保健食品及其原料毒理學(xué)評價程序

本程序適用于保健食品及其原料的毒理學(xué)安全性評價。

1術(shù)語

1.1保健食品

是指聲稱保健功能，不得對人體產(chǎn)生急性、亞急性或者慢性危害

的特別食品。包括屬于補充維生素、礦物質(zhì)等養(yǎng)分物質(zhì)的養(yǎng)分素

補充劑，以及聲稱保健功能的產(chǎn)品。

1.2保健食品原料

形成保健食品成效成分和配方的初始物料。

2受試物

2.1受試物可以是保健食品或保健食品原料。

2.2資料性要求

2.2.1應(yīng)供給受試物的名稱、性狀、規(guī)格、批號、生產(chǎn)日期、保

質(zhì)期、保存條件、申請單位名稱、生產(chǎn)企業(yè)名稱、配方、生產(chǎn)工

藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、保健功能以及推舉攝入量等信息。

2.2.2受試物為保健食品原料時應(yīng)供給動物和植物類原料的產(chǎn)

地和食用部位、微生物類原料的分類學(xué)地位和生物學(xué)特征、食用

條件和方式、食用歷史、食用人群等根本信息，以及其他有助于

安全性評估的資料。

2.2.3原料為從動物、植物、微生物中分別的成分時，還需供給

當(dāng)成分的理化特性和化學(xué)構(gòu)造等資料。

2.2.4供給受試物的主要成分、成效成分/標(biāo)志性成分及可能的

有害成分的分析報告。

2.3受試物的特別要求

2.3.1保健食品應(yīng)供給包裝完整的定型產(chǎn)品。毒理學(xué)試驗所用樣

品批號應(yīng)與功能學(xué)試驗所用樣品批號全都，并且為衛(wèi)生學(xué)試驗所

用三批樣品之一（益生菌、奶制品等產(chǎn)品保質(zhì)期短于整個試驗周

期的產(chǎn)品除外）。依據(jù)技術(shù)審評意見要求補做試驗的，假設(shè)原批

號樣品已過保質(zhì)期，可使用批號的樣品試驗，但應(yīng)供給批號樣品

按產(chǎn)品技術(shù)要求檢驗的全工程檢驗報告。

2.3.2由于推舉量較大等緣由不適合直接以定型產(chǎn)品進(jìn)展試驗

時，可以對送檢樣品適當(dāng)處理，如濃縮、局部去除輔料或安全的

食品成分等。應(yīng)供給受試樣品處理過程的說明和相應(yīng)的證明文件,

處理過程應(yīng)與原保健食品的主要生產(chǎn)工藝步驟保持全都。

3.毒理學(xué)試驗的主要工程依

據(jù)GB15193開展以下試驗。

3.1急性經(jīng)口毒性試驗

3.2遺傳毒性試驗：細(xì)菌回復(fù)突變試驗，體內(nèi)哺乳動物紅細(xì)胞微

核試驗，哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗，小鼠精原細(xì)胞或精母

細(xì)胞染色體畸變試驗，體外哺乳類細(xì)胞HGPRT基因突變試驗，

體外哺乳類細(xì)胞TK基因突變試驗，體外哺乳類細(xì)胞染色體畸變

試驗、嚙齒類動物顯性致死試驗，體外哺乳類細(xì)胞DNA損傷修復(fù)

（非程序性DNA合成）試驗，果蠅伴性隱性致死試驗。

遺傳毒性試驗組合：一般應(yīng)遵循原核細(xì)胞與真核細(xì)胞、體內(nèi)

