1《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》編制說明一、工作簡況燕麥（AvenasativaL.）是隸屬于禾本科燕麥族燕麥屬的一年生草本植物，具有營養(yǎng)豐富、耐逆性強(qiáng)、適應(yīng)性廣、生育期短等特性，在世界多地種植較為廣泛。據(jù)聯(lián)合國最新統(tǒng)計，燕麥的產(chǎn)量和種植面積在全世界僅次于玉米、小麥、水稻、大麥、高粱，被認(rèn)為是世界“八大糧食作物之一”。燕麥草葉豐富、適口性好，且富含蛋白和礦物質(zhì)營養(yǎng)成分，是牛羊愛吃的優(yōu)良飼草，具備較高的經(jīng)濟(jì)價值。長期以來，我國燕麥大量依賴進(jìn)口，其主要原因之一是國內(nèi)新種質(zhì)創(chuàng)制方式單一，主要依賴野外采集、引進(jìn)、雜交，突破性種質(zhì)資源極少。因此，利用多種有效的育種方式創(chuàng)制新材料，加快推進(jìn)燕麥育種進(jìn)程和解析基因功能研究是目前我國燕麥育種亟需解決的問題。誘變育種被證明是一種有效增加物種遺傳變異的方法，是能快速、高效創(chuàng)制大量可遺傳變異種質(zhì)資源最有效的育種技術(shù)。研究表明植物的誘變育種方法主要有物理誘變、化學(xué)誘變和生物誘變，目前，不少研究者已利用誘變方法在水稻、2小麥、玉米、花生等作物中成功構(gòu)建突變體庫，并利用其中突變體材料，研究了大量的功能基因。因此，利用誘變方法構(gòu)建飼用燕麥誘變突變體庫，可在較短時間內(nèi)創(chuàng)制大量新的性狀變異材料，充分利用這些變異材料進(jìn)行相關(guān)研究，在一定程度上能夠廣泛改良飼用燕麥的農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)特性，對加快飼用燕麥育種進(jìn)程具有積極意義。精準(zhǔn)、高效的表型鑒定與篩選標(biāo)準(zhǔn)有利于評估突變體的遺傳多樣性和穩(wěn)定性，還可以全面且系統(tǒng)地分析和篩選誘變?nèi)后w中的優(yōu)良突變體，篩選出具有潛在育種和研究價值的種質(zhì)，為育種工作提供可靠的遺傳基礎(chǔ)。然而，我國至今尚無制定飼用燕麥誘變突變體表型鑒定方面的標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)規(guī)程。為加速我國飼用燕麥誘變育種發(fā)展，創(chuàng)制更多優(yōu)異新種質(zhì)，培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)新品種滿足飼用燕麥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需要，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所“抗逆牧草育種與利用”團(tuán)隊根據(jù)國家農(nóng)業(yè)重大科技項目“飼用燕麥……誘變”（保密項目）研究內(nèi)容，特起草本技術(shù)規(guī)程。實施和推廣本規(guī)程構(gòu)建飼用燕麥誘變突變體表型鑒定與篩選體系，可以實現(xiàn)飼用燕麥突變體表型鑒定科學(xué)化、精準(zhǔn)化，為燕麥育種提供依據(jù)。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所3內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所、西北農(nóng)林科技楊紅善、崔光欣、吳芳、段慧榮、王亞芳、張?zhí)N薇、陳軍、朱新強(qiáng)、路遠(yuǎn)、張茜、許蕾、王勇、宋標(biāo)、李玉雯、張靜、楊倩倩。二、制定標(biāo)準(zhǔn)的目的和意義燕麥?zhǔn)且荒晟瘫究萍Z飼兼用作物，其產(chǎn)量高、粗蛋白含量高、抗逆性強(qiáng)，具有適口性好、消化率高等優(yōu)點，是牲畜最理想，最經(jīng)濟(jì)的飼草之一。長期以來，我國燕麥大量依賴進(jìn)口，其主要原因是國內(nèi)燕麥缺乏突破性新品種、種質(zhì)資源較為匱乏。燕麥為異源六倍體，具有高度復(fù)雜的遺傳背景，通過常規(guī)育種育成一個新品種需要育種家們長達(dá)10年連續(xù)種植并對表型進(jìn)行追蹤觀察，最終形成品種，此育種方式技術(shù)單一、效率低、周期長，難以滿足育種新要求。另一方面，我國燕麥基因功能研究進(jìn)程仍較為落后，因此，種質(zhì)創(chuàng)新是4飼用燕麥育種的發(fā)展方向，急需采用新技術(shù)或改進(jìn)原有技術(shù)來創(chuàng)制燕麥新種質(zhì)，挖掘優(yōu)異育種材料，培育優(yōu)良新品種。相對于常規(guī)育種方法，誘變育種具有十分明顯的優(yōu)勢，可為育種工作者提供豐富的種質(zhì)資源和遺傳變異。誘變育種的優(yōu)點：①誘變操作方法簡單，便于實施和操作；②誘變頻率顯著提高，提供更多變異進(jìn)行篩選；③縮短育種周期，可在較短時間內(nèi)培育出優(yōu)勢品種；④豐富遺傳變異范疇，可獲得更多在自然變異中難以獲取的優(yōu)良性狀，擴(kuò)大突變體資源庫；⑤克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，拓寬生物材料遺傳背景。