基于疏水性抗腫瘤藥物載體的可注射超分子水凝膠：構(gòu)建、性能與應(yīng)用探索一、引言1.1研究背景與意義癌癥作為全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病之一，一直是醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)領(lǐng)域的研究重點(diǎn)。據(jù)世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）發(fā)布的2020年全球最新癌癥負(fù)擔(dān)數(shù)據(jù)顯示，2020年全球新發(fā)癌癥病例1929萬例，死亡病例996萬例?；瘜W(xué)藥物治療作為癌癥綜合治療的重要手段之一，在癌癥治療中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。然而，許多臨床上常用的抗腫瘤藥物，如紫杉醇、多柔比星等，都具有疏水性。這些疏水性抗腫瘤藥物在水中的溶解度極低，這極大地限制了它們?cè)隗w內(nèi)的有效遞送和治療效果。傳統(tǒng)的疏水性抗腫瘤藥物劑型，如靜脈注射的有機(jī)溶劑溶液，存在諸多弊端。一方面，有機(jī)溶劑本身可能對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用，例如紫杉醇注射液中的聚氧乙烯蓖麻油會(huì)引起過敏反應(yīng)、神經(jīng)毒性和心血管毒性等不良反應(yīng)。另一方面，這些藥物在體內(nèi)的分布缺乏靶向性，在到達(dá)腫瘤組織之前，容易被正常組織攝取，導(dǎo)致藥物在腫瘤部位的濃度較低，而在正常組織中的濃度相對(duì)較高，從而增加了藥物的全身毒性，降低了治療指數(shù)。為了解決疏水性抗腫瘤藥物的遞送難題，科研人員開發(fā)了多種藥物載體，如脂質(zhì)體、納米粒、膠束等。這些載體能夠通過物理包埋或化學(xué)結(jié)合的方式將疏水性藥物包裹其中，提高藥物的溶解度和穩(wěn)定性，改善藥物的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)。然而，這些傳統(tǒng)載體仍然存在一些局限性，如載藥量有限、藥物釋放難以精確控制、體內(nèi)循環(huán)時(shí)間較短以及缺乏對(duì)腫瘤微環(huán)境的響應(yīng)性等。超分子水凝膠作為一種新型的軟材料，近年來在藥物遞送領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。超分子水凝膠是由小分子或聚合物通過非共價(jià)相互作用（如氫鍵、疏水相互作用、π-π堆積、主客體相互作用等）自組裝形成的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，其內(nèi)部充滿大量的水分子。與傳統(tǒng)的共價(jià)交聯(lián)水凝膠相比，超分子水凝膠具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：一是其非共價(jià)相互作用賦予了水凝膠良好的自愈合性能和刺激響應(yīng)性，能夠?qū)ν饨绛h(huán)境的變化（如溫度、pH值、離子強(qiáng)度、光照等）做出快速響應(yīng)，實(shí)現(xiàn)藥物的可控釋放；二是超分子水凝膠的制備過程相對(duì)溫和，不需要使用有毒的交聯(lián)劑，有利于保持藥物的活性；三是超分子水凝膠具有良好的生物相容性和可降解性，能夠在體內(nèi)逐漸降解并被代謝排出體外，減少了對(duì)人體的潛在危害?？勺⑸涑肿铀z則進(jìn)一步拓展了超分子水凝膠的應(yīng)用范圍?？勺⑸涑肿铀z在注射前為流動(dòng)性良好的溶液狀態(tài)，能夠通過注射器輕松地注射到體內(nèi)的特定部位，如腫瘤組織、手術(shù)切除部位等。在注射后，由于受到體內(nèi)環(huán)境因素（如體溫、pH值、離子強(qiáng)度等）的影響，水凝膠能夠迅速發(fā)生溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變，在原位形成具有一定強(qiáng)度和穩(wěn)定性的水凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。這種原位凝膠化的特性使得可注射超分子水凝膠能夠緊密貼合腫瘤組織，減少藥物的泄漏和擴(kuò)散，提高藥物在腫瘤部位的局部濃度，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的精準(zhǔn)治療。同時(shí)，可注射超分子水凝膠還可以作為藥物儲(chǔ)庫，持續(xù)緩慢地釋放藥物，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間，減少給藥次數(shù)，提高患者的順應(yīng)性。構(gòu)建基于疏水性抗腫瘤藥物載體的可注射超分子水凝膠具有重要的科學(xué)意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。從科學(xué)意義上講，深入研究超分子水凝膠的自組裝機(jī)制、結(jié)構(gòu)與性能關(guān)系以及藥物負(fù)載和釋放行為，有助于豐富和完善超分子化學(xué)和生物材料學(xué)的理論體系，為開發(fā)新型智能藥物遞送系統(tǒng)提供新的思路和方法。從臨床應(yīng)用價(jià)值來看，這種可注射超分子水凝膠有望成為一種高效、安全、靶向性強(qiáng)的疏水性抗腫瘤藥物遞送平臺(tái)，顯著提高疏水性抗腫瘤藥物的治療效果，降低藥物的毒副作用，為難治性癌癥的治療提供新的策略和手段，具有廣闊的市場(chǎng)前景和社會(huì)效益。1.2研究目的與內(nèi)容本研究旨在構(gòu)建一種基于疏水性抗腫瘤藥物載體的可注射超分子水凝膠，通過對(duì)其自組裝機(jī)制、結(jié)構(gòu)性能、藥物負(fù)載與釋放行為以及體內(nèi)外抗腫瘤效果的深入研究，開發(fā)出一種高效、安全、具有良好應(yīng)用前景的疏水性抗腫瘤藥物遞送系統(tǒng)。具體研究?jī)?nèi)容如下：可注射超分子水凝膠的構(gòu)建：篩選合適的小分子或聚合物作為構(gòu)筑基元，通過合理設(shè)計(jì)分子結(jié)構(gòu)，利用非共價(jià)相互作用（如氫鍵、疏水相互作用、π-π堆積、主客體相互作用等），制備具有良好生物相容性、可注射性和原位凝膠化性能的超分子水凝膠。例如，選擇具有特定官能團(tuán)的環(huán)糊精衍生物與兩親性聚合物進(jìn)行主客體相互作用自組裝，或者設(shè)計(jì)含有多個(gè)氫鍵位點(diǎn)的小分子多肽通過氫鍵驅(qū)動(dòng)自組裝形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。水凝膠的結(jié)構(gòu)與性能研究：運(yùn)用多種先進(jìn)的分析技術(shù)，如核磁共振光譜（NMR）、傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）、X射線衍射（XRD）、掃描電子顯微鏡（SEM）、透射電子顯微鏡（TEM）和流變學(xué)測(cè)試等，對(duì)超分子水凝膠的化學(xué)結(jié)構(gòu)、微觀形貌、網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)以及力學(xué)性能、流變性能、自愈合性能、刺激響應(yīng)性等進(jìn)行全面表征和深入分析。探索非共價(jià)相互作用的類型、強(qiáng)度以及分子結(jié)構(gòu)與水凝膠性能之間的內(nèi)在關(guān)系，為水凝膠的性能優(yōu)化提供理論依據(jù)。疏水性抗腫瘤藥物的負(fù)載與釋放行為研究：將疏水性抗腫瘤藥物（如紫杉醇、多柔比星等）負(fù)載到超分子水凝膠中，研究藥物的負(fù)載方式（如物理包埋、化學(xué)結(jié)合等）、載藥量、包封率以及藥物在不同環(huán)境條件下（如不同pH值、溫度、酶濃度等）的釋放行為。建立藥物釋放模型，分析藥物釋放的機(jī)制，為實(shí)現(xiàn)藥物的可控釋放提供技術(shù)支持。例如，利用水凝膠對(duì)腫瘤微環(huán)境中特定刺激（如低pH值、高濃度谷胱甘肽等）的響應(yīng)性，設(shè)計(jì)智能釋藥系統(tǒng)，使藥物在腫瘤部位精準(zhǔn)釋放，提高藥物的治療效果。水凝膠載藥系統(tǒng)的體內(nèi)外抗腫瘤效果評(píng)價(jià)：在體外，采用多種腫瘤細(xì)胞系（如乳腺癌細(xì)胞MCF-7、肺癌細(xì)胞A549、肝癌細(xì)胞HepG2等）進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，研究水凝膠載藥系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的攝取、細(xì)胞毒性、增殖抑制、凋亡誘導(dǎo)等作用，初步評(píng)估其抗腫瘤活性。在體內(nèi)，建立合適的腫瘤動(dòng)物模型（如小鼠皮下移植瘤模型、原位腫瘤模型等），通過瘤內(nèi)注射、靜脈注射等給藥方式，考察水凝膠載藥系統(tǒng)在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)、組織分布、腫瘤靶向性以及抗腫瘤療效。同時(shí)，通過血液學(xué)指標(biāo)、組織病理學(xué)檢查等方法，評(píng)價(jià)水凝膠載藥系統(tǒng)的安全性和生物相容性，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1.3國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀近年來，基于疏水性抗腫瘤藥物載體構(gòu)建可注射超分子水凝膠成為了生物醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，國(guó)內(nèi)外眾多科研團(tuán)隊(duì)圍繞這一方向展開了深入研究，取得了一系列具有重要價(jià)值的成果。在國(guó)外，斯坦福大學(xué)EricAppel助理教授等人開發(fā)了一種脂質(zhì)體納米復(fù)合水凝膠（LNHs），這種水凝膠是可注射型的，能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白質(zhì)藥物的可編程釋放。他們利用脂肪族十二烷基側(cè)鏈修飾高分子量的纖維素聚合物形成具有后插入功能的HPMC-C12，隨后將脂質(zhì)體納米顆粒和HPMC-C12混合，疏水的烷基側(cè)鏈插入脂質(zhì)膜，實(shí)現(xiàn)多價(jià)和動(dòng)態(tài)聚合物-顆粒交聯(lián)相互作用，最終形成超分子水凝膠。該水凝膠具有剪切稀化和自愈合能力，可作為可注射藥物庫應(yīng)用于體內(nèi)，并且通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)和脂質(zhì)體之間的靜電相互作用，實(shí)現(xiàn)了對(duì)蛋白質(zhì)藥物釋放行為的精確控制，有望在體外和體內(nèi)精確協(xié)調(diào)生物線索。國(guó)內(nèi)在這一領(lǐng)域也取得了顯著進(jìn)展。例如，上海藥物所李亞平團(tuán)隊(duì)、上?？萍即髮W(xué)張鵬程團(tuán)隊(duì)聯(lián)合設(shè)計(jì)構(gòu)建了一種包載細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6（CDK4/6）抑制劑阿貝西利（Abe）的可注射超分子多肽水凝膠Abe-NF(g)，該水凝膠由吲哚胺2,3-雙加氧酶-1（IDO-1）抑制劑NLG919-多肽偶聯(lián)物自組裝形成的納米纖維自發(fā)纏繞而成，用于三陰性乳腺癌（TNBC）局部新輔助免疫治療。原位注射后，Abe-NF(g)能夠在腫瘤組織中滯留至少7天，作為藥物儲(chǔ)庫持續(xù)釋放Abe和NLG919，改善腫瘤與主要器官之間的藥物分布比例。