與體外試驗相結(jié)合的原則，并包括不同的終點（誘導(dǎo)基因突變、

染色體構(gòu)造和數(shù)量變化），推舉以下遺傳毒性試驗組合：

組合一：細(xì)菌回復(fù)突變試驗；哺乳動物紅細(xì)胞微核試驗或哺

乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗；小鼠精原細(xì)胞或精母細(xì)胞染色

體畸變試驗或嚙齒類動物顯性致死試驗。

組合二：細(xì)菌回復(fù)突變試驗；哺乳動物紅細(xì)胞微核試驗或哺

乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗；體外哺乳類細(xì)胞染色體畸變試

驗或體外哺乳類細(xì)胞TK基因突變試驗。

依據(jù)受試物的特點也可用其他體外或體內(nèi)測試替代推舉組

合中的一個或多個體外測試。

3.328天經(jīng)口毒性試驗

3.4致畸試驗

3.590天經(jīng)口毒性試驗

3.6生殖毒性試驗

3.7毒物動力學(xué)試驗

3.8慢性毒性試驗

3.9致癌試驗

3.10慢性毒性和致癌合并試驗

4.毒性試驗的選擇

4.1保健食品原料

需要開展安全性評價的保健食品原料應(yīng)參照食品原料安全

性審查的有關(guān)規(guī)定進(jìn)展。

4.2保健食品

4.2.1保健食品一般應(yīng)進(jìn)展急性經(jīng)口毒性試驗、三項遺傳毒性試

驗和28天經(jīng)口毒性試驗。依據(jù)試驗結(jié)果和目標(biāo)人群打算是否增

加90天經(jīng)口毒性試驗、致畸試驗和生殖毒性試驗、慢性毒性和

致癌試驗及毒物動力學(xué)試驗。

4.2.2承受導(dǎo)致物質(zhì)根底發(fā)生重大轉(zhuǎn)變等非傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)的保健

食品，應(yīng)進(jìn)展急性經(jīng)口毒性試驗、三項遺傳毒性試驗、90天經(jīng)

口毒性試驗和致畸試驗，必要時開展其他毒性試驗。

4.2.3以一般食品、保健食品原料名目內(nèi)的物質(zhì)為原料，僅承受

物理粉碎或水提等傳統(tǒng)食品生產(chǎn)工藝生產(chǎn)、食用方法與傳統(tǒng)食用

方法一樣，且原料推舉食用量為常規(guī)用量或符合國家相關(guān)食品用

量規(guī)定的保健食品，一般可不開展毒性試驗。

5.特定產(chǎn)品的毒理學(xué)設(shè)計要求

5.1如產(chǎn)品配方中含有人體必需養(yǎng)分素或存在安全問題等物質(zhì),

如某一過量攝入易產(chǎn)生安全性問題的人體必需養(yǎng)分素等物

質(zhì)（如維生素A、硒等）或存在安全問題物質(zhì)（如咖啡因等），在按

其推舉量設(shè)計試驗劑量時，如該物質(zhì)的劑量到達(dá)的毒性作用劑量，

在原有劑量設(shè)計的根底上，應(yīng)考慮增設(shè)去除該物質(zhì)或降低該物質(zhì)