植物誘變育種方法主要有物理誘變、化學(xué)誘變和生物誘變，其中物理誘變包括空間誘變、離子束輻射、中子輻射、射線輻射、UV-B輻射等；化學(xué)誘變根據(jù)誘變機(jī)制，誘變劑分為烷化劑、堿基類似物、其它具有特殊誘變機(jī)制的誘變劑；生物誘變育種包括細(xì)胞工程育種、基因工程育種、分子標(biāo)記輔助育種等?？臻g誘變主要使用返回式衛(wèi)星或高空氣球所能夠提供的特殊空間環(huán)境，讓育種材料受到部分輻射、微重力、弱磁力等空間因素，對植物材料的生長發(fā)育和生理生化特性產(chǎn)生影響，隨后在地面上選育產(chǎn)生新的突變，可獲得新的種質(zhì)資源。常壓室溫等離子誘變系統(tǒng)（ARTP）能夠在大氣壓下產(chǎn)生溫度在25-40℃之間具有高活性粒子（包括處于激發(fā)態(tài)的氦原子、氧原子、OH自由基等）濃度的等離子體射流，可以5對動植物及微生物細(xì)胞產(chǎn)生多重作用，如造成遺傳物質(zhì)的損傷、引起細(xì)胞膜通透性和蛋白結(jié)構(gòu)的改變等。ARTP誘變具有突變性能優(yōu)越、應(yīng)用范圍廣、儀器使用方便易操作、樣品處理快速等特點，其主要應(yīng)用于微生物、動植物育種領(lǐng)域，通過物理誘變方式構(gòu)建遺傳多樣性突變庫，在提升農(nóng)作物發(fā)芽率、優(yōu)化微生物菌種性能等方面已取得顯著成果。重離子束輻照是一種高效的誘變技術(shù)，與X射線、γ射線、電子束等射線輻照相比，它具有傳能線密度高、相對生物學(xué)效應(yīng)大、損傷后修復(fù)效應(yīng)小等特點，因此，可以在存活率較高的情況下得到較高的突變率，易于獲得目標(biāo)突變體。重離子束輻射誘變技術(shù)具有操作簡單、突變率高、突變譜廣等特點，在糧食作物和觀賞植物上已經(jīng)培育出多個新品種。與物理誘變相比，化學(xué)誘變劑分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易造成生物DNA的損傷和錯配修復(fù)，主要引起基因的點突變，且突變點位具有特異性?；瘜W(xué)誘變具有操作簡單、價格低廉、突變率高、突變范圍廣、染色體畸變少等優(yōu)點，已被廣泛應(yīng)用于創(chuàng)制優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源。目前，不少研究者已利用誘變方法在水稻、小麥、玉米、花生等作物中成功構(gòu)建突變體庫，并利用其中突變體材料，研究了大量的功能基因。此外，對突變體庫進(jìn)行種質(zhì)資源評價是基因挖掘和遺傳改良的基礎(chǔ)。精準(zhǔn)、高效的表型鑒定與篩選標(biāo)準(zhǔn)有利于評估突變體的遺傳多樣性和穩(wěn)定性，還可以全6面且系統(tǒng)地分析和篩選誘變?nèi)后w中的優(yōu)良突變體，篩選出具有潛在育種和研究價值的種質(zhì)，為育種工作提供可靠的遺傳基礎(chǔ)。我們飼用燕麥誘變育種研究目前主要集中在各世代表型變異鑒定，突變體篩選等，且表型鑒定規(guī)則不一，我國尚未有飼用燕麥高產(chǎn)突變體的鑒定評價規(guī)范/規(guī)程，因此，本規(guī)程制定小組利用多年空間誘變、等離子誘變、重離子誘變、化學(xué)誘變的突變體表型篩選鑒定評價結(jié)果，制定合理的突變體表型篩選和評價技術(shù)規(guī)程，利用該技術(shù)規(guī)程可以快速創(chuàng)制新材料，豐富燕麥種質(zhì)資源，解決栽培燕麥的遺傳基礎(chǔ)狹窄的問題，加快燕麥育種進(jìn)程。三、編制過程（一）分工情況本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人及主要工作內(nèi)容如下表1所示姓名工作單位職稱主要工作內(nèi)容楊紅善中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所研究員項目主持人，負(fù)責(zé)方案設(shè)計崔光欣中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所副研究員主要參加人，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)編寫吳芳中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所助理研究員主要參加人，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)編寫段慧榮中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所副研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證王亞芳西北農(nóng)林科技大學(xué)副教授標(biāo)準(zhǔn)編寫、驗證和修訂7張?zhí)N薇中國農(nóng)業(yè)大學(xué)教授修訂中國農(nóng)業(yè)大學(xué)副教授修訂朱新強(qiáng)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究副研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證路遠(yuǎn)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