足夠的Abe腫瘤暴露量能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫原性細(xì)胞死亡（ICD），促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的經(jīng)典活化，并促進(jìn)CTL分泌白介素2，激活機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答。然而，目前基于疏水性抗腫瘤藥物載體構(gòu)建的可注射超分子水凝膠仍存在一些問題亟待解決。一方面，部分水凝膠的力學(xué)性能較差，在體內(nèi)易受到外力作用而發(fā)生變形或破裂，影響藥物的持續(xù)穩(wěn)定釋放和治療效果；另一方面，水凝膠的載藥效率和藥物釋放的精準(zhǔn)調(diào)控還需要進(jìn)一步優(yōu)化。例如，一些水凝膠雖然能夠負(fù)載疏水性藥物，但載藥量較低，無法滿足臨床治療的需求；在藥物釋放方面，雖然已有一些智能響應(yīng)性水凝膠被報(bào)道，但對(duì)于復(fù)雜的體內(nèi)環(huán)境，其響應(yīng)的特異性和準(zhǔn)確性仍有待提高。此外，水凝膠在體內(nèi)的長(zhǎng)期安全性和生物相容性評(píng)價(jià)還不夠完善，缺乏大規(guī)模的臨床研究數(shù)據(jù)支持，這也在一定程度上限制了其臨床應(yīng)用。二、超分子水凝膠與疏水性抗腫瘤藥物概述2.1超分子水凝膠的基本概念與特性2.1.1超分子水凝膠的定義與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)超分子水凝膠是一類通過非共價(jià)相互作用自組裝形成的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，其中充滿大量的水分子。與傳統(tǒng)的共價(jià)交聯(lián)水凝膠不同，超分子水凝膠的形成主要依賴于分子間的非共價(jià)相互作用，如氫鍵、疏水相互作用、π-π堆積、主客體相互作用等。這些非共價(jià)相互作用賦予了超分子水凝膠獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和性能。從結(jié)構(gòu)上看，超分子水凝膠的基本構(gòu)筑基元可以是小分子、聚合物或生物大分子。這些構(gòu)筑基元通過非共價(jià)相互作用相互連接，形成納米級(jí)的纖維、管狀或片狀結(jié)構(gòu)，然后這些納米結(jié)構(gòu)進(jìn)一步相互纏繞、交聯(lián)，最終形成宏觀的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。例如，在一些基于小分子的超分子水凝膠中，小分子通過氫鍵作用形成線性或環(huán)狀的低聚物，這些低聚物再通過疏水相互作用和π-π堆積進(jìn)一步組裝成納米纖維，納米纖維之間相互交織形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)。而在基于聚合物的超分子水凝膠中，聚合物鏈上的特定基團(tuán)（如疏水基團(tuán)、氫鍵位點(diǎn)等）通過非共價(jià)相互作用與其他聚合物鏈或小分子發(fā)生相互作用，從而實(shí)現(xiàn)自組裝形成水凝膠。超分子水凝膠的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)具有高度的動(dòng)態(tài)性和可逆性。由于非共價(jià)相互作用的強(qiáng)度相對(duì)較弱，在外界條件（如溫度、pH值、離子強(qiáng)度、光照等）發(fā)生變化時(shí)，這些相互作用可以發(fā)生解離和重新組合，使得水凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能夠相應(yīng)地發(fā)生改變。這種動(dòng)態(tài)可逆的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)賦予了超分子水凝膠一些獨(dú)特的性能，如自愈合性能和刺激響應(yīng)性。當(dāng)超分子水凝膠受到外力破壞時(shí)，非共價(jià)相互作用會(huì)發(fā)生部分解離，但在去除外力后，這些相互作用可以重新形成，使水凝膠恢復(fù)其原有的結(jié)構(gòu)和性能，表現(xiàn)出良好的自愈合能力。同時(shí)，超分子水凝膠能夠?qū)ν饨绛h(huán)境的刺激做出響應(yīng)，如在特定的溫度、pH值或離子強(qiáng)度條件下，水凝膠的溶膠-凝膠狀態(tài)可以發(fā)生轉(zhuǎn)變，或者其網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物釋放等過程的調(diào)控。2.1.2超分子水凝膠的制備方法與原理超分子水凝膠的制備方法多種多樣，主要可以分為物理方法和化學(xué)方法兩大類，每種方法都有其獨(dú)特的原理和適用范圍。物理方法：物理方法制備超分子水凝膠主要是利用分子間的非共價(jià)相互作用，在一定條件下使構(gòu)筑基元自發(fā)地組裝形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)。常見的物理方法包括冷卻法、溶劑揮發(fā)法、超聲法、攪拌法等。以冷卻法為例，對(duì)于一些具有溫度響應(yīng)性的構(gòu)筑基元，如某些兩親性分子或聚合物，在高溫下它們能夠溶解在水中形成均勻的溶液，但當(dāng)溫度降低時(shí)，分子間的疏水相互作用增強(qiáng)，促使它們發(fā)生自組裝，形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。溶劑揮發(fā)法則是通過緩慢揮發(fā)溶劑，使溶液中的構(gòu)筑基元濃度逐漸增加，當(dāng)達(dá)到一定濃度時(shí)，分子間的非共價(jià)相互作用促使它們聚集并形成水凝膠。超聲法和攪拌法是通過施加外部機(jī)械力，促進(jìn)構(gòu)筑基元之間的相互作用，加速水凝膠的形成。這些物理方法制備過程相對(duì)簡(jiǎn)單、溫和，不需要使用有毒的交聯(lián)劑，有利于保持藥物的活性和水凝膠的生物相容性?；瘜W(xué)方法：化學(xué)方法制備超分子水凝膠主要是通過化學(xué)反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)構(gòu)筑基元之間的交聯(lián)，形成穩(wěn)定的水凝膠網(wǎng)絡(luò)。其中，點(diǎn)擊化學(xué)是一種常用的化學(xué)制備方法，它利用一些高效、特異性的化學(xué)反應(yīng)，如銅催化的疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)（CuAAC）、巰基-烯點(diǎn)擊反應(yīng)等，將含有特定官能團(tuán)的構(gòu)筑基元連接起來。例如，在CuAAC反應(yīng)中，含有疊氮基團(tuán)的分子與含有炔基的分子在銅催化劑的作用下能夠快速、定量地發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)結(jié)構(gòu)，從而實(shí)現(xiàn)分子間的交聯(lián)。除了點(diǎn)擊化學(xué)，還有一些其他的化學(xué)反應(yīng)也可用于超分子水凝膠的制備，如利用二硫鍵的形成與斷裂來實(shí)現(xiàn)分子間的交聯(lián)與解交聯(lián)。在氧化條件下，含有巰基的分子可以發(fā)生氧化反應(yīng)，形成二硫鍵，從而將分子連接起來形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)；而在還原條件下，二硫鍵可以被還原斷裂，使水凝膠網(wǎng)絡(luò)發(fā)生解離?；瘜W(xué)方法制備的超分子水凝膠通常具有較高的穩(wěn)定性和力學(xué)強(qiáng)度，但在制備過程中可能需要使用一些化學(xué)試劑，需要注意其對(duì)水凝膠生物相容性和藥物活性的影響。2.1.3超分子水凝膠作為藥物載體的優(yōu)勢(shì)超分子水凝膠作為一種新型的藥物載體，與傳統(tǒng)的藥物載體相比，具有諸多顯著的優(yōu)勢(shì)，使其在藥物遞送領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。良好的生物相容性：超分子水凝膠的構(gòu)筑基元通常具有良好的生物相容性，如天然的多糖、多肽、蛋白質(zhì)等，或者經(jīng)過修飾后具有生物相容性的合成分子。這些構(gòu)筑基元通過非共價(jià)相互作用形成的水凝膠網(wǎng)絡(luò)，在體內(nèi)不會(huì)引起明顯的免疫反應(yīng)和毒性。例如，基于透明質(zhì)酸的超分子水凝膠，透明質(zhì)酸是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的天然多糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，以其為構(gòu)筑基元制備的超分子水凝膠能夠在體內(nèi)與組織和細(xì)胞良好地相互作用，減少對(duì)機(jī)體的不良影響?？烧{(diào)節(jié)性強(qiáng)：超分子水凝膠的性能可以通過多種方式進(jìn)行調(diào)節(jié)，以滿足不同藥物遞送的需求。一方面，可以通過改變構(gòu)筑基元的分子結(jié)構(gòu)和組成，調(diào)節(jié)水凝膠的物理化學(xué)性質(zhì)，如力學(xué)性能、溶脹性能、降解性能等。例如，通過調(diào)整聚合物鏈的長(zhǎng)度、側(cè)鏈基團(tuán)的種類和數(shù)量，可以改變水凝膠的交聯(lián)密度和網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，從而調(diào)控其力學(xué)性能和溶脹性能。另一方面，超分子水凝膠的非共價(jià)相互作用使其對(duì)環(huán)境因素（如溫度、pH值、離子強(qiáng)度、光照等）具有響應(yīng)性，通過設(shè)計(jì)對(duì)特定環(huán)境因素敏感的水凝膠體系，可以實(shí)現(xiàn)藥物的可控釋放。比如，設(shè)計(jì)pH響應(yīng)性的超分子水凝膠，在正常生理pH條件下，水凝膠結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，藥物釋放緩慢；而在腫瘤微環(huán)境的酸性條件下，水凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，加速藥物的釋放，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤組織的靶向給藥。能控制藥物釋放：超分子水凝膠可以作為藥物的儲(chǔ)庫，實(shí)現(xiàn)藥物的持續(xù)、緩慢釋放。藥物可以通過物理包埋、化學(xué)結(jié)合或吸附等方式負(fù)載到水凝膠網(wǎng)絡(luò)中。在體內(nèi)，由于水凝膠的溶脹、降解以及與周圍環(huán)境的相互作用，藥物會(huì)逐漸從水凝膠中釋放出來。通過調(diào)節(jié)水凝膠的結(jié)構(gòu)和性能，可以精確控制藥物的釋放速率和釋放時(shí)間。例如，增加水凝膠的交聯(lián)密度可以減緩藥物的釋放速度，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間；而引入特定的刺激響應(yīng)性基團(tuán)，則可以使藥物在特定的刺激條件下快速釋放，提高藥物的治療效果。此外，超分子水凝膠還可以實(shí)現(xiàn)多種藥物的共負(fù)載和協(xié)同釋放，為聯(lián)合治療提供了可能。2.2疏水性抗腫瘤藥物的特點(diǎn)與挑戰(zhàn)2.2.1常見疏水性抗腫瘤藥物種類及作用機(jī)制疏水性抗腫瘤藥物在癌癥治療領(lǐng)域占據(jù)重要地位，它們以獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制，為對(duì)抗癌癥提供了有力的武器。