劑量（如降至未觀看到有害作用劑量）妁受試物劑量組，以便對

受試物中其他成分的毒性作用及該物質(zhì)與其他成分的聯(lián)合毒性作

用做出評價。

5.2推舉量較大的含乙醇的受試物，在按其推舉量設(shè)計試驗劑量

時，如超過動物最大灌胃容量，可以進(jìn)展?jié)饪s。乙醇濃度低于15%

（V/V）的受試物，濃縮后應(yīng)將乙醇恢復(fù)至受試物定型產(chǎn)品原來的

濃度。乙醇濃度高于15%的受試物，濃縮后應(yīng)將乙醇濃度調(diào)整

至15%,并將各劑量組的乙醇濃度調(diào)整全都。不需要濃縮的受

試物，其乙醇濃度高于15%時，應(yīng)將各劑量組的乙醇濃度調(diào)整

至15%。在調(diào)整受試物的乙醇濃度時，原則上應(yīng)使用生產(chǎn)該受

試物的酒基，無法到達(dá)定型產(chǎn)品的濃度時，可用食用酒精。

5.3針對適宜人群為孕婦、乳母或兒童的產(chǎn)品，應(yīng)特別關(guān)注是否

存在生殖毒性和發(fā)育毒性，必要時還需檢測某些神經(jīng)毒性和免疫

毒性指標(biāo)。

5.4對益生菌、真菌等有特別規(guī)定的保健食品，應(yīng)按規(guī)定增加相

應(yīng)的試驗，如毒力試驗。

6.動物試驗設(shè)計共性問題

6.1受試物的前處理

6.1.1袋泡茶類受試物的提取方法應(yīng)與產(chǎn)品推舉飲用的方法一

樣，可用該受試物的水提取物進(jìn)展試驗。假設(shè)產(chǎn)品無特別推舉飲

用方法，水提取物可承受以下提取條件進(jìn)展：常壓、溫度80T?