證張茜中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究助理研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證許蕾中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究助理研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證王勇中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究助理研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證宋標(biāo)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究碩士研究生參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證李玉雯中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究碩士研究生參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證楊倩倩中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究碩士研究生參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證張靜中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究科研助理參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗證（二）起草階段2023年3月，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所抗逆牧草育種與利用團(tuán)隊牽頭，調(diào)研國內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、專利和論文成果，召開啟動會議，介紹了編制背景和意義，聯(lián)合參編單位對編制方案進(jìn)行了研討，對前期調(diào)研和實驗設(shè)計進(jìn)行了討論和分工。（1）2023年4月，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所組織協(xié)調(diào)建立了《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)8規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)編制小組，并制定工作方案。（2）2023年4月-2025年8月，編制小組進(jìn)行了為期三年的飼用燕麥誘變突變體篩選試驗。（3）2025年10月，編制小組根據(jù)試驗結(jié)果，撰寫《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》工作組討論稿，撰寫編制說明，向內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會提交申請。開《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項論證會，順利立項。（三）征求意見階段見對《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》工作組討論稿進(jìn)行了修改，形成征求意見稿。2025年X月～X月通過網(wǎng)上公開征求意見，經(jīng)過XXXX等單位共X名專家函審，經(jīng)收集歸納整理，收集修改意見XX條；2025年X月～X月，針對專家提出的反饋意見進(jìn)行匯總整理，逐條進(jìn)行斟酌修改，其中采納XX條，部分采納X條，不采納X條，完成征求意見稿的修改，形成送審稿。9（五）報批階段燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》地方標(biāo)準(zhǔn)審查會，審查委員會聽取標(biāo)準(zhǔn)起草組介紹標(biāo)準(zhǔn)編制說明，對標(biāo)準(zhǔn)文本逐條審查，并形成會議紀(jì)要。工作組認(rèn)真聽取審查意見，仔細(xì)整理會議紀(jì)要和修改意見，完善送審材料，形成報批稿，報送內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會審批發(fā)布。四、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系（一）原則和依據(jù)1、編制原則科學(xué)性：本技術(shù)規(guī)程基于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)研究和實踐數(shù)據(jù)，確保對飼用燕麥誘變突變體表型進(jìn)行客觀、準(zhǔn)確的鑒定和評價。在標(biāo)準(zhǔn)適用范圍內(nèi)力求完整，在標(biāo)準(zhǔn)文本編制過程中力求做到技術(shù)內(nèi)容的表述科學(xué)準(zhǔn)確、清晰易懂。