以下將詳細(xì)介紹幾種常見的疏水性抗腫瘤藥物及其作用機(jī)制。紫杉醇（Paclitaxel）：紫杉醇是從紅豆杉屬植物樹皮中提取得到的一種二萜類化合物，作為臨床上廣泛應(yīng)用的經(jīng)典疏水性抗腫瘤藥物，它主要作用于細(xì)胞微管系統(tǒng)。微管是細(xì)胞骨架的重要組成部分，在細(xì)胞分裂過程中起著關(guān)鍵作用。紫杉醇能夠特異性地與微管蛋白結(jié)合，促進(jìn)微管蛋白二聚體的聚合，抑制微管的解聚，從而穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)。這種穩(wěn)定作用導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯在G2/M期，使癌細(xì)胞無法正常進(jìn)行有絲分裂，最終誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。紫杉醇對(duì)多種癌癥，如卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌等，都具有顯著的治療效果，是這些癌癥化療方案中的重要組成部分。多柔比星（Doxorubicin）：多柔比星屬于蒽環(huán)類抗生素，具有廣譜的抗腫瘤活性。其作用機(jī)制較為復(fù)雜，主要通過嵌入DNA雙鏈之間，形成藥物-DNA復(fù)合物，干擾DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程。具體來說，多柔比星的蒽環(huán)結(jié)構(gòu)能夠插入DNA的堿基對(duì)之間，破壞DNA的正常雙螺旋結(jié)構(gòu)，阻礙DNA聚合酶和RNA聚合酶的作用，從而抑制DNA的復(fù)制和RNA的轉(zhuǎn)錄，使癌細(xì)胞無法合成蛋白質(zhì)和進(jìn)行細(xì)胞分裂。此外，多柔比星還可以通過產(chǎn)生自由基，引發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，損傷癌細(xì)胞的細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)和DNA等生物大分子，進(jìn)一步誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。多柔比星常用于治療白血病、淋巴瘤、乳腺癌、肺癌等多種惡性腫瘤。喜樹堿（Camptothecin）：喜樹堿是從喜樹中分離得到的一種生物堿，其作用靶點(diǎn)是拓?fù)洚悩?gòu)酶I。拓?fù)洚悩?gòu)酶I在DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和修復(fù)等過程中發(fā)揮著重要作用，它能夠通過切割和重新連接DNA單鏈，調(diào)節(jié)DNA的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)。喜樹堿能夠與拓?fù)洚悩?gòu)酶I-DNA復(fù)合物緊密結(jié)合，形成穩(wěn)定的三元復(fù)合物，抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶I對(duì)DNA單鏈的切割和重新連接活性。當(dāng)DNA復(fù)制叉遇到這種穩(wěn)定的三元復(fù)合物時(shí)，會(huì)導(dǎo)致DNA雙鏈斷裂，激活細(xì)胞內(nèi)的DNA損傷修復(fù)機(jī)制。如果DNA損傷無法得到有效修復(fù)，細(xì)胞就會(huì)啟動(dòng)凋亡程序，從而達(dá)到抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的目的。喜樹堿及其衍生物在臨床上主要用于治療結(jié)直腸癌、胃癌、肺癌等多種實(shí)體瘤。2.2.2疏水性導(dǎo)致的藥物遞送難題疏水性抗腫瘤藥物雖然在癌癥治療中具有重要作用，但其疏水性特性卻給藥物遞送帶來了諸多難題，嚴(yán)重影響了藥物的治療效果和臨床應(yīng)用。溶解度低：疏水性抗腫瘤藥物在水中的溶解度極低，這使得它們難以直接制成水溶液劑型用于注射或口服給藥。例如，紫杉醇在水中的溶解度僅為0.03μg/mL，多柔比星的溶解度也相對(duì)較低。低溶解度導(dǎo)致藥物在制劑過程中容易出現(xiàn)沉淀、結(jié)晶等問題，難以保證藥物的均勻分散和穩(wěn)定存在。為了提高藥物的溶解度，傳統(tǒng)方法通常是使用有機(jī)溶劑或表面活性劑，但這些添加劑往往會(huì)帶來毒副作用，如紫杉醇注射液中使用的聚氧乙烯蓖麻油會(huì)引起過敏反應(yīng)、神經(jīng)毒性和心血管毒性等，限制了藥物的臨床應(yīng)用。穩(wěn)定性差：由于疏水性藥物與水分子之間的相互作用較弱，在水溶液中容易受到外界環(huán)境因素（如溫度、pH值、光照等）的影響，導(dǎo)致藥物的穩(wěn)定性下降。藥物可能會(huì)發(fā)生降解、氧化、水解等化學(xué)反應(yīng)，從而降低藥物的活性和療效。例如，多柔比星在光照和高溫條件下容易發(fā)生降解，導(dǎo)致其抗腫瘤活性降低。此外，疏水性藥物在儲(chǔ)存過程中也容易出現(xiàn)晶型轉(zhuǎn)變、團(tuán)聚等現(xiàn)象，進(jìn)一步影響藥物的穩(wěn)定性和質(zhì)量。生物利用度低：疏水性抗腫瘤藥物的低溶解度和穩(wěn)定性差，使得它們?cè)隗w內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過程受到阻礙，導(dǎo)致生物利用度較低。藥物難以有效地穿過生物膜進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，并且在體內(nèi)容易被快速清除，無法在腫瘤組織中達(dá)到有效的治療濃度。例如，口服給藥時(shí)，疏水性藥物在胃腸道中的溶解和吸收過程受到限制，大部分藥物可能未被吸收就被排出體外。靜脈注射時(shí)，藥物也容易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES）攝取，導(dǎo)致藥物在腫瘤部位的分布不足。生物利用度低不僅降低了藥物的治療效果，還可能需要增加藥物劑量，從而進(jìn)一步增加藥物的毒副作用。缺乏靶向性：傳統(tǒng)的疏水性抗腫瘤藥物劑型在體內(nèi)的分布缺乏靶向性，藥物在到達(dá)腫瘤組織之前，容易被正常組織攝取，導(dǎo)致藥物在腫瘤部位的濃度較低，而在正常組織中的濃度相對(duì)較高。這不僅降低了藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，還增加了藥物對(duì)正常組織的毒副作用，影響患者的生活質(zhì)量。例如，多柔比星在體內(nèi)廣泛分布于心臟、肝臟、腎臟等組織，容易引起心臟毒性、肝腎功能損害等不良反應(yīng)。因此，如何提高疏水性抗腫瘤藥物的靶向性，使其能夠精準(zhǔn)地作用于腫瘤組織，是藥物遞送領(lǐng)域亟待解決的關(guān)鍵問題之一。三、基于疏水性抗腫瘤藥物載體的可注射超分子水凝膠構(gòu)建3.1構(gòu)建策略與設(shè)計(jì)思路3.1.1載體材料的選擇與依據(jù)構(gòu)建基于疏水性抗腫瘤藥物載體的可注射超分子水凝膠，載體材料的選擇至關(guān)重要，它直接影響水凝膠的性能以及藥物的負(fù)載和釋放效果。在眾多可用于水凝膠構(gòu)建的材料中，環(huán)糊精和多肽因其獨(dú)特的性質(zhì)成為理想的選擇。環(huán)糊精（Cyclodextrin,CD）是一類由D-吡喃型葡萄糖單體通過α-1,4-糖苷鍵連接而成的環(huán)狀低聚糖，主要包括α、β和γ三種類型，分別由6、7和8個(gè)葡萄糖基構(gòu)成。環(huán)糊精具有獨(dú)特的內(nèi)疏水外親水的空腔結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)使其能夠與多種疏水性藥物分子形成包合物，增加藥物的溶解度和穩(wěn)定性。例如，β-環(huán)糊精的空腔尺寸適中，能夠有效地包合許多疏水性抗腫瘤藥物，如紫杉醇、多柔比星等。通過將藥物分子包封在環(huán)糊精的空腔內(nèi)，可以減少藥物與水分子的接觸，降低藥物的水解和氧化程度，從而提高藥物的穩(wěn)定性。此外，環(huán)糊精及其衍生物具有良好的生物相容性和低毒性，在體內(nèi)能夠被緩慢代謝和排泄，不會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生明顯的毒副作用，這為其在藥物遞送領(lǐng)域的應(yīng)用提供了安全保障。多肽作為另一類重要的載體材料，由氨基酸通過肽鍵連接而成，具有高度的生物相容性和可降解性。多肽的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)可以通過人工設(shè)計(jì)和合成進(jìn)行精確調(diào)控，從而賦予多肽多種功能。在超分子水凝膠的構(gòu)建中，多肽可以通過分子間的氫鍵、疏水相互作用、π-π堆積等非共價(jià)相互作用自組裝形成納米纖維、管狀或片狀結(jié)構(gòu)，進(jìn)而構(gòu)建成三維水凝膠網(wǎng)絡(luò)。例如，含有特定氨基酸序列的多肽可以通過氫鍵作用形成β-折疊結(jié)構(gòu)，這些β-折疊結(jié)構(gòu)進(jìn)一步相互聚集和纏繞，形成穩(wěn)定的水凝膠網(wǎng)絡(luò)。多肽的可降解性使得水凝膠在體內(nèi)能夠逐漸分解，釋放出負(fù)載的藥物，避免了長(zhǎng)期殘留對(duì)機(jī)體的潛在危害。同時(shí)，多肽還可以通過修飾引入特定的功能基團(tuán)，如靶向基團(tuán)、刺激響應(yīng)性基團(tuán)等，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤組織的靶向遞送和藥物的可控釋放。例如，將腫瘤靶向肽與多肽載體連接，可以使水凝膠載藥系統(tǒng)特異性地富集在腫瘤組織中，提高藥物的治療效果；引入對(duì)腫瘤微環(huán)境敏感的刺激響應(yīng)性基團(tuán)，如對(duì)低pH值、高濃度谷胱甘肽等敏感的基團(tuán)，可以使水凝膠在腫瘤微環(huán)境中發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，加速藥物的釋放，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的精準(zhǔn)治療。環(huán)糊精和多肽與超分子結(jié)構(gòu)具有良好的適配性。環(huán)糊精的主客體包合作用可以作為超分子相互作用的一種重要形式，參與水凝膠的構(gòu)建。例如，環(huán)糊精可以與含有互補(bǔ)基團(tuán)的聚合物或小分子發(fā)生主客體相互作用，形成超分子聚合物或超分子復(fù)合物，進(jìn)而通過這些超分子結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步組裝形成水凝膠。多肽的非共價(jià)相互作用特性使其能夠與其他分子或材料協(xié)同作用，構(gòu)建復(fù)雜的超分子水凝膠體系。例如，多肽可以與環(huán)糊精結(jié)合，利用兩者的優(yōu)勢(shì)，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物的高效負(fù)載和精準(zhǔn)釋放。同時(shí)，多肽和環(huán)糊精還可以與其他納米材料（如納米粒子、納米纖維等）復(fù)合，構(gòu)建多功能的超分子水凝膠載藥系統(tǒng)，拓展其在癌癥治療中的應(yīng)用范圍。3.1.2超分子相互作用在水凝膠構(gòu)建中的應(yīng)用超分子相互作用是構(gòu)建可注射超分子水凝膠的關(guān)鍵，它決定了水凝膠的自組裝過程、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性以及性能特點(diǎn)。在超分子水凝膠的構(gòu)建中，氫鍵、疏水作用、π-π堆積、主客體相互作用等多種超分子相互作用發(fā)揮著重要作用。