棄的瓊脂平板可直接放入黃色醫(yī)療廢物袋，無需處理。（×）（含活菌的瓊脂平板需先高壓滅菌再丟棄）5.使用移液槍時，為避免液體殘留，可將槍頭按至第二檔吹出所有液體。（√）（正確操作，第二檔用于徹底排液，但需注意避免產(chǎn)生氣溶膠）6.實驗室冰箱溫度記錄應至少保存2年。（√）（符合《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范》要求）7.處理感染性材料時，可佩戴隱形眼鏡代替護目鏡。（×）（隱形眼鏡可能吸收化學物質(zhì)或生物因子，不可替代護目鏡）8.實驗室應急預案需每年進行1次演練，保留記錄。（√）（依據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》要求）9.二氧化碳培養(yǎng)箱的水盤需每周更換無菌水，防止霉菌滋生。（√）（正確維護措施，避免污染細胞培養(yǎng)物）10.實驗室走廊可臨時存放實驗廢棄物，只要不超過24小時。（×）（廢棄物需及時清理，不可在公共區(qū)域臨時存放）11.進行動物實驗時，可將麻醉劑剩余藥液倒入下水道。（×）（麻醉劑屬于危險化學品，需分類收集處理）12.實驗室生物安全委員會應至少每季度召開1次會議，討論安全事項。（√）（符合實驗室生物安全管理體系要求）13.實驗室緊急沖淋裝置需每月啟動1次，檢查水流和壓力。（√）（確保緊急情況下能正常使用）14.冷凍離心機運行時，若發(fā)現(xiàn)劇烈振動，應立即打開機蓋停止運行。（×）（需先按停止鍵，待轉(zhuǎn)子完全靜止后再處理，避免飛彈風險）15.實驗室人員可將個人手機帶入BSL-2實驗室進行實驗記錄。（×）（個人物品不得帶入污染區(qū)，防止交叉污染）三、簡答題（每題5分，共30分）1.簡述二級生物安全實驗室（BSL-2）的主要技術(shù)要求。答案：（1）建筑結(jié)構(gòu)：分區(qū)明確（清潔區(qū)、緩沖間、操作區(qū)），有獨立的洗手池；（2）通風系統(tǒng)：保持負壓（相對于清潔區(qū)-10Pa至-15Pa），氣流從清潔區(qū)流向操作區(qū)；（3）防護設(shè)備：配備II級生物安全柜，必要時使用高壓滅菌器；（4）管理要求：人員需培訓合格，限制無關(guān)人員進入，建立生物安全管理制度。2.列舉5種實驗室常見的生物危害因子及其對應的防護措施。答案：（1）HBV（乙肝病毒）：戴雙層手套，操作在生物安全柜中進行，接種乙肝疫苗；（2）結(jié)核分枝桿菌：在BSL-3實驗室操作，使用正壓呼吸防護裝備；（3）支原體：培養(yǎng)基需高壓滅菌后處理，避免氣溶膠產(chǎn)生；（4）實驗動物（如小鼠）：佩戴防咬手套，動物籠具高壓滅菌后清潔；（5）真菌孢子：操作時戴N95口罩，實驗室定期進行空氣消毒。3.說明實驗室危險化學品“五雙管理”的具體內(nèi)容。答案：“五雙管理”指對劇毒、易制毒、易制爆等危險化學品實行雙人驗收、雙人保管、雙人領(lǐng)用、雙鎖管理、雙本賬記錄。通過雙人制約機制，防止化學品被盜、誤用或非法流出。4.簡述實驗室發(fā)生銳器傷后的應急處置流程。答案：（1）立即停止操作，在流動水下從近心端向遠心端擠壓傷口，盡可能擠出污血；（2）用肥皂水和清水沖洗傷口15分鐘；（3）用0.5%碘伏或75%乙醇消毒傷口，覆蓋無菌敷料；（4）記錄受傷情況（時間、地點、銳器類型、接觸的生物材料）；（5）2小時內(nèi)報告實驗室負責人，進行暴露評估；（6）根據(jù)評估結(jié)果采取預防措施（如接種疫苗、服用抗病毒藥物）；（7）跟蹤觀察4-6周，進行血清學檢測。5.說明生物安全柜的日常維護要點。答案：（1）使用前檢查風速（II級A2型應≥0.5m/s）和報警系統(tǒng)；（2）每周用75%乙醇擦拭內(nèi)部表面，避免使用腐蝕性消毒劑；（3）每6個月由專業(yè)機構(gòu)進行風速、氣流模式和高效過濾器（HEPA）完整性檢測；（4）操作時避免物品遮擋前格柵和后格柵，保持柜內(nèi)物品間距≥10cm；（5）長期不用時，需運行30分鐘凈化空氣后關(guān)閉，并用防塵罩覆蓋。6.列舉實驗室廢棄物的分類及對應的處理方法。答案：（1）感染性廢棄物：含活菌的培養(yǎng)基、樣本等，高壓滅菌（121℃，30分鐘）后焚燒；（2）病理性廢棄物：實驗動物尸體、組織，高壓滅菌后交專業(yè)機構(gòu)焚燒；（3）化學性廢棄物：廢酸廢堿需中和至pH6-9后排放，有機溶劑（如甲醇）分類收集后交有資質(zhì)單位處理；（4）銳器廢棄物：針頭、玻片等，放入防穿刺銳器盒，密封后高壓滅菌再焚燒；（5）放射性廢棄物：單獨存放于鉛罐，記錄活度，聯(lián)系放射性廢物處理中心回收。四、案例分析題（每題5分，共15分）案例1：某高校實驗室研究生小張在BSL-2實驗室進行大腸桿菌（非致病性菌株）轉(zhuǎn)化實驗時，未佩戴護目鏡，移液過程中液體濺入右眼。小張立即用清水沖洗眼睛5分鐘，繼續(xù)完成實驗后離開實驗室，未報告任何人。問題：指出操作中的錯誤并提出改進措施。答案：錯誤點：（1）未佩戴護目鏡（BSL-2實驗室操作生物材料需佩戴護目鏡）；（2）沖洗時間不足（應至少沖洗15分鐘）；（3）未及時報告（暴露后需立即報告以便評估風險）；（4）繼續(xù)實驗可能導致二次污染。改進措施：（1）操作前正確佩戴護目鏡；（2）濺入后立即到洗眼器處用流動水沖洗15分鐘；（3）沖洗后報告實驗室負責人，進行暴露評估（雖為非致病菌株仍需記錄）；（4）暫停實驗，更換污染衣物，清理操作臺面。案例2：某疾控中心實驗室在處理新冠病毒（BSL-3）樣本時，發(fā)現(xiàn)生物安全柜的HEPA過濾器報警。實驗員小李未關(guān)閉安全柜，直接打開玻璃門查看，導致部分氣溶膠泄漏。問題：分析風險并說明正確處置步驟。答案：風險分析：HEPA過濾器報