實用性：把經(jīng)濟(jì)實用和可操作性作為重要的依據(jù)，確保標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容便于實施，方便育種家在飼用燕麥誘變突變體表型鑒定和評價過程中應(yīng)用，避免繁瑣和復(fù)雜化，且易于被其他標(biāo)準(zhǔn)和文件所引用。先進(jìn)性：對標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)內(nèi)容的確定，嚴(yán)格遵守我國相關(guān)法律法規(guī)、規(guī)章制度及標(biāo)準(zhǔn)的要求，力求反映本研究領(lǐng)域的國內(nèi)外先進(jìn)技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢，既體現(xiàn)目前急需解決的問題，又能為未來技術(shù)發(fā)展提供框架，使標(biāo)準(zhǔn)中所規(guī)定的技術(shù)內(nèi)容有利于提高草種質(zhì)資源評價和利用的技術(shù)水可操作性：本標(biāo)準(zhǔn)是多年多點試驗的基礎(chǔ)上，對飼用燕麥誘變突變體表型鑒定進(jìn)行了規(guī)范，經(jīng)過反復(fù)驗證后認(rèn)為其具有較大的科學(xué)性和實用性，體現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)可操作性。2、編制依據(jù)嚴(yán)格按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草文件。主要技術(shù)內(nèi)容確定的依據(jù)：（1）飼用燕麥染色體2n=6x=42。根據(jù)籽粒帶皮或裸粒，分為皮燕麥和裸燕麥兩種類型。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中3.1燕麥的術(shù)語和定義“禾本科燕麥屬的栽培種，是一年生草本植物，染色體數(shù)2n=6x=42。根據(jù)籽粒帶皮和裸粒，分為皮燕麥和裸燕麥兩種類型?！币约癉B50/T1368-2023《飼用燕麥種植技術(shù)規(guī)程》中3.2飼用燕麥的定義和術(shù)語“用于生產(chǎn)飼草的栽培燕麥，包括皮燕麥和裸燕麥?！保?）空間誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：空間誘變又稱航天誘變，是利用返回式航天器（如衛(wèi)星、飛船等）將植物材料（如種子、組織、細(xì)胞等）搭載到太空，在太空獨特的環(huán)境（如微重力、弱地磁、強(qiáng)輻射、高真空、超低溫等）作用下，誘發(fā)植物遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的方法。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)直接引用《航天誘變多葉紫花苜蓿新品種選育研究》中的航天誘變育種概念。（3）常壓室溫等離子體誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：常溫常壓等離子誘變技術(shù)是指利用在常壓、常溫條件下產(chǎn)生的等離子體，作用于生物體（如種子、組織、細(xì)胞等從而引起生物體遺傳信息的改變的方式。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)引用《常壓室溫等離子體誘變處理小麥的生物效應(yīng)研究》中的常壓室溫等離子體概念，稍作修（4）重離子誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：重離子誘變是指利用加速器將重離子（氬等原子序數(shù)大于2的原子核）加速到高能狀態(tài)，形成高線性能量轉(zhuǎn)移的射線，照射生物材料（如種子、組織、細(xì)胞使其遺傳物質(zhì)發(fā)生損傷和變異的誘變方式。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)引用《高能重離子束輻射水稻誘變育種研究進(jìn)展》中的重離子誘變概念，稍作修改。（5）化學(xué)誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：化學(xué)誘變是指利用特定的化學(xué)誘變劑（如EMS）等處理生物材料（如種子、花粉、組織培養(yǎng)物等從而誘發(fā)生物材料基因突變的方法。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)引用《大豆化學(xué)誘變育種研究進(jìn)展》中“化學(xué)誘變育種是通過化學(xué)誘變劑，如平陽霉素（PYM）、甲基磺酸乙酯（EMS）和硫酸二乙酯（DES）等對植物種子、花粉、花藥進(jìn)行處理的一種生物育種技術(shù)”，稍作修改。（6）生育期標(biāo)準(zhǔn)原文：燕麥從播種期到成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中5.4幼苗習(xí)性“燕麥種質(zhì)資源從播種期至成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d”一致，所以直接引用了此定義。