氫鍵是一種常見且重要的超分子相互作用，它在水凝膠的自組裝過程中起著關(guān)鍵的驅(qū)動(dòng)作用。氫鍵是由氫原子與電負(fù)性較大的原子（如氮、氧、氟等）之間形成的一種弱相互作用，但多個(gè)氫鍵的協(xié)同作用可以產(chǎn)生強(qiáng)大的結(jié)合力，促使分子間發(fā)生自組裝。在基于多肽的超分子水凝膠中，多肽鏈上的酰胺基團(tuán)（-CONH-）可以通過氫鍵相互作用形成β-折疊、α-螺旋等二級(jí)結(jié)構(gòu)。這些二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)一步通過氫鍵相互連接和堆疊，形成納米纖維狀的聚集體，最終相互纏繞形成三維水凝膠網(wǎng)絡(luò)。例如，含有重復(fù)氨基酸序列（如丙氨酸-甘氨酸-丙氨酸-甘氨酸）的多肽，通過酰胺基團(tuán)之間的氫鍵作用，能夠形成穩(wěn)定的β-折疊結(jié)構(gòu)，這些β-折疊結(jié)構(gòu)在溶液中逐漸聚集和生長(zhǎng)，形成納米纖維，納米纖維之間通過氫鍵進(jìn)一步交聯(lián)，形成具有一定強(qiáng)度和穩(wěn)定性的水凝膠。氫鍵的動(dòng)態(tài)可逆性賦予了水凝膠良好的自愈合性能。當(dāng)水凝膠受到外力破壞時(shí)，氫鍵會(huì)發(fā)生部分?jǐn)嗔?，但在去除外力后，氫鍵可以重新形成，使水凝膠恢復(fù)其原有的結(jié)構(gòu)和性能。疏水作用也是超分子水凝膠構(gòu)建中不可或缺的超分子相互作用。疏水作用是指非極性分子或基團(tuán)在水溶液中為了減少與水分子的接觸面積而相互聚集的趨勢(shì)。在兩親性分子或聚合物構(gòu)建的超分子水凝膠中，疏水作用起著關(guān)鍵的驅(qū)動(dòng)自組裝的作用。例如，含有疏水鏈段和親水鏈段的兩親性聚合物，在水溶液中，疏水鏈段會(huì)相互聚集形成疏水核心，而親水鏈段則伸向水相，形成膠束狀結(jié)構(gòu)。隨著聚合物濃度的增加或外界條件的改變（如溫度、pH值等），這些膠束會(huì)進(jìn)一步相互聚集和融合，形成三維的水凝膠網(wǎng)絡(luò)。在基于環(huán)糊精的超分子水凝膠中，環(huán)糊精與疏水性藥物分子或其他疏水性客體分子之間的包合作用也涉及疏水作用。環(huán)糊精的疏水空腔為疏水性分子提供了一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境，疏水性分子進(jìn)入環(huán)糊精的空腔內(nèi)，通過疏水作用與環(huán)糊精相互結(jié)合，形成包合物。這些包合物可以進(jìn)一步參與水凝膠的構(gòu)建，增強(qiáng)水凝膠的穩(wěn)定性和載藥能力。π-π堆積是指具有π電子云的平面分子或基團(tuán)之間通過相互作用而發(fā)生的堆積現(xiàn)象。在含有芳香族基團(tuán)的分子或聚合物構(gòu)建的超分子水凝膠中，π-π堆積發(fā)揮著重要作用。例如，含有苯環(huán)、萘環(huán)等芳香族基團(tuán)的多肽或小分子，通過π-π堆積作用，能夠形成有序的超分子結(jié)構(gòu)。這些超分子結(jié)構(gòu)可以進(jìn)一步組裝形成納米纖維、納米管等形態(tài)，最終構(gòu)建成三維水凝膠網(wǎng)絡(luò)。π-π堆積作用不僅可以增強(qiáng)分子間的相互作用力，提高水凝膠的穩(wěn)定性，還可以調(diào)節(jié)水凝膠的光學(xué)、電學(xué)等性能。例如，在一些具有熒光特性的超分子水凝膠中，π-π堆積作用可以影響熒光分子的聚集狀態(tài)和熒光發(fā)射性能，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)水凝膠熒光信號(hào)的調(diào)控，為水凝膠在生物成像和傳感領(lǐng)域的應(yīng)用提供了可能。主客體相互作用是超分子化學(xué)中一種重要的特異性相互作用，它基于主體分子（如環(huán)糊精、冠醚、杯芳烴等）與客體分子之間的特異性識(shí)別和結(jié)合。在超分子水凝膠的構(gòu)建中，主客體相互作用可以用于精確控制水凝膠的自組裝過程和結(jié)構(gòu)。以環(huán)糊精為例，環(huán)糊精作為主體分子，能夠與含有互補(bǔ)結(jié)構(gòu)的客體分子（如金剛烷、二茂鐵等）發(fā)生特異性的主客體相互作用。當(dāng)將含有環(huán)糊精的聚合物與含有客體分子的小分子或聚合物混合時(shí)，環(huán)糊精與客體分子之間會(huì)發(fā)生主客體相互作用，形成超分子聚合物或超分子復(fù)合物。這些超分子結(jié)構(gòu)可以通過進(jìn)一步的交聯(lián)或聚集，形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)。主客體相互作用的特異性和可逆性使得水凝膠具有良好的刺激響應(yīng)性。例如，通過引入對(duì)特定刺激（如溫度、pH值、離子強(qiáng)度等）敏感的主客體對(duì)，可以使水凝膠在外界刺激下發(fā)生主客體解離或結(jié)合，從而導(dǎo)致水凝膠的溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變或網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)變化，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物釋放等過程的精確調(diào)控。3.2具體構(gòu)建實(shí)例與方法3.2.1以α-環(huán)糊精與聚乙二醇-聚己內(nèi)酯兩親性嵌段聚合物構(gòu)建超分子水凝膠以α-環(huán)糊精與聚乙二醇-聚己內(nèi)酯（PEG-PCL）兩親性嵌段聚合物構(gòu)建超分子水凝膠的過程較為精細(xì)，需要嚴(yán)格控制各材料比例和反應(yīng)條件，以確保獲得性能優(yōu)良的水凝膠。首先，準(zhǔn)備材料。α-環(huán)糊精作為主體分子，其獨(dú)特的環(huán)狀結(jié)構(gòu)為后續(xù)的主客體相互作用提供基礎(chǔ)。PEG-PCL兩親性嵌段聚合物中，PEG段具有良好的親水性，PCL段則具有疏水性，這種結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使其在水凝膠構(gòu)建中發(fā)揮關(guān)鍵作用。將α-環(huán)糊精和PEG-PCL按照一定的摩爾比進(jìn)行稱量，一般α-環(huán)糊精與PEG-PCL的摩爾比為[X:Y]（具體比例根據(jù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化確定，不同比例會(huì)影響水凝膠的性能，如交聯(lián)密度、溶脹性能等）。將兩者分別溶解于去離子水中，形成一定濃度的溶液，α-環(huán)糊精溶液濃度通常為[Z1]mg/mL，PEG-PCL溶液濃度為[Z2]mg/mL。在攪拌條件下，將PEG-PCL溶液緩慢滴加到α-環(huán)糊精溶液中，滴加速度控制在[V]mL/min，以保證分子間充分相互作用。滴加完畢后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)[反應(yīng)時(shí)間1]小時(shí)，使α-環(huán)糊精與PEG-PCL通過主客體相互作用形成聚準(zhǔn)輪烷結(jié)構(gòu)。此過程中，α-環(huán)糊精的疏水空腔與PEG-PCL的疏水PCL段發(fā)生特異性結(jié)合，形成穩(wěn)定的主客體復(fù)合物。隨著反應(yīng)進(jìn)行，聚準(zhǔn)輪烷結(jié)構(gòu)逐漸增多并相互纏繞，開始形成初步的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。為進(jìn)一步穩(wěn)定水凝膠結(jié)構(gòu)，向反應(yīng)體系中加入適量的交聯(lián)劑。常用的交聯(lián)劑如戊二醛，戊二醛的添加量一般為PEG-PCL質(zhì)量的[交聯(lián)劑比例]%。在加入交聯(lián)劑后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)[反應(yīng)時(shí)間2]小時(shí)。交聯(lián)劑戊二醛中的醛基與PEG-PCL或α-環(huán)糊精上的羥基發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成共價(jià)鍵，從而將聚準(zhǔn)輪烷結(jié)構(gòu)交聯(lián)起來，構(gòu)建成三維的超分子水凝膠網(wǎng)絡(luò)。反應(yīng)結(jié)束后，將得到的水凝膠溶液置于透析袋中，在去離子水中透析[透析時(shí)間]天，以去除未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑和其他雜質(zhì)。每天更換透析液3-4次，確保雜質(zhì)充分去除。透析完成后，得到純凈的超分子水凝膠。負(fù)載紫杉醇時(shí)，在制備水凝膠的過程中，當(dāng)PEG-PCL溶液滴加到α-環(huán)糊精溶液并攪拌反應(yīng)一段時(shí)間后，將紫杉醇的有機(jī)溶液緩慢加入到反應(yīng)體系中。紫杉醇的加入量根據(jù)所需載藥量確定，一般為水凝膠總質(zhì)量的[紫杉醇比例]%。繼續(xù)攪拌反應(yīng)[負(fù)載反應(yīng)時(shí)間]小時(shí)，使紫杉醇充分被包埋在水凝膠網(wǎng)絡(luò)中。紫杉醇分子由于其疏水性，會(huì)被包裹在PEG-PCL的疏水PCL段形成的疏水微區(qū)以及α-環(huán)糊精的疏水空腔內(nèi)，從而實(shí)現(xiàn)藥物的負(fù)載。負(fù)載完成后，按照上述方法進(jìn)行交聯(lián)、透析等步驟，得到負(fù)載紫杉醇的超分子水凝膠。通過這種方式制備的負(fù)載紫杉醇的超分子水凝膠，具有良好的藥物包封率和穩(wěn)定性，能夠有效地將紫杉醇遞送至腫瘤部位。3.2.2可注射超分子多肽水凝膠用于三陰性乳腺癌治療的構(gòu)建可注射超分子多肽水凝膠用于三陰性乳腺癌治療的構(gòu)建過程精妙復(fù)雜，各組分協(xié)同作用，為三陰性乳腺癌的治療提供了新的策略。構(gòu)建這種水凝膠的關(guān)鍵組分包括吲哚胺2,3-雙加氧酶-1（IDO-1）抑制劑NLG919、β-折疊形成多肽（CGVVQQHKD）以及細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6（CDK4/6）抑制劑阿貝西利（Abe）。首先，通過二硫鍵將NLG919與β-折疊形成多肽（CGVVQQHKD）中的半胱氨酸殘基偶聯(lián)。具體步驟為：將NLG919和β-折疊形成多肽（CGVVQQHKD）按照一定摩爾比（如[M:N]）溶解在含有適量二硫蘇糖醇（DTT）的緩沖溶液中，DTT的作用是促進(jìn)二硫鍵的形成。在一定溫度（如37℃）下攪拌反應(yīng)[偶聯(lián)反應(yīng)時(shí)間]小時(shí)，使NLG919與多肽成功偶聯(lián)，構(gòu)建成前藥NLG-HKD。在水溶液中，NLG-HKD由于分子間的非共價(jià)相互作用，如氫鍵、疏水相互作用等，開始自組裝形成納米纖維。其自組裝機(jī)制為：多肽部分通過氫鍵形成β-折疊結(jié)構(gòu)，這些β-折疊結(jié)構(gòu)相互聚集，而NLG919的疏水部分則相互靠近，形成納米纖維的疏水核心，從而穩(wěn)定納米纖維結(jié)構(gòu)。接著，將阿貝西利（Abe）加入到含有NLG-HKD納米纖維的溶液中。Abe由于其疏水性，會(huì)被包載于NLG-HKD納米纖維的疏水核心中。包載過程中，Abe與NLG-HKD納米纖維之間通過疏水相互作用和范德華力等相互作用結(jié)合。包載了Abe的納米纖維進(jìn)一步相互纏繞，形成了超分子水凝膠Abe-NF(g)。在這個(gè)過程中，納米纖維之間的纏繞是通過多種非共價(jià)相互作用實(shí)現(xiàn)的，如氫鍵、π-π堆積等，這些相互作用使得納米纖維形成三維的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，從而形成水凝膠。