90℃,浸泡時間30min,水量為受試物質(zhì)量的10倍或以上，

提取2次，將提取液合并濃縮至所需濃度，并標(biāo)明該濃縮液與原

料的比例關(guān)系。如產(chǎn)品有特別推舉服用方法（如推舉食用浸泡后

的產(chǎn)品），在試驗時予以考慮。

6.1.2液體受試物需要進(jìn)展?jié)饪s處理時，應(yīng)承受不破壞其中有

效成分的方法。可使用溫度60℃-70℃減壓或常壓蒸發(fā)濃縮、

冷凍枯燥等方法。液體受試物經(jīng)濃縮后到達(dá)人體推舉量的試驗要

求，但不能通過灌胃賜予的，容許以摻入飼料的方式賜予試驗動物。

6.1.3不易粉碎的固體受試物〔如含膠基、蜜餞類）可用凍干粉

碎的方式處理，并在試驗報告中具體說明。

6.1.4含益生菌或其他微生物的受試物在進(jìn)展細(xì)菌回復(fù)突變試驗

或體外細(xì)胞試驗時，應(yīng)將微生物滅活，并說明具體方法。

6.1.5對人體推舉量較大的受試物，在按其推舉量設(shè)計試驗劑量

時，如超過動物的最大灌胃容量或超過摻入飼料中的限量（10%

（w/w））,可允許去除無安全問題的局部輔料進(jìn)展試驗，并在

試驗報告中具體說明。

6.1.6吸水膨脹率較高的受試物應(yīng)考慮吸水膨脹對受試物賜為劑

量和試驗動物的影響，以此來選擇適宜的受試物賜予方式（灌胃

或摻入飼判）。如承受灌胃方式賜予，應(yīng)選擇水為溶媒。

6.2受試物的賜予方式

6.2.1受試物應(yīng)經(jīng)口賜予。依據(jù)受試物的性質(zhì)及人體推舉攝入量，

選擇摻入飼料或飲水、灌胃的方式賜予受試物。應(yīng)具體說明受試

物配制方法、賜予方法和時間。

6.2.2灌胃賜予受試物時，應(yīng)依據(jù)試驗的特點和受試物的理化性

質(zhì)選擇適合的溶媒（溶劑、助懸劑或乳化劑），將受試物溶解或

懸浮于溶媒中，一般可選用蒸僭水、植物油、淀粉、明膠、竣甲

基纖維素、蔗糖脂肪酸酯等，如使用其他溶媒應(yīng)說明理由。所選

用的溶媒本身應(yīng)不產(chǎn)生毒性作用；與受試物各成分之間不發(fā)生化

學(xué)反響，且保持其穩(wěn)定性；無特別刺激性或氣味。

6.2.3摻入飼料或飲水方式賜予受試物時，應(yīng)保證受試物的穩(wěn)定

性和均一性及飼料的適口性，以不影響動物攝食、養(yǎng)分均衡和飲

水量為原則。當(dāng)受試物在飼料中的最大參與量超過漲（w/w）時，

需考慮動物的養(yǎng)分需要，結(jié)合受試物的蛋白質(zhì)含量將各組飼料蛋

白質(zhì)水平調(diào)整全都，并說明具體調(diào)整方法。原則上添加的受試物

最高不超過飼料的10%（w/w）,否則應(yīng)說明理由。

6.3試驗動物的選擇

試驗動物應(yīng)符合相應(yīng)國家標(biāo)準(zhǔn)的要求，同時結(jié)合保健功能

（如減肥、關(guān)心降血脂等）的特點來選擇試驗動物的品系、性別

和年齡等。

7.試驗結(jié)果的判定與應(yīng)用

7.1急性毒性試驗

如LD小于人的推舉（可能）攝入量的100倍，則一般應(yīng)放

50

棄該受試物用于保健食品，不再連續(xù)進(jìn)展其他毒理學(xué)試驗。

7.2遺傳毒性試驗

7.2.1如三項試驗均為陰性，則可連續(xù)進(jìn)展下一步的毒性試驗。

7.2.2如遺傳毒性試驗組合中兩項或以上試驗陽性，則表示該受

試物很可能具有遺傳毒性和致癌作用，一般應(yīng)放棄該受試物應(yīng)用

于保健食品。

7.2.3如遺傳毒性試驗組合中一項試驗為陽性，依據(jù)其遺傳毒性

終點、結(jié)合受試物的構(gòu)造分析、化學(xué)反響性、生物利用度、代謝

動力學(xué)、靶器官等資料綜合分析，再選兩項備選試驗（至少一項

為體內(nèi)試驗）。如再選的試驗均為陰性，則可連續(xù)進(jìn)展下一步的

毒性試驗；如其中有一項試驗陽性，則應(yīng)放棄該受試物應(yīng)用于保

健食品。

7.328天經(jīng)口毒性試驗

對只需要進(jìn)展急性毒性、遺傳毒性和28天經(jīng)口毒性試驗的

受試物，假設(shè)試驗未覺察有明顯毒性作用，綜合其他各項試驗結(jié)

果可做出初步評價；假設(shè)試驗中覺察有明顯毒性作用，尤其是有

劑量

一反響關(guān)系時，則一般應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。

7.490天經(jīng)口毒性試驗

依據(jù)試驗所得的未觀看到有害作用劑量進(jìn)展評價，原則是:

a）未觀看到有害作用劑量小于或等于人的推舉（可能）攝入

量的100倍表示毒性較強，一般應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。

b）未觀看到有害作用劑量大于100倍而小于300倍者，應(yīng)進(jìn)

行慢性毒性試驗。

c）未觀看到有害作用劑量大于或等于300倍者則不必進(jìn)展

慢性毒性試驗，可進(jìn)展安全性評價。

7.5致畸試驗

依據(jù)試驗結(jié)果評價受試物是不是試驗動物的致畸物。假設(shè)致

畸試驗結(jié)果陽性則不再連續(xù)進(jìn)展生殖毒性試驗和生殖發(fā)育毒性

試驗。在致畸試驗中觀看到的其他發(fā)育毒性，應(yīng)結(jié)合28天和（或）

90天經(jīng)口毒性試驗結(jié)果進(jìn)展評價。

7.6生殖毒性試驗和生殖發(fā)育毒性試驗

依據(jù)試驗所得的未觀看到有害作用劑量進(jìn)展評價，原則是：

a）未觀看到有害作用劑量小于或等于人的推舉（可能）攝入

量的100倍表示毒性較強，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。

b）未觀看到有害作用劑量大于100倍而小于300倍者，應(yīng)進(jìn)