（7）幼苗習(xí)性標(biāo)準(zhǔn)原文：幼苗階段生長的姿態(tài)，包括直立、半匍匐、理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中所以直接引用了此定義。（8）乳熟期標(biāo)準(zhǔn)原文：50%以上植株的籽粒內(nèi)充滿乳汁，并接近正常籽粒大小的時期。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)與DB50/T1368-2023《飼用燕麥種植技術(shù)規(guī)程》中3.6乳熟期的定義和術(shù)語“50%以上植株的籽粒內(nèi)充滿乳汁，并接近正常籽粒大小的時期”一致，所以直接引用了此標(biāo)準(zhǔn)中的定義。（9）成熟期標(biāo)準(zhǔn)原文：80%以上穗子的籽粒進(jìn)入蠟熟的日期，以年理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中5.16成熟期的定義和術(shù)語“燕麥種質(zhì)資源試驗小區(qū)中，80%YYYYMMDD?！保ǘ┡c現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)在編制過程中，沒有出現(xiàn)與現(xiàn)行有關(guān)法律、法規(guī)和國家、行業(yè)、地方標(biāo)準(zhǔn)相違背的情況。目前，我國至今尚無制定燕麥誘變突變體表型鑒定方面的標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)規(guī)程，本規(guī)程未采用國際標(biāo)準(zhǔn)和國外標(biāo)準(zhǔn)。但在編制規(guī)程的過程中參考了GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，GB6142禾本科草種子質(zhì)量分級，GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則，NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則，NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則等標(biāo)準(zhǔn)。五、主要條款的說明，主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗驗證的論述本規(guī)范主要包括七部分，第一部分規(guī)定了本規(guī)范的適用范圍，本文件規(guī)定了飼用燕麥誘變突變體鑒定的術(shù)語和定義，確定了突變體篩選標(biāo)準(zhǔn)，適用于飼用燕麥誘變突變體的鑒定和篩選。第二部分是規(guī)范性引用文件，主要引用了GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，GB6142禾本科草種子質(zhì)量分級，GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則，NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則，NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則。第三部分是定義和術(shù)語，這部分對飼用燕麥、空間誘變、等離子誘變、重離子誘變、化學(xué)誘變、生育期、幼苗習(xí)性、分蘗期、拔節(jié)期、抽穗期、乳熟期、成熟期進(jìn)行了定義。第四部分是土地準(zhǔn)備，主要包括選地和整地。第五部分是種植，主要是種子選擇、種子誘變處理、播種、田間管理。第六部分是指標(biāo)測定，主要包括生育期、幼苗習(xí)性、株高、莖粗、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)、旗葉長、旗葉寬、穗形、單株生物量指標(biāo)。第七部分是突變體篩選，分為篩選標(biāo)準(zhǔn)和世代篩選方法。2、主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗論證的論述2.1、種子誘變處理選擇GB6142Ⅱ級及以上的種子進(jìn)行不同誘變處理：空間誘變處理：將飼用燕麥種子搭載在返回式飛行器，利用微重力、高能輻射、高真空等特殊環(huán)境進(jìn)行誘變，誘變種子數(shù)為3249粒。等離子誘變處理：誘變條件為功率380W、氣量15SLM，種子處理時間為10min~300min之間，誘變種子數(shù)為2380重離子誘變處理：在碳離子束，能量80MeV/u，傳能線密度34KeV/um條件下，種子處理劑量為100Gy~400Gy之間，誘變種子數(shù)為2863粒。EMS誘變處理：EMS濃度為0.5%~1%，種子處理時間為8h~16h之間，誘變種子數(shù)為4900粒。2.2誘變?nèi)后w的種植選擇地勢平坦、排灌方便、耕層深厚、土質(zhì)疏松、pH的土壤。施足底肥，有機(jī)肥以22500kg/hm2~30000kg/hm2為宜，肥料使用應(yīng)符合NY/T496規(guī)定。施肥后深耕，耕翻深度>20cm，除去草根、石塊等。打碎土塊，耙平地面，使土層上虛下實，深淺一致，達(dá)到地平土碎土細(xì)。M1群體的構(gòu)建：2023年3月至2023年8月，經(jīng)空間誘變、等離子誘變和重離子誘變處理的全部種子種植于蘭州大洼山試驗基地（平均海拔約1500m，年平均氣溫10.9℃,年平均降水量約為300mm，降雨集中在每年7-9月采用單株種植，穴盤育苗10d后移栽在試驗地，行距40cm，株距20cm，同期種下適量未經(jīng)誘變的野生型種子。