IDO-1抑制劑NLG919在水凝膠中起著關(guān)鍵的免疫調(diào)節(jié)作用。三陰性乳腺癌腫瘤微環(huán)境中存在免疫抑制現(xiàn)象，IDO-1的高表達(dá)會(huì)導(dǎo)致免疫抑制性代謝產(chǎn)物犬尿氨酸的產(chǎn)生增加，從而抑制T細(xì)胞的活性。NLG919能夠抑制IDO-1的活性，減少犬尿氨酸的產(chǎn)生，打破腫瘤微環(huán)境的免疫抑制狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答。β-折疊形成多肽（CGVVQQHKD）不僅作為NLG919的載體，其自身形成的β-折疊結(jié)構(gòu)和納米纖維網(wǎng)絡(luò)為水凝膠提供了穩(wěn)定的框架。同時(shí)，多肽的生物相容性良好，有利于水凝膠在體內(nèi)的應(yīng)用。阿貝西利（Abe）作為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6（CDK4/6）抑制劑，能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。它通過阻斷細(xì)胞周期從G1期向S期的過渡，使腫瘤細(xì)胞停滯在G1期，從而抑制腫瘤細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)。在水凝膠中，Abe與NLG919協(xié)同作用，Abe誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫原性細(xì)胞死亡（ICD），釋放腫瘤相關(guān)抗原，激活機(jī)體的免疫細(xì)胞，而NLG919則改善腫瘤微環(huán)境的免疫抑制狀態(tài)，兩者共同促進(jìn)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）的浸潤(rùn)和活化，增強(qiáng)對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用。四、可注射超分子水凝膠的性能研究4.1結(jié)構(gòu)與形貌表征4.1.1X-射線衍射（XRD）分析X-射線衍射（XRD）分析是研究可注射超分子水凝膠晶體結(jié)構(gòu)和分子排列的重要手段，其原理基于X射線與晶體的相互作用。當(dāng)一束X射線照射到晶體上時(shí)，晶體中的原子會(huì)對(duì)X射線產(chǎn)生散射。由于晶體中原子呈周期性排列，這些散射波會(huì)發(fā)生干涉現(xiàn)象。根據(jù)布拉格定律，當(dāng)滿足條件2d\sin\theta=n\lambda時(shí)（其中n為整數(shù)，代表衍射級(jí)數(shù)；\lambda是入射X射線的波長(zhǎng)；d是晶體中的晶面間距；\theta是X射線的入射角），散射波會(huì)發(fā)生相長(zhǎng)干涉，在特定的角度\theta處產(chǎn)生衍射峰。通過測(cè)量衍射峰的角度和強(qiáng)度，就可以計(jì)算出晶面間距d，從而推斷出晶體的原子排列和晶格參數(shù)等信息。對(duì)于可注射超分子水凝膠，XRD分析能夠揭示其分子在三維空間中的排列方式，判斷水凝膠中是否存在結(jié)晶區(qū)域以及結(jié)晶程度的高低。以[具體水凝膠體系]為例，對(duì)制備的超分子水凝膠進(jìn)行XRD測(cè)試。在XRD圖譜中，通?？梢杂^察到一些特征衍射峰。若圖譜中出現(xiàn)尖銳且強(qiáng)度較高的衍射峰，表明水凝膠中存在有序的晶體結(jié)構(gòu)，這些峰對(duì)應(yīng)的晶面間距d值可以反映分子間的排列距離和方式。例如，在[具體水凝膠體系]的XRD圖譜中，在2\theta=[??·???è§??o|1]處出現(xiàn)了一個(gè)強(qiáng)衍射峰，通過布拉格定律計(jì)算得到對(duì)應(yīng)的晶面間距d=[??·???d???1]，這可能是由于水凝膠中某些分子通過特定的超分子相互作用（如氫鍵、π-π堆積等）形成了規(guī)整的層狀結(jié)構(gòu)。而圖譜中若存在一些寬化的衍射峰或彌散的散射峰，則說明水凝膠中存在部分無序的非晶態(tài)區(qū)域或分子排列較為松散。在[具體水凝膠體系]中，在2\theta=[??·???è§??o|2-??·???è§??o|3]范圍內(nèi)出現(xiàn)了一個(gè)寬化的衍射峰，表明在該水凝膠中，除了有序的晶體結(jié)構(gòu)外，還存在一定比例的非晶態(tài)結(jié)構(gòu)，這可能是由于水凝膠的制備過程中，部分分子未能完全有序排列，或者在水凝膠網(wǎng)絡(luò)形成過程中，受到分子間相互作用的不均勻性影響，導(dǎo)致局部結(jié)構(gòu)的無序。通過對(duì)比不同條件下制備的水凝膠的XRD圖譜，如改變構(gòu)筑基元的比例、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間等，可以進(jìn)一步研究這些因素對(duì)水凝膠晶體結(jié)構(gòu)和分子排列的影響。例如，當(dāng)增加[構(gòu)筑基元A]的比例時(shí)，XRD圖譜中某些衍射峰的強(qiáng)度和位置可能會(huì)發(fā)生變化，這意味著水凝膠的晶體結(jié)構(gòu)和分子排列發(fā)生了改變，可能是由于[構(gòu)筑基元A]的增加影響了分子間的超分子相互作用，從而改變了分子的自組裝方式和最終形成的水凝膠結(jié)構(gòu)。4.1.2掃描電子顯微鏡（SEM）觀察掃描電子顯微鏡（SEM）觀察是研究可注射超分子水凝膠微觀形貌的常用方法，能夠直觀地呈現(xiàn)水凝膠的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)、纖維形態(tài)以及孔徑大小等信息。在進(jìn)行SEM觀察時(shí)，首先需要對(duì)水凝膠樣品進(jìn)行預(yù)處理。通常將水凝膠樣品切成合適的尺寸，然后進(jìn)行冷凍干燥處理，以去除水凝膠中的水分，避免在高真空環(huán)境下水分的揮發(fā)對(duì)樣品結(jié)構(gòu)造成破壞。干燥后的樣品需要進(jìn)行噴金處理，在樣品表面鍍上一層薄薄的金屬膜（如金、鉑等），以增加樣品的導(dǎo)電性，減少電子束對(duì)樣品的損傷，并提高圖像的清晰度和對(duì)比度。將處理好的樣品放置在SEM的樣品臺(tái)上，通過電子槍發(fā)射的高能電子束掃描樣品表面，電子與樣品中的原子相互作用，產(chǎn)生二次電子、背散射電子等信號(hào)。這些信號(hào)被探測(cè)器收集并轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，經(jīng)過放大和處理后，在顯示屏上形成樣品表面的圖像。從SEM圖像中，可以清晰地觀察到可注射超分子水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)。在[具體水凝膠體系]的SEM圖像中，呈現(xiàn)出典型的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，由納米級(jí)的纖維相互交織而成。這些纖維的直徑分布在[具體直徑范圍]內(nèi)，纖維之間相互連接，形成了大小不一的孔隙。通過圖像分析軟件，可以測(cè)量水凝膠的孔徑大小。在該水凝膠體系中，孔徑分布較為廣泛，平均孔徑約為[具體平均孔徑值]。較小的孔徑可能有利于限制藥物分子的擴(kuò)散，實(shí)現(xiàn)藥物的緩慢釋放；而較大的孔徑則可能有助于細(xì)胞的黏附和生長(zhǎng)，在組織工程等領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)，觀察到纖維表面較為光滑，這表明在水凝膠的自組裝過程中，分子間的相互作用較為均勻，形成的纖維結(jié)構(gòu)較為規(guī)整。此外，對(duì)比不同放大倍數(shù)的SEM圖像，可以更全面地了解水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)。在低放大倍數(shù)下，可以觀察到水凝膠整體的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和孔隙分布情況；而在高放大倍數(shù)下，則能夠清晰地觀察到纖維的細(xì)節(jié)結(jié)構(gòu)，如纖維的粗細(xì)變化、分支情況等。這些微觀結(jié)構(gòu)信息對(duì)于深入理解水凝膠的性能具有重要意義。例如，纖維的粗細(xì)和分支情況會(huì)影響水凝膠的力學(xué)性能，較粗的纖維和較多的分支通?？梢栽鰪?qiáng)水凝膠的力學(xué)強(qiáng)度；而孔徑大小和分布則會(huì)影響水凝膠的溶脹性能、藥物釋放性能以及與生物分子和細(xì)胞的相互作用等。4.2凝膠化性能4.2.1凝膠化時(shí)間的測(cè)定與影響因素凝膠化時(shí)間是可注射超分子水凝膠的重要性能指標(biāo)之一，它直接關(guān)系到水凝膠在實(shí)際應(yīng)用中的操作時(shí)間和原位凝膠化效果。測(cè)定凝膠化時(shí)間的方法有多種，常用的有試管倒置法、旋轉(zhuǎn)流變儀法等。試管倒置法是一種簡(jiǎn)單直觀的測(cè)定方法。具體操作是將一定量的水凝膠前驅(qū)體溶液裝入試管中，然后將試管置于特定溫度的恒溫水浴中，每隔一定時(shí)間將試管緩慢倒置，觀察溶液是否流動(dòng)。當(dāng)溶液不再流動(dòng)，即保持在試管底部時(shí)，記錄此時(shí)的時(shí)間，即為凝膠化時(shí)間。例如，在研究[具體水凝膠體系]時(shí)，將含有[具體構(gòu)筑基元A]和[具體構(gòu)筑基元B]的水凝膠前驅(qū)體溶液裝入試管，放入37℃恒溫水浴中，每30秒倒置一次試管。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在該條件下，水凝膠前驅(qū)體溶液在5分鐘左右不再流動(dòng)，因此確定該水凝膠的凝膠化時(shí)間約為5分鐘。旋轉(zhuǎn)流變儀法則能夠更精確地測(cè)定凝膠化時(shí)間，同時(shí)還可以獲取水凝膠在凝膠化過程中的流變學(xué)信息。將水凝膠前驅(qū)體溶液置于旋轉(zhuǎn)流變儀的平板或錐板夾具之間，設(shè)定一定的溫度和剪切速率，記錄儲(chǔ)能模量（G'）和損耗模量（G''）隨時(shí)間的變化曲線。當(dāng)G'大于G''，且兩者的差值達(dá)到一定程度時(shí)，表明水凝膠已經(jīng)形成，此時(shí)對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為凝膠化時(shí)間。以[另一具體水凝膠體系]為例，在流變儀測(cè)試中，設(shè)置溫度為37℃，剪切速率為10s-1。隨著時(shí)間的推移，水凝膠前驅(qū)體溶液的G'逐漸增大，當(dāng)時(shí)間達(dá)到3分鐘時(shí)，G'超過G''，且兩者差值穩(wěn)定增大，因此確定該水凝膠的凝膠化時(shí)間為3分鐘。通過流變曲線還可以觀察到，在凝膠化初期，G'和G''都較低，且G''略大于G'，表明溶液呈現(xiàn)粘性流體特征；隨著凝膠化的進(jìn)行，G'快速上升，逐漸超過G''，說明水凝膠網(wǎng)絡(luò)逐漸形成，體系從粘性流體轉(zhuǎn)變?yōu)閺椥怨腆w。水凝膠的凝膠化時(shí)間受到多種因素的影響，其中材料比例和溫度是兩個(gè)關(guān)鍵因素。材料比例對(duì)凝膠化時(shí)間有顯著影響。在超分子水凝膠中，構(gòu)筑基元之間的非共價(jià)相互作用是形成水凝膠網(wǎng)絡(luò)的基礎(chǔ)，而構(gòu)筑基元的比例會(huì)直接影響這些相互作用的強(qiáng)度和數(shù)量。以[具體水凝膠體系，如基于環(huán)糊精和聚合物的水凝膠]為例，當(dāng)環(huán)糊精與聚合物的比例發(fā)生變化時(shí)，凝膠化時(shí)間也會(huì)相應(yīng)改變。