展慢性毒性試驗。

c）未觀看到有害作用劑量大于或等于300倍者則不必進(jìn)展慢

性毒性試驗，可進(jìn)展安全性評價。

7.7慢性毒性和致癌試驗

7.7.1依據(jù)慢性毒性試驗所得的未觀看到有害作用劑量進(jìn)展評價

的原則是：

a）未觀看到有害作用劑量小于或等于人的推舉（可能）攝入

量的50倍者，表示毒性較強，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。b）

未觀看到有害作用劑量大于50倍而小于100倍者，經(jīng)安全

性評價后，打算該受試物可否用于食品。

c）未觀看到有害作用劑量大于或等于100倍者，則可考慮允

許使用于保健食品。

7.7.2依據(jù)致癌試驗所得的腫瘤發(fā)生率、埋伏期和多發(fā)性等進(jìn)展

致癌試驗結(jié)果判定的原則是（凡符合以下狀況之一，可認(rèn)為致癌

試驗結(jié)果陽性。假設(shè)存在劑量反響關(guān)系，則推斷陽性更牢靠）：

a）腫瘤只發(fā)生在試驗組動物，比照組中無腫瘤發(fā)生。

b）試驗組與比照組動物均發(fā)生腫瘤，但試驗組發(fā)生率高。c）

試驗組動物中多發(fā)性腫瘤明顯，比照組中無多發(fā)性腫瘤，

或只是少數(shù)動物有多發(fā)性腫瘤。

d）試驗組與比照組動物腫瘤發(fā)生率雖無明顯差異，但試驗組

中發(fā)生時間較早。

致癌試驗結(jié)果陽性應(yīng)放棄將該受試物用于保健食品。

8.安全性綜合評價時需要考慮的因素

8.1試驗指標(biāo)的統(tǒng)計學(xué)意義、生物學(xué)意義和毒理學(xué)意義

對試驗中某些指標(biāo)的特別轉(zhuǎn)變，應(yīng)依據(jù)試驗組與比照組指標(biāo)是否

有統(tǒng)計學(xué)差異、其有無劑量反響關(guān)系、同類指標(biāo)橫向比較、兩種

性別的全都性及與本試驗室的歷史性比照值范圍等，綜合考慮指

標(biāo)差異有無生物學(xué)意義，并進(jìn)一步推斷是否具毒理學(xué)意義。此外，

如在受試物組覺察某種在比照組沒有發(fā)生的腫瘤，即使與比照組

比較無統(tǒng)計學(xué)意義，仍要賜予關(guān)注。

8.2人體推舉（可能）攝入量較大的受試物

一方面，假設(shè)受試物摻入飼料的最大參與量（原則上最高不超過

飼料的10%）或液體受試物經(jīng)濃縮后仍達(dá)不到未觀看到有害作用

劑量為人體推舉（可能）攝入量的規(guī)定倍數(shù)時，綜合其他的毒性

試驗結(jié)果和實際食用或飲用量進(jìn)展安全性評價。另一方面，應(yīng)考

慮賜予受試物量過大時，可能通過影響?zhàn)B分素攝入量及其生物利

用率、從而導(dǎo)致某些與受試物無關(guān)的毒理學(xué)表現(xiàn)。

8.3時間-毒性效應(yīng)關(guān)系

對由受試物引起試驗動物的毒性效應(yīng)進(jìn)展分析評價時，要考慮在

同一劑量水平下毒性效應(yīng)隨時間的變化狀況。

8.4人群資料

由于存在著動物與人之間的物種差異，在評價食品的安全性時，

應(yīng)盡可能收集人群接觸受試物后的反響資料。人體的毒物動力學(xué)

或代謝資料對于將動物試驗結(jié)果推論到人具有很重要的意義。

8.5動物毒性試驗和體外試驗資料

本程序所列的各項動物毒性試驗和體外試驗系統(tǒng)是目前治理（法

規(guī)）毒理學(xué)評價水平下所得到的最重要的資料，也是進(jìn)展安全性

評價的主要依據(jù)。結(jié)合其他來源于計算機分析、體外試驗或體內(nèi)

試驗的相關(guān)資料，有助于更加全面地解釋試驗結(jié)果、做出科學(xué)的

評價。

8.6不確定系數(shù)

即安全系數(shù)。將動物毒性試驗結(jié)果外推到人時，鑒于動物與人的

物種和個體之間的生物學(xué)差異，不確定系數(shù)通常為10