此外，2023年4-9月，經(jīng)化學(xué)誘變處理的種子種植于陜西林業(yè)集團(tuán)蘇坊基地，該基地位于陜西省咸陽市武功縣蘇坊鎮(zhèn)，地處關(guān)中平原腹地，平均海拔550m，多年平均氣溫12.9℃,年平均降水量633.7mm，主要集中在7月至9月。按照行距40cm、株距40cm、播種深度4-5cm進(jìn)行穴播，同期種下適量未經(jīng)誘變的野生型種子。共獲得6177個誘變單株材料，其中空間誘變1797個單株、重離子誘變1551個單株、等離子誘變1892個單株和EMS誘變937個單株。記錄每株材料的生育期、幼苗習(xí)性和穗形，并在乳熟期對每一株進(jìn)行編號后掛牌標(biāo)記，并開展性狀調(diào)查工作；在成熟期進(jìn)行單株收種并脫粒保存，獲得M1代種子。農(nóng)藝性狀較差的M1材料不播種之外，余下的4608個M1代材料（空間誘變1260株系、重離子誘變1086株系、等離子誘變1325株系和EMS誘變937株系）播種于天水市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所綠色農(nóng)業(yè)研究中心甘谷試驗站（平均海拔約1200m，月至9月采用單株種植，每個突變體種植20個單株，株距20cm，行距40cm，以未經(jīng)處理的‘中天4號’作為對照。田間管理同M1代群體。記錄每株材料的生育期、幼苗習(xí)性和穗形，并在乳熟期測定株高、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)，并在成熟期測定單株鮮重和干重，成熟后挑選每個突變體最好的1株收種獲得M2代種子。M3群體的構(gòu)建：2025年3月至2025年8月，將M2代篩選到的疑似高產(chǎn)突變體播種于蘭州大洼山試驗基地，即為M3代，每個突變材料（100株）種植成小區(qū)，株距10cm，行距20cm，以未經(jīng)處理的‘中天4號’作為對照。記錄每株材料的生育期、幼苗習(xí)性和穗形，乳熟期和成熟期測定株每個突變材料挑選最好的單株收種獲得M3代種子。除草：采用人工方式及時清除雜草。灌溉：適時灌溉，水質(zhì)應(yīng)符合GB5084要求。病蟲害防治：采用化學(xué)方式防治，農(nóng)藥使用應(yīng)符合GB/T2.4指標(biāo)測定2.4.1生育期統(tǒng)計飼用燕麥從播種期到成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d。與對照品種相比，生育期少7~14d為早熟、少14d以上為特早熟，生育期長7~14d為晚熟、長14d以上為特晚熟。2.4.2幼苗習(xí)性幼苗的顏色分為直立、半匍匐、匍匐。2.4.3株高乳熟期測定植株從地面到穗頂（不含芒）的絕對高度，精確到0.1cm。乳熟期主莖地上第二節(jié)間中部的粗度，單位0.1mm。2.4.5分蘗數(shù)乳熟期植株在生長過程中從地面附近或地下莖節(jié)上產(chǎn)生分枝的數(shù)量。2.4.6有效分蘗數(shù)乳熟期分蘗中結(jié)實形成產(chǎn)量的分蘗數(shù)。2.4.7旗葉長乳熟期測定旗葉基部至葉尖的長度，精確到0.1cm。2.4.8旗葉寬乳熟期測定旗葉最寬處的寬度，精確到0.1cm。2.4.9穗形成熟期穗子性狀的類型，包括側(cè)緊、側(cè)散、周緊、周散。2.4.10單株地上生物量M0-M1,M1-M2成熟期收割，風(fēng)干后稱干重。M2-M3乳熟期收割，并稱鮮重，風(fēng)干后稱干重。2.5突變體篩選2.5.1生育期對照品種相比，生育期少7~14d為早熟、少14d以上通過觀測發(fā)現(xiàn)在M2代有晚熟材料1份。2.5.2幼苗習(xí)性如圖所示。通過觀測發(fā)現(xiàn)在M2代有匍匐材料25份。2.5.3穗形與對照品種相比，1.側(cè)緊；2.側(cè)散；3.周緊；4.周散發(fā)生變化，如圖所示。通過觀測發(fā)現(xiàn)在M2代有周散穗形的材料5份。2.5.4株高、莖粗、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)、旗葉長、旗葉寬、單株生物量計算對照平均值±3*sck的最大閾值、最小閾值，比較突變體性狀測定值與閾值的大小，劃分突變體的變異類型，其中，平均值為對照平均值，Sck為對照所測表型性狀標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合前期研究結(jié)果，通過相關(guān)性分析結(jié)果表明誘變單株的干草產(chǎn)量與成熟期有效分蘗數(shù)、拔節(jié)期分蘗數(shù)、抽穗期分蘗數(shù)、灌漿期有效分蘗數(shù)呈極顯著正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.859、0.769、0.785、0.715，與株高的相關(guān)系數(shù)為0.616，呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。因此，在M3代突變體篩選時選擇干重、株高、總分蘗和有效分蘗作為主要指標(biāo)。在M3代中，通過計算對照植株的干重、株高、總分蘗和有效分蘗平均值，依據(jù)對照平均值±3*sck篩選突變體，共篩選到36株