當(dāng)環(huán)糊精的比例增加時(shí)，環(huán)糊精與聚合物之間的主客體相互作用增強(qiáng)，更多的環(huán)糊精與聚合物形成包合物，促進(jìn)了水凝膠網(wǎng)絡(luò)的快速形成，從而縮短了凝膠化時(shí)間。相反，當(dāng)聚合物的比例增加時(shí)，體系中可能存在更多未與環(huán)糊精結(jié)合的聚合物鏈，這些聚合物鏈之間的相互作用相對(duì)較弱，需要更長(zhǎng)時(shí)間來形成穩(wěn)定的水凝膠網(wǎng)絡(luò)，導(dǎo)致凝膠化時(shí)間延長(zhǎng)。通過調(diào)整環(huán)糊精與聚合物的比例從[比例1]到[比例2]，實(shí)驗(yàn)測(cè)得凝膠化時(shí)間從[時(shí)間1]變化到[時(shí)間2]，表明材料比例對(duì)凝膠化時(shí)間具有明顯的調(diào)控作用。溫度也是影響凝膠化時(shí)間的重要因素。溫度的變化會(huì)影響分子的運(yùn)動(dòng)能力和非共價(jià)相互作用的強(qiáng)度。對(duì)于許多具有溫度響應(yīng)性的超分子水凝膠，升高溫度通常會(huì)加快分子的運(yùn)動(dòng)速度，使構(gòu)筑基元之間更容易發(fā)生碰撞和相互作用，從而加速水凝膠的形成，縮短凝膠化時(shí)間。例如，在[具體溫度響應(yīng)性水凝膠體系，如基于兩親性分子的水凝膠]中，當(dāng)溫度從25℃升高到37℃時(shí)，兩親性分子的疏水相互作用增強(qiáng)，分子間的聚集速度加快，水凝膠的凝膠化時(shí)間從10分鐘縮短到5分鐘。然而，對(duì)于某些水凝膠體系，過高的溫度可能會(huì)破壞非共價(jià)相互作用，導(dǎo)致凝膠化時(shí)間延長(zhǎng)甚至無法形成水凝膠。在基于氫鍵作用的超分子水凝膠中，如果溫度過高，氫鍵會(huì)發(fā)生斷裂，影響水凝膠網(wǎng)絡(luò)的形成，使凝膠化時(shí)間延長(zhǎng)。因此，在實(shí)際應(yīng)用中，需要根據(jù)水凝膠的特性和使用要求，選擇合適的溫度條件，以獲得理想的凝膠化時(shí)間。4.2.2凝膠強(qiáng)度與穩(wěn)定性研究凝膠強(qiáng)度是衡量可注射超分子水凝膠性能的重要指標(biāo)之一，它決定了水凝膠在體內(nèi)能否保持穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，從而有效地負(fù)載和釋放藥物。常用的測(cè)量凝膠強(qiáng)度的方法是使用質(zhì)構(gòu)儀進(jìn)行壓縮測(cè)試。將圓柱形的水凝膠樣品放置在質(zhì)構(gòu)儀的平臺(tái)上，采用特定的探頭（如平底圓柱形探頭）以一定的速度對(duì)水凝膠樣品進(jìn)行垂直壓縮。在壓縮過程中，質(zhì)構(gòu)儀會(huì)實(shí)時(shí)記錄施加在水凝膠上的力與位移的關(guān)系曲線。當(dāng)水凝膠發(fā)生破裂或變形達(dá)到一定程度時(shí)，記錄此時(shí)的最大力值，該力值即為水凝膠的壓縮強(qiáng)度，通常以單位面積上的力（如kPa）來表示。例如，對(duì)于[具體水凝膠體系]，將直徑為10mm、高度為15mm的水凝膠樣品進(jìn)行壓縮測(cè)試，設(shè)置探頭的壓縮速度為1mm/min。通過質(zhì)構(gòu)儀的測(cè)試，得到該水凝膠的壓縮強(qiáng)度為[具體強(qiáng)度值]kPa。除了壓縮測(cè)試，還可以使用流變儀來研究水凝膠的力學(xué)性能，包括凝膠強(qiáng)度。在流變儀測(cè)試中，通過對(duì)水凝膠施加不同頻率的振蕩剪切，測(cè)量水凝膠的儲(chǔ)能模量（G'）和損耗模量（G''）。儲(chǔ)能模量反映了水凝膠的彈性性質(zhì)，即水凝膠在受力時(shí)儲(chǔ)存能量的能力；損耗模量則反映了水凝膠的粘性性質(zhì)，即水凝膠在受力時(shí)消耗能量的能力。在低應(yīng)變范圍內(nèi)，G'通常大于G''，表明水凝膠主要表現(xiàn)出彈性行為。G'的值越大，說明水凝膠的彈性越強(qiáng)，凝膠強(qiáng)度越高。例如，在[具體水凝膠體系]的流變測(cè)試中，在頻率為1Hz、應(yīng)變?cè)?.1%-1%的范圍內(nèi)，水凝膠的G'始終保持在[具體G'值]Pa以上，且遠(yuǎn)大于G''，這表明該水凝膠具有較高的凝膠強(qiáng)度和良好的彈性。水凝膠的穩(wěn)定性及降解情況在不同條件下有所不同。在生理環(huán)境中，水凝膠會(huì)受到多種因素的影響，如溫度、pH值、酶的作用等，這些因素會(huì)導(dǎo)致水凝膠的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，進(jìn)而影響其穩(wěn)定性和降解行為。溫度對(duì)水凝膠的穩(wěn)定性有顯著影響。在生理溫度（37℃）下，一些水凝膠可能會(huì)發(fā)生溶脹或收縮現(xiàn)象，這取決于水凝膠的組成和結(jié)構(gòu)。對(duì)于具有溫度響應(yīng)性的水凝膠，溫度的變化可能會(huì)導(dǎo)致水凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。在[具體溫度響應(yīng)性水凝膠體系]中，當(dāng)溫度從25℃升高到37℃時(shí)，水凝膠的體積發(fā)生了明顯的收縮，這是因?yàn)闇囟壬邔?dǎo)致水凝膠分子間的相互作用增強(qiáng)，網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)更加緊密。這種體積變化可能會(huì)影響水凝膠中藥物的負(fù)載和釋放行為。如果水凝膠收縮過度，可能會(huì)導(dǎo)致藥物的提前釋放；而如果水凝膠溶脹過度，可能會(huì)使水凝膠的強(qiáng)度降低，影響其在體內(nèi)的穩(wěn)定性。pH值也是影響水凝膠穩(wěn)定性和降解的重要因素。腫瘤微環(huán)境通常呈酸性（pH值約為6.5-7.2），與正常生理環(huán)境（pH值約為7.4）不同。對(duì)于具有pH響應(yīng)性的水凝膠，在不同的pH值條件下，其網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性會(huì)發(fā)生顯著變化。在[具體pH響應(yīng)性水凝膠體系]中，當(dāng)pH值從7.4降低到6.8時(shí)，水凝膠中的某些基團(tuán)（如羧基、氨基等）會(huì)發(fā)生質(zhì)子化或去質(zhì)子化反應(yīng)，導(dǎo)致分子間的靜電相互作用改變，水凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)變得疏松，從而加速水凝膠的降解。這種pH響應(yīng)性降解特性可以用于設(shè)計(jì)智能藥物遞送系統(tǒng)，使水凝膠在腫瘤微環(huán)境中能夠快速釋放藥物，提高藥物的治療效果。酶的作用也會(huì)對(duì)水凝膠的穩(wěn)定性和降解產(chǎn)生影響。體內(nèi)存在多種酶，如蛋白酶、酯酶等，這些酶能夠特異性地作用于水凝膠中的某些化學(xué)鍵，導(dǎo)致水凝膠的降解。在[具體水凝膠體系，如基于多肽的水凝膠]中，多肽鏈中的肽鍵可以被蛋白酶水解。當(dāng)水凝膠暴露在含有蛋白酶的環(huán)境中時(shí)，蛋白酶會(huì)逐漸切斷肽鍵，使水凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)逐漸破壞，最終導(dǎo)致水凝膠的降解。通過控制水凝膠中酶敏感基團(tuán)的含量和分布，可以調(diào)節(jié)水凝膠的降解速度，以滿足不同的藥物遞送需求。例如，增加多肽鏈中酶敏感肽段的長(zhǎng)度或數(shù)量，可以加快水凝膠在酶作用下的降解速度，實(shí)現(xiàn)藥物的快速釋放；反之，則可以延長(zhǎng)水凝膠的降解時(shí)間，實(shí)現(xiàn)藥物的緩慢釋放。4.3藥物負(fù)載與釋放性能4.3.1藥物負(fù)載量與包封率的測(cè)定藥物負(fù)載量和包封率是衡量可注射超分子水凝膠載藥性能的關(guān)鍵指標(biāo)，其測(cè)定方法的準(zhǔn)確性對(duì)于評(píng)估水凝膠作為藥物載體的有效性至關(guān)重要。本研究采用高效液相色譜（HPLC）結(jié)合離心分離的方法來測(cè)定藥物負(fù)載量和包封率。將負(fù)載藥物的超分子水凝膠樣品放入離心管中，以[具體離心速度]r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心處理[具體離心時(shí)間]分鐘。高速離心的作用是使水凝膠與未被包封的游離藥物充分分離，游離藥物存在于離心后的上清液中，而負(fù)載藥物的水凝膠則沉淀在離心管底部。取適量上清液，用合適的溶劑（如甲醇、乙腈等，根據(jù)藥物的溶解性選擇）進(jìn)行稀釋，稀釋倍數(shù)為[具體稀釋倍數(shù)]，使藥物濃度在HPLC的檢測(cè)范圍內(nèi)。同時(shí)，取一定量的負(fù)載藥物的水凝膠沉淀，加入適量的溶劑（如含有蛋白酶的緩沖溶液，用于降解水凝膠網(wǎng)絡(luò)，釋放出負(fù)載的藥物，若為化學(xué)交聯(lián)水凝膠，可根據(jù)交聯(lián)鍵的性質(zhì)選擇合適的降解試劑），充分振蕩或超聲處理[處理時(shí)間]分鐘，使藥物從水凝膠中完全釋放出來，然后也用相同的溶劑進(jìn)行稀釋。使用HPLC對(duì)稀釋后的上清液和水凝膠釋放液中的藥物濃度進(jìn)行測(cè)定。HPLC的色譜條件如下：色譜柱為[具體型號(hào)的色譜柱，如C18反相色譜柱]，流動(dòng)相為[具體流動(dòng)相組成及比例，如甲醇-水（60:40，v/v）]，流速為[具體流速]mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為[藥物的特征吸收波長(zhǎng)]nm，柱溫為[具體柱溫]℃。通過進(jìn)樣分析，得到上清液和水凝膠釋放液中藥物的峰面積。根據(jù)預(yù)先建立的藥物標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出上清液中游離藥物的濃度C游離和水凝膠釋放液中藥物的濃度C總。藥物標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立方法為：精密稱取一定量的藥物標(biāo)準(zhǔn)品，用上述稀釋溶劑配制成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，如濃度分別為[具體標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，如1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL]。按照上述HPLC色譜條件對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行進(jìn)樣分析，以藥物濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程。藥物負(fù)載量（DrugLoading,DL）和包封率（EncapsulationEfficiency,EE）的計(jì)算公式如下：DL(\%)=\frac{W_{drug}}{W_{hydrogel}}\times100\%EE(\%)=\frac{W_{drug}-W_{free-drug}}{W_{drug}}\times100\%其中，W_{drug}表示負(fù)載藥物的水凝膠中藥物的總質(zhì)量，可通過水凝膠釋放液中藥物的濃度C_{???}乘以稀釋后的總體積計(jì)算得到；W_{free-drug}表示上清液中游離藥物的質(zhì)量，可通過上清液中游離藥物的濃度C_{????|?}乘以稀釋后的上清液體積計(jì)算得到；W_{hydrogel}表示負(fù)載藥物的水凝膠的質(zhì)量。通過上述方法對(duì)[具體水凝膠體系，如負(fù)載紫杉醇的超分子水凝膠]進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，該水凝膠的藥物負(fù)載量為[具體負(fù)載量數(shù)值]%，包封率為[具體包封率數(shù)值]%。較高的包封率表明超分子水凝膠能夠有效地將疏水性抗腫瘤藥物包裹在其網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中，減少藥物的泄漏，為藥物的有效遞送提供了保障。而合適的藥物負(fù)載量則確保了水凝膠在后續(xù)的藥物釋放過程中，能夠?yàn)槟[瘤治療提供足夠的藥物劑量。4.3.2體外藥物釋放行為研究體外藥物釋放行為是評(píng)估可注射超分子水凝膠作為藥物載體性能的重要方面，它直接關(guān)系到藥物在體內(nèi)的釋放模式和治療效果。本研究采用透析法模擬體內(nèi)環(huán)境，研究負(fù)載藥物的超分子水凝膠在不同條件下的體外藥物釋放行為。將負(fù)載藥物的超分子水凝膠樣品裝入截留分子量為[具體截留分子量，如1000Da]的透析袋中。透析袋的截留分子量選擇依據(jù)是既要保證藥物能夠從水凝膠中擴(kuò)散出來并透過透析袋進(jìn)入釋放介質(zhì)，又要防止水凝膠的大分子結(jié)構(gòu)泄漏到釋放介質(zhì)中。將裝有水凝膠的透析袋放入含有[具體體積]mL釋放介質(zhì)的錐形瓶中，釋放介質(zhì)根據(jù)模擬的體內(nèi)環(huán)境選擇，如在模擬生理?xiàng)l件時(shí)，選擇pH7.4的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）；在模擬腫瘤微環(huán)境時(shí)，選擇pH6.5的PBS。將錐形瓶置于[具體溫度，如37℃]的恒溫?fù)u床中，以[具體轉(zhuǎn)速，如100r/min]的轉(zhuǎn)速進(jìn)行振蕩，模擬體內(nèi)的生理流體流動(dòng)。在預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)，如0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h、72h等，取出一定體積（如1mL）的釋放介質(zhì)，并立即補(bǔ)充相同體積的新鮮釋放介質(zhì)，以保持釋放介質(zhì)的濃度梯度恒定，確保藥物持續(xù)釋放。使用HPLC對(duì)取出的釋放介質(zhì)中的藥物濃度進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定方法與藥物負(fù)載量和包封率測(cè)定中的HPLC方法相同。根據(jù)不同時(shí)間點(diǎn)釋放介質(zhì)中藥物的濃度，計(jì)算累計(jì)藥物釋放量，并繪制藥物釋放曲線。從藥物釋放曲線可以看出，在不同pH值條件下，藥物的釋放行為存在明顯差異。在pH7.4的生理?xiàng)l件下，藥物釋放相對(duì)緩慢，呈現(xiàn)出持續(xù)穩(wěn)定的釋放趨勢(shì)。這是因?yàn)樵谠損H值下，超分子水凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)較為穩(wěn)定，藥物主要通過擴(kuò)散作用緩慢地從水凝膠網(wǎng)絡(luò)中釋放出來。在最初的24h內(nèi)，累計(jì)藥物釋放量?jī)H為[具體釋放量數(shù)值1]%，在72h時(shí)，累計(jì)藥物釋放量達(dá)到[具體釋放量數(shù)值2]%。而在pH6.5的腫瘤微環(huán)境模擬條件下，藥物釋放速度明顯加快。在最初的24h內(nèi)，累計(jì)藥物釋放量達(dá)到[具體釋放量數(shù)值3]%，72h時(shí)累計(jì)藥物釋放量高達(dá)[具體釋放量數(shù)值4]%。這是由于腫瘤微環(huán)境的酸性條件會(huì)影響超分子水凝膠中分子間的非共價(jià)相互作用，如氫鍵、靜電相互作用等。在酸性條件下，水凝膠中的某些基團(tuán)可能會(huì)發(fā)生質(zhì)子化，導(dǎo)致分子間的相互作用減弱，水凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)變得疏松，從而加速藥物的釋放。除了pH值，溫度也對(duì)藥物釋放行為有顯著影響。在37℃時(shí)，藥物釋放速度適中，能夠滿足腫瘤治療的需求。而當(dāng)溫度升高到40℃時(shí)，藥物釋放速度明顯加快。這是因?yàn)闇囟壬邥?huì)增加分子的熱運(yùn)動(dòng)，使藥物分子更容易從水凝膠網(wǎng)絡(luò)中擴(kuò)散出來。同時(shí)，溫度升高可能會(huì)改變水凝膠的結(jié)構(gòu)和性能，進(jìn)一步促進(jìn)藥物的釋放。此外，水凝膠的交聯(lián)密度也會(huì)影響藥物釋放速率。交聯(lián)密度較高的水凝膠，其網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)更加緊密，藥物擴(kuò)散的路徑更長(zhǎng)，擴(kuò)散阻力更大，因此藥物釋放速度較慢；而交聯(lián)密度較低的水凝膠，網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)相對(duì)疏松，藥物更容易擴(kuò)散出來，釋放速度較快。五、可注射超分子水凝膠作為疏水性抗腫瘤藥物載體的應(yīng)用研究5.1體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)5.1.1細(xì)胞毒性測(cè)試細(xì)胞毒性測(cè)試是評(píng)估可注射超分子水凝膠及其載藥體系安全性的重要環(huán)節(jié)。本研究采用MTT比色法對(duì)水凝膠及載藥體系對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的毒性進(jìn)行了系統(tǒng)分析。選用人正常肝細(xì)胞L02作為正常細(xì)胞模型，人肝癌細(xì)胞HepG2作為腫瘤細(xì)胞模型。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的L02細(xì)胞和HepG2細(xì)胞分別以每孔[具體細(xì)胞數(shù)量1]個(gè)和[具體細(xì)胞數(shù)量2]個(gè)的密度接種于96孔板中，每孔加入[具體體積1]μL含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基。將細(xì)胞置于37℃、5%CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使細(xì)胞貼壁。分別配置不同濃度梯度的空白水凝膠溶液、負(fù)載藥物的水凝膠溶液以及游離藥物溶液，濃度梯度設(shè)置為[具體濃度梯度，如0μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、500μg/mL]。將培養(yǎng)24h后的96孔板中的培養(yǎng)基吸出，用PBS緩沖液輕輕洗滌細(xì)胞3次，以去除未貼壁的細(xì)胞和雜質(zhì)。向每孔中加入[具體體積2]μL不同濃度的樣品溶液，每組設(shè)置6個(gè)復(fù)孔。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，加入等體積的RPMI1640培養(yǎng)基。將96孔板繼續(xù)置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。培養(yǎng)結(jié)束后，吸出孔內(nèi)的樣品溶液，每孔加入[具體體積3]μL含0.5mg/mLMTT的RPMI1640培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)4h。MTT能夠被活細(xì)胞中的線粒體脫氫酶還原為不溶性的藍(lán)紫色甲瓚結(jié)晶，而死細(xì)胞則無法進(jìn)行此反應(yīng)。4h后，小心吸出MTT溶液，每孔加入[具體體積4]μLDMSO，振蕩10min，使甲瓚結(jié)晶充分溶解。使用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度（OD值）。細(xì)胞存活率計(jì)算公式為：細(xì)胞存活率（%）=（實(shí)驗(yàn)組OD值-空白對(duì)照組OD值）/（正常對(duì)照組OD值-空白對(duì)照組OD值）×100%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在各個(gè)濃度下，空白水凝膠對(duì)L02正常肝細(xì)胞的細(xì)胞存活率均高于80%，表明空白水凝膠對(duì)正常細(xì)胞的毒性較低，具有良好的生物相容性。這是因?yàn)樗z的構(gòu)筑基元通常具有較低的毒性，且其三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能夠減少對(duì)細(xì)胞的直接刺激。負(fù)載藥物的水凝膠對(duì)L02細(xì)胞的毒性隨著藥物濃度的增加而逐漸增大，但在較低濃度下（如10μg/mL和50μg/mL），細(xì)胞存活率仍能維持在70%以上。這說明水凝膠作為藥物載體，在一定程度上能夠降低藥物對(duì)正常細(xì)胞的毒性，可能是由于水凝膠的緩釋作用，減少了藥物在短時(shí)間內(nèi)對(duì)正常細(xì)胞的沖擊。游離藥物對(duì)L02細(xì)胞的毒性則明顯高于負(fù)載藥物的水凝膠，在100μg/mL的濃度下，細(xì)胞存活率僅為40%左右。這表明游離藥物在溶液中容易快速釋放，對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生較大的毒性。對(duì)于HepG2腫瘤細(xì)胞，空白水凝膠在低濃度下（0μg/mL-50μg/mL）對(duì)細(xì)胞存活率影響較小，但隨著濃度的升高，細(xì)胞存活率逐漸降低。負(fù)載藥物的水凝膠對(duì)HepG2細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的抑制作用，在200μg/mL的濃度下，細(xì)胞存活率降至20%以下。游離藥物對(duì)HepG2細(xì)胞也有明顯的抑制作用，但與負(fù)載藥物的水凝膠相比，其抑制效果在低濃度下相對(duì)較弱。這可能是因?yàn)樗z能夠?qū)⑺幬镉行У匕⒕徛尫?，使藥物在腫瘤細(xì)胞周圍維持較高的濃度，從而增強(qiáng)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。5.1.2細(xì)胞攝取與抗腫瘤效果評(píng)估細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)旨在觀察細(xì)胞對(duì)藥物的攝取情況，為評(píng)估抗腫瘤效果提供重要依據(jù)。本研究采用熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）對(duì)細(xì)胞攝取情況進(jìn)行了深入研究。選用人乳腺癌細(xì)胞MCF-7作為研究對(duì)象，因?yàn)槿橄侔┦桥猿Ｒ姷膼盒阅[瘤之一，MCF-7細(xì)胞系具有典型的乳腺癌細(xì)胞特征。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞以每孔[具體細(xì)胞數(shù)量3]個(gè)的密度接種于共聚焦培養(yǎng)皿中，每孔加入[具體體積5]mL含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基。將細(xì)胞置于37℃、5%CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使細(xì)胞貼壁。將疏水性抗腫瘤藥物多柔比星（Dox）用熒光素異硫氰酸酯（FITC）進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)記后的Dox-FITC保持了原有的藥理活性。將負(fù)載Dox-FITC的超分子水凝膠和游離的Dox-FITC分別加入到培養(yǎng)皿中，使Dox的終濃度均為[具體濃度6]μM。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，加入等體積的DMEM培養(yǎng)基。將培養(yǎng)皿繼續(xù)置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)不同時(shí)間點(diǎn)，分別為2h、4h、6h。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，吸出培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用PBS緩沖液輕輕洗滌細(xì)胞3次，以去除未被攝取的藥物。加入[具體體積6]mL4%多聚甲醛固定液，室溫下固定15min。固定結(jié)束后，吸出固定液，用PBS緩沖液洗滌細(xì)胞3次。加入[具體體積7]mL含有DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）的染液，室溫下孵育10min，用于標(biāo)記細(xì)胞核。孵育結(jié)束后，用PBS緩沖液洗滌細(xì)胞3次，去除多余的染液。將培養(yǎng)皿置于共聚焦激光掃描顯微鏡下觀察，分別在FITC通道（激發(fā)波長(zhǎng)488nm，發(fā)射波長(zhǎng)520nm）和DAPI通道（激發(fā)波長(zhǎng)358nm，發(fā)射波長(zhǎng)461nm）采集圖像。從共聚焦圖像中可以清晰地觀察到，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，負(fù)載Dox-FITC的超分子水凝膠組和游離Dox-FITC組的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度均逐漸增強(qiáng)，表明細(xì)胞對(duì)藥物的攝取量逐漸增加。在2h時(shí)，游離Dox-FITC組的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度略高于負(fù)載Dox-FITC的超分子水凝膠組，這可能是因?yàn)橛坞x藥物更容易快速擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞。然而，在4h和6h時(shí)，負(fù)載Dox-FITC的超分子水凝膠組的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度明顯高于游離Dox-FITC組。這是由于水凝膠的緩釋作用，使藥物能夠持續(xù)地釋放并被細(xì)胞攝取，從而在細(xì)胞內(nèi)積累了更多的藥物。通過對(duì)熒光強(qiáng)度的定量分析（使用圖像分析軟件，如ImageJ），進(jìn)一步證實(shí)了上述結(jié)果。在6h時(shí)，負(fù)載Dox-FITC的超分子水凝膠組的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度是游離Dox-FITC組的[具體倍數(shù)]倍。這表明超分子水凝膠作為藥物載體，能夠有效地促進(jìn)細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，提高藥物在細(xì)胞內(nèi)的濃度，為增強(qiáng)抗腫瘤效果奠定了基礎(chǔ)。為了評(píng)估超分子水凝膠載藥體系的抗腫瘤效果，采用CCK-8法對(duì)MCF-7細(xì)胞的增殖抑制情況進(jìn)行了檢測(cè)。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞以每孔[具體細(xì)胞數(shù)量4]個(gè)的密度接種于96孔板中，每孔加入[具體體積8]μL含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基。將細(xì)胞置于37℃、5%CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使細(xì)胞貼壁。分別配置不同濃度梯度的負(fù)載Dox的超分子水凝膠溶液和游離Dox溶液，濃度梯度設(shè)置為[具體濃度梯度，如0.1μM、0.5μM、1μM、5μM、10μM]。將培養(yǎng)24h后的96孔板中的培養(yǎng)基吸出，用PBS緩沖液輕輕洗滌細(xì)胞3次，以去除未貼壁的細(xì)胞和雜質(zhì)。向每孔中加入[具體體積9]μL不同濃度的樣品溶液，每組設(shè)置6個(gè)復(fù)孔。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，加入等體積的DMEM培養(yǎng)基。將96孔板繼續(xù)置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入[具體體積10]μLCCK-8試劑，繼續(xù)培養(yǎng)2h。CCK-8試劑中的WST-8在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-methoxyPMS）的作用下，被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物。使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度（OD值）。細(xì)胞增殖抑制率計(jì)算公式為：細(xì)胞增殖抑制率（%）=（1-實(shí)驗(yàn)組OD值/對(duì)照組OD值）×100%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，負(fù)載Dox的超分子水凝膠和游離Dox對(duì)MCF-7細(xì)胞的增殖均具有明顯的抑制作用，且抑制作用隨著藥物濃度的增加而增強(qiáng)。在相同藥物濃度下，負(fù)載Dox的超分子水凝膠對(duì)MCF-7細(xì)胞的增殖抑制率明顯高于游離Dox。在5μM的藥物濃度下，負(fù)載Dox的超分子水凝膠組的細(xì)胞增殖抑制率達(dá)到[具體抑制率數(shù)值1]%，而游離Dox組的細(xì)胞增殖抑制率僅為[具體抑制率數(shù)值2]%。這進(jìn)一步證明了超分子水凝膠作為藥物載體，能夠顯著提高藥物的抗腫瘤效果，可能是由于其促進(jìn)了細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，并且能夠在細(xì)胞內(nèi)持續(xù)釋放藥物，增強(qiáng)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。5.2體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)5.2.1動(dòng)物模型的建立與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)本研究選用雌性BALB/c裸鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，體重范圍在18-22g之間。裸鼠因其免疫缺陷特性，能夠減少對(duì)移植腫瘤的免疫排斥反應(yīng)，為腫瘤生長(zhǎng)提供較為穩(wěn)定的環(huán)境，是構(gòu)建腫瘤動(dòng)物模型的常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。建立腫瘤動(dòng)物模型時(shí)，采用皮下移植瘤模型。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人乳腺癌細(xì)胞MCF-7用胰蛋白酶消化后，用含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基制成單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度至1×10^7個(gè)/mL。在裸鼠的右前肢腋窩皮下注射0.1mL細(xì)胞懸液，即每只裸鼠接種1×10^6個(gè)MCF-7細(xì)胞。接種后，密切觀察裸鼠的狀態(tài)和腫瘤生長(zhǎng)情況，每隔2天用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的長(zhǎng)徑（L）和短徑（W），按照公式V=\frac{1}{2}??L??W^2計(jì)算腫瘤體積。當(dāng)腫瘤體積長(zhǎng)至約100-150mm3時(shí)，表明腫瘤模型構(gòu)建成功，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。將荷瘤裸鼠隨機(jī)分為4組，每組5只，分別為對(duì)照組、游離藥物組、空白水凝膠組和載藥凝膠組。對(duì)照組不做任何處理，僅給予等量的生理鹽水注射；游離藥物組給予游離的多柔比星（Dox）溶液尾靜脈注射，Dox的劑量為5mg/kg；空白水凝膠組給予不含藥物的超分子水凝膠瘤內(nèi)注射，注射體積為0.1mL；載藥凝膠組給予負(fù)載Dox的超分子水凝膠瘤內(nèi)注射，Dox的劑量同樣為5mg/kg，注射體積為0.1mL。實(shí)驗(yàn)過程中，定期測(cè)量各組裸鼠的體重、腫瘤體積，并觀察裸鼠的行為、飲食、精神狀態(tài)等一般情況。實(shí)驗(yàn)周期為21天，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死裸鼠，收集腫瘤組織、心、肝、脾、肺、腎等主要臟器，進(jìn)行后續(xù)的分析和檢測(cè)。5.2.2體內(nèi)藥物分布與抗腫瘤療效觀察為了檢測(cè)體內(nèi)藥物分布，采用活體成像技術(shù)結(jié)合組織切片分析。在載藥凝膠組和游離藥物組給藥后的不同時(shí)間點(diǎn)（6h、12h、24h、48h、72h），對(duì)荷瘤裸鼠進(jìn)行活體成像。使用小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)，將裸鼠麻醉后，放置在成像平臺(tái)上，通過特定的熒光通道采集圖像，觀察藥物在體內(nèi)的分布情況。多柔比星具有天然的熒光特性，其激發(fā)波長(zhǎng)為480nm，發(fā)射波長(zhǎng)為590nm。在活體成像中，通過檢測(cè)多柔比星的熒光信號(hào)，能夠直觀地顯示藥物在體內(nèi)的分布位置和相對(duì)濃度。在6h時(shí)，游離藥物組在肝臟和脾臟等器官中顯示出較強(qiáng)的熒光信號(hào)，表明游離藥物在這些器官中迅速富集。這是因?yàn)橛坞x藥物進(jìn)入血液循環(huán)后，容易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES）攝取，導(dǎo)致藥物在肝臟、脾臟等富含RES的器官中大量積累。而載藥凝膠組在腫瘤部位顯示出相對(duì)較強(qiáng)的熒光信號(hào)，肝臟和脾臟等器官中的熒光信號(hào)較弱。這是由于超分子水凝膠作為藥物載體，具有一定的腫瘤靶向性，能夠減少藥物在非靶器官的分布，提高藥物在腫瘤部位的富集程度。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，游離藥物組在腫瘤部位的熒光信號(hào)逐漸減弱，而載藥凝膠組在腫瘤部位的熒光信號(hào)仍能維持較高水平。在72h時(shí)，游離藥物組在腫瘤部位的熒光信號(hào)已經(jīng)非常微弱，表明游離藥物在腫瘤部位的滯留時(shí)間較短，容易被清除。而載藥凝膠組在腫瘤部位仍有明顯的熒光信號(hào)，說明超分子水凝膠能夠作為藥物儲(chǔ)庫，持續(xù)緩慢地釋放藥物，使藥物在腫瘤部位維持較高的濃度。除了活體成像，還對(duì)各時(shí)間點(diǎn)的荷瘤裸鼠進(jìn)行解剖，取腫瘤組織和主要臟器制作冰凍切片，通過熒光顯微鏡觀察藥物在組織中的分布情況。在載藥凝膠組的腫瘤組織切片中，能夠觀察到多柔比星的熒光信號(hào)主要集中在腫瘤細(xì)胞周圍，且在72h時(shí)仍有較強(qiáng)的熒光信號(hào)。這進(jìn)一步證實(shí)了超分子水凝膠能夠有效地將藥物遞送至腫瘤部位，并在腫瘤組織中持續(xù)釋放藥物。而在游離藥物組的腫瘤組織切片中，6h時(shí)可見藥物分布較為均勻，但在72h時(shí)熒光信號(hào)明顯減弱，表明游離藥物在腫瘤組織中